高考生物一轮总复习：选修1 生物技术实践

高考生物一轮总复习：选修1生物技术实践目录第1讲传统发酵技术第2讲微生物的利用第3讲酶的应用第4讲生物技术在食品加工及其他方面的应用第1讲传统发酵技术1．食品安全是人类社会中与人体健康密切相关的安全性问题，请根据所学的有关知识回答：(1)纯牛奶保存常采用的消毒方法是________，这样做的目的是_______________________________________________________。(2)泡菜发酵过程会产生亚硝酸盐，对亚硝酸盐定量测定可以用________法，因为亚硝酸盐与________和________反应生成玫瑰红色的化合物。(3)变酸的果酒表面观察到的菌膜是________形成的，腐乳外部有一层致密的皮是________形成的，泡菜坛内有时会长一层白膜是________形成的。(4)为研究发酵罐中酵母菌的生长状况，需要取样统计分析，并测定pH，判断取样先后顺序的主要依据是_____________________。(5)泡菜发酵初期，水槽内经常有气泡产生。这些气泡产生的原因是________________________。泡菜中含有的亚硝酸盐会转变为致癌、致畸、致突变的物质________，制作后期亚硝酸盐的含量下降的原因是______________________________________________。解析(1)巴氏消毒法既能杀死微生物，又能够保证牛奶本身品质不被破坏。(2)对亚硝酸盐含量的测定采用比色法，将泡菜提取液和标准比色液的显色程度进行比较，即可大致得出泡菜中亚硝酸盐的含量，该过程的化学反应有亚硝酸盐与对氨基苯磺酸的重氮化反应，以及其产物和N－1－萘基乙二胺盐酸盐生成玫瑰红色化合物的反应。(3)果酒变酸主要是因为醋酸菌利用酒精发酵产生醋酸引起的；腐乳表面致密的皮是毛霉的匍匐菌丝形成的；泡菜坛内的白膜是产膜酵母大量繁殖形成的。(4)酵母菌无氧呼吸产生酒精和CO2，CO2会降低发酵液的pH，因此pH越小取样越靠后。(5)发酵初期，泡菜坛内还有部分氧气，酵母菌等能够进行有氧呼吸产生CO2；泡菜发酵过程中在硝酸盐还原菌的作用下可以产生亚硝酸盐，在合适的条件下能够转变为亚硝胺，亚硝胺具有致癌、致畸、致突变作用；发酵后期乳酸菌产生大量乳酸抑制硝酸盐还原菌的作用，且形成的亚硝酸盐被部分微生物产生的酶分解，因此亚硝酸盐含量下降。答案(1)巴氏消毒法既保证杀死引起牛奶变质的病原体，又不破坏牛奶的品质(2)比色对氨基苯磺酸N－1－萘基乙二胺盐酸盐(3)醋酸菌繁殖毛霉菌丝产膜酵母(4)pH大小，pH越小取样越靠后(5)酵母菌呼吸作用吸收O2产生CO2亚硝胺乳酸菌产生大量乳酸抑制硝酸盐还原菌的作用，同时形成的亚硝酸盐又被分解2某地盛产葡萄、柿子等水果，但因销路不畅，造成水果严重积压，腐烂变质。某驻村扶贫支教老师为解决葡萄、柿子等资源严重损耗问题，组织学生设计了如图1所示装置，试图探究以柿子为原料制作柿子酒、柿子醋。请你回答下列问题。图1图2(1)酵母菌的分离和纯化。①用清水冲洗葡萄1～2遍除去污物，用榨汁机榨取葡萄汁后，将其装入甲瓶中。葡萄汁的质量和环境温度等方面满足需求，在________的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物则被抑制。应注意的相关操作是_________________________________。②若要通过酵母菌的单菌落进行计数，应在培养液中加入________，采用________法分离和计数。能用这种培养基对酵母菌进行扩大培养吗？________。(2)柿子酒、柿子醋的制备。①若在甲瓶内装入打碎的柿子浆，加入________________酶，能较好地提升柿子酒的清澈度。②当酒精发酵基本完成时，将果酒的酒精浓度稀释至5%～6%，然后导入乙瓶(装有5%～10%的醋酸菌液)，搅匀，将温度保持在30℃，进行醋酸静置发酵。该过程中，对乙瓶应进行的操作是_________________________________________________________。