临床免疫学与检验重要知识点

1)识别阶段2)活化和增值阶段3)免疫效应1)中枢免疫器官：免疫细胞发生、分化、成熟的场所，如骨髓，胸腺2)外周免疫器官：免疫细胞产生。，可通过遗传获得，是机体在长期进化要针对入侵病原体的天然防御功能。其主要特征是反应迅速，针对外来异物触到原，并在不断刺激中逐渐建立起来的后天免疫，也称获得性免疫。其主要特抗原而产生免疫应答，开始的应答过程比较缓慢，一旦建立清除该抗原的效异性结合是基于抗原表位与抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性，这种特空间构型所决定的，它们之间的结合是抗原表位与抗体超变区沟槽分子表面的或抗原过量(形成前带或后带)，上清液中可测出游离的抗境条件有哪些?在实验中如何控制这些条件因素?pH时进行；③温度：一般以15，应温度为37℃。B瘤技术进行制备的，其主要操作步骤包括抗原免疫、亲本细胞的选择和制胞的筛选和克隆化、杂交瘤细胞体内接种或体外增量培养、单克隆抗体的纯清中的IgG并去除无关的杂抗体。提纯IgG类抗体的方法有：硫酸交换层析法和亲和层析法，采用亲和层析法提取IgG时，可使用纯化抗原或葡萄球菌蛋白A交联sephamse4B制成层析柱。另外，还可通过吸附法获得单价特异性抗血清。方法是将不含与戊二醛等双功能试剂混合制成固相吸附剂，以吸附免疫血清中的杂抗体，或将术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力B细胞杂交瘤。这种杂交瘤细胞具有两种亲本细胞的特性，即既能够分泌抗体又能绵羊、家兔的红细胞制成抗原致敏的红或抗原)作用，在有电解质存在的条件下，经过一定时间可出现肉眼可见的红细胞动血凝试验Coombs白试验，其原理是不完全抗体多半是7S的IgG类抗体，能与相应的抗原牢固结现可见反应，利用抗球蛋白抗体作为第二抗体，连接与红细胞表面抗原结合①输血：对于“危险”受体(指曾经输血、肌肉注射过血液制品或母子间血型不合的妊娠而可能产生的配血试验必须包括各种不完全抗体的检查，以抗球蛋白法最为可靠。②血型检查Rh—者，其体内是否有抗-D抗体，应用抗球蛋白试验对外表为D阴性的供最溶体反应的原理相类似，但所用的载体为金黄色葡萄球菌。这种细菌的细胞壁中含有A蛋白(SPA)，SPA能与特异性抗体IgG的Fc段结合(IgG3除外)。抗体的F(abˊ)2段暴露在葡与相应抗原特异性结合的特性。当这种葡萄球菌与IgG抗体连接时，就成为抗体相应抗原接触，即出现反向间接凝集反应。可用于细菌、病毒、毒素及各种可将可溶性抗原(或抗体)先吸附或偶联于与免疫无关大小适当的颗粒表面，使之成为致敏载体颗粒，然后与相应抗体(或抗原)作用，在适宜电解质存在条件下，出现特异性的凝集反应原或抗体分为正向间接凝集试验和反向间接凝集试验；根据载体种类，分为间接血凝试验和胶乳间接凝集试验；根据反应方式分为间接凝集试验、间接抑制凝集试验和协同凝集试性抗体致敏载体检测标本中的相应抗原。用特异性抗体致敏颗粒，与样品中的待检抗体及相应的抗体，用于检测标本中与致敏抗原相同的抗原。将标本与抗体试剂相反应，然后加入致敏抗原，若出现凝集现象，说明标本中不存在相应抗原;如未出现凝集现象，则说明待检标本中含有相应抗原，凝集反应被抑制。同理，用抗体致敏载体颗粒及相应抗相似，但所用载体为金黄色葡萄球菌，该菌细胞壁上的SPA能与特异性抗体的IgG的Fc段结合(IgG3除外)，抗体的F(abˊ)2段暴露在葡萄球菌的表面，仍能与相应抗原特异性结合。当这种葡萄球菌与后与样品中的抗集的程度判断阳性反应的强弱。长繁殖。