第一章中药药理学实验须知

内蒙古医学院实验教学教材

供中药学、中医学、中西医结合专业本科教学用

《中药药理学实验手册》

EXPERIMENTANDGUIDE

FORPHARMACOLOGYOFTRADITIONCHINESEMEDICINE

内蒙古医学院中医学院

二零---年

编写说明

为适应我国高等中医药院校中药本科教育的改革和发展、满足市场竞

争和中医药管理体制对中药教育的要求，我们在河北医科大学教务处领导

下，在中医学院领导及中药系领导的大力支持下编写了本实验教材。

本教材是在充分总结我们教学中的经验，归纳当前中药药理学教育迫

切需要能体现本学科教学特点、需要补充一些教学内容的基础上编写的。

本教材编写宗旨是：中药药理学特色鲜明、具有前瞻性、能体现现代重要

科技水平的高质量的中药药理学教材。也希望通过该教材的编写，帮助各

位老师提高自己的业务水平，促进我校重要本科教育再上新的台阶。本教

材在内容上力求充分吸取先进的实验技术和手段，去粗取精，本教材还注

重加强基础实验知识，循序渐进，开拓和加强实验动手能力的培养，在教

材使用时可采取灵活多样的形式，如设计性实验可安排学生先设计某一药

物的药效学研究方案，得到认可后用实验加以验证，旨在培养学生掌握中

药药理学（药理学）研究的思路与方法，提高学生综合分析问题和解决问

题的能力，适合社会的需要。

尽管我们力图贯彻上述宗旨，但由于编写时间仓促及水平所限，难免

存在一些问题，甚至错误之处，希望本教材问世后，广大师生能不吝赐教,

提出批评指正，我们将在今后教学实验中不断完善，形成优秀合理的教学

实验构架。

编者

2011.5.10

目录

第一章中药药理学实验须知.....................1

第二章中药药理实验基本知识与技术.............2

第•节常用动物简介.................................................................2

第二节实验动物的捉持、固定和标记方法及分组.......................................4

第三节常用实验动物的给药方法......................................................6

第四节实验动物给药量的计算........................................................8

第五节实验动物的麻醉方法.........................................................13

第六节实验动物的采血方法.......................................................15

第七节实验动物的处死方法.......................................................17

第三章中药药理实验研究的基本要求..............18

第节中药药理实验设计的基本知识.................................................18

第二节实验数据的整理与统计方法.................................................20

第四章实验项目..............................24

实验一马钱子的急性毒性试验（改进寇氏法）........................................24

实验三生大黄对小鼠排便时间和数量的影响（炭末法）................................28

实验四生大黄对小鼠小肠运动的影响（炭末法）......................................29

实验五双黄连U服液对蛋清致大白鼠后足跖肿胀的影响................................30

实验六三金片对家兔的利尿作用（膀胱漏斗法）......................................33

实验七木香对盐酸一乙乙致大鼠急性胃粘膜损伤的影响...............................34

实验八延胡索对小白鼠的镇痛作用（热板法）........................................35

实验九延胡索对小白鼠的镇痛作用（扭体法）........................................37

实验十生三七粉对小白鼠凝血时间的影响（玻片法）..................................38

实验十一三七对小白鼠凝血时间的影响（毛细玻管法）................................39

