CD117CD34Ki-67在胃肠道间质瘤中的表达及其意义

1/1CD117CD34Ki-67在胃肠道间质瘤中的表达及其意义CD117、CD34、Ki-67在胃肠道间质瘤中的表达及其意义陈金培摘要目的：

探讨胃肠道间质瘤的临床病理和免疫组化特征。

方法：

观察53例间质瘤的病理形态特征，并用免疫组化Envison法检测CD117、CD34、SMA、S-100、Ki-67的表达情况。

结果：

CD117阳性表达率为88.7％(47／53)，CD34表达率为81.1％(43／53)，SMA阳性表达率为50.9％（27/53），S-100阳性表达率为18.9％（10/53），Ki-67阳性表达率为67.9％（36/53）。

结论：

联合检测CD117与CD34可以提高间质瘤的诊断准确性，Ki-67阳性表达与肿瘤大小和危险程度相关，可作为间质瘤的预后指标。

关键词：

胃肠道间质瘤；病理学；免疫组化；CD117；CD34；Ki-67ExpressionofCD117andCD34inGastrointestinalStromalTumorChenJinpeiLiuGuoliangetal.DepartmentofPathologyGuangzhouFirstMunicipalPeoplesHospital,Guangzhou(510108),ChinaAbstract:ObjectiveTOinvestigatetheclinicopathologicandimmunohistochemicalfeaturesofintestinalstromaltumors(GIST).MethodsTheclinicopathologicfeatureswerestudiedandtheexpressionofCD117、CD34、SMA、S-100andKi-67wasdetectedwithimmunohistochemicalEnvisonstainingin53casesofGIST.ResultsOfthe53GIST,47caseswerepositivesforCD117(47/53,88.7％),43caseswerepositivesforCD34(43/53,81.1％),27caseswerepositivesforSMA(27/53,50.9％),10caseswerepositivesforS-100(10/53,18.9％),36caseswerepositivesforKi-67(36/53,67.9％).ConclusionThecombinationofCD117andCD34stainingisnecessaryforthediagnosisofGIST,Ki-67expressionandtumorsizeandthedegreeofriskassociatedstromaltumorsasaprognosticindicator.Keywords:gastrointestinal;stromal;tumors;pathology;immunohistochemistry;CD117;CD34;Ki-67胃肠道间质瘤（gastrointestinalstromaltumors,GIST）是最常见的胃肠道间叶源性肿瘤。

目前认为是一组独立起源于胃肠道间质干细胞的肿瘤，实质上由未分化或多潜能的梭形或上皮样细胞组成。

长期以来一直被诊断为消化道平滑肌（肉）瘤或（恶性）神经鞘瘤。

随着免疫组化开展，国内近年来报道的GIST病例逐渐增多。

临床上对GIST的认识不断加深，本文回顾性分析我院2005年1月-2008年12月收治的GIST53例。

探讨GIST的临床表现，病理形态特征，免疫组化表达及其意义。

作者单位：

1510180广州市第一人民医院病理科2510405广州中医药大学基础医学院1刘国荣1杨耀湘21资料与方法1．1标本来源收集广州市第一人民医院病理科2005年1月-2008年12月53例资料完整，诊断明确的原发性胃肠道间质瘤标本。

1．2一般资料患者性别、年龄、肿瘤部位、症状、肿瘤大小等查自手术记录和大体检查记录。

1．3试剂免疫组化抗体依次为CD117、CD34、SMA、S-1OO、Ki-67，其中CD117为浓缩型兔抗人单克隆抗体，稀释比例为1：

100，购自深圳深达公司；Ki-67浓缩型鼠抗人单克隆抗体，稀释比例为1：

100，购自上海长嘉生物科技有限公司；CD34、SMA、S-100均为即用型鼠抗人单克隆抗体，分别购自北京中杉公司、福州迈新生物技术有限公司、上海长岛生物技术有限公司；抗体稀释液及Envision试剂盒为Dako公司产品。

