2025届山东省山东师大附中高三（最后冲刺）生物试卷含解析

2025届山东省山东师大附中高三（最后冲刺）生物试卷注意事项1．考试结束后，请将本试卷和答题卡一并交回．2．答题前，请务必将自己的姓名、准考证号用0．5毫米黑色墨水的签字笔填写在试卷及答题卡的规定位置．3．请认真核对监考员在答题卡上所粘贴的条形码上的姓名、准考证号与本人是否相符．4．作答选择题，必须用2B铅笔将答题卡上对应选项的方框涂满、涂黑；如需改动，请用橡皮擦干净后，再选涂其他答案．作答非选择题，必须用05毫米黑色墨水的签字笔在答题卡上的指定位置作答，在其他位置作答一律无效．5．如需作图，须用2B铅笔绘、写清楚，线条、符号等须加黑、加粗．一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1．2019年澳大利亚的山火肆虐了4个多月，过火面积超过1．21万平方公里，造成包括超2万只考拉（吃桉树叶）在内的约1亿只动物丧生。叙述正确的是（）A．过火地区上的所有动物构成一个群落B．可调查灾后考拉的种群密度并据此判断其种群数量的变化趋势C．考拉粪便中的能量不属于初级消费者同化的能量D．过火地区的生态恢复过程属于初生演替2．澳洲某小岛上生活着两种棕榈科植物。研究认为在200万年前，它们的共同祖先迁移到该岛时，一部分生活在pH较高的石灰岩上，开花较早；另一部分生活在pH较低的火山灰上，开花较晚。由于花期不同，不能相互授粉，经过长期演变，最终形成两个不同的物种。下列有关叙述正确的是（）A．这两个物种的形成是定向变异的结果B．最初迁移到该岛时，两个种群的基因库差别较大C．花期不同阻碍了基因交流，最终形成了生殖隔离D．若环境条件保持稳定，种群的基因频率不会发生变化3．薇甘菊是世界上最具危险性的有害植物之一，在适生地能攀援、缠绕于乔木、灌木，重压于其冠层顶部，阻碍附主植物的光合作用，继而导致附主死亡。科研人员研究了薇甘菊不同入侵程度对深圳湾红树林生态系统有机碳储量的影响，结果如下表。下列分析错误的是有机碳储量未入侵区域轻度入侵区域重度入侵区域植被碳库51.8550.8643.54凋落物碳库2.013.525.42土壤碳库161.87143.18117.74总计215.73197.56166.70A．植被碳库中的碳主要以有机物的形式存在，其主要去路是以食物的形式流向下一营养级B．土壤碳储量减少可能是因为薇甘菊根系密集，增加了土壤氧含量，使土壤中需氧型微生物的分解作用增强C．与薇甘菊未入侵区域相比，薇甘菊重度入侵区域的总有机碳储量约减少了22.7%D．随着薇甘菊入侵程度的加剧，凋落物碳储量显著增加，原因是薇甘菊的入侵导致附主死亡4．下列关于基因工程技术的叙述，错误的是（）A．限制性核酸内切酶均能特异性识别特定的核苷酸序列B．某些基因可通过病毒的侵染将目的基因导入受体细胞中C．载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因D．抗虫基因即使成功插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达5．青蒿素能有效杀死疟原虫(一类单细胞、寄生性的原生动物)，其主要干扰疟原虫表膜线粒体的功能，阻断宿主红细胞为其提供营养，导致形成自噬泡，并不断排出虫体外，使疟原虫损失大量胞浆而死亡。下列叙述错误的是A．疟原虫是寄生在宿主红细胞中的真核生物B．疟原虫通过胞吞方式获取食物体现了细胞膜具一定的流动性C．细胞质基质是细胞代谢的场所，疟原虫丢失胞浆威胁细胞生存D．疟原虫细胞中只含有核糖体一种细胞器6．下列关于生物进化的叙述，错误的是（）A．种群基因频率的改变是产生生殖隔离的前提条件B．一个物种的形成或灭绝会影响若干其他物种的进化C．无论是自然选择还是人工选择作用，都能使种群基因频率发生定向改变D．若没有其他因素影响，一个随机交配小群体的基因频率在各代保持不变二、综合题：本大题共4小题7．（9分）2019年底爆发的新型冠状病毒肺炎（COVID-19）是由SARS-CoV-2病毒引起的，能否快速、准确地检测出病原体成为疾病防控的关键。请回答：（1）下图表示SARS-CoV-2病毒检测的部分流程。科学家以病毒的RNA为模板通过①____________过程合成cDNA，再对cDNA进行PCR扩增，这项技术称为RT-PCR。（2）进行RT-PCR需要加入的酶是____________和___________。要从cDNA中扩增出新冠病毒特有的基因序列ORF1ab和核壳蛋白基因N关键在于要加入__________、dNTP及所需的酶一起构成反应体系。（3）RT-PCR加入Taqman荧光探针可以通过测定荧光强度来检测产物浓度，原理如下：Taqman荧光探针为一段与_____________互补的核苷酸单链，两端分别连接一个荧光基团R和一个淬灭基团Q。探针结构完整时，R发射的荧光被Q吸收；而PCR扩增时结合在模板链上的探针被切断，使R和Q分离，R基团发射的荧光不被淬灭，这样通过对荧光信号强弱的监测就可实现对产物的检测。荧光信号达到设定的阈值时，经历的循环数越少，说明含有病毒的概率越____________。（4）一次核酸检测历时需16小时，为快速检测可采用抗原-抗体杂交技术，这一技术的关键是要生产出能与新冠病毒结合的特异性抗体.请写出生产这种抗体的思路：__________________。8．