2025届高考生物一轮总复习学生用书选择性必修3第十单元生物技术与工程第46讲微生物的培养技术及应用考点二微生物的选择培养和计数

考点二微生物的选择培育和计数1．选择培育基(1)概念：在微生物学中，允许__________的微生物生长，同时__________________其他种类微生物生长的培育基。(2)原理：人为供应有利于________________________生长的条件(包括养分、温度和pH等)，同时________________________其他微生物的生长。(3)实例：分别分解尿素的细菌的选择培育基。①设计原理：分解尿素的细菌能合成__________，催化尿素分解产生__________，为其生长供应氮源。②配方设计：以______________为唯一______________。[易错提示]能在选择培育基上生长的不愿定是所须要的目的菌。原则上选择培育基只能允许特定种类的微生物生长，但事实上，微生物的培育是一个特殊困难的问题，有些微生物可以利用其他微生物的代谢物进行生长繁殖，因此能在选择培育基上生长的微生物不愿定都是所需的微生物，还须要进一步鉴定。2．微生物的选择培育(稀释涂布平板法)(1)土壤取样：铲取土样，将样品装入纸袋中。(2)(3)(4)培育视察。①待涂布的菌液被培育基__________后，将平板倒置，放入30～37℃的______________中培育1～2d。②在涂布有合适浓度菌液的平板上就可以视察到分别的______________。3．微生物的数量测定(1)(2)[易错提示]关于“选择菌落数在30～300的平板”的两个理解误区：只得到1个菌落数在30～300的平板不符合试验的重复原则，易受到偶然因素的影响；得到3个或3个以上菌落数在30～300的平板也不愿定正确，如得到3个平板，菌落数分别为230、34、240，虽然菌落数均在30～300之间，但由于34与另外两个平板上的菌落数差异较大，应找出缘由并重新试验。[答案自填]1.(1)特定种类抑制或阻挡(2)目的菌抑制或阻挡(3)①脲酶NH3②尿素氮源2.(2)90(3)0.1酒精酒精燃尽冷却(4)①吸取恒温培育箱②单菌落3.(1)活菌30～300平均值少菌落(2)血细胞计数板血细胞计数板显微镜活菌死菌快速直观[教材命题点思索]1．为了筛选可分解尿素的细菌，在配制培育基时，应选择________________(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素＋NH4NO3”)作为氮源，不选择其他两组的缘由是________________________________________________。提示：尿素其他两组都含有NH4NO3，能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用NH4NO3，不能起筛选作用2．对细菌计数时往往会产生试验误差，稀释涂布平板法计数的值比实际值________，缘由是____________________________________；显微镜计数法计数的结果比实际值________，缘由是_____________________________________。提示：偏小当两个或多个细胞连在一起时，平板上视察到的只是一个菌落偏大显微镜下无法区分细胞的死活，计数时包括了死菌3．经多次规范操作、重复试验，平板上均出现________________的菌落，初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌，但鲜牛奶供应商仍认为此菌并非鲜牛奶携带。因此，要对本操作进行完善，完善的方案是______________________________________________________。提示：金黄色葡萄球菌为增加试验结论的严谨性，应增加空白比照组4．甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量，在同一稀释倍数下得到以下结果：甲同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是110、140和149，取平均值133；乙同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是27、169和176，取平均值124。有人认为这两位同学的结果中，乙同学的结果可信度低，其缘由是______________________________________________________。