福建省海滨学校、港尾中学新高考生物二模试卷及答案解析

福建省海滨学校、港尾中学新高考生物二模试卷注意事项：1．答题前，考生先将自己的姓名、准考证号填写清楚，将条形码准确粘贴在考生信息条形码粘贴区。2．选择题必须使用2B铅笔填涂；非选择题必须使用0．5毫米黑色字迹的签字笔书写，字体工整、笔迹清楚。3．请按照题号顺序在各题目的答题区域内作答，超出答题区域书写的答案无效；在草稿纸、试题卷上答题无效。4．保持卡面清洁，不要折叠，不要弄破、弄皱，不准使用涂改液、修正带、刮纸刀。一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1．一只杂合长翅雄果蝇（Aa）与一只残翅雌果蝇杂交，因一方减数分裂异常导致产生一只三体长翅雄果蝇。已知三体在减数分裂过程中，三条中随机两条配对，剩余一条随机分配至细胞一极。为确定该三体果蝇的基因组成（不考虑基因突变），让其与残翅雌果蝇测交，下列说法不正确的是（）A．三体长翅雄果蝇可能是精原细胞减数分裂第一次或第二次分裂异常导致的B．三体长翅雄果蝇可能是卵原细胞减数分裂第一次或第二次分裂异常导致的C．如果测交后代长翅：残翅=3：1，则该三体果蝇的基因组成为AAaD．如果测交后代长翅：残翅=1：1，则该三体果蝇的基因组成为Aaa2．果蝇的红眼和白眼由一对等位基因（W/w）控制。让一只纯合的红眼雌果蝇与一只白眼雄果蝇交配得到F1，F1全为红眼；F1雌雄个体随机交配得到F2。为了确定W/w是位于常染色体上，还是位于X染色体上，下列数据中不需要统计的是（）A．F2中雌性个体的性状分离比B．F2中雄性个体的性状分离比C．F2中白眼果蝇的性别比例D．F2中红眼果蝇与白眼果蝇的比例3．将一种对青霉素敏感的细菌分别培养在装有液体培养基（不含青霉素）的锥形瓶和100只小试管中。培养一段时间后，从锥形瓶和100只小试管中各取一定量菌液分别接种到含青霉素的培养基上。24h后统计每个培养基上的青霉素抗性菌的菌落数。实验结果见下图。据此判断，下列叙述不合理的是（）A．试管中细菌发生基因突变的时间或数量不同B．青霉素抗性菌的产生是自发基因突变的结果C．锥形瓶中的基因突变后代在培养液中被混匀了D．实验结果说明基因突变具有不定向性和低频性4．核糖体RNA(rRNA)通过转录形成，与核糖核蛋白组装成核糖体前体，进一步成熟，成为翻译的场所。翻译时rRNA参与催化肽键的连接。下列相关叙述错误的是A．rRNA的合成需要核DNA做模板B．原核生物中也有合成rRNA的基因C．mRNA上结合多个核糖体可缩短一条肽链的合成时间D．rRNA可降低氨基酸间脱水缩合所需的活化能5．某生物兴趣小组发现一种植物的三对相对性状：紫花（A）与白花（a）、高茎（B）与矮茎（b）、圆粒（D）与皱粒（d）。现用一植株甲与白花矮茎皱粒（aabbdd）植株杂交得到F1，然后对F1进行测交，得到F2的表现型及比例为紫矮皱∶白矮皱∶紫矮圆∶白矮圆=3∶3∶1∶1。下列判断正确的是（）A．亲本中植株甲的表现型为紫花矮茎圆粒B．由题意可判断三对基因独立遗传C．F1的基因型为AabbDd，产生的基因型为AbD的配子所占比例为1/4D．若让F2中的紫矮圆植株自交，则子代的花色全为紫色6．RNA聚合酶运行过快会导致与DNA聚合酶相“撞车”而使DNA折断，引发细胞癌变。研究发现，一种特殊酶类RECQL5可与RNA聚合酶结合减缓其运行速度，扮演“刹车”的角色，从而抑制癌症发生。下列叙述正确的是（）A．RECQL5与RNA聚合酶结合会导致翻译过程减缓B．若浆细胞不能合成RECQL5，其细胞核内也不会发生“撞车”现象C．