（10分）回答下列（一）、（二）小题：（一）回答与胴腐病防治有关的问题：果树的胴腐病是由某真菌引起的疾病，某中学的科研小组计划分离出该真菌做药物防治实验，为胴腐病的防治提供合理的建议，实验时使用的PDA培养基配方如下表所示：物质马铃薯葡萄糖自来水氯霉素含量211g21g1111mL1．3g（该真菌在PDA培养基上生长时有特定的形态特征）（1）对该培养基进行高压蒸汽灭菌，一般建议采用的温度和压力分别是________，除温度和压力之外，影响高压蒸汽灭菌效果的因素还有灭菌对象含菌量、灭菌对象PH、加热与散热速度以及________________等（答出2点即可）。（2）为了观察菌落，还需加入到培养基中的成分是________，培养基转移到三角瓶或试管时必须用________。（3）从染病枝条溃疡处剪取患病组织，________后置于培养基中培养，待菌落形态特征稳定后，用________法将该菌转移至三个分别含有等量1．5%水碱剂、41%福美砷、清水的PDA培养基中进行抗药性实验，每隔24h记录一次最后划线区域的菌落数目。①选取菌落数目稳定的培养皿记录作为结果，这样可以防止________________。②记录结果如下：小组1．5%水碱剂41%美福砷清水菌落数目2817分析得出结论：________________________________________________________________。（二）回答与棉花培育及应用有关的问题：（1）用________代替热碱来处理棉织物，可在比较温和的PH及温度条件下使处理后的织物手感柔软且强度增大。若用某些微生物来处理棉织物，发现产品质量明显变差，很可能是织物中的部分________被降解。（2）为了培育岀“兔毛棉花”’，科研人员将兔角蛋白基因转入棉花受伤部位的细胞________中，再将这些细胞进行植物组织培养，为鉴定最终是否成功培育出“兔毛棉花”，在分子水平上可采用的检测方法是________________。（3）棉酚是有毒性的化学物质，主要存在于棉花的根、叶和棉籽等器官中。棉籽含有高质量的蛋白质，科硏人员希望棉籽能成为人类的食物来源，除了对棉籽作脱酚处理之外，也可采用________技术对细胞中的特定基因进行定点改造，此项操作________（“改变”或“不改变”）特定基因的核苷酸序列。考虑到改造后的棉花要在自然环境中广泛种植，棉花叶中应________（“含有”或“不含有”）棉酚，理由是________________________。9．（10分）科学家利用转基因技术培育了OsPHDI（水稻内原本也存在该基因>过量表达的水稻植株，以提高水稻的抗逆性（如抗干旱、抗高盐）。回答下列问题：（l）为了验证OsPHDI基因的表达是否受逆境诱导，实验组需要给两叶期水稻设置_______条件，实验结果显示_______，说明OsPHDI基因的表达受逆境诱导。（2）为了培育OsPHDI基因过量表达植株进行如下操作：①利用PCR技术扩增获得大量OsPHDI基因，该操作的前提是_______。②将OsPHDI基因与含有GFP（绿色荧光蛋白基因）的载体结合，此处GFP的作用是_______。③常用_______法将表达载体导入水稻细胞；若受体细胞中出现绿色荧光，能否说明OsPHDI基因已成功导入受体细胞，并说出理由______________。④最后利用_______技术培育出完整的抗逆性植株，该技术利用的生物学原理是______________10．（10分）地中海贫血症是一种高发的基因遗传病，患者除了需要输血缓解症状之外，常见治疗手段是进行异体骨髓移植。日前科学家正在研究利用生物工程技术将患者的体细胞转化为多能干细胞，以获得用于自体移植的细胞，具体操作过程如下图。（1）异体骨髓移植治疗的局限性主要是发生________反应。上图所用生物工程技术没有该局限性，其变异原理是________。（2）分析生物工程操作过程并回答：Ⅰ：基因表达载体含有目的基因、启动子、终止子等。其中启动子是________的部位。慢病毒表达载体所含的病毒经________形成cDNA片段，该片段帮助外源基因整合到宿主细胞染色体DNA上，使外源基因稳定表达。Ⅱ：由图可知，将________导入包装细胞，一段时间后可以获得能够转化患者多能干细胞的慢病毒颗粒。Ⅲ：为了便于筛选出成功转化的多能干细胞，其中的________载体含有易检测的标记基因。（3）理论上在获得成功转化的多能干细胞后，需要诱导其定向分化为________，然后植入患者骨髓。该方法虽然操作复杂，但效果较为可靠，称为________治疗。11．（15分）谷氨酸是一种兴奋性神经递质，但是过量堆积在神经元之间又会成为神经毒素，引起神经元的损伤、衰老及死亡。请回答下列问题：（1）兴奋传来时，突触前神经元会释放谷氨酸，谷氨酸经扩散通过突触间隙，与突触后膜的受体结合，使突触后膜电位变为____________（填内正外负、内负外正）。上述过程体现细胞膜的功能有__________________________________________________（请答出两点）。（2）当突触间隙中谷氨酸积累过多时，持续作用会导致______________过度内流，使突触后神经元因渗透压__________________而膨胀损伤甚至涨破。（3）研究发现，雌性激素等甾体类激素可以防护某些神经毒素的毒性，从而发挥对神经元的保护作用。雌性激素的化学本质属于脂质中的___________________，它在人体中可以通过_______________运输来发挥保护神经元的作用。