实验十二川川对大鼠血液流变性的影响...............................................40

实验十三当归抗大鼠血栓形成的作用................................................43

实验十四丹参抗大鼠血小板聚集的作用...............................................45

实验十五复方丹参滴丸抗家兔血栓形成的作用........................................48

实验十六川贝枇杷膏对小白鼠的止咳作用（潜伏期观察法）...........................50

实验卜七酸枣仁对小鼠自发活动的影响..............................................51

实验十八天麻对小鼠睡眠时间的影响................................................53

实验十九人参对小白鼠游泳时间的影响（抗疲劳实验）...............................55

实验二十人参对小白鼠耐常压缺氧的作用............................................56

实验二十一党参对小鼠记忆获得性障碍的改善作用（跳台法）.........................57

实验二十二钩藤对大鼠的降压作用..................................................59

实验二十三生脉注射液对低血压状态家兔的升压作用..................................61

实验二十四某一中药活血化瘀作用的药效学实验设计与研究............................62

第一章中药药理学实验须知

中药药理学实验课是中药药理教学的一个重要组成部分。在生理学和药理学

实验基础上，在讲授中药药理的同时，开展中药药理的实验，它的目的和任务…

方面是验证理论、巩固并加强对理论知识的理解；另一方面是通过实验，进一步

提高学生的动手能力，培养学生能用现代科学方法从事中药理论研究和新药开发

的初步工作能力，为今后进行科学研究，打下初步基础。

中药药理实验包括进行实验操作、整理实验结果和写出实验报告等环节，为

提高实验效果，必须做到：

一、明确实验的目的要求：实验前应作好预习，明确本次实验的目的、方法、

步骤和原理，作到心中有数，这样，才能在实验过程中避免出现忙乱和差错，并

在教师指导下，培养独立操作的能力。

二、作好实验结果的处理：中药药理实验结果有计量资料（如体温、尿量）

及计数资料（如动物死亡数）。要忠实地准确的对观察到的数据及时加以记录，

决不可想当然的用主观想象或书本理论代替实验观察到的客观事实。实验完毕，

应对结果加以整理：注明实验题目、实验日期、动物性别、体重、给药剂量等；

计数资料和计量资料应列表以便比较，使之一目了然。

三、写好实验报告：写实验报告是培养文字表达能力和概括、综合、分析问

题能力的重要训练方法。每次实验完毕以后，要求以统一的实验报告纸写出实验

报告，交负责教师评阅。在实验报告中要求列出实验题目、实验方法和实验结果。

有时要对实验结果产生的原理或对实验结果异常的原因略加讨论。讨论不可离开

实验结果去抄书。实验指导所列思考题或讨论题是为加深对实验的理解，与实验

结果无关的内容，不必写入实验报告。最后把实验结果加以概括性总结，写出结

论。结论不是单纯重复实验结果，也不应超过验证的范围任意外展，扩大结论。

实验报告要求文字简练，书写工整，措词注意科学性和逻辑性。

第二章中药药理实验基本知识与技术

第一节常用动物简介

在中药药理实验中，常根据实验目的和要求选用不同的动物。常用的实验动

物有蛙、小鼠、大鼠、豚鼠、猫和犬等。在选择实验动物时，应注意实验动物对

动物的种属和系别方面的要求，因为动物的种属和系别的差异往往会造成对药物

反应性的不同。应使所选的动物能较好地反映试验药物的选择性作用，并符合节

约的原则。例如测定LD50及ED50需较多动物，常选用小鼠，因为小鼠种属清楚,

繁殖快，较经济；又如抗过敏实验常选用豚鼠，是由于豚鼠对组胺等过敏性介质

敏感。

常用实验动物的特点如下。

1.蛙和蟾绘

其心脏在离体情况下能较持久而有节律地搏动，故常用来研究药物对心脏的

作用。其坐骨神经腓肠肌标本可用来观察药物对周围神经横纹肌或神经接头的作

用。

2.小鼠

小鼠是药理实验最常用的一种动物，适用于需要大量动物的实验，如LDs。和

EDs。的测定，抗炎免疫药、抗肿瘤药、避孕药、中枢神经系统药物等的研究和药

物初筛。

3.大鼠

用途与小鼠相似。因其体形较大，有些在小鼠身上不便进行的实验可选用大

鼠。如药物的抗炎实验常选用大鼠的踝关节做炎症模型。可用大鼠进行血压测定,