DNA聚合酶与RNA聚合酶均可通过碱基互补配对而与DNA结合D．DNA聚合酶与RNA聚合酶均可催化氢键的断裂和磷酸二酯键的形成二、综合题：本大题共4小题7．（9分）基因定点整合可替换特定基因，该技术可用于单基因遗传病的治疗。苯丙酮尿症是由PKU基因突变引起的，将正常PKU基因定点整合到PKU基因突变的小鼠胚胎干细胞的染色体DNA上，替换突变基因，可用来研究该病的基因治疗过程。定点整合的过程是：从染色体DNA上突变PKU基因两侧各选择一段DNA序列HB1和HB2，根据其碱基序列分别合成HB1和HB2，再将两者分别与基因、连接，中间插入正常PKU基因和标记基因，构建出如图所示的重组载体。重组载体和染色体DNA中的HB1和HB2序列发生交换，导致两者之间区域发生互换，如图所示。（1）构建重组载体时，常用的工具酶有________。该实验用小鼠胚胎干细胞作为PKU基因的受体细胞以培育出转基因小鼠，除了胚胎干细胞能大量增殖外，还因为胚胎干细胞_________。（2）为获得小鼠的胚胎干细胞，可将小鼠囊胚中的_________取出，并用_________处理使其分散成单个细胞进行培养，培养过程中大部分细胞会贴附在培养瓶的表面生长，这种现象称为___________。（3）用图中重组载体转化胚胎干细胞时，会出现PKU基因错误整合。错误整合时，载体的两个中至少会有一个与一起整合到染色体DNA上。已知含有的细胞具有G418的抗性，、的产物都能把DHPG转化成有毒物质而使细胞死亡。转化后的胚胎干细胞依次在含有G418及同时含有G418和DHPG的培养液中进行培养，在双重选择下存活下来的是__________的胚胎干细胞，理由是_________。（4）将筛选得到的胚胎干细胞培育成小鼠，从个体生物学水平检测，若小鼠__________，说明PKU基因成功表达。8．（10分）将外源基因整合到叶绿体基因组中并成功表达，这就是叶绿体转基因技术，该技术能有效改良植物的品质。请回答下列问题：（1）若要在短时间内大量扩增外源基因，可采用PCR技术，该技术利用了_______________的原理。（2）对大多数高等植物而言，与传统的细胞核转基因相比，叶绿体转基因更稳定，因其不会随_____(填“花粉”或“卵细胞”)传给后代，从而保持了_________(填“父本”或“母本”)的遗传特性。（3）利用_______________处理植物体细胞可得到原生质体，再通过_____________法将目的基因导入原生质体，当原生质体再长出__________________时，便可通过植物组织培养技术培养出相应的转基因幼苗。（4）一个完整的基因表达载体应该包括启动子、_________________________________等，启动子位于基因的首端，它是____________________，有它才能启动基因转录。9．（10分）癌细胞表面蛋白“PDL-1”与T细胞表面蛋白“PD-1”特异性结合后，可抑制T细胞活性并启动其凋亡，导致肿瘤细胞发生免疫“逃逸”。研究者对“PD-1”基因进行克隆、表达及生物学活性鉴定，为制备抗体打基础。研究中所用引物α和β碱基序列见图1、几种常用限制酶名称及识别序列与酶切位点见图2：α链：5'-TCACTCGAGACCATGCAGATCCCACAGGCGCCC-3'β链：5'-CTCGAATTCTCAGAGGGGCCAAGAGCAGTG-3'图1（1）首先提取细胞中的mRNA反转录生成____________________作为模板；设计含有不同的限制酶切点的α和β序列为引物，通过____________________技术扩增目的基因。