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第第页土壤锰过氧化物酶（Soilmanganeseperoxidase，S—Mnp）试剂盒说明书土壤锰过氧化物酶（Soilmanganeseperoxidase，SMnp）试剂盒说明书微量法100T/48S注意：正式测定之前选择23个预期差别大的样本做猜测定。测定意义：锰过氧化物酶（EC1.11.1.13）是一种含亚铁血红素的过氧化物酶，紧要存在于担子菌中，属于木质素降解酶系，能有效的降解木质素及废水和土壤中比较难降解的氯化物，叠氮化合物、DTT，多环芳烃等。测定原理：锰过氧化物酶在Mn2+存在的条件下，将愈创木酚氧化为四邻甲氧基连酚，在465nm有特征吸取峰。自备试验用品及仪器：天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、震荡仪、甲苯。试剂构成和配制：试剂一：液体12mL×1瓶，4℃保管。试剂二：液体2mL×1支，4℃保管。试剂三：液体4mL×1瓶，4℃避光保管。试剂四：液体2mL×1支，4℃保管。样品处理：新鲜土样风干，过3050目筛。测定操作：对比管测定管土样（mg）4040甲苯（μL）303025℃，静置15min试剂一（μL）140120试剂二（μL）20试剂三（μL）4040试剂四（μL）2020充分混匀，于30℃震荡反应3h，于10000rpm，4℃离心10min，取150μL于微量石英比色皿/96孔板，测定465nm处吸光值，记为A对比管和A测定管，△A=A测定管A对比管酶活计算公式：a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下酶活性定义：每克土壤每天氧化1nmol愈创木酚所需的酶量为一个酶活力单位。SMnP活性（nmol/d/g土样）=×V反总÷W÷T=66.4×△A÷Wε：愈创木酚摩尔消光系数：12100L/mol/cm；d：比色皿光径，1cm；V反总：反应总体积，0.2mL；W：样本质量，g；T：反应时间，3hb.用96孔板测定的计算公式如下酶活性定义：每克土壤每天氧化1nmol愈创木酚所需的酶量为一个酶活力单位。SMnP活性（nmol/d/g土样）=×V反总÷W÷T=132.8×△A÷Wε：愈创木酚摩尔消光系数：12100L/mol/cm；

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