液相色谱仪管路堵塞的原因与解决方法 液相色谱解决方案

第第页液相色谱仪管路堵塞的原因与解决方法液相色谱解决方案液相色谱管路堵塞的原因：

1.没有很好过滤流动相；2.样品中有微粒；3.泵或进样器垫圈产生碎片；4.预柱、护柱和分析柱中漏出填料；5,毛刺和锉屑进入；6.流动相中的结晶盐；7.微生物8.系统中进入了其它颗粒性物质。

液相色谱管路堵塞解决方法：

系统中管路堵塞的现象很少见，常见的是烧结过滤片（玻璃砂芯）堵塞。用烧结过滤器或过滤片（孔径2—10um）能去掉堵塞管路的微粒（如0.25mm管径）。用系统分段法检查堵塞的管路，从后向前分别松开接头检查，找到堵塞管路后，应立刻拆下来疏导或换新。

假如是非刚性物质堵塞，如生物样品中的生化物质（蛋白质）、微生物等，可用极细的金属丝导通，也可以在火头上烧一烧，使有机物炭化，而后再导通。

假如是刚性物质堵塞，要导通则特别困难，接受反冲的方法有时能成功。就是将管子调头用泵冲洗。操作时要注意保护眼睛和暴露的皮肤，因堵塞物会以很高的速度冲出来。无法导通的管路要换上同样规格的管子。假如换上新管后又被堵塞，则应当停机检查上面提到的引起堵塞的几种原因。色谱柱是化学试验中zui常见、常用的化工仪器之一，正确而有效的使用方法，不仅能够延长色谱柱的使用寿命，也能确保试验的精准性。

1.”保护柱”的使用能延长色谱柱的使用寿命。”保护柱”是很短的色谱柱，填装和液相色谱柱相同的填料。正确使用”保护柱”，可以起到阻拦一些简单损坏液相色谱柱的物质的作用。从而达到延长柱子寿命的效果。相反，假如使用”保护柱”不当，可能会缩短色谱柱的使用寿命。例如，在保护柱使用过程中，假如污染达到确定程度而没有适时更换，累积的杂物很可能会冲入色谱柱中，反而会造成色谱柱损坏。因此，在使用”保护柱”时，zui紧要的是要知道什幺时候该换保护柱。该换的时候就必需要立刻更换。

2.选择高品质的色谱柱，并正确使用，这样可以延长色谱柱的使用寿命。一般认为同一厂牌、同一型号的色谱柱之间的品质都相同，对品质管理很严格的厂家而言，这说法是成立的。但假如厂家品质管理不够严格，即使是同一批号的新色谱柱之间的品质也有差异。所以，选用色谱柱时必需选择管理严格的高品质色谱柱，我们知道，任何色谱柱使用过后都会产生变化。尤其如在强酸或强碱条件下使用，色谱柱更易产生变化。因此，应尽量选用pH适用范围大的色谱柱。在开发新分析方法时，很多专家建议不要使用旧色谱柱。因色谱柱一经使用。柱性会更改；如此一来，使用旧色谱柱开发出来的新分析方法，很可能在再使用同厂牌的新色谱柱分析时。发生无法达到预定效果的情况。总的说。开发新分析方法时要使用品质好的新色谱柱；并且一支色谱柱使用在一种分析方法上；则色谱柱寿命可以延长。

3.定期冲洗色谱柱。一般柱子使用一段时间后总会有一些杂质累积在柱内，而且这些杂质不会随着流动相出来，会渐渐影响柱子的品质。这些杂质在后来的分析谱图上显现。从而造成显现怪峰、基线不公正现象。简单的解决方法是用较强的流动相冲洗。而且每次分析某一产品完成后冲洗。假如分析时使用缓冲剂﹐可以用水来取代缓冲剂。先使用有机和水的混合溶液为流动相冲洗缓冲剂。接着再用100%有机溶剂冲洗。假如直接用100%有机溶剂冲洗的话，缓冲剂很可能会沉淀出来，而损坏色谱柱的品质。使用10—20倍柱体积的量来冲洗基本就充分了。可以将100%有机溶剂冲洗的条件加在分析试验程序完毕后，如此一来每天在开机前都会用100%机溶剂冲洗。一般硅胶柱可以反冲洗处理﹐即是在将冲洗前将色谱柱倒反接后再冲洗。计划使用反冲洗处理前，先参考色谱柱的保养说明书。所以要真正保护色谱柱，使柱子的寿命延长，是使用”保护柱”和定期冲洗色谱柱

色谱柱可分为填充柱和开管柱两大类。多为金属或玻璃制作。有直管形、盘管形、U形管等形状。液相色谱通常均接受填充柱。

色谱柱的分别效果取决于所选择的固定相，以及色谱柱的制备和操作条件。

色谱是一种分别分析手段，分别是核心，因此担负分别作用的色谱柱是色谱系统的心脏。对色谱柱的要求是柱效高、选择性好，分析速度快等。市售的用于HPLC的各种微粒填料如多孔硅胶以及以硅胶为基质的键合相、氧化铝、有机聚合物微球（包括离子交换树脂）、多孔碳等，其粒度一般为3,5,7,10m等，柱效理论值可达5～16万/米。对于一般的分析只需5000塔板数的柱效；对于同系物分析，只要500即可；对于较难分别物质对则可接受高达2万的柱子，因此一般10～30cm左右的柱长就能充分多而杂混合物分析的需要。

柱效受柱内外因素影响，为使色谱柱达到较佳效率，除柱外死体积要小外，还要有合理的柱结构（尽可能削减填充床以外的死体积）及装填技术。即使可以的装填技术，在柱中心部位和沿管壁部位的填充情况总是不一样的，靠近管壁的部位比较疏松，易产生沟流，流速较快，影响冲洗剂的流形，使谱带加宽，这就是管壁效应。这种管壁区大约是从管壁向内算起30倍粒径的厚度。在一般的液相色谱系统中，柱外效应对柱效的影响远宏大于管壁效应。

在选择液相色谱柱之前，先多了解本身的样品和杂质，他们的类型结构、极性、酸碱性、分子量大小等等。

1、样品是极性的且弱酸性的；就可以选择C18在100%酸性水溶液条件下检测，即要选择承受100%纯水且对极性化合物保留很好的色谱柱。

2、假如样品极性太强，或酸性太强；可以选择CN，NH2，或硅胶柱，HILIC（亲水色谱），也有使用C18+强阴离子对试剂或强阴离子交换色谱柱（缺点是离子对试剂平衡时间长，对流动相pH要求比较精密，否则很难重复试验，另外离子对试剂很难洗下来，基本上用了离子对的色谱柱就不能再用于其它试验）

3、若样品是碱性的；可选择高纯硅胶柱（高纯硅胶缺少金属杂质，且硅胶端基封尾）或一些经过修饰的C18柱（如极性嵌入技术或碱去活技术等），他们都会削减碱性化合物的拖尾，一般会选择中性或偏碱的条件下做，由于这样可加添碱性样品的保留。

4、假如碱性化合物的极性太强，或碱性太强；可以选择宽pH的C18色谱柱在高pH值检测（优点是方法开发简单，缺点是目前实现这