（2）选用图1中的两种名称分别为____________________的限制酶将“pIRES2-EGFP质粒”载体进行双切，再用DNA连接酶将其与目的基因拼接，构建表达载体。该表达载体的组成，除了目的基因、标记基因抗卡那霉素基因外，还必须具有____________________等。（3）而后一定温度下，与经过处理的感受态大肠杆菌混合培养在含有_____________培养基中，可筛选出已经完成转化的大肠杆菌，继续培养该种大肠杆菌以扩增重组DNA。（4）将扩增后的“pIRES2-EGFP载体/PD-1重组DNA”转入可高度表达外源基因的原代293T细胞。一段时间后，为确定PD-1基因是否表达，检测细胞膜表面是否具有____________________。为判断其是否具有生物学活性和功能，则可裂解293T细胞，提取该物质看能否与____________________发生结合，从而阻断“PD-1与PDL-1信号通路”。研究中还会有一步骤，只将“pIRES2-EGFP载体”转入293T细胞，其目的是_________________________。10．（10分）果蝇红眼与白眼（A或a）、长翅与小翅（B或b）直刚毛与焦刚毛（C或c）灰身与黑身（D或d），这四对相对性状各受一对等位基因控制。回答下列问题：（1）某研究小组做了如下实验：用灰身果蝇与黑身果蝇杂交，F1既有灰身又有黑身且比例1：1。能据此实验判断灰身与黑身的显隐性吗？若能，请用遗传图解分析；若不能，请从该实验的亲本、子代中选择实验材料，设计实验来确定这对相对性状的显隐性___________________。（要求：写出实验思路、预期实验结果、得出结论）（2）若A（a）、B（b）、D（d）、F（f）这四对等位基因都位于常染色体上，现有四个纯合品系：①aaBBDDFF、②AAbbDDFF、③AABBddFF、④AABBDDff。请以上述品系为材料，完善实验设计来确定这四对等位基因是否分别位于四对染色体上（注：不考虑发生染色体变异和染色体交叉互换）：设计思路：选择____________六个杂交组合，分别得到F1，再自交得F2。结果结论：若各杂交组合的F2中均出现四种表现型，且比例为____________，则可确定这四对等位基因分别位于四对染色体上。11．（15分）在冬季部分城市出现雾霾，这与秸秆野外焚烧有-定关系。微生物学家试图通过微生物降解技术使秸秆尽快腐烂，以增加上壤肥力并缓解环境污染。请回答下列有关问题：（6）微生物学家试图从富含纤维索的土壤中筛选出纤维素分解菌，应使用以纤维素为唯一碳源的培养基进行筛选，再采用___________进行鉴定，为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验，发酵方法有__________和______两种。（3）纤维素酶是一种复合酶，其中_________可以将纤维素分解成纤维二糖，继而在_________作用下分解成葡萄糖。（3）最终在培养基中筛选出了如下表所示的两种纤维素分解菌，其中降解纤维素能力较强的是____________________。菌种菌落直径：C（mm）透明圈直径：H（mm）H/C细菌Ⅰ6．63．33．3细菌Ⅱ4．65．06．6（4）若想将纤维素分解菌中的纤维素酶提取出来用于工业生产，需要先将其固定化，一般_______（适宜或不适宜）采用包埋法，原因是______________________________。

