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文档简介
1蛋白质化学
一、名词解释
1、氨基酸的等电点(pD:在某pH的溶液中,氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相等,成为兼性离子,呈电中性。此时
溶液的pH值称为该氨基酸的等电点.
2,a-螺旋:多肽链沿长轴方向通过氢键向上.盘曲所形成的右手螺旋结构称为a-螺旋。
3、b-折叠:两段以上折叠成锯齿状的多肽链通过氢键相连而并行成较伸层的片状结构。
4、分子病:由于基因突变导致蛋白质一级结构发生变异,使蛋白质的生物学功能减退或丧失,甚至造成生理功能的变化而引起的
疾病。5、电泳:蛋白质在溶液中解离成带电颗粒,在电场中可以向电荷相反的电极移动,这种现象称为电泳。
6、变构效应:乂称变构效应,是指寡聚蛋白与配基结合,改变蛋白质构象,导致蛋白质生物活性改变的现象.
7、盐析:在蛋白质溶液中加入高浓度的中性盐,可有效地破坏蛋白质颗粒的水化层。同时又中和了蛋白质表面的电荷,从而使蛋
白质颗粒集聚而生成沉淀,这种现象称为盐析(saltingout)。
8、分段盐析:不同蛋白质析出时需要的盐浓度不同,调节盐浓度以使混合蛋白质溶液中的几种蛋白质分段析出,这种方法称为分
段盐析。
9、盐溶:在蛋白质溶液中加入少量中性盐使蛋白质溶解度增加的现象。
二、填空
1、不同蛋白质的含(N)量颇为相近,平均含量为(16)机
2、在蛋白质分子中,一个氨基酸的a碳原子上的(竣基)与另一个氨基酸a碳原子上的(氨基)脱去一分子水形成的键叫(肽
键),它是蛋白质分子中的基本结构键。
3、蛋白质颗粒表面的(水化层)和(电荷)是蛋白质亲水胶体稳定的两个因素。
4、赖氨酸带三个可解离基团,它们Pk分别为2.18,8.95,10.53,其等电点为(9.74)。〈碱性氨基酸;PI=;(p«'2+射’")>
5、氨基酸的结构通式为()«
6、组成蛋白质分子的碱性氨基酸有(赖氨酸)、(精氨酸)和(组氨酸)。酸性氨基酸有(天冬氨酸)和(谷氨酸)。
7、氨基酸在等电点时,主要以(兼性或偶极)离子形式存在,在pH>pI的溶液中,大部分以(阴)离子形式存在,在plKpI的溶
液中,大部分以(阳)离子形式存在。
8、脯氨酸和羟脯氨酸与荀三酮反应产生(黄)色的物质,而其它氨基酸与荀三酮反应产生(紫)色的物质。
9、通常可用紫外分光光度法测定蛋白质的含量,这是因为蛋白质分子中的(色氨酸)、(络氨酸)和(苯丙氨酸)三种氨基酸的共
辄双键有紫外吸收能力。
10、蛋白质之所以出现各种内容丰富的构象是因为(C-CQ键和(N-Co)键能有不同程度的转动。
ll、Pauling等人提出的蛋白质a-螺旋模型,每圈螺旋包含(3.6)个氨基酸残基,高度为(0.54nm)。每个氨基酸残基沿轴上升(0.15nm),
并沿轴旋转(100)度。
12、一般来说,球状蛋白质的(疏水)性氨基酸侧链位于分子内部,(亲水)性氨基酸侧链位于分子表面。
13、两条相当伸展的肽链(或同一条肽链的两个伸展的片段)之间形成氢键的结构单元称为郃折叠)。
14、维持蛋白质构象的化学键有(氢键)、(范德华力)、(疏水作用)、(盐键)、(二硫键)和(配位键)。
15、血红蛋白(Hb)与氧结合的过程呈现(协同)效应,是通过Hb的(别构效应)现象实现的。
16、蛋白质的二级结构有(a螺旋)、(0折叠)、印转角)和(无规则卷曲)等几种基本类型。
17、破坏a-螺旋结构的氨基酸是(甘氨酸)和(脯氨酸)。
18、蛋白质:级结构和三级结构之间还存在(超二级结构)和(结构域)两种组合体。
19、(脯氨酸)不是a-氨基酸,它经常改变肽链折叠的方式。
三、单项选择题
1、在寡聚蛋白质中,亚基间的立体排布、相互作用以及接触部位间的空间结构称之谓()
A、三级结构B、缔合现象C、四级结构D、变构现象
2、形成稳定的肽链空间结构,非常重要的一点是肽键中的四个原子以及和它相邻的两个a-碳原子处于()
A、不断绕动状态B、可以相对自由旋转C、同一平面D、随不同外界环境而变化的状态
3、肽链中的肽键是:()A、顺式结构B、顺式和反式共存C、反式结构
4、维持蛋白质二级结构稳定的主要因素是:()A、静电作用力B、氢键C、疏水键I)、范德华作用力
5、蛋白质变性是由于()
A、一级结构改变B、空间构象破坏C、辅基脱落D、蛋白质水解
6、必需氨基酸是对()而言的。A、植物B、动物C、动物和植物D、人和动物
7、天然蛋白质中含有的20种氨基酸的结构()
A、全部是L-型B、全部是D型C、部分是L-型,部分是D—型D、除甘氨酸外都是L一型
8、天然蛋白质中不存在的氨基酸是()
A、半胱氨酸B、瓜氨酸C、丝氨酸D、蛋氨酸
9、当蛋白质处于等电点时,可使蛋白质分子的()
A、稳定性增加B、表面净电荷不变C、表面净电荷增加D、溶解度最小
10、蛋白质分子中-S-S-断裂的方法是()
4加尿素B、透析法C、加过甲酸【)、加重金属盐
11、下列含有两个竣基的氨基酸是:()
A、组氨酸B、赖氨酸C、甘氨酸D、天冬氨•酸E、色氨酸
12、含有Ala(丙),Asp,Lys,Cys的混合液,其pl依次分别为6.0(-),2.77(-),9.74(+),5.07(一),在pH9环境中
电泳分离这四种氨基酸,自正极开始,电泳区带的顺序是:()
A、Ala,Cys,Lys,AspB、Asp,Cys,Ala,LysC、Lys,Ala,Cys,AspD、Cys,Lys,Ala,AspE、Asp,Ala,Lys,
Cys
13、关于蛋白质分子三级结构的描述,其中错误的是:()
A、天然蛋白质分子均有的这种结构B、具有三级结.、,多肽链都具有生物学活性
C、三级结构的稳定性主要是次级键维系D、亲水基团聚集在三级结构的表面E、决定盘曲折叠的因素是氨基酸残基
14、典型的a-螺旋是()A、2.6,oB、310C3.6"D、4.015
15、每分子血红蛋白可结合氧的分子数为()A、1B,2C、3D、4E、6
16、血红蛋白的氧合曲线呈()
A、双曲线B、抛物线C、S形曲线D、直线E、钟罩形
17、SDS凝胶电泳测定蛋白质的相对分子质量是根据各种蛋白质()
A、在一定pH条件下所带净电荷的不同B、分子大小不同C、分子极性不同D、溶解度不同E、以上说法都不对
18、蛋白质一级结构与功能关系的特点是()
A、相同氨基酸组成的蛋白质,功能一定相同。B、一级结构相近的蛋白质,其功能类似性越大.
