(高清版)GB∕T 37644-2019 化妆品中8-羟基喹啉和硝羟喹啉的测定高效液相色谱法

GB/T37644—2019化妆品中8-羟基喹啉和硝羟喹啉的测定国家市场监督管理总局GB/T37644—2019本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由中国轻工业联合会提出。本标准由全国香料香精化妆品标准化技术委员会(SAC/TC257)归口。本标准起草单位：苏州世谱检测技术有限公司、扬州完美日用品有限公司、江苏隆力奇生物科技股中华药业南通有限公司、欧诗漫生物股份有限公司、苏州市食品药品监督管理局、苏州市药品检验检测产品质量监督检验研究院、江苏省食品药品监督检验研究院、无限极(中国)有限公司。I禁用物质是指不能作为化妆品生产原料即组分添加到化妆品中的物质。《化妆品安全技术规范1GB/T37644—2019化妆品中8-羟基喹啉和硝羟喹啉的测定高效液相色谱法本标准规定了化妆品中8-羟基喹啉和硝羟喹啉的高效液相色谱测定方法的原理、试剂和材料、仪器设备、试验步骤、结果计算、回收率与精密度、允许差等内容。本标准适用于化妆品中8-羟基喹啉和硝羟喹啉的测定。本标准的方法检出限和定量限：化妆品(蜡基、粉类除外):8-羟基喹啉和硝羟喹啉的检出限为1.5mg/kg,定量限为5.0mg/kg;蜡基和粉类化妆品：8-羟基喹啉和硝羟喹啉检出限为3.0mg/kg,定量限为10.0mg/kg。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法试样中的8-羟基喹啉和硝羟喹啉经溶剂超声提取后，用配有二极管阵列检测器的高效液相色谱仪测定，保留时间和光谱图定性，外标法定量。高效液相色谱-质谱/质谱法定性确证。4试剂和材料4.2甲醇：色谱纯。4.3乙腈：色谱纯。4.4甲酸：色谱纯。4.5磷酸：分析纯。4.6辛烷磺酸钠：分析纯。4.7标准物质：纯度不小于98%。8-羟基喹啉和硝羟喹啉的中文名称、INCI名称(国际化妆品原料名称)/英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量及结构式参见附录A中的表A.1。4.80.01mol/L辛烷磺酸钠溶液：称取1.08g辛烷磺酸钠(4.6),用水稀释至500mL,用磷酸(4.5)调节pH至2.5。4.9磷酸水溶液：移取适量水，用磷酸(4.5)调节pH至2.5。4.10甲醇-0.01mol/L辛烷磺酸钠溶液：甲醇+0.01mol/L辛烷磺酸钠溶液=7+3(体积比)。4.11甲酸-乙腈溶液：甲酸十乙腈=1+99(体积比)。4.12甲醇-磷酸水溶液：甲醇十磷酸水溶液=7+3(体积比)。4.13混合标准工作溶液：准确称取标准物质(4.7)10.0mg(精确至0.1mg),用甲醇-0.01mol/L辛烷磺酸钠溶液(4.10)溶解并定容至10mL,得到标准储备溶液(p=1000.0mg/L,于4℃避光保存，可保存2个月)。分别移取适量标准储备溶液，用甲醇-0.01mol/L辛烷磺酸钠溶液(4.10)逐级稀释成质量2GB/T37644—2019标准工作溶液(现配现用)b)液相色谱-三重四级杆质谱联用仪；f)离心机：转速不低于4000r/min;6试验步骤离心管中，加甲酸-乙腈溶液(4.11)至5.0mL;蜡基类样品置于70℃水浴中至试样熔融。然后，涡旋振荡2min,超声提取15min,4000r/min离心3min,取1.0mL上清液40℃氮吹至干，用1.0mL甲涡旋振荡2min,超声提取15min,4000r/min离心5min,取上层清液过0.45pm滤膜，待测。高效液相色谱参考条件如下：d)柱温：30℃;时间/minA/%B/%3GB/T37644—2019时间/minA/%B/%6.3标准工作曲线绘制按6.2测定条件对系列混合标准工作溶液(4.13)进行测定，以色谱峰的峰面积为纵坐标，对应的溶液浓度为横坐标作图，绘制标准工作曲线。8-羟基喹啉和硝羟喹啉标准溶液的高效液相色谱图参见附录B中的图B.1。6.4试样测定按6.2测定条件对试样溶液进行测定，试样溶液中的被测物根据保留时间和光谱图定性。由试样溶液的峰面积，从标准曲线上查出相应的被测物浓度。试样溶液中被测物的响应值均应在仪器测定的线性范围之内，超出线性范围的试样溶液需用甲醇-0.01mol/L辛烷磺酸钠溶液(4.10)稀释后再测定。需要时，用高效液相色谱-质谱/质谱法进行确证试验参见附录C。6.5空白试验除不加入试样外，均按6.1～6.2进行测定。7结果计算试样中8-羟基喹啉和硝羟喹啉的含量按式(1)计算。式中：w——试样中8-羟基喹啉和硝羟喹啉的含量，单位为毫克每千克(mg/kg);p——试样溶液中8-羟基喹啉和硝羟喹啉峰面积对应的质量浓度，单位为微克每毫升(μg/mL);Po——空白试验中8-羟基喹啉和硝羟喹啉的质量浓度，单位为微克每毫升(μg/mL);V——试样最终定容体积，单位为毫升(mL);计算结果精确至小数点后一位数字。8回收率与精密度除蜡基类和粉类外的化妆品中，8-羟基喹啉和硝羟喹啉在添加浓度为5.0mg/kg～50.0mg/kg范围内，回收率在80%～110%之间，相对标准偏差小于10%。蜡基类和粉类化妆品中，8-羟基喹啉和硝羟喹啉在添加浓度为10.0mg/kg～100.0mg/kg范围内，回收率在80%～110%之间，相对标准偏差小于10%。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。4(资料性附录)相对分子质量及结构式参见表A.1。中文名称INCI名称英文名称分子式相对分子质量结构式8-羟基喹啉硝羟喹啉C₉H₃N₂ONO₂NO₂5(资料性附录)8-羟基喹啉和硝羟喹啉标准溶液的高效液相色谱图参见图B.1。2响应值/响应值/mAU051——8-羟基喹啉；图B.18-羟基喹啉和硝羟喹啉标准溶液的高效液相色谱图6GB/T37644—2019(资料性附录)C.1液相色谱参考条件液相色品参考条件如下：b)流动相：A液10mmol乙酸铵水溶液(含0.1%甲酸),B液乙腈(含0.1%甲酸),梯度洗脱程序相间/minA/%B/%C.2质谱参考条件喹品参考条件如下：表C.28-羟基喹啉和硝羟喹啉的质谱MRM模式优化参数目化基发留相间/min去簇电压/V碰撞电压/V8-测基定高146.0/128.0146.0/117.020,24的测定高190.8/145.0190.8/117.028,44C.3定性测定相对离子丰度允许照相对偏差士20%士25%士30%