参考答案一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1、C【解析】

一只杂合长翅雄果蝇（Aa）与一只残翅雌果蝇（aa）杂交，因一方减数分裂异常导致产生一只三体长翅雄果蝇基因型可能为AAa或Aaa。基因型为AAa的三体产生的原因可能为父本减数第二次分裂A、A所在姐妹染色单体没分开，产生AA的精子再与a卵细胞结合而成。基因型为Aaa的三体产生的原因可能有两种：①父本减数第一次分裂时含有A、a基因的同源染色体没有分离（减数第二次分裂正常）产生Aa的精子再与a的卵细胞结合而成，②母本减数第一次分裂时含a、a基因的同源染色体没有分开，或是减数第二次分裂时姐妹染色单体没有分开产生aa的卵细胞再与A的精子结合而成。【详解】AB、据上分析可知，该三体长翅雄果蝇基因型可能为AAa或Aaa，产生的原因可能是精原细胞减数分裂第一次或第二次分裂异常导致的，也可能是卵原细胞减数分裂第一次或第二次分裂异常导致的，AB正确；C、如果该三体果蝇的基因组成为AAa，产生的配子类型及比例是AA：a：Aa：A=1：1：2：2，与残翅雌果蝇（aa）测交，后代的基因型及比例为AAa：aa：Aaa：Aa=1：1：2：2，则长翅：残翅=5：1，C错误；D、如果该三体果蝇的基因组成为Aaa，产生的配子类型及比例是A：aa：Aa：a=1：1：2：2，与残翅雌果蝇（aa）测交，后代的基因型及比例为Aa：aaa：Aaa：aa=1：1：2：2，则长翅：残翅=1：1，D正确。故选C。2、D【解析】

基因位置的判断方法。在常染色体上还是X染色体上的判断方法：1.已知性状的显隐关系，通常采用隐性的雌性和显性的雄性的个体进行杂交，若后代中雌雄个体表现型一致，则位于常染色体上；若后代中雌性表现为显性，雄性表现为隐性，则相关基因位于X染色体上。2.未知性状的显隐关系，通常采用正反交实验，若正反交结果相同，则位于常染色上；若正反交结果不同，则位于X染色体上。【详解】为了确定W/w是位于常染色体上，还是位于X染色体上应统计F2中雌性个体的性状分离比、F2中雄性个体的性状分离比，再进行比较，若雌雄两性的性状分离比一致则基因位于常染色体上，若不一致说明性状的传递与性别有关，基因位于X染色体上；也可统计F2中白眼果蝇的性别比例，根据白眼果蝇的性别比例是否为1∶1进行判断；若只统计红眼果蝇与白眼果蝇的比例，无法判断与性别的关系，即D错误。故选D。3、D【解析】

分析题干信息可知：将同种细菌分别培养在锥形瓶和100只小试管中，培养一段时间后，锥形瓶中各培养基的抗药性差别不大，试管中的抗药性差别很大，可认为锥形瓶为相同环境，试管为不同的环境，据此分析作答。【详解】A、由于各个试管可看作不同的环境，经试管培养后在不同培养基上的抗菌菌落差别较大，可推断试管中细菌发生基因突变的时间或数量不同，A正确；B、实验中的细菌放置于不含青霉素的液体培养基中，结果出现了抗性菌落，可推知青霉素抗性菌的产生是自发基因突变的结果，B正确；C、锥形瓶中的细菌在各个培养基培养后抗性菌落几乎相同，应为基因突变后代在培养液中被混匀的缘故，C正确；D、基因突变的不定向性是指基因突变可以向各种不同的方向发生突变，题干中只有抗菌一种性状，无法证明其有不定向性，D错误。故选D。【点睛】解答此题需要明确锥形瓶和不同试管在本实验中的作用，进而结合基因突变的特点分析作答。4、C【解析】

