2024版新教材高中生物第3章基因工程第1节重组DNA技术的基本工具课时作业新人教版选择性必修3

第1节重组DNA技术的基本工具必备学问基础练进阶训练第一层学问点1限制性内切核酸酶——“分子手术刀”1.限制性内切核酸酶的作用事实上就是把DNA上某些化学键断开，断开的化学键是下图中的（）A．①B．②C．③D．④2．下列有关基因工程中限制性内切核酸酶的描述，错误的是（）A．每一种限制性内切核酸酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列B．限制性内切核酸酶的活性受温度影响C．限制性内切核酸酶能识别和切割RNAD．限制性内切核酸酶可从原核生物中提取3．下列关于限制性内切核酸酶的叙述中，错误的是（）A．它能在特定位点切割DNA分子B．同一种限制性内切核酸酶切割不同的DNA分子产生的黏性末端能够很好地进行碱基配对C．它能随意切割DNA，从而产生大量DNA片段D．每一种限制性内切核酸酶只能识别特定的核苷酸序列4．如图表示某种酶切割目的基因的过程，相关叙述不正确的是（）A．图示用到的酶为限制性内切核酸酶，这类酶主要从原核生物中分别纯化出来B．图示限制性内切核酸酶切割后形成的末端是黏性末端，有的限制性内切核酸酶可切割形成平末端C．该限制性内切核酸酶能识别的碱基序列是GAATTC，切点在G和A之间D．限制性内切核酸酶的名称往往是依据发觉者姓名来命制的5．下列黏性末端属于同一种限制性内切核酸酶切割而成的是（）A．①②B．①③C．①④D．②③学问点2DNA连接酶——“分子缝合针”6.基因工程是在DNA分子水平上进行的操作，该操作过程中科学家所用的“分子缝合针”缝合的部位是（）A．碱基对之间的氢键B．碱基与脱氧核糖之间C．核苷酸中的磷酸与脱氧核糖之间D．DNA双链上的磷酸二酯键7．以下有关DNA连接酶的叙述，正确的是（）A．能连接氢键B．能连接单个脱氧核苷酸C．T4DNA连接酶只能连接黏性末端D．T4DNA连接酶可以连接平末端8．下列关于DNA连接酶的理解正确的是（）A．其化学本质是蛋白质B．DNA连接酶可以复原DNA分子中的氢键C．它不能被反复运用D．在基因工程操作中可以用DNA聚合酶代替DNA连接酶9．下列关于DNA连接酶的叙述，正确的是（）A．DNA连接酶不须要识别特定的脱氧核苷酸序列B.一种DNA连接酶只能连接一种黏性末端C．将单个脱氧核苷酸加到某DNA片段末端，形成磷酸二酯键D．连接两条DNA链上碱基之间的氢键学问点3基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”10.[2024·浙江杭州高二校考期中]下列关于质粒的存在及本质的叙述，错误的是（）A．一个大肠杆菌可含有多个质粒B．质粒是一种小型环状分子C．质粒存在于拟核区D．质粒的化学本质是DNA11．质粒作为“分子运输车”的条件是（）①能够自我复制②双链环状RNA分子③有一个至多个限制酶切点④有标记基因⑤真核细胞中没有A．①②③④⑤B．①②③④C．①③④D．②③⑤12．基因工程中可用作载体的是（）①质粒②噬菌体③病毒④动物细胞核A．②③④B．①②④C．①②③D．①③④13．下列关于质粒的叙述，正确的是（）A．质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器B．质粒是细菌细胞质中能够自主复制的小型环状DNA分子C．质粒只有在导入宿主细胞后才能在宿主细胞内复制D．细菌质粒的复制过程确定是在宿主细胞外独立进行的14．作为基因的运输工具——载体，必需具备的条件之一及理由是（）A．必需是细菌质粒，这样对受体细胞无害B．必需具有一个或多个限制酶切割位点，以便于目的基因插入C．必需具有抗生素抗性基因，以便受体细胞能更好的存活D．必需是环状DNA分子，这样更简洁进入受体细胞15．下列关于细菌质粒的叙述，正确的是（）A．全部的质粒都可以作为基因工程中的载体B．是独立于细菌拟核DNA之外的双链DNA分子，不与蛋白质结合C．质粒对侵入的宿主细胞都是无害的D．