《专题》复习课件精讲

1.实验原理：

2.影响植物组织培养的因素专题3植物的组织培养专题4酶的研究与应用一、植物组织培养的实验原理、影响因素、过程植物细胞的全能性影响植物组织培养的因素1.材料因素的影响不同的植物组织，培养的难易程度差别很大，容易进行无性繁殖的植物也容易进行组织培养。同一种植物材料，材料的年龄、保存时间的长短也有影响。幼龄、保存时间短的植物材料容易培养成功。2.营养因素的影响学.科.网zxxk.需要配制适宜的培养基，常用的一种培养基是MS培养基，其主要成分包括：大量元素、微量元素、有机物以及蔗糖等。3.激素的影响植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素。植物激素的浓度、使用的先后顺序以及用量的比例等，都会影响实验结果。

(1)按照不同的顺序使用这两种激素，会得到不同的实验结果使用顺序实验结果先使用生长素，后使用细胞分裂素先使用细胞分裂素，后使用生长素同时使用有利于细胞分裂，但细胞不分化细胞既分裂又分化分化频率提高(2)两种用量的比例影响植物细胞的发育方向生长素/细胞分裂素植物细胞的发育方向比值高时比值低时比值适中时

4.pH、温度、光照等条件的影响不同的植物对各种条件的要求往往不同。有利于根的分化，抑制芽的形成有利于芽的分化，抑制根的形成促进愈伤组织的生长3、植物组织培养过程:离体组织或细胞植物体脱分化细胞分裂素≈生长素愈伤组织芽根细胞分裂素>生长素细胞分裂素<生长素再分化不需要光需要光1.植物组织培养是指(

)A.离体的植物器官、组织或细胞培育成愈伤组织B.愈伤组织培育成植株学.科.网zxxk.C.离体的植物器官、组织或细胞培育成完整植物体D.愈伤组织形成并液泡化【答案】C2．利用植物组织培养的方法可快速、大量繁殖植物，在培养过程中，取该植物的花芽并将其分别培养在含有不同比例的吲哚乙酸和细胞分裂素的培养基中，花芽的生长状况如下表所示：吲哚乙酸细胞分裂素花芽生长状况A组花芽00组织切块B组花芽3ppm0.2ppm形成愈伤组织C组花芽3ppm0.002ppm愈伤组织分化出根D组花芽0.03ppm1.0ppm愈伤组织分化出嫩枝E组花芽00.2ppm稍生长吲哚乙酸细胞分裂素花芽生长状况A组花芽00组织切块B组花芽3ppm0.2ppm形成愈伤组织C组花芽3ppm0.002ppm愈伤组织分化出根D组花芽0.03ppm1.0ppm愈伤组织分化出嫩枝E组花芽00.2ppm稍生长

(1)在此过程中能实现脱分化的花芽是________组。从实验结果可以看出，能诱导新的花芽形成的条件是________________________。(2)上述实验结果说明，在植物组织培养过程中，诱导芽和根形成的关键是___________________________。在生产实践中，欲快速大量获得此植物的花芽，可选用________组的培养基进行扩大生产。

培养基中细胞分裂素含量与生长素含量之间的比例(或培养基中细胞分裂素与生长素的浓度比B、C、D细胞分裂素浓度大于生长素浓度D二、被子植物花粉的发育过程双核期小孢子四分体时期单核期小孢子母细胞花粉母细胞小孢子减数分裂有丝分裂花粉管细胞核生殖细胞核有分丝裂精子1个营养细胞生殖细胞4个4个4个4个4个8个（小孢子四分体时期单核居中期单核靠边期双核期）三、产生花粉植株的两种途径①②移栽花药中的花粉胚状体脱分化愈伤组织花药中的花粉脱分化分化丛芽再分化丛芽诱导生根体细胞胚（胚状体）：在组织培养过程中，某些细胞在形态上转变为与合子发育成的胚非常相似的结构，发育过程亦与合子胚类似原因：培养基中的激素种类及浓度配比实验操作：2、通过镜检来确定是否处于适宜的发育期。方法：醋酸洋红法(将染色体染成红色)

