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文档简介
DeterminationofStaphylococcusaureusindisposablesanitaryproducts—2024-05-17发布2024-05-30实施I II 1 1 1 1 1 2 2 3 4 5 6本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定本文件起草单位:宁夏计量质量检验检测研究院、宁夏食品检测研究1GB/T27403实验室质量控制规范食医用手套或指套)、纸巾、湿巾、卫生湿巾、电话膜、帽子、口罩、妇女经期卫生用品(包括卫生护3.2DNA(deoxyribonuleicaci3.3Nuc(thermost3.4PCR(polymerasechain一次性使用卫生用品样品经扩增培养后,提取增菌液中DNA,以提取的DNA为模板,以金黄色葡萄球菌中(Nuc)基因中相对保守且高度特异的引物和探针进行目标物的实时荧光PCR扩增,根据Ct值2在100级净化条件下用无菌方法打开用于检测的至少3个包装,从每个包装中取样7.3.1手动提取法。从样品增菌液(7.2)表层吸取1mL增菌液。离心收集细菌(4000rpm/min,37.3.2试剂盒法。从样品增菌液(7.2)表层吸取1mL增菌液,离心收集细菌(4000rpm按照商品化细菌基因组提取试剂盒说明书进行细菌基因组DNA提取,如不能即时检验,提取后DNA取适量DNA原液加无菌双蒸水稀释至一定倍数后,使用核酸蛋白分析仪或紫外分光光度计测定ρ—DNA浓度,单位为微克每毫升(μg/mL体积(μL)1检验过程中分别设置阳性对照、阴性对照和空白对照。阳性对照为金黄色葡萄球菌标准菌株DNA,阴性对照为大肠埃希氏菌标准菌株DNA,空白对照为等体积的无菌双蒸水。每个待检样品提取DNA溶c)阳性对照:有荧光对数增长且荧光通道出现典型的扩增曲4结果为阳性者,该样品检验结果为金黄色葡萄球菌初筛阳性,对样品增菌液进一步按照GB5A.1.1成分A.1.2制法6F:5'-CACCTGAAACAAAGCATCCTAA5'-FAM-TGCTTCAGGGCCATATTTCTR:5'-CGCTAAGCCACGTCCATATNuc基因的扩增片段atgtacaaaggtcaaccaatgacattcagactattattgggtgcatttacgaaaaaaatggtagaaaatgcaaataa
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