《细菌室质控》课件

临床微生物实验室的质量控制质量保证QA(QualityAssurance)。质量保证。是实验室报告的质量得到保证的全过程

●

概括总结为：正确的结果是来自于从正确的样品采集的正确的标本；在正确的时间里得到的结果，结果的解释是基于正确的

参考资料，当然还要思索到价钱的合理。在强调质量的前提下设计的步骤不能只限于实验室的技术操作步骤。量

保分析中SOP质量控制检测质诱析箭正确：采集时间采集标本采集方法标本分析后结果质量保证和质量控制的关系与医红沟通对语量保质质量保证和质量控制的关系●质量保证和质量控制在目的方面很类似，但在含义和功能上是不同的。其功能是相

互作用的关系，由于非常接近而通常被混

淆。●质量保证比质量控制更难用“量”来限定，

每个环节都将影响结果的质量。·

对每个环节进展控制，构成质量保证体系。质量保证和质量控制的关系·质量控制很少把实验室人员包括在内·质量保证是基于实验室和临床医生的对话。质量保证体系·质量保证比质量控制更难用“量”来限定，由于它偏重实验室的检测对患者的影响一个有效的质量保证体系协助实验室阐明，实验数据不是凭空产生的，实验室做的一切最终会对患者的生命产

生影响，对患者的生命担任。得到正确分析结果的根底标本分析前的质量控制—微生物学特殊方面

大量的分析前要素影响微生物实验的诊断价值合理的标本采集向临床提供标本采集阐明(sop

),

包括正确时间、部位和方法等正确的运送方式包括运送工具和有效时间及储存方法等有可靠的标本质量评价方法拒收标本目的全不台

匕

、信白

大

二木

不H(/,

不

了，

大△搜集和运送微生物标本的容器要求·

无菌·无防腐剂·足够大·平安严密·不易碎·运送培育基·

加强无生长因子或坚持特定菌的培育基防止用木质的棉试子对细菌有毒害拭子标本·拭子标本在运送过程中应防止枯燥，可将拭子放进液体肉汤或运送培育基中。·

为防止标本中的细菌数量减少，标本量应尽能够大。运送时间及运输储存温度·

标本因冷藏及pH改动或在氧气中暴露，能够减少

很多种细菌的存活时间·

脑膜炎球菌，淋病奈瑟菌，流感嗜血杆菌，肺

炎链球菌，布氏杆菌，沙门菌，志贺氏菌，霍乱

弧菌，空肠弯曲菌及厌养菌·

定量评价细菌数的培育(尿标本)·

对环境敏感菌株在运送中数量快速减少时，假

设运送时间太长，其它菌那么成倍增长，需求寻

觅的细菌可同其它菌一同过度生长。·

需进展细菌学检测的一切标本，应在搜集后2小

时内送到实验室标本运送贮存温度血血培养瓶室温或37℃脓、脑脊液、胸水、心包液、腹水、关节滑液、鼻窦分泌物短时间内运送：标本在带帽的注射器内

保证厌氧条件长时间运送：使用运送培基室温不用培养避免冷藏支气管肺泡灌洗液、痰，其它分泌物、便立刻送检(2-3小时)冷藏眼、耳、嘴、咽

、

鼻、尿道、生殖道

直肠、伤口用运送培养基(运送时间>4小时)室温不培养细菌学实验的各种标本的运送及储存条件试运转和重试运转操作步骤·

日常维护和清洁·室内监测或运用者检查仪器和设备质控活动按日程进展调整操作步骤室间质评室内质控培育箱、水浴和冰箱可接受温度范围温度℃

可接受范围℃

目的25

士1.0

酵母菌、霉菌35

士1.0

常规30

士1.0

酵母菌和霉菌、李斯特42

士0.5

沙门/弯曲菌分离、鲍曼不动杆菌

冷藏

4-8

储存培养基、试剂冷冻

-20低温

储存标本、试剂、贮存菌种冷冻

-70超低温

储存参考菌株和血清·pH

计·厌氧指示剂·水浴箱·天平·加样器·

自动高压灭菌器·生物平安柜定期维护和校准、记录年检、验证废品商业培育基·接纳时记录批号，接纳日期；·厂家提供质控文件，照实沿用气体，培育

时间长度，可接受的结果；·运用的实验室必需检查外观，破损、污染、

溶血或冻坏情况；·有效期内质量能否有变化必需做质控的商业培育基实验音育基琼脂菌琼脂菌选择培育基要的微生物鉴定盒中的培育基有两种或更多的底物自制培育基。每批做质控用菌株根据期望结果选择确认要求生长特性〔溶血、特征菌落等〕