细菌质粒的复制过程都是在宿主细胞内独立进行的实力素养综合练进阶训练其次层1．[2024·新疆兵团二中校考]下列与核酸相关酶的叙述，正确的是（）A．RNA聚合酶和解旋酶的功能完全相同B．RNA复制酶和逆转录酶的产物相同C．DNA酶和限制性内切核酸酶作用的化学键一样D．DNA连接酶和DNA聚合酶的底物相同2．下列关于基因工程的基本工具的说法中，正确的是（）A．基因工程中的工具酶有限制性内切核酸酶、DNA连接酶和载体B．DNA连接酶可将随意的DNA片段通过形成磷酸二酯键而连接起来C．质粒上必需有标记基因才可作为载体D．限制性内切核酸酶不仅仅能切割外源DNA，也能切割自身的DNA分子3．下列有关限制性内切核酸酶的叙述中正确的是（）A．用限制酶切割一个DNA分子中部，获得一个目的基因时，被水解的磷酸二酯键有2个B．限制性内切核酸酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的几率就越大C．—CATG↓—和—G↓GATCC—序列被限制性内切核酸酶切出的黏性末端碱基数不同D．只有用相同的限制性内切核酸酶处理含目的基因的片段和质粒，才能形成重组质粒4．[2024·河南南阳中学校考]下列关于几种酶作用的叙述，不正确的是（）A．E.coliDNA连接酶既可以连接平末端，又可以连接黏性末端B．RNA聚合酶能与基因的特定区段结合，催化遗传信息的转录C．DNA连接酶能将两个DNA片段连接为一个DNA分子D．限制酶不是一种酶，而是一类酶5．甲DNA分子用三种方式酶切时得到的片段长度如图所示，下列叙述错误的是（）A.甲DNA分子上没有HindⅢ的酶切位点B．甲有2个BamHⅠ的酶切位点C．甲是环状DNA分子D．HindⅢ和BamHⅠ所切断的化学键类型相同6．如图表示三种酶分别作用于DNA分子的不同部位，①②③这三种酶依次是（）A．DNA连接酶、限制酶、解旋酶B．限制酶、解旋酶、DNA连接酶C．解旋酶、限制酶、DNA连接酶D．限制酶、DNA连接酶、解旋酶7．某线性DNA分子含有3000个碱基对（bp），先用限制酶a切割，再把得到的产物用限制酶b切割，得到的DNA片段大小如下表。限制酶a和b的识别序列和切割位点如图所示。下列有关说法错误的是（）a酶切割产物（bp）b酶再次切割产物（bp）1600；1100；300800；300A．在该DNA分子中，a酶与b酶的识别序列分别有3个和2个B．a酶与b酶切出的黏性末端可相互连接C．a酶与b酶切断的化学键均为磷酸二酯键D．a酶与b酶识别切割的序列不同体现了酶的专一性

8.[2024·江苏连云港中学校考]（不定项）下列关于限制酶和DNA连接酶的理解，错误的是（）A．限制酶能在特定部位的两个核苷酸之间切断磷酸二酯键B．DNA连接酶可以复原DNA分子中的氢键，将两条DNA片段的黏性末端之间的缝隙连接起来C.在基因工程操作中，可以用DNA聚合酶代替DNA连接酶D．限制酶广泛存在于动植物体内，微生物内很少分布9.如图为体外对DNA分子进行切割和连接的示意图，请据图回答下列问题：（1）EcoRⅠ是一种酶，其识别序列是，切割位点是与之间的键，切割产生的DNA片段末端形式为。（2）将不同来源的DNA片段“缝合”起来，须要酶或酶，它们均属于酶，作用是，其中能“缝合”两个双链DNA片段的平末端的酶是。10．依据基因工程的有关学问，回答下列问题：（1）限制酶切割DNA分子后产生的DNA片段，其末端类型通常有和。（2）质粒载体用限制酶X（识别的序列由6个核苷酸组成）切割后产生的片段如下：eq\a\vs4\al(AATTC……G,G……CTTAA)该酶识别的序列为，切割的部位是之间的磷酸二酯键。（3）为使切割后的载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用限制酶X切割外，还可用限制酶Y切割，两种酶共同的特点是。（4）按其来源不同，基因工程中所运用的DNA连接酶有两类，即DNA连接酶和DNA连接酶，其中后者只能连接一种末端。（5）基因工程中除质粒外，和也可作为载体。