1、基因的表达即基因控制蛋白质的合成过程，包括转录和翻译两个主要阶段。

（1）转录：是指以DNA的一条链为模板，按照碱基互补配对原则，合成RNA的过程。

转录的场所：细胞核；

转录的模板：DNA分子的一条链；

转录的原料：四种核糖核苷酸（“U”代替“T”与“A”配对，不含“T”）；

与转录有关的酶：RNA聚合酶；

转录的产物：mRNA，tRNA，rRNA。

（2）翻译：是指以mRNA为模板，合成具有一定氨基酸排列顺序的蛋白质的过程。

翻译的场所：细胞质的核糖体上。

翻译的本质：把DNA上的遗传信息通过mRNA转化成为蛋白质分子上氨基酸的特定排列顺序。

2、RNA分子的种类及功能：

（1）mRNA：信使RNA；功能：蛋白质合成的直接模板；

（2）tRNA：转运RNA；功能：mRNA上碱基序列（即遗传密码子）的识别者和氨基酸的转运者；

（3）rRNA：核糖体RNA；功能：核糖体的组成成分，蛋白质的合成场所。【详解】rRNA是以DNA的一条链为模板转录形成的，因此rRNA的合成需要DNA做模板，A正确；原核生物也有核糖体也需要rRNA，所以原核生物中也有合成rRNA的基因，B正确；每个核糖体上都可以合成一条肽链，多个核糖体分别完成多肽链的翻译，C错误；rRNA能催化肽键的连接，可见其具有催化功能，即可降低氨基酸之间脱水缩合所需的活化能，D正确。

故选C。【点睛】本题主要考查基因表达的有关知识，解答本题的关键是掌握转录和翻译的过程以及多聚核糖体合成蛋白质的过程和意义。5、A【解析】

基因分离定律的实质：等位基因随着同源染色体的分开而分离。基因自由组合定律的实质：在减数分裂过程中，同源染色体上的等位基因彼此分离的同时，非同源染色体上的非等位基因自由组合。测交实验能够根据后代的表现型和比例确定亲本的基因型以及产生的配子的种类和比例。【详解】A、由于F1测交所得F2中紫矮皱∶白矮皱∶紫矮圆∶白矮圆=3∶3∶1∶1，即Aabbdd∶aabbdd∶AabbDd∶aabbDd=3∶3∶1∶1，去掉配子abd可以得到F1的配子及比例为：Abd∶abd∶AbD∶abD=3∶3∶1∶1，因此可推知F1的基因型为AabbDd和Aabbdd，由F1的基因型可推知亲本植株甲的基因型为AAbbDd表现型为紫花矮茎圆粒，A正确；B、根据题意及上述分析，在亲本与子代中只存在矮茎纯合子，只能确定紫花（A）与白花（a）、圆粒（D）与皱粒（d）这两对基因独立遗传，不能确定基因B、b与基因A、a，D、d的位置关系，因此无法确定三对基因是否独立遗传，B错误；C、根据F1测交所得F2中紫矮皱∶白矮皱∶紫矮圆∶白矮圆=3∶3∶1∶1，即Aabbdd∶aabbdd∶AabbDd∶aabbDd=3∶3∶1∶1，去掉配子abd可以得到F1的配子及比例为：Abd∶abd∶AbD∶abD=3∶3∶1∶1，因此可推知F1的基因型为AabbDd和Aabbdd，C错误；D、根据题意，F2中的紫矮圆植株的基因型为AabbDd，因此该植株自交会发生性状分离，D错误。故选A。【点睛】本题的突破口在于测交比例的灵活运用。利用测交后代的表现型及基因型的比例，逆推出相关配子的类型及比例，进而确定亲代的基因型。6、B【解析】