选择性(生长/不生长)6

加强营养(苛养菌)。鉴定用生化反响(阴性、阳性，如：氧化/发酵，动力等)。质控菌株的储存日常用：4-8℃,胰酶消化大豆肉汤(非苛养菌);

高

营

养巧克力琼脂斜面(苛养菌),每周转种。

中期储存：5

0%胎牛血清肉汤，脱纤维羊血或脱脂牛奶，10=15%甘油胰酶消化大豆肉汤，

-20℃长

期储存：冻干或液氮。试剂—切试剂(水、枯燥培育基、菌株和药敏纸片)o

必需标志成份、浓度、配制日期、接纳日期、

储存地方、失效期和库存量。按厂家要求保管试剂。过期试剂应该弃去。参考菌株用于检测一切菌株、试剂、阳性和阴

性反响。试剂质控。触酶(粪肠球菌、金葡菌)。凝固

酶

(

金黄色葡萄球菌、表葡菌)。氧化酶(绿脓假单胞菌、大肠杆菌

oB-内酰胺酶。杆菌肽(A

群链球菌)o

OP(

肺

炎链球菌S,草绿色链球菌R)o

X+V

纸片(流感嗜血杆菌)。抗酸染色〔快生长分枝杆菌。G

染色(金黄色葡萄球菌、大肠杆菌o

诊断抗血清。用知阳性和阴性菌株做对照!抗生素药敏实验。纸片法。新批号药做；普通每周做；。失

控时天天做，延续30天，准确度和准。度到达后才恢复每天做；。

一个药物失控时，重新测5天。

o稀释法。琼脂法、微量肉汤法每次同时做质控药敏实验失控措施按美国NCCLS(CLSI)规定o(1)

质控菌株应按规范方法与临床标本种

分别菌同步进展药敏实验；。(2)