焙花青-铬矾法(花粉细胞核染成蓝黑色)。1、从花药看：从花粉看：

从花蕾看：

花药（载玻片上）→1%的醋酸洋红1滴→用镊柄将花药捣碎，盖上盖玻片→镜检（花粉粒的细胞核被染成红色）花药（在卡诺氏固定液中处理20min）→取出，置于载玻片上→焙花青－铬矾溶液染色→盖上盖玻片→镜检（花粉粒的细胞核被染成蓝黑色）

单核期

月季的初花期

完全未开放的

（一）材料选取（二）材料的消毒5、无菌水冲洗3～5次

花药的外面有花萼、花瓣保护，通常处于无菌状态1、花蕾用体积分数为70%的酒精浸泡30秒2、无菌水清洗3、无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分4、放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中2～4分钟（质量分数为1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液）（三）接种和培养

1消毒后花蕾，要在

下除去萼片和花瓣，并立即将花药接种到培养基上。3通常每瓶接种花药

，温度控制在

左右，

。幼小植株形成后才

。2在剥离花药时，要尽量

（否则接种后，容易从受伤部位产生二倍体的愈伤组织），同时还要彻底

，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成。一般经过20-30天培养后，会发现花药开裂，长出愈伤组织或释放出胚状体。将愈伤组织及时转移到分化培养基上，以便进一步分化出再生植株。

4进一步鉴定和筛选：常常会出现染色体倍性的变化无菌条件不损伤花药去除花丝7-10个25℃不需要光照需要光照二、酶的研究与应用1．影响果汁产量的物质及处理方法(1)影响果汁产量的物质①种类：②造成的问题：(2)处理方法——常用的酶及其作用特点如下：纤维素、果胶。果肉的出汁率低，耗时长；果汁浑浊、黏度高，易发生沉淀。酶解法组成本质作用果胶酶纤维素酶多聚半乳糖醛酸酶果胶分解酶果胶酯酶C1酶、Cx酶葡萄糖苷酶蛋白质蛋白质催化果胶分解成为可溶性的半乳糖醛酸2.探究不同种类的加酶洗衣粉的洗涤效果(1)实验原理；酶的催化作用具有专一性，复合酶洗衣粉加入的酶制剂种类较多，与单一加酶洗衣粉相比，对各种污渍都有较好的洗涤效果。(2)实验变量①自变量：②无关变量：③实验步骤学.科.网zxxk.不同种类的加酶洗衣粉其他条件相同且适宜(如温度、pH等)步骤烧杯编号ⅠⅡⅢ注入自来水500mL500mL500mL加入物质(相同、等量)奶渍布奶渍布奶渍布控制水温37℃37℃37℃加入洗衣粉(等量)蛋白酶洗衣粉复合酶洗衣粉脂肪酶洗衣粉用玻璃棒搅拌5min5min5min观察实验现象一）固定化酶的应用实例1）.固定化酶的反应柱示意图：将酶固定在一种颗粒状的载体上，再将这些酶颗粒装到一个反应柱内，柱子底端装上分布着许多小孔的筛板。酶颗粒无法通过筛板的小孔，而反应溶液却可以自由出入。2）.利用固定化酶技术生产高果糖浆的实例：高果糖浆的生产需要使用葡萄糖异构酶，它能将葡萄糖转化成果糖。生产过程中，将葡萄糖溶液从反应柱的上端注入，使葡萄糖溶液流过反应柱，与固定化葡萄糖异构酶接触，转化成果糖，从反应柱的下端流出。3、酵母细胞的固定化反应柱能连续使用半年，大大降低了生产成本，提高果糖的产量和质量。优点：概念：利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间的技术。包埋法化学结合法物理吸附法二）固定化酶技术和固定化细胞技术固定化酶或者固定化细胞分别适用哪些方法？原因？适用于固定化酶适用于固定化细胞包埋法是指将微生物的细胞均匀包埋在不溶于水的多孔性载体中，常用的载体有明胶、琼脂糖、海藻酸钠、聚丙烯酰胺等。化学结合法是指将酶分子或细胞相互结合或将其结合到载体上物理吸附法是指将酶吸附到固体吸附剂的表面三）、固定化酶与固定化细胞(1)方法：包埋法、化学结合法和物理吸附法。(2)比较类型固定酶的种类适用方法优点及不足实例固定化酶可反复利用，但只催化一种或一类化学反应固定化葡萄糖异构酶固定化细胞成本低、操作容易，但反应效果下降固定化酵母细胞一种一系列包埋法化学结合、物理吸附法法四）实验操作——酵母细胞的固定化（1）酵母细胞的活化：活化是指什么？方法？活化就是让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态。四）实验操作——酵母细胞的固定化（1）酵母细胞的活化：（2）配制CaCl2溶液：用蒸馏水溶解，不用自来水溶解，以防止自来水中各种离子影响实验结果。四）实验操作——酵母细胞的固定化（1）酵母细胞的活化：（2）配制CaCl2溶液：