胆管插管和长期毒性实验，还可用其离体子宫做子宫收缩药的检定。此外，尚可

用来复制糖尿病模型，用于糖尿病药物的研究以及流感病毒传代及细菌学实验

等。

4.豚鼠

豚鼠易被抗原性物质所致敏，对组胺特别敏感，常用于平喘药和抗组胺药的

实验研究。对结核杆菌比较敏感，故也用于抗结核药的实验研究。此外还用于离

体心脏、平滑肌实验。

5.家兔

家兔较驯服，易饲养。常用于观察药物对呼吸、心脏、血管（离体兔耳血管

灌流）、肠肌运动的影响，体温实验及热源检查。用于避孕药实验（雌兔）或观

察药物对皮肤局部作用（刺激性）。

6.猫

猫对于脑实验和其他外科手术耐受力强，反射功能强，血压较稳定。常用于

观察药物对心血管的影响。可用于中枢神经系统实验，如去大脑僵直，姿势反射

实验；猫也常用于镇吐药的实验。

7.犬

实验需用大动物时，常用犬。犬是记录血压、呼吸最常用的动物。常用于观

察血流动力学药物对冠状动脉血流量和心肌电生理的影响，以及对降压药、抗休

克药的研究等。犬还可通过训练，用于慢性实验研究，如条件反射、高血压的实

验治疗以及造胃屡、肠屡来观察药物对胃肠蠕动和分泌的影响的实验。此外，犬

也用于长期毒性实验。

第二节实验动物的捉持、固定和标记方法及分组

一、实验动物的标记

实验用较大动物如兔、猫、犬等可用特制的号码牌固定于耳上。白色家兔和

小动物（小鼠、大鼠）可用黄色苦味酸（3%〜5%）涂于毛上标记。其编号方法无

统一规定，以下方法可供参考。

如给小鼠标记1〜10号，可将小鼠背部分为前肢、腰部、后肢，按左、中、

右分为九个区域，从右到左标记1〜9号，第10号不标记。

二、常用实验动物的捉持、固定方法

1、小鼠：用右手提起鼠尾，放在粗糙物（鼠笼盖）上面，向后轻拉其尾，

左手拇指、食指捏住其颈背部皮肤，将小鼠固定在掌中，使其腹部朝上，然后以

无名指和小指夹住鼠尾。

2、大鼠：捉持和固定方法基本同小鼠。将其放于鼠笼盖上，右手轻拉鼠尾,

左手中指和拇指放到大鼠双前肢腋下，食指放入颈部，使其伸开前肢迅速将其握

住。

3、豚鼠：一手拇指和中指从豚鼠背部伸到腋下，另一只手托住其臀部即可。

体重小者可用一只手捉拿。

4、家兔：一手抓住颈背部皮肤，轻轻将兔提起，另一手托住其臀部，或将

其置于固定箱内。

5、猫：捉持方法同家兔，但应注意其利爪和牙齿会损伤人。为保安全多用

套网捉拿，用固定袋固定。

6、犬：对驯服犬，可用特制嘴套将犬嘴套住，并将嘴套上的绳带拉至耳后颈部

打结固定。对凶暴的犬，用长柄钳式捕犬夹钳住其颈部，再用嘴套将犬嘴套住。如

无嘴套，可用绳带绑嘴，方法是在犬嘴的上下部打结并绕到颈后再打结固定。

急性实验时，通常将犬麻醉后仰位固定于手术台上。四肢栓上绳带，拉紧固

定在手术台边缘的锲子上。取下嘴套或绳带，将一金属棒经两嘴角穿过口腔压于

舌上，并将舌拉出口腔，再用绳带绕过金属棒绑嘴并固定于手术台的柱子上。

三、实验动物的随机分组法

数理统计学上，根据随机抽样的原则，编制了随机数目表，应用随机数目代

替抽签法。表中的数字都各自独立，全部数字无论从横行、纵列或斜行的顺序都

是随机的。因此使用时可任自一个数目开始，可从左而右，亦可从右而左，可从

上而下，也可从下而上，按顺序取得需要的数目，其结果比抽签更为理想。

（1）完全随机法

（2）配偶设计随机分组法

（3）随机单位组设计分组法

第三节常用实验动物的给药方法

一、小鼠

1、灌胃（ig）:将小鼠固定后，使颈部拉直，右手持有灌胃针头的注射器，

自口角插入口腔，沿上腭插入食管。若遇阻力，可将针头抽出再另插，以免刺破

食管或误入气管。灌注量为0.l~0.3ml/10g体重,最多0.4ml/10g体重。

2、皮下注射（sc）：注射部位常选背部皮下。轻轻捏起背部皮肤，将注射针

头刺入皮下，稍稍摆动针头，若容易摆动则表明针尖部位于皮下。此时注入药液。

拨针时应轻捏针刺处片刻，以防药液漏出。注射量为0.1〜0.3ml/10g体重。

3、肌内注射（im）:多注射于后肢股部肌肉，每侧不超过0.1ml。

4、腹腔注射（ip）:左手固定小鼠，右手持注射器，从下腹部外侧进针3〜5mm,

呈45度角刺入腹腔。注射量为0.1〜0.2ml/10g体重，最大不超过0.5ml/只。

5、尾静脉注射（iv）:将小鼠置于固定筒内，使尾部露在外面，用70%〜75%

乙醇棉球擦尾部，或将鼠尾浸入45〜50℃温水中，待尾部左右侧静脉扩张后，

左手拉尾，右手进针。注射量不超过0.5ml/只。

二、大鼠

灌胃、皮下注射、腹腔注射、肌内注射、尾静脉注射方法均同小鼠。一般情

况下，灌胃剂量为1〜2ml/100g,皮下注射、尾静脉注射Vlml/只，腹腔注射为

1.5ml/只，肌内注射为0.1〜0.2m"只。此外，大鼠尚有舌下静脉给药的方法。

三、豚鼠

1、皮下、肌内及腹腔注射：方法基本同小鼠，给药量分别为0.5〜1.0ml/

只、0.3〜0.5ml/只、2〜4ml/只。

2、静脉注射：选用后脚掌外侧的静脉或外颈静脉进行注射。采用前法，可