C、•级结构中任何氨基酸的改变,其生物活性即消失。不同生物来源的同种蛋白质,其•级结构相同
D、不同生物来源的同种蛋白质,其一级结构相同。E、以上都不对。
19、“分子病”首先是蛋白质什么基础层次结构的改变()
4一级B、二级C、超二级D、三级E、四级
20、注射时用70%的酒精消毒是使细菌蛋白质()
4变性B、变构C、沉淀D、电离E、溶解
21、可使蛋白质低温沉淀而不引起变性的方法是加()
A、Pb"B、Hg"C、三氯醋酸D、生物碱试剂E、有机溶剂
四、是非题
1、一氨基一瘦基氨基酸的pl接近中性,因为-C00H和-NH;,的解离度相等。一
〈一氨基一竣基氨基酸为中性氨基酸,其等电点为中性或接近中性,但氨基和竣基的解离度,即PK值不同)
2、构型的随£1须有旧的共价健的破坏和新的共价键的形成,而构象的飒!环发对幽匕+
3,生物体内只有蛋白质才含有氨基酸。一
4、所有的蛋白质都具有一、二、三、四级结构。-
5、镰刀型红细胞贫血病是一种先天遗传性的分子病,其病因是由于正常血红蛋白分子中的一个谷氨酸残基被缴氨酸残基所置换。
+
6、在蛋白质分子中,只有一种连接氨基酸残基的共价键,即肽键。一〈二硫键等》
7、天然氨基酸都有一个不对称a-碳原子。-〈轴阿勒
8、蛋白质的变性是其立体结构的破坏,因此常涉及肽键的断裂。一
9、一个化合物如能和年三酮反应生成紫色,说明这化合物是氨基酸、肽或蛋白质。一
〈前词呢讶晦“淇f嵯圜(拾物5/甦瞰
10、双缩胭反应是肽和蛋白质特有的反应,所以二肽也有双缩股反应。-
11、大多数蛋白质的主要带电基团是由它N-末端的氨基和C-末端的竣基组成。-<R基团》
12、蛋白质的亚基(或称亚单位)和肽链是同义的。一〈亚基是肽链,但肽链不一定是亚基>
13、血红蛋白与肌红蛋白均为氧教体,前者是个典型的别构(或变构)蛋白,因而与氧结合过程中呈现协同效应,而后者却不是。
+
14、等电点不是蛋白质的特征参数。+(不含任何盐的纯水中的等离子点〉
15、溶液的pH可以影响氨基酸的等电点。一〈等电点是氮帮骏所带净电荷为零时溶液的pH值,溶液pH并不影响〉
16、蛋白质分子的亚基与结构域是同义词。一
〈亚基尉§一条多肽链或以共价键雌在内的几条多肽罐喇曜白质分子的最4央储胸单位
结构《:肘稣#J球状蛋白质分子中,多肽链往彳胧成JL个紧密fl储状构象,彼此分开,以松散的肽窗0连,此蝴构娥跟结构域。>
五、问答题
1、什么是构型和构象?它们有何区别?
构型(configuration):一个有机分子中各个原子特有的固定的空间排列。这种排列不经过共价键的断裂和重新形成是不会改
变的。构型的改变往往使分子的光学活性发生变化。
构象(conformation):指一个分子中,不改变共价键结构,仅单键周围的原子旋转所产生的原子的空间排布。一种构象改变
为另•种构象时,不要求共价键的断裂和重新形成。构象改变不会改变分子的光学活性。
2、简述蛋白质的a-螺旋和b-折叠。
答:a-螺旋:当某一段肽链中所有的Ca的扭角分别相等时,则这一段肽链的主链就会围绕一个中心轴形成规则的螺旋构象。每一
圈含有3.6个氨基酸残基,沿螺旋轴方向上升0.54nm。相邻的螺圈之间形成链内氢键。
b-折叠:-种肽链相当伸展的结构,由两条或多条多肽链侧向聚集,通过相邻肽链主链上的N-H与C=0之间有规则的氢键,
形成的。分为平行式和反平行式。
3、维系蛋白质结构的化学键有哪些?它们分别在哪•级结构中起作用?
