江苏省姜堰区实验中学高三第三次模拟考试新高考生物试卷及答案解析

江苏省姜堰区实验中学高三第三次模拟考试新高考生物试卷注意事项：1．答题前，考生先将自己的姓名、准考证号填写清楚，将条形码准确粘贴在考生信息条形码粘贴区。2．选择题必须使用2B铅笔填涂；非选择题必须使用0．5毫米黑色字迹的签字笔书写，字体工整、笔迹清楚。3．请按照题号顺序在各题目的答题区域内作答，超出答题区域书写的答案无效；在草稿纸、试题卷上答题无效。4．保持卡面清洁，不要折叠，不要弄破、弄皱，不准使用涂改液、修正带、刮纸刀。一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1．下表中人体不同细胞的寿命和分裂能力不同，以下说法错误的是（）细胞种类寿命能否分裂小肠上皮细胞1~2天能癌细胞无限增殖能红细胞120天不能白细胞5~7天大多数不能A．吞噬细胞（白细胞的一种）的寿命比红细胞短，这与其吞噬病原体有关B．癌细胞的无限增殖是因为原癌基因突变为抑癌基因C．通常情况下，细胞的分化程度越高，细胞分裂能力越弱D．小肠上皮细胞寿命最短，与基因控制的衰老和凋亡有关2．下图是关于细胞膜结构与功能的关系网（d，e，f，h表示完整的细胞器），其不同膜结构间相互联系和转移的现象称为膜流，下列说法中正确的是（）注：虚线框内仅是物质转变与合成A．自养型生物都含有结构dB．一切细跑均能发生膜流现象C．膜流其实是生物膜流动性的体现，质壁分离与复合过程中发生了膜流D．细胞膜蛋白的更新与f→g→h→g→c途径有关3．下列关于种群和群落的叙述，正确的是A．种群是生物进化的基本单位，种群内出现个体变异是普遍现象B．退耕还林、退塘还湖、布设人工鱼礁之后都会发生群落的初生演替C．习性相似物种的生活区域重叠得越多，对资源的利用越充分D．两只雄孔雀为吸引异性争相开屏，说明行为信息能够影响种间关系4．科学研究发现有些人可能具有抵抗HIV侵染的能力，原因是其细胞中含有HLAB57基因，能使身体内产生更多功能强大的某种免疫细胞，该种免疫细胞能产生大量可束缚HIV的蛋白质。下列有关人体免疫调节的说法比较合理的是（）A．被HIV感染的人就是HIV患者B．机体只能依赖浆细胞产生的抗体消灭HIVC．艾滋病病人的直接死因是B细胞被攻击受损D．含有HLAB57基因的某些细胞可能具有识别HIV的能力5．将大肠杆菌放在含有15N标记的NH4C1培养液中培养后，再转移到含有14N的普通培养液中培养，8h后提取DNA进行分析，得出含15N的DNA占总DNA的比例为1/8，则大肠杆菌的分裂周期是A．4h B．2hC．1.6h D．1h6．下列关于细胞结构与组成成分的叙述，错误的是（）A．细胞膜、内质网膜和核膜含有的磷脂分子结构相同，但蛋白质不同B．盐酸能使染色质中的DNA与蛋白质分离，有利于DNA与健那绿结合C．细胞核、线粒体和叶绿体中都含有DNA、RNA和蛋白质D．内质网和高尔基体既参与物质加工，又参与物质运输二、综合题：本大题共4小题7．（9分）图1表示光合作用过程概要的模式图，其中，①-④表示化学反应，A-F代表物质。图2表示将某绿藻细胞悬浮液放入密闭的容器中，在保持一定的pH值和温度时，给于不同条件时细胞悬浮液中溶解氧浓度变化的模式图。据图回答问题：（1）写出下列反应或物质的名称。②_____；D_____。（2）据图2分析，该绿藻细胞的呼吸速率为_____微摩尔/分。（3）在图2中乙处给予光照时，分析瞬间ATP的变化为_____；在丙处添加CO2时，分析短时间内C5的变化为_____。（4）若在图2中丁处给予光补偿点（此时光合速率等于呼吸速率）的光照，则正确表示溶解氧变化的曲线是a～g中的_____。（5）若在图2中丁处加入使光反应停止的试剂，则正确表示溶解氧变化的曲线是a～g中的___________。（6）若在图2中丁处给予适宜条件，使溶解氧的变化如图中的b，预计1小时后，实际产生的氧气量为_____微摩尔。8．（10分）原生态椰子油是近年来活跃在国外市场上的一种新型植物油脂，常用酶解法进行提取，酶解法的原理是通过酶解除去椰奶中的蛋白质、纤维素和淀粉等物质，其流程如图所示，回答下列问题：（1）由生产流程可知，椰子油的提取一般采用压榨法进行提取，不采用水中蒸馏法提取的原因是_________________________________________。用蒸馏法提取芳香油时，当蒸馏瓶中的水和原料量一定时，影响精油提取量的主要因素_________________________。