参考答案一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1、C【解析】

1.种群数量特征包括种群密度、出生率和死亡率、迁入率和迁出率、年龄组成和性别比例。2.初生演替：是指一个从来没有被植物覆盖的地面，或者是原来存在过植被，但是被彻底消灭了的地方发生的演替。次生演替：原来有的植被虽然已经不存在，但是原来有的土壤基本保留，甚至还保留有植物的种子和其他繁殖体的地方发生的演替。3.同化量=摄入量-粪便量。【详解】A、群落包含一定区域内的生产者、消费者、分解者，A错误；B、判断种群数量变化趋势的依据应该是年龄组成，不能用种群密度，B错误；C、考拉吃桉树叶，其粪便的能量属于生产者固定的能量，不属于初级消费者的能量，C正确；D、火灾过后，土壤条件基本保留，甚至还保留了种子或其他繁殖体，恢复过程属次生演替，D错误。故选C。【点睛】本题考查种群的特征、群落演替的类型，生态系统的能量流动，意在考查学生的识记能力和判断能力。2、C【解析】

变异在环境变化之前已经产生，环境只是起选择作用，不是影响变异的因素，不要夸大其作用，通过环境的选择将生物个体中产生的不定向的有利变异选择出来，其余变异遭到淘汰．只要基因频率改变，生物就进化，只要生物进化，基因频率一定改变．物种是自然状态下能够交配并产生可育后代的一群生物，一个物种可能在不同地点和时间形成不同的种群；不同物种之间一般是不能相互交配的，即使交配成功，也不能产生可育的后代。【详解】A、变异是不定向的，A错误；B、最初迁移到该岛时，两个种群的基因库差别不大，B错误；C、花期不同阻碍了基因交流，最终形成了生殖隔离，形成两个不同的物种，C正确；D、环境条件保持稳定时，种群的基因频率也会发生变化，如基因突变等原因，D错误。故选C。3、A【解析】植被碳库中的碳主要以有机物的形式存在，其主要去路之一是以食物的形式流向下一营养级，A错误；薇甘菊根系密集，增加了土壤孔隙度，使得土壤氧含量增加，从而使土壤中需氧型微生物的分解作用增强，使得土壤碳储量减少，B正确；与薇甘菊未入侵区域相比，薇甘菊重度入侵区域的总有机碳储量约减少了（215.73-166.70）/215.73=22.7%，正确；随着薇甘菊入侵程度的加剧，凋落物碳储量显著增加，原因是薇甘菊的入侵导致附主死亡，D正确。4、C【解析】