答:1、维系蛋白质结构的化学键有哪些?它们分别在哪一级结构中起作用?(6分)
稳定蛋白质三维结构的作用力主要是一些所谓弱的相互作用或称非共价键或次级键,包括氢键、范德华力、疏水作用和盐键(离子
键),此外还有共价二硫键、酯键和配位键。
维系蛋白质分子的一级结构:肽键、二硫键
维系蛋白质分子的二级结构:氢键
维系蛋白质分子的三级结构:疏水作用、氢键、范德华力、盐键
维系蛋白质分子的四级结构:范德华力、盐键
4、试述蛋白质结构与功能的关系。
答:蛋白质一级结构指蛋白质多肽链中氨基酸残基的排列顺序。因为蛋白质分子肽链的排列顺序包含了自动形成复杂的三维结构(即
正确的空间构象)所需要的全部信息,所以一级结构决定其高级结构。
蛋白质的空间结构是指蛋白质分子中原子和基团在三维空间上的排列、分布及肽链走向。蛋白质的空间结构决定蛋白质的功能。
空间结构与蛋白质各自的功能是相适应的。
5、扼要解释为什么大多数球状蛋白质在溶液中具有下列性质。
⑴在低pH时沉淀。
(2)当离子强度从零逐渐增加时,其溶解度开始增加,然后下降,最后出现沉淀。
(3)在一定的离子强度下,达到等电点pH值时,表现出最小的溶解度。
(4)加热时沉淀。
答:①低PH值时,陵基质子化,这样蛋白质分子带有大量的净正电荷,分子内正电荷相斥使许多蛋白质变性,并随着蛋白质分子
内部疏水基团向外暴露使蛋白质溶解度降低,因而产生沉淀。
②加入少量盐时,对稳定带电基团有利,增加了蛋白质的溶解度。但是随着盐离子浓度的增加,盐离子夺取了与蛋白质结合
的水分子,降低了蛋白质的水合程度,使蛋白质水化层破坏,而使蛋白质沉淀。
③蛋白质在等电时以偶极离子的形式存在,其总净电荷为零,蛋白质颗粒在溶液中因为没有相同电荷间的相互排斥,所以最
不稳定,溶解度最小,极易形成沉淀析出。
④加热时,蛋白质变性,二、三级结构发生改变或破坏,致使蛋白质分子表面的结构发生变化,亲水基团相对减少,原来埋
藏在分子内部的疏水基团大量暴露在分子表面,结构蛋白质颗粒失去水化层,极易引起分子间相互聚集而产生沉淀。
6、通过下面信息确定一个蛋白的亚基组成:
凝胶层析确定分子质量:200kDa
SDS—PAGE确定分子质量:lOOkDa
加毓基乙醇的SDS确定分子质量:40kDa和60kDa。
答:凝胶过滤分离的蛋白质是处在未变性的状态,如果被测定的蛋白质的分子形状是相同的或者是相似的,所测定的分子量应该是
较准确的。SDS测定蛋白质的分子量只是根据它们的大小。但这种方法能破坏寡聚蛋白质亚基间的非共价作用力,使亚基解
离。在这种情况下,所测定的是亚基的分子量。如果有2-疏基乙醇存在,则能破坏肽链内或肽链间的二硫键。在这种情况下进行
SDS,所测定的分子量是亚基的分子量(如果亚基间没有二硫键)或者是肽链的分子量(如果亚基是由二硫键连接的几个肽链
组成)。根据题中给出的信息,该蛋白质的分子量是200kD,由两个大小相同的亚基(lOOkD)组成,每个亚基由两条肽链(40kD和
60kD)借二硫键连接而成。
7、1、家基酸的侧链对多肽或蛋白质的结构和生物学功能非常重要。用三字母和单字母缩写形式列出其侧链为如下要求的氨基酸:
(a)含有一•个羟基。
(b)含有一个氨基。
(c)含有一个具有芳香族性质的基团。
(d)含有分支的脂肪族煌链。
(e)含有硫。
答:(a)Ser(S),Thr(T),Tyr(Y)
(b)Asn(N),Gin(Q),Arg(R),Lys(K)
(c)Phe(F),Trp(W),Tyr(Y),
(d)lie(I),Leu(L),Vai(V)
(e)Cys(C),Met(M)
8、胃液(pH=1.5)的胃蛋白酶的等电点约为1,远比其它蛋白质低。试问等电点如此低的胃蛋白酶必须存在有大量的什么样的官
能团?什么样的氨基酸才能提供这样的基团?
答:一C00—•;Asp,Glu
3酶化学
一、名词解释
辅酶:与酶蛋白结合比较松弛的小分子有机物质,通过透析方法可以除去。
辅基:是以共价键和酶蛋白结合,不能通过透析除去,需要经过一定的化学处理才能与蛋白分开。
酶的活性中心:(或称活性部位)是指酶分子中直接和底物结合,并和酶催化作用直接有关的部位。
酶的必需基团:参与构成酶的活性中心和维持酶的特定构象所必需的基团。
同工酶:指催化相同的化学反应,但其蛋白质分子结构、理化性质和免疫性能等方面都存在明显差异的一组酶。
核酶:是对RNA有催化活性的RNA。
变构酶:一种调节酶,经与一种或几种代谢物结合后,能改变其催化活性。
二、填空
1、全酶由酶蛋白和辅因子组成,在催化反应时,二者所起的作用不同,其中醒目决定酶的专一性和高效率,辅因子起传递电子、
原子或化学基团的作用。
2、辅因子包拈猫最,辅基和金属离子等。其中域与酶蛋白结合紧密,需要化学方法处理除去,铺酸与酶蛋白结合疏松,可用透
析法除去。
3、T.R.Cech和S.Altman因各自发现了核酶(具有催化能力的RNA)而共同获得1989年的诺贝尔奖(化学奖)。
4、根据酶的专一性程度不同,酶的专一性可以分为结构专•性和立体异构专一性。
5、酶的活性中心包括结合部位和催化部位两个功能部位,其中结合部位ft接与底物结合,决定酶的专一性,催化部位是发生化学
变化的部位,决定催化反应的性质。
6、酶反应的温度系数Qu1一般为上力。
7、酶促动力学的双倒数作图(Lineweaver-Burk作图法),得到的直线在横轴I:的截距为(.±),纵轴上的截距为(,)。
kmvmax
8、判断一个纯化酶的方法优劣的主要依据是酶的比活力和总活力。(回收率和纯化倍数)
9,竞争性抑制剂不改变酶反应的Vm,韭竞重性抑制剂不改变酶反应的Km值。
10、使酶具有高催化效应的因素是邻近效应和定位效应、张力和变形、酸碱催化、共价催化和酶活性中心是低介电区域。
11、如果一个酶对A、B、C三种底物的米氏常数分别为K.a、K-b、K.c,且Ka>K,b>K.c,则此酶的最适底物是©,与酶亲和力最小
的底物是A»
12、根据由节物分子不同,别构效应分为同促效应和异促效应。根据调节物使别构酶反应速度对回敏感度不同分为正蛔效廛和
负协同效应。
同促效应:不同的别构酶的调节物分子不同,调节物是底物的别构酶发生的别构效应即为同促效应.