由一人捉持豚鼠并固定一条后腿，另一人剪去注射部位的毛，酒精棉球涂擦使血

管扩张，用连接在注射器上的小儿头皮针头刺入血管推注药物。做外颈静脉注射

时，需将颈部皮肤切-小口，暴露血管，再用针头刺入血管。注射量通常为2〜

4ml/只。

四、家兔

1、灌胃：如用兔固定箱，可一人操作。右手将开口器固定于兔口中，左手

插入导尿管。若无固定箱，需二人合作。一个坐位，将兔夹于两腿之间，左手紧

握双耳，固定头部，右手抓住双前肢。另一人将开口器横放于兔口中，压在舌上，

用8号导尿管由开口器中央孔慢慢插入食管和胃。为避免误入气管，可将导尿管

外口端浸入清水中，如无气泡出现，证明已插入胃中。然后注入药液，给药量通

常为10ml/kg体重。

2、耳缘静脉注射：选定耳缘静脉（耳背内侧），拨除局部的毛，用酒精棉球

涂擦或以示指轻弹之，使血管扩张。用左手示指和中指夹住耳根部，拇指和环指

夹住兔耳尖部拉直，然后尽量从血管远心端刺入，再用拇指和示指固定针头处，

注入药液。注射量通常为2ml/kg体重。

3、皮下、肌内和腹腔注射:方法基本上同小鼠，最大注射量分别为0.5ml/kg、

1.0ml/kg和5.Oml/kg体重。

第四节实验动物给药量的计算

一、给药剂量的计算

实验动物的给药量常按g/kg体重、mg/kg体重、ml/kg体重或按体表面积来

计算，一般是通过动物之间或动物与人之间的剂量换算而得。换算方法大致有以

下儿种。

1、按体型分数换算法：通常采用下列公式：

JAXRBXW^

式中d；是欲求算的B种动物（包括人）的kg体重剂量，d,、是已知A种动物

（包括人）的kg体重剂量；W,、、WB是已知动物A、B的体重；R,、RB是动物的体

型系数，见下表。

表：实验动物与人的体型系数

动物种类小鼠大鼠豚鼠兔猫猴犬人

R（体型系娄0.060.090.0990.0930.0820.1110.1040.11

例：已知家兔2kg,用药50mg/kg,求算家犬5kg体重用药量。

&=50、RB=O.104、RA=0.093、WA=2>%=5,代入上述公式:

1/31/3

dB=50mg/kgX0.104X5/（0.093X2）=41.2mg/kg

2、按动物与人体表比换算法（见下表）

小鼠20g大鼠200g豚鼠400g兔1.5kg猫2.0kg猴4.0kg狗12.0kg人70.0kg

小鼠20g1.07.012.2527.829.764.1124.2387.9

大鼠200g0.141.01.743.94.29.217.856.0

豚鼠400g0.080.571.02.252.45.24.231.5

兔1.5kg0.040.250.441.01.082.44.514.2

猫2.0kg0.030.230.410.921.02.24.113.0

猴4.0kg0.0160.110.190.420.451.01.96.1

狗12.0kg0.0080.060.100.220.230.521.03.1

人70.0kg0.00260.0180.0310.070.0780.160.321.0

例1：已知体重12kg的犬,其每日服药剂量为10mg/kg体重，每日总量为120mg,

试求人的日服药量。

人日服总量=犬日服总量X人与犬体表比=120X3.l=372mg

例2：某利尿中药大鼠给药时的剂量为250mg/kg体重，试粗略估计犬灌胃给药

时可以试用的剂量。（附表如下：）

解1：利用表中“mg/kg-mg/m?转换因子”计算法

将某种动物按mg/kg计算的剂量乘以相应的转换因子，即为按mg/m?计算的剂

量。

犬的试用剂量=250X6（大鼠的转换因子）/19（犬的转换因子）=79mg/kg

解2：利用表中每“1kg体重占体表面积相对比值”计算法

犬的试用剂量=250X0.16（犬的体表面积比值）/0.47（大鼠的体表面积比值）=85

mg/kg

不同种类动物间用药剂量换算时的常用数据

动物种类体重（kg）体表面积（m’）mg/kg-mg/mJ每1kg体重占体表

转换因子面积相对比值

0.0180.00632.9

0.0200.00673.0粗略为31.0

小鼠

0.0220.00713.1(0.02kg)

0.0240.00763.2

0.100.01965.1

大鼠0.150.02575.8粗略为60.47

0.200.03116.4(0.20kg)

0.250.03616.9

0.300.04396.8

0.400.05327.6粗略为8

豚鼠0.40

0.500.06178.1

(0.40kg)

0.600.06978.6

1.500.132311.3

家兔2.000.160312.4粗略为120.24

2.500.186013.4(2.0kg)

2.000.157112.7

2.500.182413.7粗略为140.22

猫

3.000.205814.6(2.5kg)