利用淋巴细胞的HGRT将H合成为嘌呤碱并最终与T一起合成DNA从淋巴细胞获得产生某种骨髓瘤细胞获得不断繁殖的能力理功能为免疫防御、免疫自稳、免疫监视免疫防御：是机体排斥外来抗原性功能正常时，机体可抵御病原微生物及其毒性产物的感染和损害，即抗反应过高会引起超敏反应，反应过低或缺失可发生免疫缺陷。免疫自稳：是环境稳定的一种生理功能。该功能正常时，机体可及时清除体内损伤、衰老、变物等异物，而对自身成分保持免疫耐受；该功能失调时，可发生生理功能紊乱或疫监视：是机体免疫系统及时识别、清除体内突变、畸变细胞和病毒感染细胞的释，可一次完成抗原和抗体的滴定，并找出抗原、抗体的最适比。是前二法的自由特异性结合，在两者比例合适的部位，形成白色沉淀环，沉淀环的大小与抗原释的抗原液，和不同浓度的抗原标准品，置37~12温箱，24~48h后观察孔周围中，如何判定结果?原抗体两者比例所致，沉淀线靠近抗原孔，提示抗体含量高；靠近抗体孔，提泳有哪些用途?学分析技术，既有抗原抗体反应的高度骨髓瘤、白血病、系统性红斑狼疮、肝病等病人的血清蛋白成分的分析，多发M体为什么流向负极?中带负电荷，电泳时从负极向正极泳动，而抗体IgG分子量大，暴露的极中解离的也少，向正极的泳动速度较慢，电泳时由电渗引向负极的液流速度超IgG动抗体流向负极，使抗原和抗体定向对流并发生反应，出现肉眼可见的沉淀动，逐渐形成梯度浓度，在抗原抗体比例适当时形成沉淀，随着抗原量的减哪些类型?应的抗体特异结合，在二者比例合适、并有一定浓度的电解质存在时，可以，使反应液出现浊度。这种浊度可用肉眼或仪器测知，并可通过浊度推算出本原理是什么?Rayleh射方程，散射光强度与粒子(免疫复合物)的浓度和体积成正比，通过测“速率”是指什么?内抗原与抗体反应的速度。抗原与抗体结合形成免疫复合物的速度，在每个单在抗体过量的情况下，随着反应时问的延长，免疫复合物的总量逐渐增加，通么必须始终保持抗体过量状效应，形成的免疫复合物分子小，而且会发生再解离，使浊度下降，光散射过量时，免疫复合物的形成随着抗原量的增加而递增，光散射的强度也随之递定的反应体系中必须始终保持抗体过量，以保证免疫复合物的生成量与浊度的时制作，绝不可一次作有时出现扩散环呈现两重现了抗原性相同的两个组分，其扩散率不同，例如α重链病血清中出现的α重链和正常的IgA两种成分并存，皆与抗IgA抗体发生反应，就形成内外两重环。⑤在单扩试验时，有时回出现结果与真实含量不符，这主要出现在Ig测定中。如用单克隆抗体或骨髓瘤纯抗原免疫动物在单一结合价的现象，若用此作为单扩试剂测量正常人的多态性抗原，则抗体相反，如用多克隆抗体测定单克隆病，则抗原相对过剩(单一抗原决定簇)，致使沉淀圈呈不相关扩大，从而造成某一成分的沉淀反应主要应用于体液内包括血液、尿液、脑脊液、胸水、泪液、关节腔液等内的蛋白质(如MW10000~50000，标本浓度为1mg/L~100g/L)测定，应用最广泛的是可以准确定量的免疫浊度法，也理为可溶性抗原和抗体在含有一定电解质的琼脂凝胶板的对应孔中各自向对方处形成抗原抗体沉淀线，根据沉淀线的位置、形状及对比关系，可作出对抗原疫扩散试验、双向免疫扩散试验、絮状沉淀试验、免疫浊度测定易行，结果可靠，特异性高，分辨率高于对流免疫电泳，成本低廉，结果可经其测定的灵敏度高，特异性强，精密度好，而且可对半抗原和抗原测定以及测、药物等微量物质的测定。由于大多数检验项目均有RIA或IRMA试剂盒供应，目前仍是基层单位对答：放射免疫分析(RIA)是放射免疫技术最经典的模式。它是以放射性核素标记抗原与反应系统中未性抗体为基本原理来测定待检样品中抗原量的一种分析方法。而免疫放射分析(IRMA)是用放射性核素标记的过量抗体与待检测抗原直接结合，采用固相免疫吸附载体分离结合RIA射性核素标记抗A应具备什么条件?DA微技术是以荧光显微镜为检测工具，用荧光素标记特异性抗体或抗抗体，检测固定组织DA光免疫测定法具有特异性强，灵敏度高，标准曲线范围宽，分析速度快，标记物制备较DA明、A荧光抗体技术的优点：(1)能做到快速、敏感、定位。