异促效应:指调节物与底物分子不同的别构酶发生的别构效应。
正协同效应:当底物与一个亚基上的活性中心结合后,引起酶分子构象的改变,使其它亚基的活性中心与底物的结合能力增强
的作用,称为正协同效应。
三、单项选择题
1、酶的活性中心是指酶分子:
A、上.的几个必需基闭B、与底物结合的部位C、结合底物并发挥催化作用的部位
D、中心部位的一种特殊结构E、催化底物变成产物的部位
2、当酶促反应v=80%Vmax时,[S]为Km的倍数是:
A、4B、5C、10D,40E、80
3、酶的竞争性抑制剂的动力学特点是:
A、丫皿和K”都不变B、V,"不变,KIC、V„„t,K.不变D、LI,降不变E.Vmax不变,Kmt
4、同工酶的特点是:
A.催化同一底物起不同反应的酶的总称B.催化的反应及分子组成相同,但辅酶不同的一组酶
C.催化作用相同,但分子结构和理化性质不同的一组酶D.多酶体系中酶组分的统称
E.催化作用、分子组成及理化性质均相同,但组织分布不同的一组酶
5、别构效应剂与酶的哪一部位结合:
A.活性中心以外的调节部位B.酶的苏氨酸残基C.酶活性中心的底物结合部位D.任何部位E.辅助因子的结合部位
6、目前公认的酶与底物结合的学说是
A、活性中心说B、诱导契合学说C、锁匙学说D、中间产物学说
7、下列关于酶活性中心的叙述正确的的是
A、所有酶都有活性中心B、所有酶的活性中心都含有辅酶
C、酶的活性中心都含有金属离子D、所有抑制剂都作用于酶活性中心。
8、NAD'在酶促反应中转移
A、氨基B、氢原子C、氧原子D、竣基
9、FAD或FMN中含有哪一种维生素?
A、尼克酸B、核黄素C、毗哆醛D、毗哆胺
10、利用恒态法推导米氏方程时,引入了除哪个外的三个假设?
A、在反应的初速度阶段,E+P-ES可以忽略B、假设[S]»[E],则[S]-[ES]~[S]
C、假设E+S-ES反应处于平衡状态
D、反应处于动态平衡时,即ES的生成速度与分解速度相等
11、酶分子经磷酸化作用进行的化学修饰主要发生在其分子中哪个氨基酸残基上?
A、PheB、CysC,LysD、TrpE、Ser
12、如按Lineweaver-Burk方程作图测定Km和Vmax时,X轴上实验数据应示以
A、1/Vw'B、V„„C、1/[S]D、[S]E、V,„/[S]
13、大肠杆菌天冬氨酸转氨甲酰酶别构抑制剂是
A、ATPB、CTPC、UTPD、ADPE、GTP
14、下列哪一项不是Km值的意义?
A、Km值是酶的特征性物理常数,可用于鉴定不同的配
B、Km值可以表示酶与底物之间的亲和力,Km值越小、亲和力越大
C、Km值可以预见系列反应中哪一步是限速反应
D、用Km值可以选择酶的最适底物
E、比较Km值可以估计不同酶促反应速度
15、有机磷农药作为酸的抑制剂是作用于酶活性中心的:
A、筑基B、羟基C,竣基D、咪哇基E,氨基
16、某种酶活性需以-SH为必需基团,能保护此酶不被氧化的物质是:
A、CysB、GSHC、尿素D、离子型去污剂E、乙醇
17、丙氨酸氨基转移酸的辅酶是:
A、NAD+B、NADP+C、磷酸P比哆醛D、烟酸E、核黄素C
18、含B族维生素的辅酶在酶促反应中的作用是
A、传递电子,原子和化学基因的作用B、稳定酶蛋白的构象
C、作为酶活性中心的一部分D、决定酶的专一性E、提高酸的催化活性
19、关于变构酶的结构特点的错误叙述是
A、有多个亚基组成B、有与底物结合的部位C、有与变构剂结合的部位D、催化部位与别构部位都处于同一亚基上
E、催化部位与别构部位既可处于同一亚基,也可处于不同亚基上
20、将米氏方程改为双倒数方程后:
A、l/v与1/[S]成反比B、以1/v对1/[S]作图,其横轴为1/[S]
C、v与[S]成正比D、Km值在纵轴上E,Vmax值在纵轴上
21、一个简单的酶促反应,当[S]<〈Km时:
A、反应速度最大B、反应速度难以测定C、底物浓度与反应速度成正比D、增加酶浓度,反应速度显著变大
22、卜.列哪种辅酶中不含核甘酸
A、FADB、NAD+C、F%D、NADPE、CoASH
23、酶蛋白分子中参与酸、碱催化的最主要的酸碱基团是
A、氨基B、竣基C、筑基D、酚基E、咪哇基
24、下列哪一项不是酶具有高催化效率的因素?
A、加热B、酸碱催化C,“张力”和“形变”D、共价催化E、邻近定位效应
25、纯化酶制剂时;酶纯度的主要指标是
A、蛋白质浓度B、酶量C、酶的总活性D、酶的比活性E、酸的理化性质
四、是非题
1、米氏常数(Km)是与反应系统的酶浓度无关的一个常数。/
(血值是酶的特征常数,一般只与酶的性质有关,与酶浓度无关,不同的酶,Km值不同)
2、同工酶就是一种酶同时具有几种功能。*
3、辅酶与酶蛋白的结合不紧密,可以用透析的方法除去。/
4、•般来说酶是具有催化作用的蛋白质,相应地蛋白质都是配葭x
5、酶反应的专一性和高效性取决于酶蛋白本身。/
6、酶活性中心是酶分子的一小部分。/
7、酶的最适温度是酶的一个特征性常数。x
8、竞争性抑制剂在结构上与酶的底物相类似。/
9、L-氨基酸氧化酶可以催化D-氨基酸氧化。x
10、维生素E的别名叫生育酚,维生素K的别名叫凝血维生素。/
11、泛酸在生物体内用以构成辅酶A,后者在物质代谢中参加酰基的转移作用。/
12、本质为蛋白质的酶是生物体内唯•的催化剂。x
13、酶反应的最适pH只取决于酶蛋白本身的结构。x
14、酶活性中心一般由在一级结构中相邻的若干氨基酸残基组成。x
15、酶只能改变化学反应的活化能而不能改变化学反应的平衡常数。/
16、酶活力的测定实际上就是酶的定量测定。/
检杳酶的含量及存在,不能直接用重量或体积来表示,常用它催化某一特定反应的能力来表示,即用酶的活力来表示,因
此酶活力的测定实际上就是酶的定量测定。
17、酶反应速度一般用单位时间内底物的减少量来表示。x
18、Km是酶的特征常数,只与酶的性质有关,与酶的底物无关。/
19、当[S]〉>Km时,v趋向于Vmax,此时只有通过增加[E]来增加v。/
20、酶的最适温度与酶的作用时间有关,作用时间长,则最适温度高,作用时间短,则最适温度低。x
21、正协同效应使酶与底物亲和力增加。/
五、问答题
1.酶作为生物催化剂具有什么特点?p67
答:①酶具有极高的催化效率
②酶的催化作用具有高度专性
③酶易失活
④酶的催化活性受到调节、控制
⑤有些酶的催化活性与辅因子有关
2.按酶促反应的性质,国际酶学委员会把酶分成哪六大类?