DNA重组技术至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体。基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定．构建基因表达载体时，需要用同种限制酶切割含有目的基因的DNA和运载体DNA，再用DNA连接酶连接形成重组DNA分子。【详解】A、限制性核酸内切酶具有识别特定核苷酸序列的能力，即具有专一性，A正确；B、病毒也可以作为运载体，将目的基因导入受体细胞中，B正确；C、载体质粒通常采用抗生素抗性基因作为筛选标记基因，C错误；D、抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达，需要进行检测和鉴定，D正确。故选C。5、D【解析】

原核细胞和真核细胞最主要的区别就是原核细胞没有核膜包被的典型的细胞核；它们的共同点是均具有细胞膜、细胞质、核糖体和遗传物质DNA。疟原虫吞噬食物的过程为：细胞外的生物大分子，与细胞膜上的受体结合后，细胞膜发生变化，向内凹陷，内侧形成外被蛋白，然后进一步形成有被小泡进入细胞内，该过程中存在细胞膜形态的变化，依赖于细胞膜的流动性结构特点。【详解】A、疟原虫属于真核生物中的原生动物，即是寄生在人体红细胞中的真核生物，A正确；B、疟原虫通过胞吞方式获取食物体现了细胞膜具一定的流动性，B正确；C、细胞质基质是细胞代谢的主要场所，胞浆丢失则会威胁到疟原虫的生存，C正确；D、疟原虫细胞中含有线粒体、内质网、核糖体等多种细胞器，D错误。故选D。6、D【解析】

现代生物进化理论的基本观点：种群是生物进化的基本单位。生物进化的实质在于种群基因频率的改变；突变和基因重组、自然选择及隔离是物种形成过程的三个基本环节。通过它们的综合作用。种群产生分化。最终导致新物种的形成。其中突变和基因重组产生生物进化的原材料，自然选择使种群的基因频率发生定向的改变并决定生物进化的方向，隔离是新物种形成的必要条件。【详解】A、种群基因频率的改变实际上就是种群的进化，而当基因频率改变累积到一定的程度不同，就产生了生殖隔离，所以种群基因频率的改变是产生生殖隔离的前提条件，A正确；B、一个物种的形成或灭绝，会影响到若干其他物种的进化，因为生物与生物之间存在共同进化，B正确；C、无论是自然选择还是人工选择作用，都能使种群基因频率发生定向改变，从而决定生物进化的方向，C正确；D、虽然没有其他因素影响，但是由于群体数量较少，因此小群体的基因频率在各代可能会发生改变，D错误。故选D。【点睛】解答本题的关键是识记和理解现代生物进化理论的基本观点，明确生物进化的实质是种群基因频率的改变、新物种产生的标志是生殖隔离。二、综合题：本大题共4小题7、逆转录（或：反转录）逆转录酶Taq酶（ORF1ab和核壳蛋自基因N）的特异性引物目的基因大①向小鼠体内注射新冠病毒的抗原蛋白（或灭活的新冠病毒）：②提取免疫小鼠的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，经多次筛选获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞；③将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养、或注射到小鼠腹腔内增殖，从培养液或小鼠腹水中就提取大量的单克隆抗体【解析】