11．下图中的图1和图2分别表示的是EcoRⅠ限制酶和SmaⅠ限制酶的作用示意图。请思索回答问题：（1）EcoRⅠ限制酶和SmaⅠ限制酶的化学本质是，其单体是。（2）EcoRⅠ限制酶识别的碱基序列是，EcoRⅠ限制酶和SmaⅠ限制酶的识别序列不相同，说明限制酶具有性。（3）由图2可知，当限制酶在它识别序列的切开时，产生的末端是平末端；要将图1中的末端再连接起来，须要用。（4）1970年，阿尔伯（W.Arber）等在细菌中发觉了第一个限制酶，而在该细菌中没有此限制酶的识别序列，推想该限制酶在细菌细胞中的作用可能是。探究·实践DNA的粗提取与鉴定1．某同学用洋葱进行“DNA的粗提取与鉴定”试验，下列操作错误的是（）A．加入研磨液后用力进行快速、充分的研磨B．用蛋白酶纯化过滤后的研磨液中的DNAC．加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌D．加二苯胺试剂混匀后沸水浴加热2．[2024·广东一模]下列有关“DNA的粗提取与鉴定”试验的叙述，正确的是（）A．簇新猪血、菜花等动植物材料均可用于DNA的粗提取B．DNA不溶于体积分数为95%的冷酒精而溶于2mol/L的NaCl溶液C．在研磨植物细胞时加入研磨液是为了溶解细胞壁D.溶有DNA的NaCl溶液中加入二苯胺试剂后即呈蓝色3．[2024·辽宁锦州高二校考]下列关于“DNA的粗提取与鉴定”试验的叙述，正确的是（）A．预冷的酒精溶液（体积分数为99.5%的乙醇）可用来进一步纯化粗提取的DNAB．DNA析出过程中，玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物C．用同样方法从等体积兔血和鸡血中提取的DNA量相近D．用二苯胺试剂鉴定DNA须要进行50～65℃水浴加热4．[2024·辽宁朝阳北票市高级中学高二校考]下列关于“DNA的粗提取与鉴定”试验的叙述，错误的是（）A．利用DNA和蛋白质在不同浓度NaCl溶液中的溶解度差异提取DNAB．DNA不溶于酒精，在2mol/L的NaCl溶液中不能溶解C．提取DNA时，在切碎的洋葱中加入适量洗涤剂有利于DNA的释放D．用二苯胺试剂鉴定DNA时，溶液蓝色深浅反映DNA含量多少5．[2024·河南南阳中学校考]下列关于“DNA的粗提取与鉴定”试验的叙述，错误的是（）A．羊的成熟红细胞可作为提取DNA的材料B．提取植物细胞的DNA时，须要加入确定量的研磨液C．预冷的酒精溶液能抑制核酸水解酶活性，防止DNA水解D．在沸水浴条件下，DNA与二苯胺试剂反应呈现蓝色6．下列关于“DNA的粗提取与鉴定”试验的叙述，正确的是（）A．把香蕉果肉放入研钵中，倒入95%的酒精进行充分研磨B．在漏斗中垫上滤纸，将研磨液过滤入离心管中C．将预冷的95%的酒精溶液加入离心获得的上清液中，静置可见丝状物D．在含有絮状物的试管中加入亚甲基蓝，进行水浴加热显蓝色7．在“DNA的粗提取与鉴定”试验中，假如试验材料是植物细胞，须要进行研磨并搅拌。下列相关说法正确的是（）A．在切碎的植物材料中加入确定量的洗涤剂和蒸馏水，充分研磨后过滤获得滤液B．加入洗涤剂是为了瓦解细胞膜和核膜C．要快速搅拌产生泡沫以加速细胞膜的溶解D．先加入洗涤剂，搅拌和研磨后再加入食盐8．利用簇新洋葱作为试验材料提取DNA时，下列操作正确的是（）A．向DNA溶液中加入50%的冰酒精后DNA会与蛋白质分别并析出B．利用DNA在低温下遇二苯胺试剂反应呈蓝色的特性对其进行鉴定C．研磨前向研钵中加入适量无水乙醇可以提取到更多的DNAD．将晾干的丝状物置于2mol/L的NaCl溶液中会发生溶解现象9．如图是某同学在“DNA的粗提取与鉴定”试验中的两个操作步骤示意图，下列叙述错误的是（）A．图1中用玻璃棒卷起的丝状物为粗提取的DNAB.图1所示操作的原理是DNA不溶于酒精，而蛋白质等杂质溶于酒精C．图2试管1的作用是证明2mol·L－1NaCl溶液遇二苯胺出现蓝色D．图2试管2中未将DNA溶于2mol·L－1NaCl溶液中，可能导致蓝色变更不明显10．