1．4方法标本经10％甲醛固定，常规石蜡包埋，切片厚4m，HE染色，光镜观察，免疫组化用Envision两步法。

石蜡标本常规切片，脱蜡至无水后，于抗体修复液中微波修复，详细步骤按说明书进行。

染色设已知阳性对照，阴性对照用PBS液替代，DAB显色，苏木精复染。

1．5免疫组化结果判定CD117、CD34、SMA及S-100阳性信号为棕黄色、棕褐色，着色于胞浆，Ki-67表达于细胞核。

每例切片至少随机选择10个HPF，取平均值，每例切片阳性细胞数平均10％为阳性，否则为阴性。

1．6GIST良恶性判断肿瘤危险程度的判定本组病例根据Fletcher原则判定肿瘤危险程度：

大小2cm，核分裂数5个／50HPF提示危险程度很低；2～5cm，核分裂数5个／50HPF提示低度危险；5cm，核分裂数6-1O个／50HPF或5～10cm，核分裂数5个／50HPF则为中度危险；5cm，核分裂数5个／50HPF或只要10cm或核分裂数10个／50HPF即视为高度危险。

1．7组织学分型参考Miettinen等组织分型将GIST分为梭形细胞型、上皮细胞型、混合细胞型。

1．8统计学方法应用SPSS11.5统计软件包对本组试验数据进行校正的X检验分析。

2结果2．1临床病理学比较53例GIST中，男性23例，女性30例，年龄18-79岁，平均55.3岁。

病史2天至10年，平均3个月。

首发症状包括腹痛、腹胀29例，黑便18例，腹部肿块3例，胸闷1例，排尿困难1例，腰骶部疼痛1例。

病变部位在胃30例，食管5例，小肠11例，大肠2例，肠系膜5例。

肿瘤危险程度:很低组16例，低组17例，中等组7例，高组13例。

肿瘤大小：

直径＜2cm16例，2-5cm15例，5-10cm12例，＞10cm10例。

2．2组织学表现比较GIST瘤细胞主要有两种形态：

梭形和上皮样形。

大部分梭形瘤细胞界限不清，可呈纤细长梭形、胖梭形、短梭形变异，胞质轻度或中度嗜伊红，有核端空泡者细胞一端平钝，主要呈交叉束状、栅栏状、漩涡状排列。

上皮样瘤细胞多数胞界清楚，细胞呈圆形、椭圆形或多边形，胞质丰富，轻度嗜伊红、嗜碱或透明淡染，主要呈弥漫片状排列。

其中梭形细胞型45例，上皮样细胞型5例，混合型（梭形和上皮样细胞）3例。

很低组病例细胞欠丰富，无或多张切片仅见1个核分裂相，无肿瘤性坏死、出血囊性变。

低组病例细胞丰富，轻度至中度异型，或出血或坏死，1例可见囊性变，2例未见核分裂，12例核分裂5个／50HPF，另3例5个／50HPF。

中等组病例细胞丰富，中度或高度异型，或出血或坏死，1例核分裂5个／50HPF，6例5个／50HPF。

高组病例细胞丰富密集，仅1例轻度异型，余皆为中度至高度异型。

1例未见核分裂，4例核分裂5个／50HPF，8例核分裂＞10个／50HPF。

2．3免疫组织化学CD117阳性表达率为88.7％(47／53)，CD34表达率为81.1％(43／53)，SMA阳性表达率为50.9％（27/53），S-100阳性表达率为18.9％（10/53），Ki-67阳性表达率为67.9％（36/53），CD117和CD34共同表达率为67.9％(36／53)。