5.000.327515.3

犬10.000.519919.2粗略为190.16

15.000.681222.0(10.0kg)

40.001.239832.2

人50.001.438634.8粗略为350.08

60.001.624636.9(50.Okg)

二、给药容积的计算

实验过程中常用的容量计算如下：实验时需从已知药的浓度和已知的给药剂

量（g/kg或mg/kg）算出相当于每1kg体重应给药的毫升数（ml）,以便于给药。

例：小鼠体重20g,腹腔注射盐酸吗啡10g/kg,药液浓度为0.1%,应注射

多少毫升？

计算方法：0.1%的盐酸吗啡溶液每1ml含药物1mg,10mg/kg的剂量相当

于10ml/kg,小鼠体重20g,换算成kg为0.02kg0则10ml/kgXO.02kg=O.2ml。

三、配制药物浓度的计算

实验中有时需根据药物剂量（mg/kg）和设定的给药容积（ml/kg）,计算出应

该配制的药物浓度。

例：按50mg/kg的剂量给家兔静脉注射苯巴比妥钠，注射量按1ml/kg进

行，应配制苯巴比妥钠的浓度是多少？

计算方法：50mg/kg相当于1ml/kg,因此1ml药液应含50mg药物，算

成百分比浓度为：1：50=100：X,X=50X100mg=5g,即应配制成5%的苯巴比

妥钠溶液。

四、药物浓度表示法及剂量换算法

药物的重量以“克”为基本单位，容量以“毫升”为基本单位。这是衡量的

公制，现将公制列表如下：

公制重量与容量表

单位名称简写符号折算

微克ug(r)1/1000毫克

毫克mg1000微克

克g1000毫克

千克（公斤）Kg1000克

毫升ml1/1000升

升L1000毫升

药物浓度是指一定量液体或固体制剂所含主药的分量。常用以下儿种表示

法：

1、百分浓度：是按每100分溶液或固体物质中所含药物的分数来表示浓度,

简写为虬由于药物或溶液的量可以用体积或重量表示，因而有三种不同的表示

百分浓度的方法：

（1）重量/体积（W/V）法：即每100毫升溶液中含药物的克数，此法最常

用，不加特别注明的药物%浓度即指此法。

（2）重量/重量（W/W）法：即每100克制剂中含药物的克数，适用于固体、

半固体药物。

（3）体积/体积（V/V）法：即每100毫升溶液中含药物的毫升数，适用于

液体药物。如消毒用75%乙醇，即为100毫升中含无水乙醇75毫升。

2、比例浓度：常用于表示稀溶液的浓度。

3、克分子浓度（M）：一升溶液中所含溶质的克分子数称为该溶液的克分子

浓度。

4、克当量浓度（N）：一升溶液中含有溶质的克当量数称为该溶液的克当量

浓度。

剂量换算：

（1）动物实验所用药物的剂量，一般按mg/Kg（或g/Kg）计算，应用时须

从已知药浓度换算出相当于每公斤体重应注射的药液量（ml）,以便于给药。

（2）在动物实验中有时须根据药物的剂量及某种动物给药途径的药液容量,

然后配制相当的浓度以便于给药。

第五节实验动物的麻醉方法

一、麻醉方式

1、吸入麻醉法

常用药物为乙醛。在玻璃容器底部铺以饱浸乙醛（5〜10ml）的脱脂棉。将

实验动物放在该容器内的网状隔板上，盖上盖（密闭），经20s或30s的时间动

物即进入麻醉状态。如需要较长时间麻醉，可把浸有乙酸的棉球放在动物的鼻口

处，进行追加麻醉。

此法适用于麻醉小鼠、大鼠和家兔。

2、注射麻醉法

常用麻醉药有戊巴比妥钠、巴比妥钠、苯巴比妥钠、硫喷妥钠等。小鼠、大

鼠和豚鼠常采用腹腔注射进行全身麻醉。狗、猫、兔等动物既可腹腔注射麻醉，

也可静脉注射麻醉。（具体剂量见下表：）

注射麻醉药物的用法与用量

动物给药途径药液浓度剂量（mg/kg）维持时间（h）

戊巴比妥钠狗猫兔ivip3%301〜4

鼠ip3%451〜2

硫喷妥钠狗猫ivip2.5%〜5%20〜501/4〜1/2

兔鼠ip2.5%〜5%50〜801/4-1/2

乌拉坦狗兔ivip10%10002〜4

鼠ip10%13002〜4

氯醛糖狗猫ivip2%50〜805〜6

兔鼠ivip2%50〜805~6

注：iv静脉注射ip腹腔注射

二、注意事项

1、配制注射用麻醉剂，一般应用蒸储水，有些可用生理盐水。配制巴比妥类溶

液，使用煮开冷却的蒸储水可保持较长时间，贮药瓶应密闭紧塞，以防空气进入产