答:氧化还原酶类、转移酶类、水解酶类、裂合醐类、异构醐类、合成酶类
3.何谓酶原与酶原激活?酶原与酶原激活的生物学意义是什么?
答:酶原:有些酶在细胞内合成和初分泌时,并不表现有催化活性,这种无活性状态的酶的前体形式称为〜。
酶原激活:指酶原在•定条件卜.被打断一个或几个特殊的肽键,从而使酶构象发生一定的变化形成具有活性的三维结构过程。
⑴可保护分泌酶原的组织不被水解破坏
⑵酶原激活是有机体调控酶活的一种形式
4.试述影响酶促反应速度的因素?
答:影响因素:酶浓度、底物浓度、pH、温度、抑制剂、激活剂等
⑴酶浓度:在底物足够过量而其它条件固定的条件卜,若反应系统中不含有抑制酶活性的物质及其它不利于酶发挥作用的因素
时,酶促反应的速度和酶浓度成正比。
⑵底物浓度:
在酶浓度、PH、温度等条件固定不变的情况下
①当底物浓度较低时,反应速度与底物浓度成正比
②随着底物浓度的增高,反应速度不再成正比例加速
③当底物浓度高达一定程度,反应速度不再增加,达最大速度
⑶PH:酶的活力受环境pH的影响,在一定pH下,酶表现最大活力,高于或低于此pH,酶活力降低
⑷温度
①和一般化学反应相同,在达到最适温度之前,反应速度随温度升高而加快。
②酶是蛋白质,随着温度升高,使酶蛋白逐渐变性而失活,引起酶反应速率卜.降。
⑸抑制剂:使酶活力下降,但并不引起酶蛋白变性
⑹激活剂:能提高酶活性
5.何谓米氏方程式,米氏常数的意义是什么?
Vmax[S]
V=Km+[S]
Km值是反应速度为最大速度一半时的底物浓度。单位用mol/L或mol/L表示。
6.什么是酶的可逆的抑制作用?可逆的抑制作用可分哪几种?请简述它们的特点。
答:酶的可逆的抑制作用:抑制剂与酶以非共价键结合而引起酶活性降低或丧失,能用透析、超滤等物理方法除去抑制剂而使
酶复活,这种抑制作用是可逆的。
可逆的抑制作用可分为:
⑴竞争性抑制:抑制剂和底物竞争酶的结合部位,从而影响了底物与酶的正常结合。
①大多数竞争性抑制剂的结构与底物结构类似
②抑制程度取决于底物及抑制剂的相对浓度
③抑制作用可以通过增加底物浓度而解除
⑵非竞争性抑制:底物和抑制剂同时和酶结合,两者没有竞争作用,但中间的三元复合物不能进一步分解为产物,酶活力降低。
①抑制剂结构与底物无共同之处
②抑制剂与酶活性部位以外的基团相结合
③抑制作用不能通过增加底物浓度来解除
⑶反竞争性抑制:酶只能与底物结合后,才能与抑制剂结合,不再分解,从而降低形成产物的数量。
类型K-
无抑制剂VgK.
竟争件抑制不变增加
非竞争件抑制减小不变
反竞争性抑制减小M小
7.某酶的Km为24X10mol/L,[S]为0.5mol/L时,测得速度为128umol/min,计算出底物浓度为10'mol/L时的初速度。
8、从肝细胞中提取的一种蛋白水解酶的粗提液300ml含有150mg蛋白质,总活力为360单位。经过一系列纯化步骤以后得到的4ml
酶制品(含有0.08mg蛋白),总活力为288单位。整个纯化过程的收率是多少?纯化了多少倍?(80%,1500倍)
9、在很多酶的活性中心均有His残基参与,请解释。
答:酶蛋白分子中组氨酸的侧链咪哇基PK值为6.0~7.0,在生理条件下,一部分解离,可以作为质子供体,一部分不解离,可以
作为质子受体,既是酸,又是碱,可以作为广义酸碱共同催化反应,因此常参与构成酶的活性中心。
1核酸的结构与功能
一、名词解释
1、生物化学:是运用化学原理和方法,研究生命有机体化学组成和化学变化的科学,即研究生命活动化学本质的学科。
2、DNA一级结构:由数量极其庞大的四种脱氧的单核甘酸按照一定的顺序,以3',5'一磷酸二酯键彼此连接而形成的线形或环
形多核甘酸链。
3、增色效应:含DNA和RNA的溶液经变性或降解后对紫外线吸收的增加。是由丁•碱基之间电子的相互作用的改变所致,通常在
260nm测量。
4、减色效应:一种含有DNA或RNA的溶液与含变性核酸或降解核酸的相同溶液相比较,其紫外线吸收为低。是由于DNA双螺
旋结构使碱基对的n电子云发生重叠,因而减少了对紫外线的吸收。
5、DNA的变性:指核酸双螺旋的氢键断裂,变成单链,并不涉及共价键的断裂。
6、DNA的复性:变性DNA在适当条件下,又可使两条彼此分开的链重新缔合成为双螺旋结构,全过程为复性。