(2)Ag和Ab的特异性与形态的检查结合在cell；⑵寄生虫学方面：用于寄生虫的诊断(鉴定、分型)；⑶免疫学方面：研求?物分离，分为均相酶免疫测定和异相酶免疫测定，异相酶免疫测定又可分为固DAAgE)与Ab结合形成AbAgE后，其中的酶(E)活性将减弱或增强。因此，不需对反应液中的AbAgEAgE被测样品中Ag的含量。DA载体上的抗体和酶标抗体，与待检抗原上两个不同的抗原决定基结合，形成固相抗体一。由于反应系统中固相抗体和酶标抗体的量相对于待检抗原是过量的，因此复原的含量成正比。测定复合物中酶作用于加入的底物后生成的有色物质量，即LISADANC附蛋白力强，微量抗原吸附完全，故检出灵敏度可较普通的EusA高6~8倍；(2)试剂用量NC长期保存(-20℃可达半年)。DA原理：抗原或抗体预先结合到某种固相载体表面；测定时，将受检样品(含待测抗体或抗原)程序与结合在固相载体上的抗原或抗体起反应形成抗原或抗体复合物；反应抗体被结合量(免疫复合物)即与标本中待检抗体或抗原的量成一定比中其他物质，加入底物进行显色，最后通过定性或定量分析有色产物量即可确DA活性的Ag-E与Ab结合形成AgAb后，所标的酶(E)因与Ab接触，酶活性受到抑制。加入未标记抗原(标准或样品，具酶活性的游离AgE增多。最终测得的酶活性随着反应体系中未标记抗原(Ag)浓SDSPAGE疫测定三项技术结合而成。抗原等蛋白样品经SDS处理后带硝酸纤维素膜上；将印有蛋白质条带的硝酸纤维素膜依次与特异性抗体和酶标第DA技术是指用胶体金颗粒作为标记物进行抗原抗体反应的一类免疫学测定技术，其主要技膜为体的渗滤装置中，依次滴加标本、免疫金及洗涤液，因微孔滤膜贴置于吸水材装置时与膜上的抗原或抗体快速结合并起到浓缩作用，达到快速检测目的，阳合的的固相膜免疫分析技术，滴加在膜一端的标本溶液受载体膜的毛细管作用向另般，在移动过程中被分析物与固定于载体膜上某一区域的抗体或抗原结合而被DA能使已被抗体致敏了的红细胞发生溶血。免疫溶血试验所参与的成分有补体，抗原(SRBC)及的就可测知第三个成分，稀释该成分可测定其效价或含DA分可测其溶血活性或含量。测定溶血活性应先制备缺乏该补体单个成分的“补体试剂的原理，将致敏红细胞与“补体试剂”混合，再加入待测血清，孵育后，溶体成分的溶血功能有关。测定含量可用已知抗体以单向琼脂扩散等方法进mg/ml免疫比浊法:原理，优点：检测结果准确，精密度高，耗时短，灵敏度高ug/mlT活gAIDS测主要是病毒标志、免疫标志和相关标志三大类。病毒标志主要是直接分离培养检测病毒或检体阳性：至少有两条膜(gp41/gp120/gp160)或至少有一条膜带与P24带同时测定；②HIV抗体阴性：胞检测减少，常＜1.5×109/L。CD4+T细胞绝对值下降至(2~4)×109/L，CD4/CD8比值＜1，还有Ig、B，在靶细胞内进行复制，繁殖，最后以芽生方式破坏细胞膜而移出，进造血系统及白血病免疫分型4.肿瘤耐药基因AIDS身免疫病相关HLA分析7.移值免疫中的应用突变和异常增生，致使血清和尿中出现大量游离的无免疫功能的免疫球蛋白浆细胞的异常增殖而导致的免疫球蛋白异常增生造成机体病理损常。ANA。答：自身免疫病的防治原则大致为：(1)预防和控制病原体的感染，避免因自身组织细胞的抗原性发生改变和交叉抗原诱发的免疫应答，同时也避免感染引起的抗原提呈细胞和T细胞的激活。(2)使用T引起的身身免疫病。(3)特异性抗体治疗，如用抗CD3单抗，抗炎症性细胞因子单抗等。(4)疫苗激发免疫耐受。如口服II型胶原等自身预防和治疗类风温关节炎等NA1)皮试检测变应原。2)免疫球蛋白检测：总IgE和特异性IgE。