生沉淀；硫喷妥钠溶液不稳定，应在临用前配制；乌拉坦溶液稍加温则药效更好。

2、动物麻醉一般以眼睑、角膜、瞳孔和趾反射作为观察麻醉深度的指标。

3、静脉注射速度要均匀，不宜太快，否则可因抑制呼吸而使动物死亡。

4、麻醉药剂量与动物品种及健康状况有关，药量要准确，浓度要适中，冬

季麻醉药液应加温到接近动物体温水平。

5、麻醉深度不够时，必须经一定时间才能补足麻醉剂。补加剂量一次不宜

超过原注射量的20%〜25%。

第六节实验动物的采血方法

在中药药理（药理）学实验中，常需要采实验动物的血液，以作常规检验或

生化及化学分析，因此必须掌握正确的采血技术，一次采血过多或连续多次采血

都可影响动物健康，造成贫血或导致死亡，须予注意。

一、小鼠、大鼠的采血法

1、剪尾采血：需血量很少时常用本法。动物麻醉后，将鼠尖剪去约5mm，从

尾根部向尾尖部按摩，血自尾尖流出，若事先将鼠尾浸在45℃水中数分钟，使

尾部血管充盈，可采到较多的血。取血后用棉球压迫止血。此法可反复多次取血,

小鼠每次可取0.1ml,大鼠可取0.3—0.5mlo

如不麻醉，应将动物装入固定筒内，按上法操作取血。但在清醒状态下，

常采不到所需血量。

2、眼眠后静脉丛采血：取长7〜10cm的玻璃毛细管（内径约1mm），另端渐

扩大呈喇叭形，将其尖端折断，使其断端锋利。预先将玻璃管浸入设肝素溶液,

取出干燥。采血时，左手（拇指及示指）抓住鼠两耳之间的皮肤，使鼠头部固定,

并轻轻压迫颈部两侧，阻碍头部静脉血液回流，使眼球充分外突。右手持毛细管

或配有磨钝的7号针头的1ml注射器，沿内眦眼眶后壁向喉头方向刺入，刺入

深度：小鼠2〜3mm、大鼠4〜5mm。稍旋转毛细管，血液即流入其中。取血完毕

拔出毛细管，左手放松出血即停止。

3、眶动脉和眶静脉采血（也称摘眼球采血）：左手固定动物，压迫眼球使其

尽量突出，右手用镶子或止血钳迅速摘除眼球，眼眶内很快流出血液。此法采血

量较多，一般只适用于一次性采血。

4、股静脉或股动脉采血：麻醉动物背位固定，切开左或右腹股沟的皮肤，

作股静脉或股动脉分离手术。注射针头（7号或8号）刺入血管抽血。若需要连

续多次取血，则针刺采血部位尽量靠远心端。

5、断头取血：剪掉鼠头，立即将鼠颈朝下，提起动物，将血滴入备好的容

器中。

二、家兔的采血法

1、耳缘静脉采血：将家兔固定，剪去拟采血耳壳上的毛，用电灯照射或用

二甲苯棉球涂擦耳壳，使血管扩张，再用乙醇将二甲苯拭净。然后以粗针头刺入

静脉取血，或直接刺破血管取血。采血完毕，用干棉球压迫止血，如血不易止住，

可用木夹夹耳壳10-20mino

2、心脏采血：将家兔背位固定，在左胸第二至第四肋间剪一处毛，以碘酒

和乙醇消毒，然后用7号针头（带有10ml注射器）在心跳最明显处作穿刺，针

头刺入心脏后即有血液涌入注射器或者边穿刺边抽，直至血液流入注射器。所得

所需血量后，立即将针头拔出。

3、股动脉采血：将家兔背位固定，一手拉直动物后肢，一手持注射器在血

管搏动明显处，将带有注射器的针头刺入股动脉，若操作正确，鲜红色血液即流

入注射器。抽血完毕，迅速拔出针头，用干棉球压迫止血2〜3min。

4、耳中央动脉取血：将兔置于兔固定筒内，用二甲苯涂兔耳中央较粗、颜

色较鲜红的中央动脉，使其扩张。一手固定兔耳，一手持注射器，于中央动脉的

末端向心方向刺入，血液即进入针管。取血完毕后压迫止血。

第七节实验动物的处死方法

实验结束后，常须将动物处死，常用的处死方法有：

1.颈椎脱臼法

此法常用于小鼠。用手指或镶子压住小鼠的后头部，另一手捏住鼠尾用力向

后上牵拉，使之颈椎脱臼，立即死亡。

2.空气栓塞法

此法常用于家兔的处死。用注射器将空气快速注入静脉，可使动物立即死亡。

一般注入空气10〜20ml。

3.打击法

此法适用于较小的动物。抓住动物的尾部，提起，用力敲击动物头部，或用

木锤打击动物头部，致使动物死亡，如家兔、大鼠和小鼠等。

4.大量放血法处死

小鼠可采用摘眼球大量放血致死。

5.药物吸入致死

吸入苯、乙酸、氯、二氧化碳、一氧化碳均可使动物死亡。

第三章中药药理实验研究的基本要求

第一节中药药理实验设计的基本知识

一、中药药理实验设计的重要性

中药药理研究首要的问题，就是对实验研究的周密设计，因为实验设计是实

验过程的依据，是实验数据处理的前提，也是提高实验研究质量的一个重要保证。

