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文档简介

1目编号：20233365-T-326对《猪圆环病毒聚2聚合酶链反应（PCR）检测方法，补充了引言、规范性引用文件、术语与定义、当前，我国猪群中PCV2感染十分普遍，临床健康猪群感染率持续高位，3实用性和可操作性的方法，在修订《猪圆环病毒聚合酶链式反应试验方法》技术指导和征求意见；崔进负责协调推进项目、技术复核、PCR方法优化；房456多项研究报道表明，同步接毒法得到的病毒含量显著高于异步接毒，且用D-氨TritonX-100透膜、3%7 8AB验，确定最适退火温度。反应体系：10×PCRbuffer（Mg2+plus）2.5μL，dNTPs9M：DL2000Marker；1-9：1×109-1×101copies/uLPCV2质粒标准5）本标准PCR方法与《猪圆环病毒聚合酶链式反应试验方法》1-5：1.61×102copies/μL-1.61×107copies/μLPCV2质粒标准品1-6：1.61×107copies/μL-1.61×102copies/μ-2稀释的标准品-3稀释的标准品-4稀释的标准品35901—2018）的比较包被浓度-血清稀释度组合中阳性血清和阴性抗原包被浓度(μg/mL）123P/NP/NP/N以商品化PCV2阳性血清国家参考品为阳性对照，以本团队实验室制备的PCV2阴性对照血清为阴性对照，用建立的间接ELISA方法检测40份PCV2抗性临界值=S/P+2SD=0.44。从而得到判定标准为：待检血清S/P≥0.57，判定为PCV2抗体阳性；S/P≤0.44，判定为PCV123456789和血清流行病学调查。该方法直接采用现行推荐性国标《猪圆环病毒2型阻断利用大肠杆菌表达系统，筛选获得优势广谱的Cap备了一株针对Cap保守抗原表位的单克隆抗体5H7，制备了HRP标记的5断率（PI横向比较，在抗原包被浓度一致而血清稀释度不同条件下，当血清NPPI（%）NPPI（%）NPPI（%）NPPI（%）NPPI（%）号182934567X X+2SD X+3SD国三类动物疫病，现行国标及农业行业标准按照标准编制的有关要求，项目团队完善了PCVD的诊断方法，为开展测方法的标准，分别是本次拟整合修订的《猪圆环病毒聚合酶链反应试验

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