食品安全国家标准 食品中脂肪的测定

食品安全国家标准食品中脂肪的测定

一、范围

本标准规定了食品中脂肪的测定方法。该方法适用于各类食品中脂肪的测定。

二、方法

1.索氏提取法

（1）原理：利用有机溶剂将食品中的脂肪提取出来，并通过蒸发、干燥、称重等步骤计算出脂肪含量。

（2）试剂与仪器：石油醚、乙醇、无水硫酸钠、滤纸、索氏提取器、真空干燥箱、分析天平等。

（3）操作步骤：

1)样品处理：将样品磨碎，过筛，称取适量样品。

2)提取：将样品放入索氏提取器中，加入适量石油醚，加热回流，提取至提取液无色。

3)洗涤：将提取液过滤，用乙醇洗涤滤纸上的脂肪。

4)干燥：将洗涤后的滤纸放入真空干燥箱中，干燥至恒重。

5)称重：将干燥后的滤纸和脂肪称重，计算脂肪含量。

2.气相色谱法

（1）原理：利用气相色谱仪将食品中的脂肪酸甲酯分离，通过检测器检测，计算出脂肪含量。

（2）试剂与仪器：甲醇、硫酸、正己烷、气相色谱仪、火焰离子化检测器等。

（3）操作步骤：

1)样品处理：同索氏提取法。

2)甲酯化：将提取的脂肪加入甲醇和硫酸，加热反应。

3)萃取：将甲酯化后的溶液加入正己烷，振荡萃取。

4)进样：将萃取后的溶液进行气相色谱分析。

5)计算脂肪含量：通过气相色谱仪的检测结果，计算出脂肪含量。

三、结果计算

1.索氏提取法：

脂肪含量（%）=（脂肪质量/样品质量）×100%

2.气相色谱法：

脂肪含量（%）=（脂肪酸甲酯峰面积/内标峰面积）×内标浓度（mg/mL）×进样体积（mL）/样品质量（g）×100%

四、允许偏差

本标准规定的方法允许偏差如下：

1.索氏提取法：相对偏差≤5%

2.气相色谱法：相对偏差≤3%

五、注意事项

1.索氏提取法操作过程中需注意防火、防爆。

2.气相色谱法操作过程中需注意操作气体压力、温度等参数。

3.试剂和仪器需定期校准，以保证测定结果的准确性。

4.测定过程中，应严格遵循本标准规定的操作步骤，确保测定结果的有效性。

六、样品处理与保存

1.样品处理：在测定前，应将食品样品充分混合均匀，确保样品的代表性。对于固体样品，需磨碎至能通过80目筛网；液体样品需搅拌均匀。

2.样品保存：样品应保存在阴凉、干燥、避光的环境中，防止脂肪氧化。处理后的样品应尽快测定，如需长时间保存，应置于-18℃以下冷冻保存。

七、质量控制

1.空白试验：每次测定均需进行空白试验，以检查试剂和实验过程中的污染情况。

2.校准曲线：使用已知脂肪含量的标准品或标准溶液，绘制校准曲线，以验证方法的线性。

3.重复性试验：对同一样品进行至少三次重复测定，计算相对标准偏差（RSD），以评估方法的重复性。

八、结果报告

1.结果报告应以“脂肪含量（%）”表示，保留至小数点后两位。

2.结果报告应包括样品名称、样品编号、测定方法、测定结果、测定日期、操作人员等信息。

九、安全与环保

1.实验室操作人员应穿戴适当的个人防护装备，如实验服、手套、护目镜等。

2.使用有机溶剂时应注意通风，避免吸入有害蒸气。

3.废弃的有机溶剂和实验废物应按照相关环保规定进行处理，不得随意排放。

十、参考文献

1.国家卫生健康委员会.食品安全国家标准食品中脂肪的测定.GB/T5009.6-2003.

2.AOACInternational.OfficialMethodsofAnalysisofAOACInternational.18thed.2005.