改换药物或培育基时必需用相应质控

菌株测试

；。(3)—切质控菌株在实行常规监控〔一周

—次质控〕前应延续监测30天。自动和半自动系统·厂家提供鉴定和药敏试剂所用菌株号

·及预期结果·可以验证能否操作按照SOP

规范规范

操作敏实验失控措施每种菌株，30次实验总失控结果不能

空结果完全符合上述要求，可转为一周法。直径超出可接纳范围都必需校正不明时，可用相应质控菌株延续监测5天；控

中每种抗菌药物同时测试5个抑菌环

到达可接纳范围，可恢

复一周一

次质实验室间质量评价(EQA)。室间质评是调查实验结果的正确性

(accuracy),是

检查不同实验室操作的差别。。室内质控是调查实验室实验结果的反复性〔准确性precision],

而无法检验的正确性。。参与微生物室间质量评价活动。可以检查实验室

室内质控的质量，同时了解本人实验室与其他实验室之间的差别。实验室认可的要求正确的做法：

√室间质评样本应与常规

任务放在一同做，当

作临床标本；由做常规任务的人员操

作；一切的技术人员都应参与最好。与常规任务一样的方法操作步骤和试剂错误的做法：X特殊对待，单独操作专人专做与常规方法、所用试剂

不同室间质量评价的误区4、肠杆菌科4、非发酵菌G群链球菌〔非三甲医院统计〕非三甲医院鉴定比率A,C,F,G

群链

球菌(B型溶血(链球菌链球菌属

葡萄球菌属肠球菌

其他G群链球菌27.3%无乳链球菌4.7%马链球菌16%化脓性链球菌

30.5%A群链球菌

12.7%G群链球菌42.2%化脓性链球菌26.7%C群肠球菌

A群链球菌B群链球菌

11.6%A,C,F,G

群链球菌(B型溶血(链球菌无乳链球菌2.6%链球菌属

马链球菌11.2%1、G群链球菌〔

三甲医院统计〕溶血孪生球菌D群肠球菌嗜沫嗜血杆菌2、非01群霍乱弧菌敏感正确率

：头孢唑林81.4%阿莫西林/棒酸□S□I□R

59.4%环丙沙星S亚胺培南S氨曲南S阿莫西林/棒酸S头孢噻肟S头孢他啶S头孢唑林S庆大霉素R100

200300

400

500600亚安培南4、0214号产酸克雷伯菌[敏感株]0214号产酸克雷伯菌(敏感株)实验室结果分布2

、0205号洛菲不动杆菌0205号洛菲不动杆菌头孢哌酮敏感正确率65.5%复方新诺明S环丙沙星S头孢哌酮S哌拉西林I庆大霉素S100200实验室结果分布300

400OS■I□R头孢他啶S5000314嗜麦芽窄食单胞菌

964084005·亚胺培南

天然耐药7

个

实

验

室报告敏感复方新诺明R亚胺培南R环

丙

沙

星S3

、0314嗜麦芽窄食单胞菌0

100

200300400

500600实验室结果分布□S□IOR0115号金黄色葡萄球菌(

MSS

4敏感正确率：*苯唑西林90.8%

万古霉素97.2%

头孢曲松92.2%*氨苄西林/

舒巴坦86.7%500

6000115号金黄色葡萄球菌(MSSA)氨苄西林/舒巴坦S头孢曲松S庆大霉素S万古霉素S环丙沙星S红霉素S克林霉素S苯唑西林S青霉素R100

200

300

400实验室结果分布OSOIOR三、葡萄球菌属0209号金黄色葡萄球菌(MRSA)万古霉素S庆大霉素S氨苄西林舒巴坦R苯唑西林R青霉素R正确率：苯唑西林79.7%

万古霉97.9%氨苄西林/舒巴坦

应该报告耐药，报告敏感的实验室

占30.9%0209号金黄色葡萄球菌

(MRSA100

200

300400500

600实验室结果分布OS□IOR0110粪肠球菌(敏感正确率：*青霉素72.5%*万古霉素85.5%耐药正确率：庆大霉素500

98.8%诺氟沙星R氯霉素R左氧氟沙星R

G庆大霉素高R呋喃妥因S万古霉素S青霉素S100

200实验室结果分布四、肠球菌HLAR)300□SOIOR0110粪肠球菌

(HLAR)84000204号肺炎链球菌(青霉素耐药)四环素R红霉素R万古霉素S氧氟沙星S头孢噻肟MIC,R青霉素MIC,R青霉素(苯唑筛选)100

200300400OSOIOR实验室结果分布·

苯唑西林挑选实验能够耐药正确率为89.7%●有303个实验室可以进展青霉素

MIC

检测，耐药

正确率62%·

头孢噻肟MIC耐

药正确19.0%四环素耐药正确

率74.4%。五、苛养菌药敏500●耐药正确率：氨苄西林93.3%·敏感正确率：氨苄西林/舒巴

坦76.4%头孢克罗73.6%

氯霉素88.3%四环素71.1%0301号流感嗜血杆菌环丙沙星S四环素S氯霉素S头孢克罗S氨苄西林舒巴坦S氨苄西林R0301号流感嗜血杆菌100

200实验室结果分布300

400□SIIOR500

6000309

号牛链球菌(敏感株)敏感正确率：青霉素90.3%头孢噻肟90.4%

红霉素94.4%

万古霉素96.7%0309号牛链球菌(敏感株)

0W01万古霉素S克林霉素S红霉素S头孢噻肟S青霉素S六、其他链球菌420440460480500520实验室结果分布□STIOR淋病奈瑟03P脑炎奈瑟02N流感03P流感01N卡他03P卡他01P七、β-内酰胺酶实验0

20

40

60

80□阳性□阴性β-内酰胺酶试验100

120如46.6实验室应具备多种检测手段。分别、培育。非选择培育基、选择培育基、鉴别培育基等、

分别不同营养和气体环境要求的病原菌。鉴定。规范化的商品试剂、自动半自动仪器、自制、

血清学等试剂o药敏实验。纸

片法、微量肉汤稀释法、E-

test注重培育微生物任务人员的质量控制认识o有形的、看得见的

—微生物实验的质量可以经过正确的操作来表达，例如革

兰染色试剂，可以经过对规范质控菌株的染色来反映操作和试剂的质量。。质量控制更依赖于任务人员的认知才干o

一个受过充分培训的、可以严谨地分析实验结果的任务人员，不是只可以忠实地记录实验数据，而是可以实施更加严

厉的规范。注重培育微生物任务人员的质量控制认识。具有质量认识的微生物技术人员。应该对规范烂熟于心，能对不常见的结果提出疑问：。象不能够多的或迄今为止从未见过的药敏表型o出现少见菌或非常驻菌，以及添加的污染率等。

。各种质量控制方法都很难检查出来。这些和其他的技术错误或书写错误不是经常发生，或散在发生实验室应该鼓励任务人员的质量认识他们做出的结果可以得到临床医生的信住G+未报道过的表型、不常见结果或技

术错误造成不常见表型/技术错误造成结

果，要确认耐药结果肠球菌属Daptomicin

NSVan

R粪肠球菌氨苄或青霉素R,Daptomic