（2）一般在压榨前需将椰子皮干燥去水后要用石灰水浸泡，其目的是_______________________________________________________，在加水压榨过程中，为了使椰子油容易与水分离，应加入一定质量的______________________。（3）分析题干，酶解法发酵过程中加入的酶应有_____________________________，酶解发酵过程中要严格控制发酵的温度，原因是_________________________________________________________。（4）如图表示椰子油提取次数和出油率关系，据图分析欲同时考虑提取成本和经济效益，最佳的提取次数为____次。9．（10分）血糖调节过程复杂，有许多独特之处，需要多种分泌腺、组织细胞以及神经细胞的参与，异常的激素分泌可导致体内血糖含量异常变化，引起一些病症。回答下列相关问题：（1）血糖调节的腺体特殊：胰腺中不同细胞分泌的与血糖变化有关的物质均具有_________（写出一点）的特点，某同学认为胰腺中不同细胞分泌的物质在发挥作用后均会被灭活，该观点对吗?_________，试分析原因：____________________________________。（2）胰岛素和胰高血糖素的关系特殊：血糖浓度降低时，使胰岛A细胞分泌胰高血糖素的信号是___________________；胰高血糖素的分泌会_________（填“促进”或“抑制”）胰岛素的分泌，目的是___________________________。（3）血糖调节中枢具有一定的特殊性，其还是_________（写出两个）等的调节中枢。若在某次实验过程中，分别刺激与该中枢连接的神经纤维上的A、B两点均能引起某区域兴奋，如果两个位点同时受到刺激，则引起该中枢兴奋的反应强度将___________（填“减弱”“加强”或“不变”）。10．（10分）研究人员利用小鼠的单倍体ES细胞（只有一个染色体组），成功培育出转基因小鼠。其主要技术流程如图所示，请分析回答下列问题：（1）利用PCR技术可以扩增目的基因，PCR反应体系中除含缓冲液、模板DNA、dNTP（包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP）、引物外，还应含有____；引物应选用下图中____（填图中字母）。（2）在基因工程操作步骤中，过程①②称为___。已知氨苄青霉素不能有效杀死小鼠细胞，而一定浓度的G418能有效杀死不具有Neo′的小鼠细胞。结合上图推测，过程①选用的两种限制酶是___（填图中的编号），③处的培养液应添加____（填“氨苄青霉素”或“G418”）。（3）图中桑椹胚需通过____技术移入代孕小鼠子宫内继续发育，进行该操作前需对受体小鼠进行____处理。11．（15分）阅读下面材料并回答问题：疟原虫感染引起疟疾。疟原虫进入红细胞后，消耗宿主细胞的血红蛋白。通常这种受损的红细胞被运送到脾脏，红细胞被裂解，同时破坏疟原虫。可是，疟原虫却通过分泌把手形的蛋白，穿透红细胞表面并固定在血管内壁上来逃脱这一命运。几天后，感染者的免疫系统渐渐控制住了感染，可是一段时间内，一部分疟原虫改变了它们的把手形蛋白，与那些引发免疫反应的疟原虫不同了。感染这些疟原虫的细胞逃脱了免疫消灭，接着引发感染。科学家发现，疟原虫是通过抗原变异逃避被消灭的。疟原虫每进行一次分裂大约有2%的可变基因表达，这种不可思议的抗原变异速度，至今还没有完全弄明白究竟是怎么实现的。正处于研究中的一种以DNA为基础的新型疫苗可能对这种疾病有效。DNA疫苗包括一个质粒、来自病原体编码内部蛋白的基因，该基因对病原体的功能很重要且不会改变。当质粒侵入细胞时，它们携带的基因表达出蛋白质，但不会进入细胞核本身的DNA。病原体基因表达的蛋白突出在细胞表面，使它有标记，然后被T细胞消灭。在以后的真正感染时，免疫系统可以立刻反应。（1）疟原虫感染的红细胞被脾脏中的__________细胞裂解。（2）根据文中信息解释，免疫系统为什么不能彻底清除患者体内疟原虫?______________。（3）短文告诉我们，新型疫苗的化学本质是_____________，注射该疫苗后，最终引起机体产生特异性免疫反应的物质是________________________________。（4）新型疫苗与现行疫苗相比具有的优点是_________________________。（5）机体感染疟原虫后，参与体液免疫的细胞有哪些?________________。