（不定项）如图为“DNA粗提取与鉴定”试验的部分操作流程。下列相关叙述错误的是（）A．将图1中的研磨液过滤后保留沉淀B．图2过程，用玻璃棒进行交叉搅拌会使DNA析出更快C．图2析出得到的白色丝状物只能溶于2mol·L－1的NaCl溶液中D．图3对提取后的DNA进行鉴定，两支试管中均要加入二苯胺试剂11.DNA在NaCl溶液中的溶解度是随着NaCl溶液浓度的变更而变更的。（1）下列NaCl溶液中能使DNA析出最彻底的一种是；溶解度最高的一种是。A.质量浓度为0.14mol·L－1B．质量浓度为2mol·L－1C．质量浓度为0.15mol·L－1D．质量浓度为0.3mol·L－1（2）DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些物质却可以溶于酒精溶液，利用这一原理可以，可以推想溶于酒精中的物质可能有。（3）利用DNA遇变蓝色的特性，将该物质作为鉴定DNA的试剂。其试验过程要点是向盛有DNA的试管中加入4mL的。混合匀整后，将试管置于5min，待试管后，视察试管中溶液颜色的变更，这个试验也说明DNA耐温。12．关于DNA粗提取的试验材料的选择，经过了多次试验效果的比较，最终选择鸡血作为试验材料。请据图完成下列问题：（1）鸡血细胞中红细胞（“含”或“不含”）细胞核，家鸡属于鸟类，新陈代谢旺盛，因而血液中细胞的数目较多，可以为试验供应丰富的。（2）试验前由老师制备血细胞液供应应同学们作试验材料，而不用鸡全血，主要缘由是。（3）生活在牧区的人们，实行牛、羊和马血较便利，若他们按试验要求完成试验步骤后，结果是很难提取到DNA。这是因为这些动物和人类一样________________________________________________________________________。（4）若选用动物肝脏作为试验材料，在提取之前，最好增加程序，使组织细胞更易分别。13．下图为“DNA的粗提取与鉴定”试验的相关操作。据图请回答：（1）图中试验材料A可以是等。（2）通过上述所示步骤得到滤液C后，再向滤液中加入2mol·L－1的NaCl溶液的目的是，再过滤得到滤液D，向滤液D中加入蒸馏水的目的是。（3）在“DNA的粗提取与鉴定”试验中，将含有确定杂质的DNA丝状物分别放入体积为2mL的4种溶液中，经搅拌后过滤，获得下表所示的4种滤液，含DNA最少的是滤液。1研磨液中搅拌研磨后过滤滤液E22mol·L－1的NaCl溶液中搅拌后过滤滤液F30.14mol·L－1的NaCl溶液中搅拌后过滤滤液G4预冷的95%的酒精溶液中搅拌后过滤滤液H（4）DNA鉴定的原理是_______________________________________。第1节重组DNA技术的基本工具必备学问基础练1．答案：B解析：限制性内切核酸酶能识别特定的序列，并在特定位点切割，断裂的化学键是磷酸与脱氧核糖之间的磷酸二酯键，且DNA的结构有方向性，因此断裂的磷酸二酯键是脱氧核糖3号位上碳与下一个脱氧核糖5号位上的磷酸形成的磷酸二酯键，即图中②，B正确，A、C、D错误。2．答案：C解析：限制性内切核酸酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，故每一种限制性内切核酸酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，A正确；酶的作用条件和顺，酶的活性易受温度、pH等条件的影响，故限制性内切核酸酶的活性受温度的影响，B正确；限制性内切核酸酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，不能识别和切割RNA，C错误；限制性内切核酸酶主要从原核生物中提取，D正确。3．