(高清版)GB∕T 37640-2019 化妆品中氯乙醛、2,4-二羟基-3-甲基苯甲醛、巴豆醛、苯乙酮、2-亚戊基环己酮、戊二醛含量的测定 高效液相色谱法

GB/T37640—2019戊二醛含量的测定高效液相色谱法2019-06-04发布2020-01-01实施国家市场监督管理总局IGB/T37640—2019本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由中国轻工业联合会提出。本标准由全国香料香精化妆品标准化技术委员会(SAC/TC257)归口。本标准起草单位：江苏省产品质量监督检验研究院(国家化妆品质量监督检验中心)、广州华鑫检测苏省食品药品监督检验研究院、上海市日用化学工业研究所(国家香料香精化妆品质量监督检验中心)。Ⅱ禁用物质是指不能作为化妆品生产原料即组分添加到化妆品中的物质。《化妆品安全技术规范戊二醛含量的测定高效液相色谱法2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理水类、膏霜类、乳液类和粉类化妆品试样直接用用正己烷分散后使用50%(体积分数)乙腈溶液提取；提取液经离心、过滤后，用高效液相色谱仪测定(其中氯乙醛和戊二醛需要经过2,4-二硝基苯肼衍生后进行高效液相色谱测定)。根据保留时间和光4试剂和材料4.3磷酸二氢钠(NaH₂PO₄·2H₂O)。4.52,4-二硝基苯肼：纯度不小于99%。4.650%乙腈溶液：准确量取100mL乙腈(4.1)与100mL水混合。—4.7缓冲溶液：准确称取15.6g磷酸二氢钠(4.3),用水溶解并定容至1L,用磷酸(4.4)调节pH至2.0。4.82,4-二硝基苯肼溶液(4.0g/L):准确称取2,4-二硝基苯肼(4.5)2.0g,用乙腈(4.1)溶解并定容至—297%,氯乙醛标准物质为质量分数40%水溶液，戊二醛标准物质为质量分数50%水溶液。6种标准物构式参见附录A中的表A.1。环己酮4种标准物质(4.10)(精确至0.0001g),用乙腈(4.1)配制成质量浓度为1000pg/mL的标准储备溶液(于4℃避光保存，可保存3个月)。准确移取标准储备溶液各0.5mL,置于10mL棕色容量瓶于4℃避光保存，可保存1个月)。准确移取适量混合标准储备溶液，用50%乙腈溶液(4.6)逐级稀释成质量浓度为0.05pg/mL、4.12混合标准工作溶液B:分别准确称取适量氯乙醛和戊二醛2种标准物质(4.10)(精确至0.0001g),用乙腈(4.1)配制成质量浓度为1000μg/mL的标准储备溶液(于4℃避光保存，可保存3个月)。准确量浓度各为50μg/mL,于4℃避光保存，可保存1个月)。准确移取适量混合标准储备溶液，用50%乙5.6低速离心机：转速不低于4000r/min。6试验步骤涡旋振荡器上振荡混匀后，超声提取15min,冷却至室温，用50%乙腈溶液(4.6)定容至10mL。取2mL溶液于离心管中，10000r/min离心2min,上清液经滤膜过滤后供高效液相色谱仪测定2,4-二取1.0mL离心后的上清液，加入1.0mL衍生剂(4.9),40℃下反应30min,用滤膜过滤后供高效液相色谱仪测定氯乙醛和戊二醛。3层溶液于离心管中，10000r/min离心2min,然后经滤膜取1.0mL离心后的上清液，加入1.0mL衍生剂(4.9),40℃下反应30min,滤膜过滤后供高效液相色谱仪测定氯乙醛和戊二醛。高效液相色谱参考条件如下：d)柱温：30℃;时间/min乙腈/%水/%将1.0mL混合标准工作溶液(4.12戊二醛的标准工作曲线。6种标准物质溶液的液相色谱图参见附录B中的图B.1和图B.2。4样品色谱图中，该物质的光谱图与标准品的一致，则可初步认定样品为阳性样品，记录色谱峰的峰面积，以外标法定量。试样溶液中被测物的响应值均应在标准曲线的线性范围之内，超出线性范围的试样溶液可用50%(体积分数)乙腈溶液适当稀释后进行测定。需要时，用高效液相色谱-质谱/质谱法进行确6.3空白试验除不称取试样外，均按6.1～6.2进行测定。7结果计算试样中被测组分的含量按式(1)计算：式中：X——试样中被测组分的含量，单位为毫克每千克(mg/kg);…p;——从标准曲线得到的试样溶液(6.1)中被测组分的质量浓度，单位为微克每毫升(μg/mL);P。