参考答案一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1、B【解析】

1、细胞分化是指在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态，结构和生理功能上发生稳定性差异的过程。

2、衰老细胞的特征：（1）细胞内水分减少，细胞萎缩，体积变小，但细胞核体积增大，染色质固缩，染色加深；（2）细胞膜通透性功能改变，物质运输功能降低；（3）细胞色素随着细胞衰老逐渐累积；（4）有些酶的活性降低；（5）呼吸速度减慢，新陈代谢减慢。

3、细胞凋亡是由基因决定的细胞编程序死亡的过程。在成熟的生物体内，细胞的自然更新、被病原体感染的细胞的清除，是通过细胞凋亡完成的。

4、细胞癌变的根本原因是原癌基因和抑癌基因发生基因突变，其中原癌基因负责调节细胞周期，控制细胞生长和分裂的过程，抑癌基因主要是阻止细胞不正常的增殖。【详解】A、细胞凋亡的速率与它们的功能有关系，白细胞能吞噬进入人体的细菌和病毒以及代谢产生的对人体有害的“异物”，吞噬后就死亡并被排出，所以其凋亡的速率很快，A正确；

B、癌细胞的无限增殖是由原癌基因及抑癌基因突变引起的，B错误；

C、通常情况下，细胞的分化程度越高，其全能性就越低，细胞分裂能力就越弱，C正确；

D、人体不同组织的细胞寿命不同，是由遗传物质决定，与基因控制的衰老和凋亡有关，D正确。

故选B。【点睛】本题考查细胞的分化、细胞凋亡的过程以及细胞癌变的原因，学生应准确识记。2、D【解析】

膜流一个典型的实例是分泌蛋白的合成：在核糖体上翻译出的肽链进入内质网腔后，还要经过一些加工，如折叠、组装、加上一些糖基团等，才能成为比较成熟的蛋白质。然后，由内质网腔膨大、出芽形成具膜的小泡，包裹着蛋白质转移到高尔基体，把较成熟的蛋白质输送到高尔基体腔内，做进一步的加工，成为成熟的蛋白质。接着，高尔基体边缘突起形成小泡，把蛋白质包裹在小泡里，运输到细胞膜，小泡与细胞膜融合，把蛋白质释放到细胞外。d，e，f，h表示完整的细胞器，d为叶绿体，e为线粒体，f为内质网，h为高尔基体。【详解】A、d为叶绿体，自养型生物分为光能自养型（光能）和化能自养型（化学能），真核生物进行光合作用含有叶绿体，原核生物如蓝藻不含叶绿体也能进行光合作用，而有些细菌还能利用化学反应放出的能量合成有机物，因此自养型生物不一定都含有结构d，A错误；B、原核生物细胞结构中只有细胞膜才有膜结构，而膜流是指不同膜结构间相互联系和转移的现象，因此原核细跑不能发生膜流现象，B错误；C、质壁分离与复原过程为水分的进出过程，属于自由扩散，无膜流现象发生，C错误；D、细胞膜蛋白的更新与f（内质网）→g（囊泡）→h（高尔基体）→g（囊泡）→c（细胞膜）途径有关，D正确。故选D。【点睛】本题考查生物膜系统的结构和功能，关键是理解结构上直接相连的膜之间可直接转变，结构上间接相连的膜之间是以“出芽”的形式形成“囊泡”而发生膜的转移。3、A【解析】