CD117阳性表达率与肿瘤大小、核分裂数、危险程度、组织学类型、部位无关，其差异无显著意义(P0．05，见表1)，CD34阳性表达率与肿瘤大小、核分裂数、危险程度、组织学类型无关，其差异无显著意义（P＞0.05，见表2），但CD34阳性表达率与部位有关，其差异有显著意义（P＜0.05，见表2），SMA阳性表达率与肿瘤大小、核分裂数、危险程度、组织学类型、部位无关，其差异无显著意义(P0．05，见表3)，S-100阳性表达率与肿瘤大小、核分裂数、危险程度、部位无关，其差异无显著意义（P＞0.05，见表3），但S-100阳性表达率与组织学类型有关，其差异有显著意义（P＜0.05，见表4），Ki-67阳性表达率与核分裂数、组织学类型无关，其差异无显著意义（P＞0.05，见表5），但Ki-67阳性表达率与肿瘤大小、危险程度、部位有关，其差异有显著意义（P＜0.05，见表5）。

表1CD117在GIST中的表达CD117x值P值+-肿瘤直径（cm）＜21332-51415-101022.7680.429＞10100核分裂数5/50HPF395-0.0220.983＞5/50HPF81危险程度很低133低152中等701.9100.591高121组织学类型梭形细胞型414上皮样细胞型324.6550.098混合细胞型30部位食管41胃255小肠1103.2770.484大肠20系膜50表2CD34在GIST中的表达CD34x值P值+-肿瘤直径（cm）＜21422-51145-101021.0460.790＞1082核分裂数5/50HPF377-1.2060.228＞5/50HPF63危险程度很低142低143中等521.0020.801高103组织学类型梭形细胞型369上皮样细胞型410.7260.696混合细胞型30部位食管23胃291小肠6519.0190.002大肠11系膜50表3SMA在GIST中的表达SMAx值P值+-肿瘤直径（cm）＜21152-55105-10574.5450.323＞1064核分裂数5/50HPF2123-1.0260.305＞5/50HPF63危险程度很低115低611中等255.5750.768高85组织学类型梭形细胞型2223上皮样细胞型320.5270.768混合细胞型21部位食管50胃1515小肠475.8880.208大肠11系膜23表4S-100在GIST中的表达S-100x值P值+-肿瘤直径（cm）＜24122-52135-10391.4730.688＞1019核分裂数5/50HPF935-0.6470.518＞5/50HPF18危险程度很低412低215中等161.1770.758高310组织学类型梭形细胞型639上皮样细胞型1413.5440.001混合细胞型30部位食管23胃624小肠293.0560.548大肠02系膜05表5Ki-67在GIST中的表达Ki-67x值P值+-肿瘤直径（cm）＜2792-5965-1010210.5510.014＞10100核分裂数5/50HPF2816-1.4650.917＞5/50HPF81危险程度很低79低116中等618.7680.033高121组织学类型梭形细胞型3015上皮样细胞型321.5630.458混合细胞型30部位食管05胃219小肠8313.8040.008大肠20系膜503讨论GIST是最常见的胃肠道非上皮来源性肿瘤，约占胃肠道肿瘤的1％，而占间叶性肿瘤的70％，其中60％-70％发生在胃，20％-30％发生在小肠，5％发生在结肠和直肠，发生于食管不足5％，偶见在网膜和肠系膜化及良恶性鉴别均存在争议，对于诊断和治疗的认识也有较大差异，尤其是恶性胃肠道间质瘤(MGIST)，其预后相对较差，治疗比较棘手。

而且GIST缺乏特异性的临床表现，其症状与肿瘤的部位、大小和生长方式有关。

如肿瘤呈腔内生长且突破黏膜则表现为溃疡或出血，如肿块较大且呈腔外生长则可能于病人体表触及包块或出现梗阻症状。

GIST的最终诊断主要依靠病理检查和免疫组化结果。

研究证实，以往诊断的胃肠道平滑肌瘤和神经鞘瘤多属于GIST将胃肠道间叶来源的一大类梭形细胞肿瘤总称为GIST型(良性、交界性、恶性)；(2)神经型(恶性)；(3)平滑肌神经混合型(恶性或潜在恶性)；(4)未定型(恶性或潜在恶性)。