1.将标记有荧光素的Taqman探针与模板DNA混合后，完成高温变性、低温复性、适温延伸的热循环，并遵守聚合酶链式反应规律，与模板DNA互补配对的Taqman探针被切断，荧光素游离于反应体系中，在特定光激发下发出荧光，随着循环次数的增加，被扩增的目的基因片段呈指数规律增长，通过实时检测与之对应的随扩增而变化荧光信号强度，求得Ct值，同时利用数个已知模板浓度的标准品作对照，即可得出待测标本目的基因的拷贝数。2.单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原的抗体。通常采用单克隆抗体技术来制备，单克隆抗体技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的效应B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能产生抗体，又能无限增殖。用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群，可制备针对一种抗原的特异性抗体即单克隆抗体。【详解】（1）以RNA为模板合成DNA的过程为逆转录或反转录，故题图中以病毒的RNA为模板合成cDNA的过程为①逆转录，再对cDNA进行PCR扩增，这项技术称为RT-PCR。（2）RT-PCR是扩增DNA的过程，因为加入的模板是RNA，故需要加入的酶是逆转录酶和Taq酶。要从cDNA中扩增出新冠病毒特有的基因序列ORF1ab和核壳蛋白基因N关键在于要加入（ORF1ab和核壳蛋自基因N）的特异性引物、dNTP及所需的酶一起构成反应体系，从而实现了相关基因的扩增。（3）RT-PCR加入Taqman荧光探针可以通过测定荧光强度来检测产物浓度，原理如下：Taqman荧光探针为一段与目的基因互补的核苷酸单链，两端分别连接一个荧光基团R和一个淬灭基团Q。探针结构完整时，R发射的荧光被Q吸收；而PCR扩增时结合在模板链上的探针被切断，使R和Q分离，R基团发射的荧光不被淬灭，这样通过对荧光信号强弱的监测就可实现对产物的检测。若荧光信号达到设定的阈值时，经历的循环数越少，说明扩增次数少，说明更多的荧光探针与目的基因进行了碱基互补配对，可推测获得的核酸产物中含有病毒的概率越大。（4）若采用抗原-抗体杂交技术进行病毒检测，需要制备能与新冠病毒结合的特异性抗体，单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高且能够大量制备的优势，故设计的思路是设法获得能产生该特异性抗体的杂交瘤细胞，步骤如下：①向小鼠体内注射新冠病毒的抗原蛋白（或灭活的新冠病毒），目的是要获得能能产生特异性抗体的效应B细胞；②提取免疫小鼠的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，经多次筛选获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞；③将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养、或注射到小鼠腹腔内增殖，从培养液或小鼠腹水中可以提取大量的单克隆抗体。【点睛】熟知逆转录、PCR扩增和单克隆抗体的相关知识是解答本题的关键！能够理解题目中关于荧光检测的关键信息是解答本题的难点，获取信息能力是本题考查的重要能力。8、91℃和511g/cm2灭菌时间、灭菌对象的体积、灭菌锅内空气排除程度等琼脂（或凝固剂）三角漏斗消毒划线因培养时间不足而导致遗漏菌落数；计数误差较大1．5%水碱剂对该菌抑制效果最强，适合防治胴腐病（或1．5%水碱剂和41%美福砷都能抑制该菌生长，1．5%苦水碱剂抑制效果更强，最适合防治胴腐病）果胶酶纤维素基因组（染色体DNA）抗原-抗体杂交基因敲除改变含有让棉花具有抗虫能力【解析】

除了实验用具必须无菌外，各种培养基也必须是无菌的。培养基是微生物生存的环境和营养物质。“细菌喜荤，霉菌喜素”，通常细菌培养基要用蛋白胨和酵母提取物来配制，还要加入一定量的氯化钠，以维持一定的渗透压；霉菌培养基一般用无机物配制或添加蔗糖的豆芽汁即可。此外，细菌通常要求在中性偏碱的环境中生长，霉菌要求在中性偏酸的环境中生长，因此，在制备培养基时需调节培养基的酸碱度。加入培养基的三角瓶、试管也要在121C下灭茵15min，如果培养基中有葡萄糖，为防止葡萄糖分解碳化，要用91℃和511g/cm2灭菌31min。果胶是植物细胞壁的主要成分，由半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯组成。山楂(山里红)的果实中果胶含量最多，煮沸的山楂泥可制成山楂糕，就是由于果胶的作用。果胶起着将植物细胞粘合在一起的作用，去掉果胶，就会使植物组织变得松散。果胶不溶于乙醇，这是鉴别果胶的一种简易方法。植物的细胞壁主要由纤维素、木质素(lignin)和半纤维素组成。因此，在枯树或草炭土中有许多能利用和分解这些物质来作为能源的微生物。已经发现并用于生产纤维素酶的菌种有绿色木霉。【详解】（一）（1）由于对该培养基中有葡萄糖成分，为了防止葡萄糖碳化，故在进行高压蒸汽灭菌，一般建议采用的温度和压力分别是91℃和511g/cm2，除温度和压力之外，影响高压蒸汽灭菌效果的因素还有灭菌对象含菌量、灭菌对象PH、加热与散热速度以及灭菌时间、灭菌对象的体积、灭菌锅内空气排除程度等