种群指在一定时间内占据一定空间的同种生物的所有个体，种群是生物进化和繁殖的基本单位；群落指生活在一定的自然区域内，相互之间具有直接或间接关系的各种生物的总和，群落中会发生演替与信息传递，其中信息传递的作用包括三个方面：（1）个体：生命活动的正常进行，离不开信息的传递；（2）种群：生物种群的繁衍，离不开信息的传递；（3）群落和生态系统：能调节生物的种间关系，以维持生态系统的稳定。【详解】种群是生物进化与繁殖的基本单位，自然状态下由于存在突变与基因重组，因此种群内出现个体变异是普遍现象，A正确；初生演替是指一个从来没有被植物覆盖的地面，或者是原来存在过植被，但是被彻底消灭了的地方发生的演替；次生演替原来有的植被虽然已经不存在，但是原来有的土壤基本保留，甚至还保留有植物的种子和其他繁殖体的地方发生的演替；退耕还林、退塘还湖、布设人工鱼礁后原来的生存环境没有被完全破坏，因此其发生的群落演替属于次生演替，B错误；习性相近的物种的生活区域在一定范围内重叠的越多，对资源的利用越充分，但超过一定范围，会影响资源的再生能力，C错误；两只雄性孔雀为吸引异性争相开屏，说明生物种群的繁衍，离不开信息的传递的作用，D错误。4、D【解析】

关于“艾滋病”，考生可以从以下几方面把握：（1）艾滋病的中文名称是获得性免疫缺陷综合征（AIDS），其病原体是人类免疫缺陷病毒（HIV）。（2）艾滋病的致病原理：HIV病毒进入人体后，与人体的T淋巴细胞结合，破坏T淋巴细胞，使免疫调节受到抑制，使人的免疫系统瘫痪，最后使人无法抵抗其他细菌、病毒的入侵，让人死亡。（3）艾滋病的传播途径包括：血液传播、性传播、母婴传播。【详解】A、被HIV感染的人可能是HIV携带者，不一定是患者，A错误；B、正常机体应该依赖细胞免疫和体液免疫共同消灭侵入人体的抗原，B错误；C、由于T细胞被攻击受损，免疫力降低，艾滋病病人大多死于其他病原微生物的感染或恶性肿瘤，C错误；D、当HIV侵入人体时，能引起含有HLAB57基因的细胞产生相应的反应，推测应该是具有识别HIV的能力，D正确。故选D。5、B【解析】

细胞周期：连续分裂的细胞，从一次分裂完成时开始到下次分裂完成时为止；根据半保留复制可知，含15N的DNA分子有2个，占总DNA分子的比例为1/32则一个DNA分子经复制后得到64个，复制6次得到的；复制6次耗时6小时，则分裂周期是1小时。【详解】由于DNA是半保留复制，形成子代DNA分子中含有亲代链的DNA为2个，则2/2n=1/8则n=4，说明细胞分裂4次，则细胞周期=8÷4=2小时。故选：B。【点睛】本题的解题关键是能够根据含15N的DNA占总DNA的比例计算出复制的次数，进而进行相关计算。6、B【解析】

1、生物膜的成分：脂质、蛋白质和少量的糖类．磷脂构成了细胞膜的基本骨架．蛋白质分子有的镶在磷脂双分子层表面，有的部分或全部嵌入磷脂双分子层中，有的横跨整个磷脂双分子层。2、“观察DNA和RNA在细胞中的分布”实验原理：①DNA主要分布于细胞核中，RNA主要分布于细胞质中；②甲基绿和吡罗红对DNA、RNA的亲和力不同：利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色，可以显示DNA和RNA在细胞中的分布；③盐酸（HCl）能够改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色体中的DNA与蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合。3、分泌蛋白合成和分泌过程：附着在内质网上的核糖体合成蛋白质→内质网进行粗加工→内质网“出芽”形成囊泡→高尔基体进行再加工形成成熟的蛋白质→高尔基体“出芽”形成囊泡→细胞膜，整个过程还需要线粒体提供能量。【详解】A、细胞膜、内质网膜和核膜都以磷脂双分子层为基本支架，磷脂分子结构相同，但三种膜的功能不同这与各种膜上所含蛋白质的种类和数量有关，A正确；B、盐酸使染色质中的DNA与蛋白质分离，有利于DNA与染色剂（甲基绿）结合，B错误；C、细胞核、线粒体和叶绿体中都含有DNA、RNA和蛋白质，C正确；D、内质网和高尔基体都与蛋白质的加工、运输有关，D正确。故选B。【点睛】本题需要考生识记生物膜的结构，蛋白质是生命活动的承担者，掌握分泌蛋白的合成过程。二、综合题：本大题共4小题7、水的光解NADPH（[H]）2.5增加减少de750【解析】