热变性后的复性又称为退火。
7、核酸分子杂交:应用核酸分子的变性和复性的性质,使来源不同的DNA(或RNA)片断按碱基互补关系形成杂交双链分子,
这一过程称为核酸的分子杂交。
8、熔解温度:DNA变性的特点是爆发式的,变性作用发生在一个很窄的温度范围内。通常把热变性过程中光吸收达到最大吸收(完
全变性)■半(双螺旋结构失去一半)时的温度称为该DNA的熔点或熔解温度(meltingtemperature),tm表示。
9、Chargaff定律:所有DNA中腺喋吟与胸腺啥嗟的摩尔含量相等,(A=T),鸟喋吟和胞嘴咤的摩尔含量相等(G=C),即喋吟
的总含量与嗜嚏的总含量相等(A+G=T+C)。DNA的碱基组成具有种的特异性,但没有组织和器官的特异性。另外生长发育阶
段、营养状态和环境的改变都不影响DNA的碱基组成。
二、填空
1、核酸完全的水解产物是(碱基)、(戊糖)和(磷酸)。其中(碱基)又可分为(嚎吟)碱和(喀咤)碱
2、体内的喋吟主要有(腺嚓吟)和(鸟嚓吟):嚅喔碱主要有(胞喀碇)、(胸腺嗑咤)和(尿嗡咤)。某些RNA分子中还含有微
量的其它碱基,称为(稀有碱基)。
3、喋吟环上的第(9)位氮原子与戊糖的第1位碳原子相连形成(N-C糖昔)键,通过这种键相连而成的化合物叫(核昔)。
4、体内两种主要的环核苜酸是(cAMP)和(cGMP)»<33-环腺昔酸,3f-环鸟甘酸〉
5、写出下列核甘酸符号的中文名称:ATP(腺昔三磷酸),dCDP(脱氧胞昔二磷酸)。
6、tRNA的三叶草型结构中,其中氨基酸膏的功能是(携带活化氨基酸),反密码环的功能是(与mRNA模板上的密码子进行碱
基配对的专一性的识别)。
7、两类核酸在细胞中的分布不同,DNA主要位于(细胞核)中,RNA主要位于(细胞质)中。
8、核酸分子中的糖背键均为印)型糖首键。糖环与碱基之间的连键为(糖昔)键。核昔与核昔之间通过(磷酸二酯)键连接形成
多聚体。
9、核酸在260nm附近有强吸收,这是由于(在喋吟碱基和嗜咤碱基中存在共加双键)。
10、给动物食用3H标记的(胸腺喀咤),可使DNA带有放射性,而RNA不带放射性。
11、双链DNA中若(G-C对)含量多,则Tm值高。
12、DNA样品的均一性愈高,其熔解过程的温度范围愈(窄.
13、DNA所处介质的离子强度越低,其熔解过程的温度范围越(宽),熔解温度越(俯,所以DNA应保存在较(高)浓度的盐溶
液中,通常为(1)mol/L的NaCl溶液。
14、双链DNA螺距为3.4nm,每圈螺旋的碱基数为10,这是(B〉型DNA的结构。
15、NAD+,FAD和CoA都是(腺昔酸)的衍生物。
16、维持DNA双螺旋结构稳定的主要因素是(碱基堆积力),其次,大量存在于DNA分子中的弱作用力如(氢键),(离子键)和
(范德华力)也起一定作用。
17、tRNA的三级结构为(倒L)形,其一端为(3,-端CCA),另端为(反密码子)。
三、单项选择题
1、热变性的DNA分子在适当条件下可以复性,条件之一是
A、骤然冷却B、缓慢冷却C、浓缩D、加入浓的无机盐
2、在适宜条件下,核酸分子两条链通过杂交作用可自行形成双螺旋,取决于
A、DNA的Tm值B、序列的重复程度C、核酸链的长短碱基序列的互补
3、下列关于mRNA描述哪项是错误的?
A、原核细胞的mRNA在翻译开始前需加“PolyA”尾巴。B、真核细胞mRNA在3,端有特殊的“尾巴”结构
C、真核细胞mRNA在5,端有特殊的“帽子”结构
4、核酸变性后,可发生哪种效应?
A、减色效应B、增色效应C、失去对紫外线的吸收能力D、最大吸收峰波长发生转移
5、下列复合物中除哪个外,均是核酸与蛋白质组成的复合物
A、核糖体B、病毒C、端粒酶D、RNasePE、核酶(ribozyme)
6、RNA经NaOH水解,其产物是:
A、21核昔酸B、3、核甘酸C\2、核昔酸和3、核昔酸的混合物D、2、核甘酸、31核甘酸和S-核甘酸的混合物
7、尼克酰胺腺嚓畛二核甘酸(NAD+),黄素腺嚓吟:核昔酸(FAD)和辅酶A(CoA),三种物质合成的共同点是
A、均需要尼克酸B、均需要泛酸C、含有来自磷酸核糖焦磷酸(PRPP)的核糖基团
D、均接受半胱氨酸基团E均属于腺昔酸的衍生物
8、上图中,哪一点代表双链DNA的Tm值?