3)嗜碱性粒细胞和嗜酸性粒细胞检物质，使血管扩张、通盘性增加、加剧局部渗出和水肿，并激活凝血系统，形成微Rh性疾病。(2)Rh血型不hhh通常分三个阶段：(1)致敏阶段在此阶段，变应原进入机体，刺激机体特异的B淋巴细胞，使其增胞上，使机体处于致敏状态。(2)发敏阶段当有相同变应原再次进入机体时，与致敏靶细胞表面的效应阶段颗粒中的生物活性介质及新合成的生物活性介质作用于相应的效应器官，引起效应器官病理一抗原表位的B细胞杂交瘤产生的同源抗体，具有特异性强、效价高、生物类型用DNA重组及蛋白工程技术对编码抗体的基因按不同的需要进行改造和装配，经体，主要包括人源化抗体、小分子抗体、双价特异性抗体和抗体部位具有不同的特异性，可以清最高稀释度、即。。原，在适当电解质参与下可直接抗体直接结合，在一定条件下，会抗原)作用，在适宜的电解质存在的条件下，出现特异性凝集现象动凝集反应(passiveagglutinationtest)。复合物以溶性抗原与相应抗体分别放人凝胶内进，位于琼脂凝胶中的抗迁移率不同而彼此分开形成不同的区带。电泳结束后，在琼脂板中相应的抗血清，由于经电泳分离后的各种抗原成分在琼脂中呈放射带现象:在抗原抗体特异性反应时，生成结合物的量与反应物的浓度有关，当抗原与抗体达到最适比。发光较长时间的照射后。抗体反应后，先把Ab*Ag与Ab*分离，然后测定AbAgAbAg定法。抗原抗体反应后Ab*Ag中的标记物失去荧光特性，则不本中的相应抗原或抗体的荧光免疫测定技术而建立的封闭：是指在抗原或抗体包被ELISA板后，用1％~5％牛血清白蛋白或5％~20％小牛血清等再包被，EIA抗原抗体反应后，需分离游离的和与抗原(或的酶标记物，然后对经酶催化的底物显色程度进行测定，再推算子的多肽,可存在于肿瘤患者的血清中。体外培养时,它可抑制非特异性致有丝分裂transplantation植到自体或异体的一定部位、用以代移植排斥反应(transplantationrejection)：针对移植抗原产生的引起移植物功能或受者机体损害的宿主抗移植物反应(hostversusgraftreaction,HVGR)：宿主针对供体组织或细胞的HLA抗原产生移植物抗宿主反应(graftversushostreaction,GVHR)：一定条件下移植物中的过客(免疫)细胞immunodeficiency因导致的免疫系统发育或免疫应答障碍而导致的一种或多种免疫功能不全.免疫缺陷病:由免疫缺陷所致的各种临床综合特征的疾病.T的理化特性和生物学特性进行多参数定荧光信号之间的相本-周蛋白(bence-Jones):尿中游离的免疫球蛋白轻连。自身免疫病(AID)因机体免疫系统对自身成分发生免疫应答而导致的组织损伤或功能紊乱，属于病抗核抗体(ANA)：抗核酸抗原抗体，是一组将自身真核细胞的各种成分[脱氧核糖核蛋白(DNP)、DNA、可提取的核抗原(ENA)和RNA等]作为靶抗原的自身抗体的总称。的一或组织细胞损伤为主的特异性免疫应答。E例性、可逆性温度一般以15~40℃为宜，最适温度37℃最好20％类型包括正向间接凝集、反应反向间接凝集反应、间接凝集抑制反应和协同凝集反3参与凝集反应中的抗原称为(凝集原)抗体称为(凝集素)试验有(玻片法)(试管法)(玻片法)常用的直中正向凝集反应是用(抗原)致敏载体以检测标本中相应的(抗体)而反向间接凝集反载体以检测标本中相应(抗原)验可用已知抗原型红细胞检测血清中的(不完全抗体)可用于输血前的(交叉配血)试1．免疫沉淀反应是(可溶性抗原)与(相应抗体)特异性结合2．棋盘格法(抗原)和(抗体)同时稀释，可一次完成(抗原)和(抗体)的滴定3．单向琼脂扩散是待测抗原从含有定量(抗体)的(凝胶)内自由向周围扩散，抗原抗体特异性结合，在两者比例合适的部位，形成(沉淀环)。