题图是解答本题的切入点，从图1可知，①光能的吸收，②水的光解，③ATP个合成，④暗反应，A是水，B是氧气，C是CO2，D是NADPH，E是ATP，F是糖类。从图2分析可知，光照之前只进行呼吸作用，只需根据氧气吸收的总量比时间即可计算出呼吸速率。光照影响光合作用的光反应过程，它能促进ATP的生成和水的光解；在丙处添加CO2时，要考虑到二氧化碳影响的是光合作用的暗反应中的二氧化碳的固定。丁点以后，若曲线不变，则表示光合作用等于呼吸作用强度；若曲线上升，则表示光合作用大于呼吸作用强度；如果曲线下降，则表示光合作用小于呼吸作用或只进行呼吸作用。【详解】（1）由图1可知①应是色素吸收光能，②是水的光解，③是ADP形成ATP的过程，④是光合作用的暗反应，物质D是水的光解形成的，并且要参与暗反应应是[H]。（2）在光照开始之前，细胞只进行呼吸作用，呼吸作用第一阶段的场所为细胞质基质，第二、三两阶段发生在线粒体中；在0～4分细胞吸收的氧气的值=210-200=10微摩尔，因此该绿藻细胞的呼吸速率=10÷4=2.5微摩尔/分。（3）在乙处给予光照时，此时光合作用的光反应产生ATP增加，光反应的场所为叶绿体的类囊体薄膜。在丙处添加CO2时，会促进暗反应的二氧化碳的固定，从而导致C5的数量减少，而C3的数量增多。（4）如果丁处是光补偿点，则此时的呼吸作用强度与光合作用强度相同故氧气的量不会增加，应是曲线d。（5）若在丁处加入光反应抑制剂，此时绿藻细胞不能进行光合作用，只能进行呼吸作用，又恢复到0～4分时的状态，并且呼吸速率不变，因此e可以表示溶解氧变化的曲线。（6）实际产生的氧气量应是净氧气量和呼吸作用消耗的氧气量，由图可知每分钟的净氧气产生量是（290-260）/（12-9）=10微摩尔/分，由第（2）问可知呼吸作用消耗的氧气量是每分钟2.5微摩尔/分，故产生的氧气量是每分钟12.5微摩尔/分，在1h内共产生12.5×60=750微摩尔/分。【点睛】本题考查了影响光合作用和呼吸作用的环境因素，意在考查考生能从题目所给的图形中获取有效信息的能力；理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力；能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论的能力。8、水中蒸馏会导致原料焦糊和有效成分的水解等问题蒸馏时间和温度提高出油率，防止压榨时脱落，使压榨液的粘稠度不高，过滤时不会堵塞筛眼NaHCO3和Na2SO4蛋白酶、纤维素酶和淀粉酶温度会影响酶的活性3【解析】

植物芳香油的提取方法有三种：1.水蒸气蒸馏法提取，适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油，化学性质稳定，难溶于水，易溶于有机溶剂，能随水蒸汽一同蒸馏。2.压榨法，适用于柑橘、柠檬等易焦糊原料的提取。为提高出油率，需将柑橘皮干燥去水，并用石灰水浸泡。3.有机溶剂萃取法，适用范围广，要求原料的颗粒要尽可能细小，能充分浸泡在有机溶液中。干燥时要注意控制温度。温度太高、干燥时间太长会导致胡萝卜素的分解。【详解】（1）有些原料不适合采用蒸馏法提取的原因是水中蒸馏会导致原料焦糊和有效成分的水解等问题，蒸馏法提取芳香油时，当水和原料量一定时，影响精油提取量的主要因素是蒸馏时间和温度。（2）压榨前用石灰水浸泡，可以提高出油率，防止压榨时脱落，使压榨液的粘稠度不高，过滤时不会堵塞筛眼，在压榨过程中，为了使椰子油容易与水分离，可加一定量的NaHCO3和Na2SO4。（3）根据提意可知，酶解的目的是去除椰奶中的蛋白质、淀粉和纤维素，因此需要加入的酶是蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶，之所以要控制好温度，是因为温度会影响酶的活性。（4）分析图形，当提取到第三次时出油率几乎达到最大值，继续提取不会有明显的增加，因此最佳的提取次数为3次。【点睛】本题考查了植物有效成分的提取知识。意在考查考生能运用所学知识与观点，通过分析、比较、综合等方法对某些生物学问题进行解释，推理做出合理判断或得出正确结论的能力。9、微量、高效（特异性等，合理即可）不对胰腺包括内分泌腺和外分泌腺，外分泌腺产生的与糖类等物质分解有关的酶可以反复利用，内分泌腺分泌的激素具有发挥作用后被灭活的特点血糖浓度和神经递质促进机体通过合成和分泌胰高血糖素促进能源物质葡萄糖的产生，同时促进胰岛素的分泌使葡萄糖及时被组织细胞摄取并氧化分解产生能量体温、水盐不变【解析】