A、AB、BC、CD、DE.都不对
9、真核生物DNA缠绕在组蛋白上构成核小体,核小体含有的蛋白质是:
A、Hl、H2、H3、H4各两分子B、H1A、H1B、H2A、H2B各两分子
C、H2A、H2B、H3A、H3B各两分子D、〃24、H2B、H4各两分子E、H2A、H2B、H4A、H4B各两分子
10、自然界游离核甘酸中的磷酸最常位于
A、核甘的戊糖的C2上B、核昔的戊糖的C-3,上
C、核昔的戊糖的C5上D、核甘的戊糖的C2及C-3'上E、核背的戊糖的C2及CS上
11、胸腺喘噬与尿嘴咤在分子结构上的差别在
A、C2上有NHAC2上有OAC5上有甲基、C5上无甲基
C、C4上有NH2,C4上有OD、C5上有羟甲基,C5上无羟甲基
四、是非题
1、杂交双链是指DNA双链分开后两股单链的重新结合。一
2、如果DNA一■条链的碱基顺序是CTGGAC,则互补链的碱基序列为GACCTG。+
3、在tRNA分子中,除四种基本碱基(A、G、C、U)外,还含有稀有碱基。+
4、DNA是遗传物质,而RNA则不是。一
5、脱氧核糖核甘中的糖环3'位没有羟基。一
6、两个核酸样品A和B,如果A的ODZ/ODZMAB的ODZ/ODZM,那么A的纯度>B的纯度。一
7、若种属A的DNATm值低于种属B,则种属A的DNA比种属B含有更多的A-T碱基对。+
8、原核生物和真核生物的染色体均为DNA与组蛋白的复合体。-
9、核酸的紫外吸收与溶液的pH值无关。一〈有关>
10、生物体内存在的游离核昔酸多为5'-核甘酸。+
11、基因表达的最终产物都是蛋白质。一
12、Z型DNA与B型DNA可以相互转变。+
13、生物体内,天然存在的DNA分子多为负超螺旋。+
〈负超螺旋DNA容易解链,便于进行复制、转录等反应〉
14、mRNA是细胞内种类最多、含量最丰富的RNA。一
15、tRNA的二级结构中的额外环是tRNA分类的重要指标。+
16、真核生物成熟mRNA的两端均带有游离的3'-OH。+
17、目前为止发现的修饰核甘酸大多存在于tRNA中。+
18、对于提纯的DNA样品,测得OD2«/OD28O<1.8,则说明样品中含有RNA。一
(蛋白质;OD260/OD280=1.8为DNA;OD26o/OD28o=2为RNA>
19、核酸变性或降解时,出现减色效应。-<增色效应〉
20、在所有病毒中,迄今为止还没有发现既含有RNA又含有DNA的病毒。+
五、简答题
1、试比较DNA和RNA在化学组成、分子结构及功能上的差异。
DNARNA
A、G、C、TA、G、C、U
化学组成
脱氧核糖核糖
分子结构一级结构:3;5,一磷酸二酯键彼此连接而形成的核甘酸链
二级结构:双螺旋tRNA二级三叶草、三级倒L型
三级结构:超螺旋、核小体mRNA一级结构3端有polyA,5,有帽子结构
mRNA:在蛋白质合成中起着模板作用
rRNA:与蛋白质结合构成核糖体,是合成蛋白
携带遗传信息,决定细胞和个体
功能质的场所
的基因型
tRNA:在蛋白质合成时起着携带活化氨基酸的
作用
2、什么是Tm值?Tm值大小与哪些因素有关?
答:Tm值:通常把热变性过程中光吸收达到最大吸收(完全变性)一半(双螺旋结构失去一半)时的温度称为该DNA的熔点或熔解
温度。
⑴DNA的均一性:均一性愈高的样品,熔解过程的温度范围愈小
⑵G-C含量:G-C含量高的DNA,tm值也高(
⑶介质离子强度:离子强度增大,DNA的Tm随之增大,变性温度范围则较窄。
3、DNA双螺旋结构模型主要特点是什么?
答:①由两条反向平行的脱氧多核甘酸链围绕同一中心轴,构成右手双螺旋结构。有两个沟:大沟和小沟。
②两股单链“糖-磷酸”构成骨架,居双螺旋外侧;碱基位于双螺旋内侧,并与中心轴垂直。糖环平面与中轴平行。
③每圈螺旋含10个核甘酸残基,螺距:3.4nm,直径:2nm。顺轴方向每隔0.34nm有一个核甘酸,两个核昔酸之间的夹角为36°
④•条多核甘酸链上的喋吟碱基与另•条链上的喀咤碱基以氢键相连,匹配成对。原则:A=T;G=C
•条链为另一条链得互补链
4、一段双链DNA包含1000个碱基,其组成中G+C占58%,那么在DNA的该区域中胸腺啥I®残基有多少?
5、指出双螺旋DNA溶解曲线是如何受下列条件的影响的:
⑴降低溶液离子强度;
⑵加入少量的乙醇。
答:⑴由于在底离子强度的情况下,磷酸基团的电荷很少相互屏蔽,相互排斥力更强,使双螺旋不稳定,因此其Tm值降低。
⑵非极性溶剂降低了稳定双螺旋的疏水性,因此降低了Tm值。
6、线粒体电子转移链中的一种重要蛋白质:酵母细胞色素氧化酶由7个亚基组成,但是只有其中的4种亚基的氨基酸顺序由酵母核
内DNA编码,那么其余三种亚基的氨基酸顺序所需的信息来自何处?
答:线粒体DNA
7、DNA样品在水浴中加热到一定温度,然后冷至室温测其A260,请问在下列情况下,加热与退火前后,A260的变化如何?