1、克里克提出的中心法则：（1）遗传信息可以从DNA流向DNA，即DNA的复制；（2）遗传信息可以从DNA流向RNA，进而流向蛋白质，即遗传信息的转录和翻译；后来中心法则又补充了遗传信息从RNA流向RNA以及从RNA流向DNA两条途径。2、基因表达包括遗传信息的转录和翻译过程，其中转录是DNA的一条链为模板合成RNA的过程，需要条件是：模板（DNA的一条链）、原料（核糖核苷酸）、酶（解旋酶和RNA聚合酶）和能量；翻译是以mRNA为模板合成蛋白质的过程，需要条件是：模板（mRNA）、原料（氨基酸）、酶、能量和tRNA。【详解】A、RECQL5与RNA聚合酶结合会导致转录过程减缓，A错误；B、浆细胞属于高度分化的细胞，不再进行分裂，因此不会进行DNA复制，其细胞核内不会发生“撞车”现象，B正确；C、DNA聚合酶与RNA聚合酶的化学本质是蛋白质，不存在碱基，C错误；D、DNA聚合酶不会催化氢键的断裂，D错误。故选B。二、综合题：本大题共4小题7、限制酶和DNA连接酶具有全能性内细胞团细胞胰蛋白酶或胶原蛋白酶贴壁生长正确互换整合正确互换整合后的染色体上只有只有，无、，具有G418抗性，故能在含有G418和DHPG的培养液中生长，错误互换整合后的细胞中染色体DNA上含有和至少1个，而、的产物都能把DHPG转化成有毒物质，故在含有G418和DHPG的培养液中错误整合的细胞死亡尿液中霉臭味显著降低【解析】

DNA重组技术至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体。构建重组载体时，首先需用限制性核酸内切酶切割目的基因和运载体，再用DNA连接酶连接目的基因和运载体形成重组载体。胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的内细胞团），因此获取的胚胎干细胞应取自囊胚的内细胞团。结合题图可知，正常互换后的染色体DNA上只有，而无、；错误整合时，载体的两个中至少会有一个与一起整合到染色体DNA上，故由于正确互换后的细胞染色体上有，无、，故对G418有抗性，可在含G418的培养液中正常生活，而错误互换后的染色体DNA上由于含有至少1个，而、的产物都能使细胞死亡，故错误互换的细胞不能生存，据此分析。【详解】（1）构建重组载体时，常用的工具酶有限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶。实验用小鼠胚胎干细胞作为PKU基因的受体细胞，除了胚胎干细胞能大量增殖外，还因为胚胎干细胞具有全能性。（2）为获得小鼠的胚胎干细胞，可将小鼠囊胚中的内细胞团细胞取出，并用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理使其分散成单个细胞进行培养，培养过程中大部分细胞会贴附在培养瓶的表面生长，这种现象称为贴壁生长。（3）已知含有的细胞具有G418的抗性，、的产物都能把DHPG转化成有毒物质而使细胞死亡，据分析可知，正确互换后的染色体上只有只有，无、，错误互换后的细胞中染色体DNA上含有和至少1个，因此，转化后的胚胎干细胞依次在含有G418及同时含有G418和DHPG的培养液中进行培养，在双重选择下存活下来的是正常互换整合的胚胎干细胞，原因是：正确互换后的染色体上只有只有，无、，具有G418抗性，故能在含有G418及同时含有G418和DHPG的培养液中生长，错误互换后的细胞中染色体DNA上含有和至少1个，而、的产物都能把DHPG转化成有毒物质，因此在含有G418和DHPG的培养液中死亡。（4）苯丙酮尿症是由于苯丙氨酸代谢途径中的酶缺陷，使得苯丙氨酸不能转变成为酪氨酸，导致苯丙氨酸及其酮酸蓄积，并从尿中大量排出，主要表现为智力低下，尿液中有霉臭味，将筛选得到的胚胎干细胞培育成小鼠，若PKU基因成功表达，则从个体生物学水平检测，小鼠尿液中霉臭味显著降低。【点睛】本题考查了基因工程和胚胎工程等相关知识，要求学生能够识记胚胎干细胞的来源，明确基因表达载体构建过程及目的基因的表达和检测，本题难点在于序列交换后细胞的筛选。8、DNA双链复制花粉母本纤维素酶和果胶酶农杆菌转化（或基因枪）细胞壁目的基因、标记基因、终止子RNA聚合酶结合和识别的部位【解析】

基因工程技术的基本步骤：

1、目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。

2、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。

3、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

4、目的基因的检测与鉴定：

（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。

（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】（1）PCR技术依据的原理是DNA双链复制。

（2）对大多数高等植物而言，与传统的细胞核转基因相比，叶绿体转基因更稳定，叶绿体转基因是属于细胞质遗传，具有母系遗传特点，而花粉中细胞质较少，受精卵中细胞质几乎来之卵细胞的，因此叶绿体转基因不会随着花粉遗传给后代。

