药物的镇痛作用

【实验目的】8/12/2024freeteamplatefrom11.学习痛阈测定及三种痛觉测定方法。2.观察吗啡或哌替啶的镇痛作用。【实验原理】疼痛是临床常见的病症之一。它除了表现为痛觉即由伤害性刺激引起的一种主观感受外，还经常在痛觉的基础上伴发并表现出各种痛反应如自主神经反应、躯体防御反应和心理情感及行为反应等为减轻疼痛而在临床上应用的镇痛（催眠）药、镇痛药和麻醉药等，一般就是通过提高痛觉阈值来达到镇痛目的。本实验应用热板法和化学刺激法，观察镇痛药吗啡或哌替啶对小白鼠痛觉阈值的影响及其表现。8/12/2024freeteamplatefrom2一、热板法【材料与方法】一、实验动物：雌性小白鼠，18～22g。二、器材与药品：Woolfe热板、天平、1ml注射器2支、注射针头、鼠笼、秒表、0.1％盐酸吗啡或0.4%盐酸哌替啶、生理盐水。8/12/2024freeteamplatefrom3三、方法与步骤：⒈筛选实验动物⑴将浴槽加满水并使水面接触热板，通过控温仪装置使热板表面温度维持在55±1℃，然后将小白鼠置于热板上，密切观察它的活动；在正常情况下，大多数小白鼠在热刺激下出现不安的表现如举前肢、抬后肢、跳跃等。但以上指标不稳定而不宜作为痛阈指标，若将舔后爪出现的时间作为疼痛反应的指标，则更具客观性。⑵当小白鼠出现舔后爪时，立即记录时间并同时将其取出（以免烫伤足部），该时间即为小白鼠的痛阈值。用此法筛选痛阈值在30s以内的小鼠以供实验用。8/12/2024freeteamplatefrom48/12/2024freeteamplatefrom5⑶取已选出的小白鼠4只称重，随机分为两组即对照组和实验组（每组2只），按上述方法分别测定给小白鼠注射药物和生理盐水前的痛阈值。

⑷实验组小白鼠腹腔注射0.1%盐酸吗啡10mg/kg(0.1ml/10g)或0.4%盐酸哌替啶40mg/kg（0.1ml/10g）、对照组小白鼠腹腔注射等容量生理盐水，并于注射后15、30、45min分别再次测定小鼠痛阈值。其中，对于60s不舔后爪的小鼠，痛阈按60s计算。

8/12/2024freeteamplatefrom6⑸汇总实验结果，用下列公式计算痛阈改变百分率:

痛阈改变百分率＝（用药后平均痛阈值－用药前平均痛阈值）/用药前平均痛阈值×100%

5.将给药前、后小白鼠痛阈值记入下表。并计算各时间点的痛阈改变百分率。以横坐标表示时间、纵坐标表示痛阈改变百分率，绘出用药后15min、30min、45min小鼠的痛阈改变百分率时效曲线。8/12/2024freeteamplatefrom7给药后前小白鼠痛阈值8/12/2024freeteamplatefrom8动物只数给药前痛阈值（s）给药后痛阈值（s）15min30min45min实验组对照组痛阈改变百分率时效曲线8/12/2024freeteamplatefrom9【注意事项】1.热板法个体差异大，实验动物应预先筛选。一般以疼痛反应在30s以内者为敏感鼠可供实验用。2.小鼠应选雌性，因雄性小鼠遇热阴囊松弛，易与热板接触而影响实验结果。3.用药后小鼠痛阈值超过60s者应立即取出，以防止烫伤足部而影响实验结果，其痛阈值按60s计算。8/12/2024freeteamplatefrom10二、化学刺激法【材料与方法】一、实验动物：小白鼠，18～22g，雌雄不限。二、器材与药品：天平、1ml注射器2支、注射针头、鼠笼、0.4%盐酸哌替啶、生理盐水、0.6％醋酸或1％酒石酸锑钾溶液。8/12/2024freeteamplatefrom11三、方法与步骤：1.取体重相近的小白鼠4只称重，随机分为2组即实验组和对照组（每组2只），并观察每组动物的活动情况。2.实验组小白鼠腹腔注射1％盐酸哌替啶40mg/10g（0.1ml/10g）,对照组腹腔注射点等容量的生理盐水。8/12/2024freeteamplatefrom128/12/2024freeteamplatefrom133.20min后，两组小白鼠均腹腔注射1％酒石酸锑钾0.1ml/10g或0.6%醋酸0.1ml/10g，并观察15min内各组出现扭体反应的动物数。如在注射药物之后，小白鼠会因腹腔受刺激而出现强烈的腹痛，进而外在地表现为扭体反应（腹部内凹、躯干和后腿伸张、臀部抬高等）。此时将给药组与对照组相比，若前者使扭体反应发生率减少50％以上，即可认为哌替啶产生了镇痛作用。8/12/2024freeteamplatefrom144.汇总实验结果，将各组发生扭体反应和未发生扭体反应的小鼠记入下表，并计算药物镇痛百分率

药物镇痛百分率＝（实验组无扭体反应数－对照组无扭体反应数）/对照组扭体反应数×100％。

8/12/2024freeteamplatefrom15小白鼠发生和未发生扭体反应数目的统计动物数扭体反应数无扭体反应数实验组对照组【注意事项】1.酒石酸锑钾或醋酸需临用时配制,若存放过久，作用会明显减弱2.哌替啶给药剂量要准确，否则剂量过大会造成呼吸抑制，剂量过小则不出现作用。8/12/2024freeteamplatefrom16三、甩尾法【材料与方法】一、实验动物：小白鼠，18～22g，雌雄不限。二、器材与药品：恒温水浴箱、天平、1ml注射器3支、注射针头、小鼠固定器、0.4%盐酸哌替啶、30%安乃近、生理盐水。8/12/2024freeteamplatefrom17三、方法与步骤：1.取体重相近的小白鼠3只称重，观察每只动物的活动情况。将小鼠装入小鼠固定器，暴露鼠尾，将鼠尾的1/3~1/4浸入55℃热水中，约6s内小鼠出现甩尾动作，作为小鼠痛阈值。超出6s的小鼠应弃除。2.甲鼠腹腔注射0.4％盐酸哌替啶40mg/kg（0.1ml/10g）,乙鼠腹腔注射3%安乃近300mg/kg（0.1ml/10g）,丙鼠腹腔注射点等容量的生理盐水。并于注射后10、20、30、40min分别再次测定小鼠痛阈值。其中，对于60s不甩尾的小鼠，痛阈按60s计算。8/12/2024freeteamplatefrom188/12/2024freeteamplatefrom193.汇总实验结果，用下列公式计算痛阈改变百分率:

痛阈改变百分率＝（用药后平均痛阈值－用药前平均痛阈值）/用药前平均痛阈值×100%

4.将给药前、后小白鼠痛阈值记入下表。并计算各时间点的痛阈改变百分率。

8/12/2024freeteamplatefrom20给药后前小白鼠痛阈值动物只数给药前痛阈值（s）给药后痛阈值（s）10min20mion30min