(a)加热的温度接近该DNA的Tm值;
(b)加热的温度远远超过DNA的Tm值。
4脂类化学和生物膜
一、名词解释
1、外周蛋白:在细胞膜的细胞外侧或细胞质侧与细胞膜表面松散连接的膜蛋白,易于用不使膜破坏的温和方法提取。
2、内在蛋白:整合进入到细胞膜结构中的一类蛋白,它们可部分地或完全地穿过膜的磷脂双层,通常只有用剧烈的条件将膜破坏
才能将这些蛋白质从膜上除去。
3、同向协同:物质运输方向与离子转移方向相同
4、反向协同:物质运输方向与离子转移方向相反
5、内吞作用:细胞从外界摄入的大分子或颗粒,逐渐被质膜的小部分包围,内陷,其后从质膜上脱落下来而形成含有摄入物质的
细胞内囊泡的过程。
6、外排作用:细胞内物质先被囊泡裹入形成分泌泡,然后与细胞质膜接触、融合并向外释放被裹入的物质的过程。
7、细胞识别:细胞通过其表面的受体与胞外信号物质分子选择性地相互作用,从而导致胞内一系列生理生化变化,最终表现为细
胞整体地生物学效应的过程。
二、填空
1、膜蛋白按其与脂双层相互作用的不同可分为内在蛋白与外周蛋白两类。
2、根据磷脂分子中所含的醇类,磷脂可分为甘油磷脂和鞘磷脂两种。
3、磷脂分子结构的特点是含一个极性的头部和两个非极性尾部。
4、神经酰胺是构成鞘磷脂的基本结构,它是由鞘氨醇以酰胺键与脂肪酸相连而成。
5、磷脂酰胆碱(卵磷脂)分子中磷酰胆碱为亲水端,脂肪酸的碳氢链为疏水端。
6、磷脂酰胆碱(卵磷脂)是由苴泡、脂肪酸、磷酸和胆碱组成。
7、脑昔脂是由鞘氨醇、脂肪酸和单糖(葡萄糖/半乳糖)组成。
8、神经节背脂是由鞘氨醇、脂肪酸、糖和唾液酸组成。
9、生物膜内的蛋白质速水氨基酸朝向分子外侧,而亲水氨基酸朝向分子内侧。
10、生物膜主要由膜脂和膜蛋白组成。
11、膜脂,槛包括磷脂、糖脂和固醇,其中以磷脂为主。
三、单项选择题
1、神经节昔脂是()A、糖脂B、糖蛋白C、脂蛋白D、脂多糖
2、下列关于生物膜的叙述正确的是()
A、磷脂和蛋白质分子按夹心饼干的方式排列。B、磷脂包裹着蛋白质,所以可限制水和极性分子跨膜转运。
C磷脂双层结构中蛋白质镶嵌其中或与磷脂外层结合。D、磷脂和蛋白质均匀混合形成膜结构。
3、跨膜蛋白与膜脂在膜内结合部分的氨基酸残基()
A、大部分是酸性B、大部分是碱性C、大部分是琉水性D、大部分是糖基化
4、卜.列关于哺乳动物生物膜的叙述除哪个外都是正确的()
A、蛋白质和膜脂跨膜不对称排列B、某些蛋白质可以沿膜脂平行移动
C、蛋白质含量大于糖含量D、低温下生长的细胞,膜脂中饱和脂肪酸含量高
5、下列有关甘油三酯的叙述,哪一个不正确?()
A、甘油三酯是由吩子甘油与三分子脂酸所组成的酯B、任何一个甘油三酯分子总是包含三个相同的脂酰基
C、在室温下,甘油三酯可以是固体,也可以是液体D、甘油三酯可以制造肥皂E、甘油三酯在氯仿中是可溶的
6、脂肪的碱水解称为()A、酯化B、还原C、皂化D、氧化E、水解
7、下列哪种叙述是正确的?()
A、所有的磷脂分子中都含有甘油基B、脂肪和胆固醇分子中都含有脂酰基
C中性脂肪水解后变成脂酸和甘油D、胆固醇酯水解后变成胆固醇和氨基糖E、碳链越长,脂酸越易溶解于水
8、一些抗菌素可作为离子载体,这意味着它们()
A、直接干扰细菌细胞壁的合成B、对细胞膜有一个类似于去垢剂的作用
C增加了细胞膜对特殊离子的通透性D、抑制转录和翻译E、仅仅抑制翻译
9、钠钾泵的作用是什么?()
A、Na*输入细胞和将K*由细胞内输出B、将Na*输出细胞
C、将K+输出细胞D、将K+输入细胞和将Na+由细胞内输出E、以上说法都不对
10、生物膜主要成分是脂与蛋白质,它们主要通过什么键相连?()A、共价键B、:硫键C、氢键D、离子键E、疏水作用
11、细胞膜的主动转运()A、不消耗能量B、需要ATPC、消耗能量(不单指ATP)D、需要GTP
四、是非题
1、自然界中常见的不饱和脂酸多具有反式结构。*(顺式)
2、天然脂肪酸的碳链骨架碳原子数目几乎都是偶数。/
3、质膜上糖蛋白的糖基都位于膜的外侧。,
4、细胞膜的内在蛋白通常比外周蛋白疏水性强。/
5、缩短磷脂分子中脂酸的碳氢链可增加细胞膜的流动性。/
6、某细菌生长的最适温度是25匕,若把此细菌从25℃移到37℃的环境中,细菌细胞膜的流动性将增加。/
7、细胞膜的两个表面(外表面、内表面)有不同的蛋白质和不同的酶。,
8、所有细胞膜的主动转运,其能量来源是高能磷酸键的水解。x
还有依靠呼吸链的氧化还原作用,有的则依靠代谢物(底物)分子中的高能键
9、三脂酰甘油分子中不饱和脂肪酸含量愈高,其熔点愈高。x
10、胆固醇为环状一元醇,不能皂化。/
1k脂肪和胆固醇都属脂类化合物,它们的分子中都含有脂肪酸。x
胆固醇的化学本质是醇,分子中无脂肪酸
12、磷脂和糖脂都属于两亲化合物。/
13、生物膜的脂双层基本结构在生物进化过程中一代一代传卜一去,但这与遗传信息无关。/
14、生物膜中的糖都与脂或蛋白质共价连接。/
15、神经酰胺也是一种第:信使。/
16、脂类物质是醇和高级一元酸形成的化合物。x
17、自然界中的单不饱和脂肪酸的双键的位置一般在第9〜10碳原子之间。,
18、生物膜的结构与球蛋白类似,疏水基团在内,极性基团在外。/
五、问答题
1、流动镶嵌模型的要点。
2、生物膜物质运输的方式。
3、试述物质的被动运输和主动运输的基本特点。
4、Na'—K'泵的作用机理
5糖类分解代谢
一、名词解释
1、糖酵解途径:是在无氧条件3葡萄糖进行分解,形成2分子丙酮酸并伴随着ATP生成的,系列反应。
2、柠檬酸循环:是用于乙酰CoA中的乙酰基氧化生成CO2的酶促反应的循环系统,该循环的第一步反应是由乙酰CoA和草酰乙
酸缩合形成柠檬酸。
3、糖的有氧氧化:糖的有氧氧化指葡萄糖或糖原在有氧条件卜氧化成水和二氧化碳的过程。是糖氧化的主要方式。
4、磷酸戊糖途径:是指机体某些组织(如肝、脂肪组织等)种一个葡萄糖-6-磷酸经代谢产生NADPH和核糖-5-磷酸的途径。该途
径包括氧化和非氧化两个阶段,在氧化阶段,葡萄糖-6-磷酸转化为核酮糖-5-磷酸和CO,并生成两分子的NADPH;在非氧化阶段,
核酮糖-5-磷酸异构化生成核糖-5-磷酸或转化为酵解中的两个中间代谢物果糖-6-磷酸和甘油醛-3-磷酸。
5、发酵:厌氧有机体把糖酵解生成NADH中的氢交给丙酮酸脱竣后的产物
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