严密而合理的实验设计，不但可对实验结果和误差有比较准确的估计，最大限度

地获得丰富而可靠的资料，而且还可减少人力，节省物力和时间，提高工作效率,

避免因实验设计不当，造成人力、物力的浪费，甚至全功尽弃的不良结果。因此,

实验研究设计，从中药药理实验研究过程来看，具有非常重要的意义。

二、实验设计的内容

1、明确研究目的和意义：实验设计，首先应考虑研究目的和意义，根据研

究的中心问题，进行实验内容设计，做到心中有数，有的放失。

2、确定实验组和对照组：实验组和对照组之间除了处理不同，其他条件均

应等同。保持实验可比性的原则。在新药审批办法中规定，新药的主要药效作用

各项实验均应有空白对照和已知药物对照。药理试验结果需经统计学处理。

3、确定实验方法、项目和指标：要有明确的规定和说明，要注意选择能反

映被研究问题的本质的关键指标。药理作用及其机理能用客观方法定性地加以测

量，取得准确可靠的数据。

4、确定实验对象的数量：中药药理实验研究对象包括正常动物、麻醉动物

及病理模型；既有整体体内试验，也有离体器官、组织或细胞体外试验等。尽量

研究各种接近中医临床证候的动物病理模型，按中医药治则，观察中药药理与疗

效，但也不排除对正常动物或离体器官等的作用分析。由于动物实验和临床观察

毕竟有一定差别，因此考虑用不同动物多种方法测试，往往是必要的。要根据实

验目的、方法的指标的要求决定实验动物、样本及数量、计量资料，一般小动物

（大、小鼠）每组8—12只，较大动物（兔、狗）每组5—8只是基本的，总量

应符合统计要求。

5、资料整理和统计：将纪录的资料作为必要的分析、整理，经过恰当的统

计分析，作出结论。

三、实验设计的原则

实验设计的三大原则：对照、重复和随机。

1、对照：比较研究是科实验不可少的条件，没有比较，不难以鉴别，也就

缺乏科学性，所以实验设计必须设立对照组。而对照组与实验组之间除用以实验

的药物，处理的区别之外，其他条件如实验动物、方法、仪器、环境及时间等应

相同。动物的种属、品系、性别、窝别、年龄、体重、健康状况等方面尽量一致

以减少误差。一般将“齐同对比”归纳为“同时、同地、同环境、同种、同重、

同批号”等几个方面。

根据实验研究的内容不同，可选用不同的对照形式，常用的方法有下列4

种：

（1）空白对照：指在不加任何处理的条件下进行观察对照。

（2）假处理对照：即除不用被研究的药物外，对照组的动物要经受同样的

处理，如给予生理盐水或不含药物的溶酶。又称“阴性对照二

（3）标准对照：指以已知经典药物在标准条件下与实验药进行对照。又称

“阳性对照”。必要时可设两个作用机制不同的阳性对照药。

（4）组间对照：系在实验组间分儿个剂量组互为对照进行对比，以便说明

量效关系或药效的剂量依赖性。一般设2—3个剂量组。

另外，也可用自身作用给药前后对比者，但最终还是需要作组间对照来说明

问题。

2、重复：能在类似条件下，把实验结果重复出来，才算是可靠的实验，重

复实验除增加可靠性外，也可了解实验变异情况。

3、随机：就是按照机遇均等的原则来进行分组。其目的是使一切干扰因素

造成的实验误差减少，而不受实验者主观因素或其他偏性误差的影响。随机化的

手段可采用编号卡片抽签法，随机数字表或采用计算器的随机数字键。近年来提

倡“均衡下的随机”，即先将能控制的主要因素（如体重、性别等）先行均衡地

归类分档，然后在每一档中随机地取出等量动物分配到各组，使那些难控制因素

（如活泼、饥饱、疲劳和度及性周期等）得到随机化的安排。

第二节实验数据的整理与统计方法

中药药理（药理）实验主要是通过动物理化实验来认识药物作用的特点和规

律，其实验观测到的数据资料按其实验指标的性质，分为质反应（计数）资料和

量反应（计量）资料两大类。

一、量反应资料

实验数据通过测量而得，以计量数字的多少来表示。如血压、心率、血细胞

数、电刺激阈值等，也可用实测变化比值或变化率作为测量资料，如血压升降数

值，心率和呼吸增减次数、尿量增减、血糖升降以及血红蛋白升降等数值；评分

分值的半定量资料也属计量资料范畴。

量反应资料的特点是每一个观察对象可得一个定量的数据，所以信息量丰富。

量反应资料的统计分析最常用t检验，可用下列公式计算：

-E±_x+x++.・.x〃

X—]2

nn

加-1-+（〃2-।1）

例数不等时：V〃|+〃2-2ntn2