答案：C解析：限制性内切核酸酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并能在特定位点切割DNA分子，A正确；同一种限制性内切核酸酶切割不同的DNA分子时，由于识别位点相同，所产生的末端相同，能够进行碱基互补配对，B正确；每种限制性内切核酸酶只能识别特定的核苷酸序列，并在特定的位点上切割DNA分子，而不能随意切割DNA分子，C错误；酶具有专一性，一种限制性内切核酸酶只能识别一种特定的核苷酸序列，D正确。4．答案：D解析：依据图示，该酶切割目的基因后形成黏性末端，则该酶为限制性内切核酸酶，这类酶主要从原核生物中分别纯化出来，A正确；图示限制性内切核酸酶切割后形成的末端是黏性末端，有的限制酶可切割形成平末端，B正确；由题图可知，该限制性内切核酸酶能识别的碱基序列是GAATTC，切点在G和A之间，C正确；限制性内切核酸酶的名称往往是用生物属名的头一个字母与种加词的头两个字母组成，表示这个酶是从哪个生物中分别出来的，D错误。5．答案：B解析：限制性内切核酸酶识别的核苷酸序列往往具有回文结构，切割后形成的黏性末端能够互补配对，图中①③能够互补，其他的不能互补，所以①③属于同一种限制性内切核酸酶切割而成的。B正确，A、C、D错误。6．答案：D解析：在基因工程的操作中，“分子缝合针”是DNA连接酶，DNA连接酶能够催化DNA双链上的磷酸二酯键形成。7．答案：D解析：DNA连接酶是将两个DNA片段连接形成磷酸二酯键，A错误；能连接单个脱氧核苷酸的是DNA聚合酶，DNA连接酶能连接的是两个DNA片段，B错误；E.coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，可用于连接黏性末端和平末端，但连接平末端效率相对较低，C错误，D正确。8．答案：A解析：DNA连接酶的化学本质是蛋白质，A正确；DNA连接酶可以复原DNA分子中的磷酸二酯键，B错误；酶只变更反应速率，反应前后自身的物质的量不发生变更，能被反复运用，C错误；DNA连接酶是同时连接双链的切口，而DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸加到已有的脱氧核苷酸片段的末端，因此在基因工程操作中不行以用DNA聚合酶代替DNA连接酶，D错误。9．答案：A解析：DNA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和脱氧核糖，不须要识别特定的脱氧核苷酸序列，A正确；DNA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和脱氧核糖，所以一种DNA连接酶可以连接多种黏性末端，B错误；DNA连接酶连接的是两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，DNA聚合酶是将单个脱氧核苷酸加到某DNA片段末端，形成磷酸二酯键，C错误；DNA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和脱氧核糖，形成磷酸二酯键，D错误。10．答案：C解析：质粒存在于细菌拟核DNA之外，一个大肠杆菌可含有多个质粒，A正确，C错误；质粒是一种小型双链环状DNA分子，其本质是DNA，B、D正确。11．答案：C解析：质粒作为“分子运输车”的条件是能够自我复制、有一个至多个限制酶切点、有标记基因、对受体细胞无害，质粒是双链DNA分子，真核细胞也有质粒，故选C。12．答案：C解析：常用的基因工程载体为质粒，另外噬菌体、动植物病毒也可作为基因工程载体，即C正确，A、B、D错误。13．答案：B解析：质粒是存在于细菌中的一种环状DNA分子，不是细胞器，A错误；质粒是一种袒露的、结构简洁、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制实力的双链环状DNA分子，B正确；在体外，若赐予适宜的条件，质粒也可能进行复制，C错误；有的质粒可以整合到宿主细胞的染色体DNA上，如大肠杆菌的Ti质粒的T－DNA，D错误。14．