十一、附录

附录中包括脂肪测定中使用的标准溶液的配制方法、仪器校准程序等详细操作指南，以供实验室参考使用。

十二、仪器设备要求

1.分析天平：精度不低于0.1mg，用于准确称量样品和试剂。

2.索氏提取器：具备良好的回流性能，能够有效提取脂肪。

3.真空干燥箱：具备均匀的加热性能，用于滤纸和脂肪的干燥。

4.气相色谱仪：配备火焰离子化检测器，具有良好的分离效果和稳定性。

5.精密移液器：用于准确移取液体试剂和样品。

6.振荡器：用于样品的萃取和混合。

十三、试剂要求

1.石油醚：分析纯，沸点范围为60-90℃。

2.乙醇：分析纯，用于洗涤滤纸上的脂肪。

3.无水硫酸钠：分析纯，用于吸收水分。

4.甲醇：色谱纯，用于脂肪酸甲酯化反应。

5.硫酸：优级纯，用于脂肪酸甲酯化反应。

6.正己烷：色谱纯，用于气相色谱的溶剂和脂肪酸甲酯的萃取。

十四、操作步骤详述

1.索氏提取法：

a.样品处理：准确称取2-5g样品，过80目筛网。

b.提取：将样品放入索氏提取器中，加入适量石油醚，加热至60-70℃，回流提取6-8小时。

c.洗涤：将提取液过滤，用乙醇洗涤滤纸上的脂肪，重复洗涤2-3次。

d.干燥：将洗涤后的滤纸放入真空干燥箱中，60℃下干燥至恒重。

e.称重：将干燥后的滤纸和脂肪称重，计算脂肪含量。

2.气相色谱法：

a.样品处理：同索氏提取法。

b.甲酯化：将提取的脂肪加入甲醇和硫酸，在60℃水浴中加热反应1小时。

c.萃取：将甲酯化后的溶液加入正己烷，振荡萃取3次，每次5分钟。

d.进样：取上层萃取液进行气相色谱分析。

e.计算脂肪含量：通过气相色谱峰面积比，结合内标法计算脂肪含量。

十五、常见问题处理

1.索氏提取法中提取液无色不明显：可能是因为提取时间不足，应适当延长提取时间。

2.气相色谱法中峰形异常：可能是样品处理过程中出现污染，应检查实验操作过程，必要时重新处理样品。

3.测定结果偏差较大：应检查试剂纯度、仪器校准情况以及操作步骤是否规范，找出原因并纠正。

十六、记录与档案管理

1.实验记录：应详细记录实验过程中的所有操作步骤、使用的试剂批号、仪器设备状态等信息。

2.档案管理：实验记录和相关资料应按照实验室规定进行归档，以便追溯和审核。

十七、人员培训与资质

1.人员培训：参与脂肪测定的人员应接受专业的培训，掌握实验原理、操作步骤、质量控制方法和安全防护知识。

2.资质要求：实验操作人员应具备相应的资格证书，确保具备必要的理论知识和操作技能。

十八、实验室环境要求

1.实验室应保持清洁、整齐，避免尘埃和污染。

2.实验室内应设有足够的工作空间和安全的存储区域。

3.应配备适当的通风设施，确保空气流通，降低有害物质浓度。

4.实验室温度应控制在15-30℃之间，相对湿度控制在40%-70%之间，以保证实验结果的准确性。

十九、方法验证

1.验证项目：包括准确度、精密度、检出限、定量限、线性范围等。

2.验证方法：采用标准品或已知脂肪含量的样品进行验证。

3.验证频率：至少每年进行一次全面的方法验证。

二十、异常情况处理

1.如遇实验设备故障、试剂变质等异常情况，应立即停止实验，并记录异常情况。

2.分析异常原因，采取相应措施，如更换设备、重新采购试剂等。

3.异常情况处理完毕后，应重新进行实验，确保实验结果的准确性。

二十一、实验结果的传递与解释

1.实验结果应由实验室负责人或授权人员审核确认后，传递给委托方。

2.对实验结果进行解释时，应考虑样品特性、实验方法、操作过程等因素，确保解释的科学性和合理性。

二十二、持续改进

1.实验室应定期对测定方法、操作流程、质量控制等方面进行回顾和评估。

2.根据评估结果，制定并实施改进措施，不断提高实验质量和效率。

3.鼓励实验室人员参与相关培训和研讨会，掌握最新的技术动态，提升实验室的整体实力。

二十三、争议解决

1.如委托方对实验结果有异议，实验室应提供原始记录、质控数据等资料，协助委托方进行核实。

2.必要时，可邀请第三方权威机构进行复验，以解决争议。

3.实验室应建立完善的投诉处理机制，确保委托方的合法权益得到保障。

二十四、标准化与规范化

1.实验室应遵循国家标准和行业规范，确保测定方法的标准化和规范化。

2.实验室应定期更新标准文献，以保持测定方法的先进性和适用性。

3.实验室应积极参与行业标准的制定和修订，推动行业技术的发展。

二十五、信息化管理

1.实验室应建立信息化管理系统，实现实验数据、样品信息、设备状态等信息的电子化管理。

2.信息化管理有助于提高数据处理速度和准确性，减少人为误差。

3.信息化管理便于实验室质量控制、数据追溯和档案管理。

二十六、总结

本标准详细阐述了食品中脂肪的测定方法、操作步骤、质量控制、安全与环保要求等关键环节，旨在为实验室提供