（3）植物细胞壁的主要成分为纤维素和果胶，根据酶的专一性，可以利用纤维素酶和果胶酶

处理植物体细胞可得到原生质体，再通过农杆菌转化（或基因枪）法将目的基因导入原生质体，当原生质体再长出

细胞壁时，便可通过植物组织培养技术培养出相应的转基因幼苗。

（4）一个完整的基因表达载体应该包括启动子、目的基因、标记基因、终止子等，启动子位于基因的首端，它是RNA聚合酶结合和识别的部位，有它才能启动基因转录。【点睛】本题考查基因工程的有关知识，要求考生识记基因工程的工具及操作步骤；识记PCR技术的原理、条件等；了解转基因生物的安全性问题，识记基因表达载体的组成，难度适中。9、cDNAPCRXhoIEoRI启动子、终止子、复制原点卡那霉素PD-1蛋白PDL-1或答PD-1抗体作为对照【解析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因采用DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA采用分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质采用抗原—抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】（1）基因文库包括基因组文库和部分基因文库（cDNA）。其中基因组文库包含某种生物所有的基因，而部分基因文库只包含某种生物的部分基因，可以mRNA为模板反转录形成cDNA；由于PCR技术利用的是DNA分子复制的原理，所以用该cDNA进行PCR技术扩增短时间内可以获得大量的目的基因。（2）分析图1中碱基序列，α链上有“—CTCGAC—”识别序列，β链上有“—GAATTC—”碱基识别序列，与图2中XhoI限制酶和EoRI限制酶的识别序列相同。故选用XhoI限制酶和EoRI限制酶将“pIRES2-EGFP质粒”载体进行双切，再用DNA连接酶将其与目的基因拼接，构建基因表达载体。基因表达载体的组成包括目的基因、标记基因、启动子、终止子、复制原点等。（3）根据第（2）题可知，基因表达载体上的标记基因是卡那霉素抗性基因，因此一定温度下，与经过Ca2+处理的感受态大肠杆菌混合培养在含有卡那霉素的培养基，可筛选出已经完成转化的大肠杆菌。（4）基因表达的产物是蛋白质，一段时间后，为确定PD-1基因是否表达，可以检测细胞膜表面是否具有PD-1基因表达的PD-1蛋白。为判断其是否具有生物学活性和功能，可采用抗原—抗体杂交技术，即从裂解293T细胞中，提取PD-1蛋白看能否与PDL-1发生结合，从而阻断“PD-1与PDL-1信号通路”。为了增加实验的可信度，还需要设置对照实验，只将“pIRES2-EGFP载体”转入293T细胞，因为不含PD-1基因，所以“PD-1与PDL-1信号通路”不会阻断。【点睛】题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的概念、原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识在新的情景材料下分析运用。10、不能方法一：让表现型相同的亲代与子代作为材料若有性状分离，则所选材料的表现型为该相对性状的显性若无性状分离，则所选材料的表现型为隐性方法二：让子代表现型相同的作为材料若有性状分离，则所选材料的表现型为该相对性状的显性若无性状分离，则所选材料的表现型为隐性①×②、①×③、①×④、②×③、②×④、③×④9：3：3：1【解析】

孟德尔在做一对相对性状的纯合亲本杂交实验时，将F1能表现出来的亲本性状称为显性性状，而将在F1中未表现出来的另一个亲本的性状，称为隐性性状，并将在杂交后代中显性性状和隐性性状同时出现的现象称为性状分离。显隐性的判断方式主要有2种：①是一对相对性状的个体杂交，后代只有一种表现型，则该表现型为显性，由显性基因控制；②是相同表现型的个体杂交，后代出现另一种性状