GB/T 40980-2021 生化制品中还原糖的测定 柱前衍生高效液相色谱法（正式版）

ICS07.080CCSA40GB/T40980—2021生化制品中还原糖的测定柱前衍生高效液相色谱法国家市场监督管理总局国家标准化管理委员会IGB/T40980—2021本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由全国生化检测标准化技术委员会(SAC/TC387)提出并归口。1GB/T40980—2021生化制品中还原糖的测定柱前衍生高效液相色谱法乳糖10种还原糖的测定方法。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。5试剂或材料除特殊说明外，本方法所用试剂除流动相为色谱纯外均为分析纯，试验用水均为GB/T6682规定5.1磷酸二氢钾(KH₂PO₄)。5.3亚铁氰化钾[K₄Fe(CN)₆·3H₂O]。5.4乙酸锌[Zn(CH₃COO)₂·2H₂O]。5.7三氯甲烷(CHCl₃)。25.10三乙胺(C₆H₁5N)。解并定容至1000mL。5.161.0mol/LHCl溶液：取83.2mL浓盐酸，缓慢加入约800mL水中，冷却后加水定容半乳糖(CAS:59-23-4)、L-阿拉伯醛糖(CAS:5328-37-0)、D-木糖(CAS:31178-70-8)、L-岩藻糖(CAS:2438-80-4)、D-葡萄糖(CAS:50-99-7)、D-麦芽糖(CAS:3458-28-4)、D-乳糖(CAS:63-42-3),纯度均≥99%。6.3超声波提取器：功率250W,工作频率取有代表性的样品至少50g,固体样品(液体样品混匀直接待用)用电动粉碎机粉碎(过孔径为GB/T40980—2021称取样品5g(精确到0.001g)于50mL离心管中，加水至40mL,在沸水浴中提取15min,超声提7.3试样衍生分别吸取试样和不同浓度的标准工作溶液0.4mL于15mL具塞试管中，加入1.0mol/LNaOH溶液0.2mL,0.5mol/LPMP衍生溶液1.0mL,在70℃恒温水浴中反应60min;冷却至室温，加入仪器色谱参考条件如下：b)流动相：A相为含20mmol/LKH₂PO₄(三乙胺调节pH值至7.8±0.1)水溶液，B相为乙腈，梯度条件见表1;表1梯度洗脱参考条件时间/min流量/(mL/min)流动相B/%07.5标准曲线的制作10种还原糖标准品色谱图见附录A中图A.1。7.6样品的测定34GB/T40980—2021液中糖的浓度。8分析结果计算与表示试样中还原糖含量按照式(1)计算： (1)式中：X——样品中还原糖的含量，单位为克每一百克(g/100g);p———从标准工作曲线上得到的被测组分溶液质量浓度，单位为微克每毫升(μg/mL);V——样品溶液定容体积，单位为毫升(mL);m——所称试样的质量，单位为克(g)。计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留三位有效数字。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。本方法测定10种糖标准品的参考检出限和定量限见表2。表210种糖标准品检出限和定量限序号化合物检出限/(μg/mL)定量限/(ug/mL)l2甘露糖核糖0.2340.2410.7020.7233鼠李糖0.2370.7114乳糖0.4515麦芽糖0.4546葡萄糖0.2140.6427半乳糖0.3230.9698木糖0.2100.6309阿拉伯糖0.1930.579岩藻糖0.