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美澳型核果褐腐病菌活性检测方法ViabilitytestofMoniliniafruticola(G.W国家市场监督管理总局国家标准化管理委员会本文件描述了应用普通荧光显微镜或激光扫描共聚焦显微镜对美澳型核果褐腐病菌[Monilin-分生孢子活性conidialviabliityles),核盘菌科(Sclerotiniaceae),链核盘菌属(Monilinia)。分别应用二乙酸荧光素(FlouresceinDiacetate,FDA)和碘化丙啶(PropidiumIodide,PI)荧光染料26.2试剂为10mg·mL-¹的母液，置于棕色瓶4℃避光保存。使用前用丙酮稀释，配置成马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA):200g去皮马铃薯切成小方块，加入1000mL自来水，煮沸15min,用四层纱布过滤得到滤液，滤刮取寄主症状病征的分生孢子装入到有无菌水的离心管中，配制成终浓度为每微升含10个~3PI染色检测：将荧光光路打开，设置荧光通道的激发波长534存查样品应视样品的状态采用相应的保存方式，妥善保存6个月。如发现具有活性的美澳型核果理。样品保存方法应符合SN/T2589的规定。5(资料性)A.1主要寄主ca),病菌还可在木瓜属(Chaenomeles)、山楂属(CrataeA.2为害症状美澳型核果褐腐病菌为害症状见图A.1。A.3菌落特征菌株在PDA培养基上生长菌落形态见图A.2。6图A.2菌株在PDA上生长菌落形态A.4分生孢子形态学特征透明，聚集时为灰黄色。分生孢子梗较短，分枝或不分7(资料性)普通荧光显微镜对美澳型核果褐腐病菌孢子染色观察结果图普通荧光显微镜观察FDA对美澳型核果褐腐病菌孢子染色效果见图B.1。图B.1普通荧光显微镜观察FDA对美澳型核果褐腐病菌孢子染色效果图普通荧光显微镜观察PI对美澳型核果褐腐病菌孢子染色效果见图B.2。8图B.2普通荧光显微镜观察PI对美澳型核果褐腐病菌孢子染色效果图9激光共聚焦显微镜观察FDA对美澳型核果褐腐病菌孢子染色效果见图C.1。激光共聚焦显微镜观察PI对美澳型核果褐腐病菌孢子染色效果见图C.2。图C.2激光共聚焦显微镜观察PI对美澳型核果褐腐病菌孢子染色效果图2005,24(5):554-557.2016,35(9):1099-1105.2009,28(2):236-243.[9]FanJY,GuoLY,Jian-PingXU,etal..GeneticDiversityofPopμLationsofMoniliniafructicola(Fungi,Ascomycota,Helotiales)fromChina[J].JournalofEukaryoticMicrobiology,2010,57(2):206-212.[10]HuMJ,ChenY,ChenSN,etal..FirstreportofbrownrotofpeachcausedbyMonilin-iafructicolainsoutheasternChina.[J].PlantDis

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