——从标准曲线得到的空白试验(6.3)中被测组分的质量浓度，单位为微克每毫升(μg/mL);V——试样溶液定容体积，单位为毫升(mL);m——试样质量，单位为克(g)。结果精确至小数点后一位数字。8回收率和精密度苯乙酮、2,4-二羟基-3-甲基苯甲醛、2-亚戊基环己酮、氯乙醛和戊二醛在添加浓度为3.0mg/kg~30.0mg/kg范围内，回收率在80%～110%之间，相对标准偏差小于10%。巴豆醛在添加浓度为1.5mg/kg～15.0mg/kg范围内，回收率在80%～110%之间，相对标准偏差小于10%。9允许差在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过算术平均值的10%。5(资料性附录)表A.1。序号中文名称国际化妆品原料名称英文名称CAS号分子式相对分子质量化学结构式1苯乙酮Acetophenone98-86-2CgHgOOO2氯乙醛ChloroacetaldehydeC₂H₃ClO32-亚戊基环己酮2-Pentylidenecyclohexanone25677-40-1CHgOH₃CO4巴豆醛Crotonaldehyde4170-30-3CH₆O52,4-二羟基-3-甲基苯甲醛2,4-Dihydroxy-3-methylbenzaldehyde6248-20-0CgH₈O₃6戊二醛GlutaralGlutaraldehydeC₅H₈O₂6GB/T37640—2019(资料性附录)6种标准物质溶液的液相色谱图6种标准物质溶液的液相色谱图参见图B.1和图B.2。22.552.5苯乙酮2,4-二羟基-3-2-亚戊基环己酮0时间/min1517.注：检测波长λ=235nm。20响应值/响应值/mAL5氯乙醛2.50时间/min图B.2氯乙醛和戊二醛标准物质衍生物溶液的液相色谱图7GB/T37640—2019(资料性附录)C.1液相色谱参考条件液相色谱参考条件如下：b)流动相：A为0.%甲酸乙腈溶液，B为0.1%甲酸溶液，梯度洗脱程序：0min～7min,20%A;7min～12nn,20%A～80%A;12min～15min,80%A;15min～16min,80%A～20%A;16min～20min。20%A;d)柱温：30℃;e)进样量：2μL。质谱参考条件如下：d)雾化气：氮气，260℃,14.0L/min;子对、去簇电压和碰撞电压见表C.1,提取离子色谱图见图C.1。表C.12,4-二羟基-3-甲基苯甲醛、巴豆醛、苯言酮、2-亚戊基环己酮和戊二醛衍生物的质谱MRM模式优前参数目标物保留时间/min母离子子离子去簇电压/V碰撞电压/V巴豆醛20.0,12.0苯乙酮2.0,20.02,4-二羟基-3-甲基苯甲醛40.0,16.02-亚戊基环己酮8表C.1(续)目标物保留时间/min母离子子离子去簇电压/V碰撞电压/V戊二醛(衍生物)氯乙醛b定量离子。b氯乙醛或氯乙醛衍生物在三重四极杆质谱中无符合要求的离子对。+MRMCF=0.000DF=0.000(166.90000->55.10000)STD-r001.d2-亚戊基环己酮0-0X10⁴0-0-X10⁴+MRMCF=0.000DF=0.000(166.90000->110.70000)STD-r001.d+MRMCF=0.000DF=0.000(153.06000->77.70000)STD-r001.d2,4-二羟基-3-3甲基苯甲醛+MRMCF=0.000DF=0.000(153.06000->106.90000)STD-r001.d+MRMCF=0.000DF=0.000(120.80000->65.10000)STD-r001.d苯乙酮+MRMCF=0.000DF=0.000(120.80000->92.70000)STD-r001.d+MRMCF=0.000DF=0.000(70.90000->30.90000)STD-r001.d+MRMCF=0.000DF=0.000(70.90000-)41.20000)STD-r001.d+MRMCF=0.000DF=0.000(461.12000->82.00000)STDYS-r001.d戊二醛衍生物+MRMCF=0.000DF=0.000(461.12000->262.90000)STDYS-r001.d0-图C.12,4-二羟基-3-甲基苯甲醛、巴豆醛、苯乙酮、2-亚戊基环己酮