。（2）菌落在固体培养基上才能形成，故为了观察菌落，还需在该培养基中加入琼脂（或凝固剂）已获得固体培养基，通常用三角漏斗将培养基转移到三角瓶或试管中（3）从染病枝条溃疡处剪取患病组织经过消毒后置于培养基中培养，待菌落形态特征稳定后，用划线法将该菌转移至三个分别含有等量1．5%水碱剂、41%福美砷、清水的PDA培养基中进行抗药性实验。①为了防止因培养时间不足而导致遗漏菌落数，通常选取菌落数目稳定的培养皿进行统计并记录作为实验结果，这样可以避免出现较大的计数误差。②记录的实验结果显示，在加入1．5%水碱剂的培养皿中菌落数最少，41%美福砷次之，故此可得出如下结论：1．5%水碱剂对该菌抑制效果最强，适合防治胴腐病（或1．5%水碱剂和41%美福砷都能抑制该菌生长，1.5%水碱剂抑制效果更强，最适合防治胴腐病）。（二）（1）由分析可知，用果胶酶在比较温和的PH及温度条件下可使处理后的织物手感柔软且强度增大。若用某些微生物来处理棉织物，由于某些微生物能产生纤维素酶，导致织物中的纤维素被分解，故织物质量明显变差。（2）为了培育岀“兔毛棉花”，科研人员将兔角蛋白基因转入棉花愈伤组织细胞的基因组（染色体DNA）中，然后利用这些细胞进行植物组织培养，获得转基因植株，为鉴定最终是否成功培育出“兔毛棉花”，在分子水平上可采用抗原-抗体杂交的方法来检测目的基因是否成功表达。（3）棉酚是有毒性的化学物质，科硏人员希望棉籽能成为人类的食物来源，除了对棉籽作脱酚处理之外，也可采用基因敲除技术对细胞中的特定基因进行定点改造，通过基因敲除技术改变了特定基因的核苷酸序列。考虑到改造后的棉花要在自然环境中广泛种植，为了使改造后的棉花能很好的适应环境，棉花叶中应含有棉酚，因为棉酚是有毒的化学物质，该物质的存在能让棉花具有抗虫能力。【点睛】让学生学会利用书中的相关知识解答实际生活中的问题是解答本题的关键，高压蒸汽灭菌的特例分析是本题的易错点。获取有用信息的能力也是本题的考查点之一。9、干旱，高盐（逆境）实验组（逆境）植株OsPHDl基因的表达量高于对照（适宜条件）组（需要一段已知OsPHDl基因的核苷酸序列以便）合成引物作为标记基因（检测目的基因是否导人受体细胞）农杆菌转化不能，有可能导入了不含OsPHDl基因的GFP载体植物组织培养植物体细胞具有全能性【解析】

1、基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

2、利用PCR技术扩增目的基因（适用于目的基因的核苷酸序列已知的情况）

①概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。

②原理：DNA复制

③条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。【详解】（l）通过个体水平上验证OsPHDI基因的表达是否受逆境诱导，实验组需要给两叶期水稻设置干旱，高盐（逆境）条件，如果实验组（逆境）植株OsPHDl基因的表达量高于对照（适宜条件）组，说明OsPHDI基因的表达受逆境诱导。（2）①利用PCR技术扩增获得大量目的基因，需要加入相应的引物，故利用PCR技术扩增获得大量OsPHDI基因，该操作的前提是合成引物。②GFP（绿色荧光蛋白基因）的作用是作为标记基因，便于后期的筛选。③表达载体导入植物细胞，常用农杆菌转化法；若受体细胞中出现绿色荧光，不能说明OsPHDI基因已成功导入受体细胞，因为有可能导入了不含OsPHDl基因的GFP载体。④植物组织培养的生物学原理是植物体细胞具有全能性。故可通过植物组织培养技术培育出完整的抗逆性植株。【点睛】本题考查基因工程的相关知识，只要考生识记基因工程的操作步骤，明确基因表达载体的构建是其核心步骤，注意从题干中获取有效信息。10、免疫排斥基因重组RNA聚合酶识别和结合逆转录表达载体和包装载体表达造血干细胞体外基因【解析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动