答案：B解析：常用的载体有质粒、噬菌体、动植物病毒，但必需对受体细胞无害，A错误；载体具有一个或多个限制酶切割位点，以便于目的基因插入，B正确；载体必需具有标记基因，以便于进行目的基因的鉴定和筛选，C错误；质粒是环状DNA分子，而噬菌体和动植物病毒不是环状DNA，D错误。15．答案：B解析：自然的质粒不能干脆作为载体，基因工程中用到的质粒都是在自然质粒的基础上进行过人工改造的，A错误；质粒是独立于细菌拟核DNA之外的双链DNA分子，不与蛋白质结合，B正确；作为载体的质粒必需是平安的，对受体细胞无害，但并不是全部的质粒均具有该条件，C错误；在体外，若赐予适宜的条件，质粒也可能进行复制，D错误。实力素养综合练1．答案：C解析：RNA聚合酶用于转录，催化核糖核苷酸之间磷酸二酯键的形成，解旋酶用于DNA的复制，解旋，破坏氢键，A错误；RNA复制酶用于RNA的复制，催化子链RNA的合成，逆转录酶用于以RNA为模板合成DNA的逆转录过程中，B错误；DNA酶水解DNA，破坏磷酸二酯键，限制性内切核酸酶用于切割DNA，破坏磷酸二酯键，作用的化学键一样，C正确；DNA连接酶用于连接两个DNA片段之间的磷酸二酯键，DNA聚合酶用于连接单个的脱氧核苷酸，D错误。2．答案：C解析：限制酶和DNA连接酶才是基因工程的工具酶，载体不是酶，A错误；DNA连接酶只能催化具有互补黏性末端或平末端的DNA片段之间形成磷酸二酯键，B错误；质粒作为载体的必备条件之一就是要有标记基因，C正确；限制酶不切割自身DNA分子，只切割外源DNA，以疼惜自身DNA的平安，D错误。3．答案：B解析：用限制酶切割一个DNA分子中部，获得一个目的基因时，须要切割目的基因的两侧，因此要断裂4个磷酸二酯键，A错误；限制性内切核酸酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的几率就越大，B正确；—CATG↓—和—G↓GATCC—序列被限制性内切核酸酶切出的黏性末端碱基数均为四个，C错误；不同的限制酶切割也可能形成相同的末端序列，因此用不同限制酶处理含目的基因的片段和质粒，也能形成重组质粒，D错误。4．答案：A解析：E.coliDNA连接酶只能连接黏性末端，A错误；RNA聚合酶能与基因的特定位点(启动子)结合，催化遗传信息的转录，形成RNA，B正确；DNA连接酶能使不同脱氧核苷酸的磷酸与脱氧核糖连接，形成磷酸二酯键，即将两个DNA片段连接为一个DNA分子，C正确；限制酶是一类酶，包含多种类型，一种限制酶只能识别一种特定核苷酸序列，且使该序列特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，D正确。5．答案：A解析：分析题图，甲DNA分子中，HindⅢ单独运用时，DNA长度不变；BamHⅠ单独运用时切割为两个片段，说明该酶在甲DNA分子上至少有一个酶切位点；BamHⅠ和HindⅢ联合切割甲DNA分子时，被切割形成3个片段，说明甲DNA分子为环状DNA分子，并且其上含有一个HindⅢ的酶切位点，有两个BamHⅠ的酶切位点，A错误，B、C正确；HindⅢ和BamHⅠ所切断的化学键类型相同，都是磷酸二酯键，D正确。6．答案：C解析：①作用的部位是氢键，因此①是解旋酶；②作用的部位是磷酸二酯键，因此②是限制酶；③作用的部位是两个DNA片段的缺口，因此③是DNA连接酶。7．答案：A解析：分析题表可知，a酶可以把原有DNA切成3段，说明a酶的识别序列有2个；b酶把1600的DNA切成大小均为800的两个片段，把1100的DNA切成大小分别为800和300两个片段，且a酶和b酶的识别位点不同，说明b酶的识别序列有2个，A错误；a酶与b酶切出的黏性末端相同，用DNA连接酶可以将它们连接起来，B正确；a酶和b酶属于限制酶，限制酶切割的化学键都是磷酸二酯键，C正确；a酶与b酶切割后产生的黏性末端相同，但是两者识别切割的脱氧核苷酸序列不同，说明两种酶的底物不同，体现了酶的专一性，D正确。8．