提示：乙同学的结果中，1个平板的计数结果与另外2个相差悬殊，结果的重复性差两种纯化细菌的方法的比较项目平板划线法稀释涂布平板法纯化原理通过接种环在固体培育基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培育基表面将菌液进行一系列的梯度稀释，稀释度足够高时，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞主要步骤平板划线操作系列稀释操作和涂布平板操作接种工具接种环涂布器平板示意图关键操作接种环在固体培育基表面连续划线①一系列的梯度稀释；②涂布平板操作优点可以视察菌落特征，对混合菌进行分别可以计数，可以视察菌落特征缺点不能计数操作困难，须要涂布多个平板共同点都要用到固体培育基；都需进行无菌操作；都会在培育基表面形成单菌落；都可用于视察菌落特征考向1微生物的选择培育1．(2024·广东选择考)探讨者拟从堆肥中取样并筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌。依据堆肥温度变更曲线(如下图所示)和选择培育基筛选原理来推断，下列最可能筛选到目标菌的条件组合是()A.a点时取样、尿素氮源培育基B．b点时取样、角蛋白氮源培育基C．b点时取样、蛋白胨氮源培育基D．c点时取样、角蛋白氮源培育基解析：选D。由题图可知，随着堆肥时间的延长，堆肥温度先上升后保持稳定，a点时堆肥温度最低，c点时堆肥温度最高。该试验的目的是筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌，应当用以角蛋白为唯一氮源的培育基进行筛选培育，且应当在高温条件下(c点时)取样，D项符合题意。2．(2024·茂名一模)探讨人员欲筛选出能高效降解一次性口罩(主要是由C、H两种元素组成的聚丙烯纤维)的细菌，设计了如下图所示的流程。回答下列问题：(1)土壤是微生物的自然培育基，该培育基能为微生物的生长供应的四大养分物质分别是碳源、________________________。(2)通过相关试验来选择较合适的土壤样品，该试验的自变量是________________，最适合作为选择土壤样品的指标是___________________________________________________________________。(3)图中“甲”指的是________，运用的是液体培育基，目的是__________________________________________________________。(4)将分别纯化得到的不同菌种分别接种到鉴别培育基上，鉴别培育基应以______________为唯一碳源，并加入能与之结合的显色剂。设不同菌种的菌落面积为s，菌落四周透亮圈的面积为S，选择S/s的值________的菌落，就是能高效降解一次性口罩的目的菌群。答案：(1)氮源、水和无机盐(2)土壤样品的种类一次性口罩的腐烂程度(3)选择培育提高聚丙烯纤维降解菌的比例和密度(4)聚丙烯纤维大考向2微生物的分别与计数3．(2024·大湾区一模)热纤梭菌是一种能高效降解纤维素的嗜热厌氧细菌，可分泌一种多酶复合体，从而将纤维素水解为可溶性糖，在农林废弃物的转化利用中具有应用价值。下图是筛选该菌的过程，下列相关叙述错误的是()A.从牛粪堆的深层取样比从表层取样更加合理B．甲、丙都是以纤维素为唯一碳源的选择培育基C．用平板乙统计菌落数可精确反映该菌的真实数量D．丙中纤维素的残留量可反映该菌降解纤维素的实力解析：选C。热纤梭菌是一种嗜热厌氧细菌，与表层相比，牛粪堆的深层氧气含量低、温度高，更适合热纤梭菌生存，A项正确；题图是筛选能高效降解纤维素的嗜热厌氧细菌，因此甲、丙都是以纤维素为唯一碳源的选择培育基，B项正确；依据题图可知，平板乙中的菌落是利用稀释涂布平板法接种的菌种，由于当两个或多个细胞连在一起时，平板上视察到的只是一个菌落，因此用该方法统计的菌体数量会比活菌的实际数量少，C项错误；热纤梭菌可分泌一种多酶复合体，其可将纤维素水解为可溶性糖，因此丙中纤维素的残留量可反映该菌降解纤维素的实力，D项正确。4．尿素简洁保存，是目前运用量较大的一种化学氮肥，尿素分子并不能干脆被农作物吸取，只有被尿素分解菌分解成氨之后才能被植物利用。如图是从土壤中分别、计数尿素分解菌的过程，下列有关分析正确的是()A．若②过程稀释了10倍，则乙锥形瓶里盛有9mL无菌水B．③的接种方法可用平板划线法或稀释涂布平板法C．a、b、c培育基可以用牛肉膏蛋白胨培育基D．若①②过程分别稀释了10倍，a、b、c培育基上的菌落数依次为57、58、56个，则10g土样中的尿素分解菌数量约为5.7×109个解析：选D。②过程加入了2mL菌液，若稀释了10倍，则乙锥形瓶里应盛有18mL无菌水，A项错误；平