通常以均数输作为一组数据的集中性参数，以标准差s作为其离散性参数，

第三个参数是该组例数（n），三个参数常写成（±s（n）的形式。其中，Z是总和

的数学符号，Zx是各实验数据x的总和，Ex?是x平方的总和，（Ex）?是

x总和的平方。

t值法的判断标准为：算出t值时，按自由度f（f=m+n2-2）从t值表中查出

to.O5>to,0]、to.001值，与实算值比较:

如t>to.OO）,则P<0.001,差别有非常非常显著意义

如t>to.o>,则P<0.01,差别有非常显著意义

如则PV0.05,差别有显著意义

如tvto.05,则P>0.05,差别无显著意义

例如,某一试验测得甲、乙两用药组药后血压降低值如下表数据，试分析结果,

作出结论。

各组用药后血压降低值(mmHg)

甲药组2815301413182022共8例(m=8：

乙药组3034421931273438共8例5=8)

X.—•=20mmHg

甲药组均数1n

歹

----------——=6351nmHg

标准差n-l------------均数

乙药组均数=31.8mmHg标准差=7.00mmHg

自由度(f)=m+n2-2=8+8-2=14

玉一耳|20-31.88|

忖+―/6.352[7.0()2'

仁+工V8+8

查t值表to.oi=2.977,to.ooi=4.140

得<10,00.；故PV0.01,差异有非常显著意义，

结论为：t检验说明乙药的降压作用确比甲药强。

此外，对量反应(计量)资料的统计方法还有配对t值法、参比差值法、简

化方差分析法等，需用时可参阅其他统计学参考书。

二、质反应资料

实验结果只有质的区别，数据是通过计数(即阳性反应的动物数)而获得的，

如动物死亡或存活；某反应的出现或不出现；临床治疗中的痊愈、显效、有效、无

效等。质反应通常用出现率来表达，可用百分率型，小数型。为了进行计算统计分

析，例数不宜过少，一般所用动物每组至少20只。通常以X?(卡方)法进行检验。

公式如下：

2(|axJ-/>xc|-0.5xn)2xn

(a+h)(c+d)(a+c)(b+d)

式中x2读作卡方；a、b、c、d是两组阳性数和阴性数所组成的四格表中的

例数，n是总例数。

例如：甲药组50人,有效35人；乙药组50人，有效25人，先排列出四格

表如下：

有效无效总计

甲药组35(a)15(b)50(a+b)

乙药组25(c)25(d)50(c+d)

共计60(a+c)40(b+d)100(n)

_(|35x25-15x25|-0.5x100)2x100_3

y2

代入上式50x50x60x60

查X,值表(四格:友的自由度恒等于1),得0.05的机率点为3.841,

3.375<乂2。,05,故P>0.05,差别无显著意义。

本方法最常用。止匕6，卜，质反应资料的统计分析方法还有配对乂2法，简化直

接概率法、参比值法等,需用时可参阅其他统计学参考书。

附：t值表与X2值表

t值表

几率(P)几率(P)

自由度自山度

0.050.010.0010.050.010.001

112.70663.657636.619182.1012.8783.922

24.3039.92531.598192.0932.8613.883

33.1825.84112.924202.0862.8453.850

42.7764.6048.610212.0802.8313.819

52.5714.0326.869222.0742.8193.792

62.4473.7075.959232.0692.8073.767

72.3653.4995.408242.0642.7973.745

82.3063.3555.041252.0602.7873.725

92.2623.2504.781262.0562.7793.707

102.2283.1694.587272.0522.7713.690

112.2013.1064.437282.0482.7633.674

122.1793.0554.318292.0452.7563.659

132.1603.0124.221302.0422.7503.646

142.1452.9774.140402.0212.7043.551

152.1312.9474.073602.0002.6603.460

162.