目前，临床上对于GIST的病理诊断趋于这一基本概念。

GIST的发生与位于11号染色体上的C-Kit基因突变密切相关，导致其编码的蛋白CD117在细胞水平常常有过度表达。

C-Kit在GIST细胞中的阳性率达85％-94％，也就是说几乎所有的GIST均有C-Kit表达。

因此，认为CD117是GIST的特征性标记物。

因此Miettinen等瘤和神经鞘瘤以及神经纤维瘤的富于细胞且表达CD117的梭形、上皮样或多形性的间叶源性肿瘤。

我们采用CD117等抗体标志结果支持这一观点。

但尽管本组CD117阳性率很[1]。

目前对其起源、分[2-3]。

Rosai[4]，共分为4型：

(1)平滑肌[5]已建议将GIST定义为胃肠道除外平滑肌肿高，但仍有6例失表达，说明CD117在GIST发生发展过程中个别病例可能丢失。

本组47例GIST的CD117阳性表达在危险程度统计处理无显著性差异，也说明了CD117表达与肿瘤分化程度无关。

在45例梭型细胞型、5例上皮样细胞型、3例混合细胞型，各型CD117蛋白阳性表达统计处理无显著差别，说明瘤细胞分型与免疫组化(主要是CD117阳性)无关。

CD34是较早应用于GISTs的研究中的一种造血前体细胞抗原。

最初有人在GIST中检查到CD34，并且有较高的表达率。

约有70％-80％的GIST的CD34表达为阳性，但在内皮细胞、纤维原细胞及其他的一些肿瘤如卡博肉瘤、纤维源性肿瘤中也有CD34表达Ki-67是一种反映细胞分裂和增殖活性的标志物，已为临床广泛应用。

有研究表明，Ki-67有重要意义，是有效的预后判断指标，Ki-67的高水平表达与不良的病理学特征和侵袭行为有关，检测Ki-67简单、方便，易于推广，是判断GIST危险程度的一个有效指标，当部分GIST形态学判断危险程度有困难时，结合Ki-67的结果不失为一个简单有效的手段。

本组研究表明Ki-67阳性表达与GIST的危险程度有关，阳性表达率越高，危险程度越高。

其阳性表达也与肿瘤大小相关，肿瘤越大，阳性率越高。

Ki-67可用来判断肿瘤的预后，在临床可作为GIST的预后指标。

从本文结果得出CD117、CD34、SMA、S-100阳性表达与肿瘤大小无关，但Ki-67阳性表达与肿瘤大小呈正相关；CD117、CD34、SMA、S-100、Ki-67阳性表达均与核分裂数无关；CD117、CD34、SMA、S-100阳性表达与肿瘤危险程度无关，但Ki-67阳性表达与肿瘤危险程度呈正相关；CD117、CD34、SMA、Ki-67阳性表达与肿瘤组织学类型无关，但S-100阳性表达与组织学类型相关；CD117、SMA、S-100阳性表达与GIST发生部位无关，但CD34、Ki-67阳性表达与肿瘤发生部位相关。

研究还表明CD117与SMA、S-100、Ki-67表达均有显著相关，说明CD117在GIST中是一个比较敏感指标。

本组CD34阳性率为81.1％，CD34阳性的病例大多数CD117亦阳性，偶尔有CD34阳性而CD117阴性者，两者呈互补性表达。

所以，联合CD34和CD117检测，可以提高GIST的诊断准确率，但它们在GIST中总阳性表达无明显差异性,对于CD117和CD34全阴性的病例，即使形态学上很接近GIST，但一般临床上也不诊断为GIST。

在鉴别诊断上，本组S-100大部分病例无表达，在少部分病例中有灶性表达，与CD117阳性比较有显著性差异，由此可与神经源性肿瘤相鉴别。

本组有一半的病例（27/53）SMA阳性表达