血糖平衡调节：1、人体正常血糖浓度：0.8-1.2g/L（低于0.8g/L：低血糖症；高于1.2g/L；高血糖症、严重时出现糖尿病。）2、人体血糖的三个来源：食物、肝糖元的分解、非糖物质的转化；三个去处：氧化分解、合成肝糖元肌糖元、转化成脂肪蛋白质等。3、血糖平衡的调节过程：血糖浓度过高，刺激胰岛B细胞促进胰岛素的分泌，加速组织细胞对血糖的摄取利用和储存，在低血糖的条件下，刺激胰岛A细胞分泌胰高血糖素，促进肝糖原分解和非糖物质转化成血糖。此外下丘脑中存在血糖调节中枢，通过相应的神经控制激素的分泌。【详解】（1）胰腺中不同细胞分泌的与血糖变化有关的物质有胰岛素和胰高血糖素等激素，激素均具有微量、高效，由体液运输，作用于靶细胞和靶器官等特点；胰腺中还有外分泌腺，外分泌腺产生的与糖类等物质分解有关的酶可以反复利用，内分泌腺分泌的激素具有发挥作用后被灭活的特点，所以该观点不正确。（2）胰高血糖素的分泌受到下丘脑发出神经的神经递质的信号和血糖浓度低的信号的刺激，所以信号是神经递质和血糖浓度；胰岛素是人体中唯一降低血糖的激素，促进组织细胞加速对血糖的摄取利用和储存，所以胰高血糖素的分泌会促进胰岛素的分泌，目的是机体通过合成和分泌胰高血糖素促进能源物质葡萄糖的产生，同时促进胰岛素的分泌使葡萄糖及时被组织细胞摄取并氧化分解产生能量。（3）血糖调节中枢在下丘脑，其上还有水盐调节中枢和体温调节中枢，由于中枢的兴奋是由离子的跨膜运输引起的，所以两个位点同时受到刺激，离子的进出量与单次刺激比较不会发生改变，则引起该中枢兴奋的反应强度将不变。【点睛】本题重点考查血糖调节的过程，难点是（2）中分析出胰岛素和胰高血糖素二者之间的关系，胰高血糖素的分泌促进胰岛素的分泌。10、热稳定的DNA聚合酶（或Taq酶）A和D基因表达载体的构建Ⅰ和ⅡG418胚胎移植同期发情【解析】

1.PCR反应的条件：模板DNA、dNTP（包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP）、引物、耐高温的DNA聚合酶，其中，dNTP的作用是合成DNA的原料、提供能量。

2.基因工程的操作步骤为：提取目的基因、构建基因表达载体、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测和鉴定。【详解】（1）根据分析可知，PCR反应体系中除含缓冲液、模板DNA、dNTP（包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP）、引物以外，还应含有耐高温的DNA聚合酶。为了扩增目的基因的片段，根据图示可知需要在引物A和D作用下以目的基因的两条链为模板合成子代目的基因。（2）由图可知，过程①②是将目的基因和运载体连接形成重组质粒，即基因表达载体的构建过程。重组质粒上的抗生素抗性基因可作为标记基因，其作用是有利于筛选出含有目的基因的细胞。根据题意可知，氨苄青霉素不能有效杀死小鼠细胞，而一定浓度的G418能有效杀死不具有Neo′的小鼠细胞，因此应选择Neo′作为标记基因，即质粒上Neo′不能用限制酶切割，则过程①应选用Ⅰ和Ⅱ两种限制酶，图中③处的培养液应添加G418以便于起到筛选的作用。（3）将桑椹胚通过胚胎