（3）配制海藻酸钠溶液：是最重要的环节：如果海藻酸钠浓度过高，注意事项：加热时要用小火，或者间断加热（目的？）（浓度要适宜？）如果浓度过低，将很难形成凝胶珠；形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数目少，影响实验效果。如果加热太快，海藻酸钠会发生焦糊。四）实验操作——酵母细胞的固定化（1）酵母细胞的活化：（2）配制CaCl2溶液：（3）配制海藻酸钠溶液：（4）海藻酸钠溶液与酵母细胞的混合：必须将溶化的海藻酸钠溶液冷却至室温才能与酵母细胞进行混合。为什么？搅拌的目的？海藻酸钠溶液冷却至室温才能与酵母细胞进行混合，以免温度过高而杀死酵母菌。搅拌的目的使其混合均匀。四）实验操作——酵母细胞的固定化（1）酵母细胞的活化：（2）配制CaCl2溶液：（3）配制海藻酸钠溶液：（4）海藻酸钠溶液与酵母细胞的混合：（5）固定化酵母细胞：CaCl2溶液的作用？所形成的凝胶柱在CaCl2溶液中浸泡的目的？使胶体聚沉。如何判断固定化酵母细胞是否成功？---观察凝胶珠的颜色和形状若凝胶珠颜色过浅，说明海藻酸钠的浓度偏低，固定的酵母细胞数目较少凝胶珠不是圆形或椭圆形，则说明海藻酸钠的浓度偏高，制作失败，需要再作尝试形成稳定的结构这一阶段成功与否呢？怎样评价？观察发酵的葡萄糖溶液；利用固定的酵母细胞发酵产生酒精，可以看到产生了很多气泡，同时会闻到酒味。3(江苏高考·T3)下列关于固定化酶和固定化细胞的叙述，正确的是(

)A.固定化细胞技术在多步连续催化反应方面优势明显B.固定化酶的应用中，要控制好pH、温度和溶解氧

C.利用固定化酶降解水体中有机磷农药，需提供适宜的营养条件

D.利用固定化酵母细胞进行发酵，糖类的作用只是作为反应底物【答案】A4.下列关于固定化酶技术的说法正确的是(

)A.固定化酶技术就是固定反应物将酶依附着载体围绕反应旋转的技术B.固定化酶的优势在于能催化一系列的酶促反应C.固定化酶中的酶无法重复利用D.固定化酶是将酶固定在一定空间内的技术【答案】D

(1)果胶酶和纤维素酶都是复合酶，并不特指某一种酶，而是一类酶的总称。(2)固定化细胞使用的都是活细胞，在应用时要注意为其提供适宜的生存条件。固定化细胞由于保证了细胞的完整性，因而酶的环境改变小，所以对酶活性影响较小。5、

(2009年高考江苏卷)下列关于植物组织培养的叙述中，错误的是(

)A．培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压B．培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化C．离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织D．同一株绿色开花植物不同部分的细胞经培养获得的愈伤组织基因相同【答案】

D6、下列关于加酶洗衣粉的说法不正确的是(

)A.直接将酶制剂添加洗衣粉中制成加酶