答案：BCD解析：限制酶能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并且在特定部位的两个核苷酸之间切断磷酸二酯键，A正确；DNA连接酶可以复原DNA分子中的磷酸二酯键，将两条DNA片段的黏性末端之间的缝隙连接起来，B错误；DNA聚合酶将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键，DNA连接酶是连接两个DNA的片段，形成磷酸二酯键。在基因工程操作中，不行以用DNA聚合酶代替DNA连接酶，C错误；限制酶主要来源于微生物，D错误。9．答案：(1)限制5′—GAATTC—3′鸟嘌呤脱氧核苷酸(或G)腺嘌呤脱氧核苷酸(或A)磷酸二酯黏性末端(2)E.coliDNA连接T4DNA连接DNA连接催化两个脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键，将两个双链DNA片段“缝合”起来T4DNA连接酶解析：(1)EcoRⅠ是一种限制酶，限制酶能够识别特定的脱氧核苷酸序列，并在特定位点进行切割，据图可知，EcoRⅠ识别序列是5′—GAATTC—3′，切割位点是G与A之间的磷酸二酯键；由于该酶的切割位点在识别序列的中轴线两侧，故切割形成的末端是黏性末端。(2)将不同来源的DNA片段“缝合”起来，须要DNA连接酶，具体包括E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶；DNA连接酶的作用是催化两个脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键，将两个双链DNA片段“缝合”起来；其中能“缝合”两个双链DNA片段的平末端的酶是T4DNA连接酶。10．答案：(1)平末端黏性末端(2)5′—GAATTC—3′G和A(3)两种限制酶切割后形成的黏性末端相同(4)T4E．coli(5)噬菌体动植物病毒解析：(1)限制酶切割DNA分子后产生的DNA片段，其末端类型通常有黏性末端或平末端。(2)将图中片段两端的黏性末端对接后可以看出限制酶X识别的序列为6个核苷酸组成的—GAATTC—，互补链是—CTTAAG—，切割的位点为G和A之间的磷酸二酯键。(3)为使切割后的载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用限制酶X切割外，还可用限制酶Y切割，则两种限制酶切割后形成的黏性末端必需相同。(4)按其来源不同，基因工程中所运用的DNA连接酶有两类，即T4DNA连接酶和E.coliDNA连接酶，E.coliDNA连接酶，来源于大肠杆菌，可用于连接黏性末端；T4DNA连接酶，来源于T4噬菌体，可用于连接黏性末端和平末端。(5)基因工程中常用的载体有质粒、噬菌体和动植物病毒。11．答案：(1)蛋白质氨基酸(2)5′—GAATTC—3′专一性(3)中轴线E．coliDNA连接酶或T4DNA连接酶(4)切割外来DNA，起到防卫作用解析：(1)EcoRⅠ限制酶和SmaⅠ限制酶的化学本质是蛋白质，蛋白质是生物大分子，其单体是氨基酸。(2)分析题图1可知，EcoRⅠ限制酶识别的碱基序列是5′—GAATTC—3′，SmaⅠ限制酶的识别序列是5′—CCCGGG—3′，EcoRⅠ限制酶和SmaⅠ限制酶的识别序列不相同，说明限制酶具有专一性。(3)由图2可知，当限制酶在它识别序列的中轴线切开时，产生的末端是平末端；DNA连接酶可以连接两个DNA片段，要将图1中的末端再连接起来，须要用E.coliDNA连接酶或T4DNA连接酶。(4)1970年，阿尔伯(W.Arber)等在细菌中发觉了第一个限制酶，而在该细菌中没有此限制酶的识别序列，推想该限制酶在细菌细胞中的作用可能是切割外来DNA，起到防卫作用。探究·实践DNA的粗提取与鉴定1．答案：A解析：加入研磨液后研磨动作要轻缓、松软，A错误；蛋白酶能够分解蛋白质，因此能起到纯化DNA的目的，B正确；加入酒精后用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓，以免引起DNA分子的断裂，C正确；DNA可与二苯胺试剂在沸水浴条件下作用显蓝色，D正确。