Maneini子抗原的测定，在一定范围内，沉淀环随时间延长而扩大，抗原浓度与 (扩散环直径的平方)呈线性关系，常用(普通)坐标纸作图。Fahey子抗原的测定，在一定范围内，沉淀环随时间延长而扩大，沉淀环直径与 (抗原浓度的对数)呈线性关系，常用(半对数)坐标纸作图。验可对抗原或抗体的存在、含量和相对分子量进行分析，沉淀线靠近抗原孔指示 (抗体含量)较大；靠近抗体孔则指示(抗原含量较高)；不出现沉淀线则表明(无对应的抗原和抗7.免疫电泳是将(电泳)与(双向免疫扩散)相结合的一种免疫化学分析技术。8.火箭电泳是(电泳)与(单向免疫扩散)相结合的免疫技术。9.对流免疫电泳是(电泳)与(双向免疫扩散)相结合的免疫技术。10.对流免疫电泳中，抗体流向负极，是因为(抗体分子量大)(电泳)速度小(电渗)速度。1l.免疫浊度测定的基本原理是抗原抗体在特殊缓冲液中快速形成(免疫复合物)，使反应液出现(浊度)，并可根据其推算出抗原或抗体的量。12.根据Rayleigh方程，散射比浊法中的散射光强度与入射光波长成(反)比，与粒子的浓度和体积成 (正)比。13.速率散射比浊法是测定单位时间内免疫复合物形成的(最快时间段)的散射信号值，此时的散射信14.免疫胶乳浊度测定的原理与透射比浊法相似。载体为大小适中、均匀的胶乳颗粒其直径应稍(小于)入射光波长目前多用(200)nm的胶乳颗粒。15.免疫浊度测定的基本原则之一是反应体系中必须始终保持(抗体)过量。16.凝胶内沉淀试验包括(单向扩散试验)和(双向扩散试验)抗原抗体最适比的基本测定方法为(抗原稀释法)和(抗体稀释法)。1.荧光免疫技术的主要类型包括(荧光抗体染色技术)(荧光免疫测定技术)。2．荧光物质有(荧光素)和(其他荧光素物质)。3．荧光抗体染色技术可分为(荧光免疫显微技术)和(流式荧光免疫技术)。据抗原抗体反应后是否需要分离结合的与游离的荧光标记物而分为(均相)和(非均包括(时间分辨荧光免疫测定)(荧光酶免疫测定)。7．均相荧光免疫测定法包括(荧光偏振免疫测)和(底物标记荧光免疫测定)。法有(搅拌标记)和(透析标记法)。5．ELISA中三种必要试剂是(固相的抗原或抗体)(酶标记的抗原或抗体)(酶的反应底物)。6．制备酶结合物常用的方法有(戊二醛交联法)和(过碘酸盐氧化法)。8．均相酶免疫测定技术的类型主要有(酶增强免疫测定技术)(克隆酶供体免疫分析技术)。GE11.常用于HRP标记抗(戊二醛交联法)和(过碘酸钠法)。1.不受位阻效应影响,更易发挥生物素活性作用的是(BCNHS)。2.用于标记蛋白质醛基的,适用范围较BHZ宽的活化生物素是(BCHZ)。3.在一定波长的光照射下,光敏基团可转变为芳香基硝基苯而直接与腺嘌呤N7位氨基结合的是(光生物素)。4.生物素化蛋白质衍生物有二类,一种是(生物素化的大分子生物活性物质),另一种是(标记材料结合生物素后制成的标记物)。5.用于亲和素标记的物质中,最常用的是(酶),(异硫氰酸荧光素(FITC))和(胶体金)。1.用丙酮做固定剂的抗原是(免疫球蛋白)；用1%聚甲醛做固定剂的抗原是(激素)；用10%甲醛做固定剂的抗原是(类脂质)；用95%乙醇做固定剂的抗原是(蛋白质)；用四氯化磺做固定剂的抗原是 4.酶免疫组化技术中最常用的酶有(辣根过氧化物酶)(碱性磷酸酶)及(葡萄糖氧化酶)。5.免疫电镜标本的制备主要有(非包埋法免疫染)(包埋前免疫染色)(包埋后免疫染色)6.免疫组化中最常用的制片方法是(蛋白酶消化法)和(非特异吸附法)。有(金免疫组织化学染色技术)和(金免疫测定技术)，前者包括(免疫金(银)光镜染)等。体金与抗原(抗体))的结合物，在免疫组织化学染色技术中，习惯上称之为(金探针)3．斑点金免疫层析试验方法学类型有(双抗体夹心法)(竞争法)和(间接法)。(吸水垫料)和(点加