2．答案：B解析：猪是哺乳动物，其成熟的红细胞中无细胞核，不含DNA，因此簇新猪血不能用于提取DNA，A错误；DNA不溶于体积分数为95%的冷酒精，但能溶于2mol/L的NaCl溶液中，因此可用酒精进一步纯化DNA，B正确；在研磨植物细胞时加入研磨液(洗涤剂和食盐)，洗涤剂的作用是溶解细胞膜和核膜，而食盐的作用是提高DNA的溶解度，C错误；溶有DNA的NaCl溶液中加入二苯胺试剂，沸水浴加热后，颜色呈蓝色，D错误。3．答案：B解析：预冷的酒精溶液(体积分数为95%的乙醇)可用来进一步纯化粗提取的DNA，A错误；DNA析出过程中，用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物，搅拌操作要和顺，以防DNA断裂，B正确；兔是哺乳动物，其成熟的红细胞中没有DNA，因此用同样方法从等体积兔血和鸡血中提取的DNA量不行能相近，C错误；在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会呈现蓝色，D错误。4．答案：B解析：DNA和蛋白质在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，据此可以提取DNA，A正确；DNA可以在2mol/L的NaCl溶液中溶解，B错误；在提取洋葱细胞的DNA时，在切碎的洋葱中加入确定量的洗涤剂，作用是溶解细胞膜和核膜，有利于DNA的释放，C正确；用二苯胺试剂鉴定DNA时，溶液蓝色深浅反映DNA含量多少，D正确。5．答案：A解析：羊的成熟红细胞没有细胞核，因此不行作为提取DNA的材料，A错误；提取植物细胞的DNA时，须要加入确定量的研磨液(洗涤剂和食盐)，洗涤剂的作用是溶解细胞膜和核膜，而食盐的作用是提高DNA的溶解度，B正确；预冷的酒精溶液具有两个功能：第一，能抑制核酸水解酶活性，防止DNA水解；其次，DNA不溶于酒精溶液，而细胞中的某些蛋白质溶于酒精溶液，因此利用酒精溶液可以将DNA析出，C正确；二苯胺是鉴定DNA的试剂，在沸水浴条件下，DNA与二苯胺反应呈现蓝色，D正确。6．答案：C解析：把香蕉果肉放入研钵中，倒入研磨液进行充分研磨，A错误；在漏斗中垫上纱布，将研磨液过滤入离心管中，B错误；DNA不溶于酒精，因此可用体积分数为95%冷酒精析出DNA，静置2～3分钟，可见丝状物，C正确；在含有絮状物的试管中加入二苯胺，在沸水浴条件下显蓝色，D错误。7．答案：B解析：在切碎的植物材料中加入确定量的洗涤剂和食盐，充分研磨后过滤获得滤液，这是因为洗涤剂能溶解细胞膜和核膜，有利于DNA的释放；食盐的主要成分是NaCl，有利于DNA的溶解，A错误；加入洗涤剂是为了溶解细胞膜和核膜，有利于DNA的释放，B正确；加入洗涤剂后，动作要轻缓、松软，否则简洁产生大量的泡沫，不利于后续步骤的操作，C错误；洗涤剂和食盐同时加入后搅拌研磨，D错误。8．答案：D解析：冷却的95%的酒精，能溶解滤液中包括蛋白质在内的大部分有机物，但并不溶解DNA，从而可以析出并提取DNA，A错误；在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色，因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂，B错误；研磨前向研钵中添加的液体是洗涤剂，目的是溶解细胞膜和核膜，使DNA更易释放，C错误；在2mol/L的NaCl溶液中DNA易溶解，故将晾干的丝状物置于2mol/L的NaCl溶液中会发生溶解现象，D正确。9．答案：C解析：DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精，所以图1中溶液a为酒精溶液，其中用玻璃棒卷起的丝状物为粗提取的DNA，A、B正确；图2试管1的作用是证明2mol·L－1NaCl溶液遇二苯胺不会出现蓝色，C错误；DNA易