③为探究不同醋酸菌接种量(5%、10%、15%)与醋酸发酵的关系，进行了相应实验，获得图2所示实验数据。在接种后70h，接种量为15%的醋酸产量最少的主要原因是__________________________________________________。解析(1)①由于果酒发酵中，发酵液中缺氧且呈酸性，一定范围内，酵母菌可以在这样的发酵液中生长繁殖，而其他微生物受到抑制，从而发酵产生大量的果酒。如果将发酵液导入图1的甲瓶中，应注意的操作是夹住a、b，关闭c、e，间隔一段时间应打开b处夹子，因为酵母菌发酵需要无氧环境，但会产生CO2，所以每发酵一段时间后，应打开b处夹子释放CO2气体，以防止发酵瓶因气压过大而爆裂。②若要通过酵母菌的单菌落进行计数，需要用固体培养基培养才能形成菌落，所以应在培养液中加入凝固剂——琼脂；分离并计数要采用稀释涂布平板法接种培养；但不能用这种方法对酵母菌进行扩大培养，因为固体培养基不能被培养的酵母菌在短时间内充分利用。(2)①发酵制作的果酒呈浑浊状态，是因为发酵液中存在大量的酵母菌不能利用的纤维素和果胶，所以可以在发酵液中加入纤维素酶和果胶酶进行溶解，以提升柿子酒的清澈度。②当酒精发酵基本完成时，将果酒倒入含有醋酸菌液的乙瓶进行醋酸发酵，由于醋酸发酵需要在有氧环境中进行，所以需要对乙瓶进行打开夹子d，通入无菌的空气。③图2是探究不同醋酸菌接种量(5%、10%、15%)与醋酸发酵的关系曲线。由于在等量果酒为原料的条件下，接种量越大的发酵瓶内发酵液消耗越快，同时产生的代谢废物积累太多，所以在接种后70h，接种量最多的发酵瓶产生醋酸量最少。答案(1)①缺氧、呈酸性夹住a、b，关闭c、e，间隔一段时间应打开b处夹子排出CO2②琼脂稀释涂布平板不能(2)①纤维素酶和果胶②打开夹子d，通入无菌的空气③醋酸菌生长繁殖消耗营养物质较多，产生的代谢废物积累太多3．下图是果酒、果醋的制作流程(如图所示)。请据图回答以下问题：eq\x(挑选优质葡萄)→eq\x(清洗)→eq\x(榨汁)→eq\x(接种菌种)→eq\x(酒精发酵)→eq\x(接种菌种)→eq\x(醋酸发酵)(1)在葡萄酒制作过程中出现葡萄酒变酸现象，其原因可能是发酵液中混有________菌发酵产生乳酸；也可能是________，导致________菌生长繁殖，产生醋酸。(2)某同学尝试用罐头瓶制作果酒，在培养过程中，每隔12h左右将瓶盖拧松一次，此后再拧紧，这样做的主要目的，一是____________________，二是避免氧气进入和杂菌污染。(3)在酸性条件下，可用________来检测果酒发酵是否成功。若要进一步检测所得果酒中活体酵母菌的密度时，一般采用________法，但此种方法最终计算得出的菌体数往往比实际数目低。(4)在果酒制作中，加入的新鲜葡萄汁没有经过灭菌处理，但是在制出的果酒中基本检测不出酵母菌以外的杂菌，从生态学角度分析：一是酵母菌与杂菌之间存在________关系；二是由于果酒中的________不利于杂菌的生长。解析(1)在葡萄酒制作过程中出现葡萄酒变酸现象，其原因可能是发酵液中混有乳酸菌发酵产生乳酸；也可能是发酵容器密闭不严，导致醋酸菌生长繁殖，产生醋酸。(2)酵母菌发酵时产生二氧化碳，如果不及时放气发酵瓶可能会爆裂，因此在制酒阶段，每隔12h左右就要将瓶盖拧松一次；不打开瓶盖是为了防止氧气和杂菌进入发酵瓶。(3)酒精可用酸性条件下的重铬酸钾溶液来检测。若要进一步检测果酒中活体酵母菌的密度时，一般采用稀释涂布平板法；这种方法计算得到的数值往往偏低，原因是两个或多个酵母菌会形成一个菌落。(4)加入的新鲜葡萄汁没有进行过灭菌处理，但是在制出的果酒中基本检测不出酵母菌以外的杂菌，从生态学角度分析：一是大量的酵母菌在与杂菌之间的竞争中取得优势，二是果酒中的酒精更不利于杂菌生长，从而淘汰掉杂菌。答案(1)乳酸发酵装置密闭不严醋酸(2)放掉发酵产生的CO2(3)重铬酸钾稀释涂布平板(4)竞争酒精4．不同浓度还原型谷胱甘肽(GSH)处理对甘蓝泡菜中硝酸还原酶(NR)活性和亚硝酸盐含量的影响如图所示。请回答：(1)甘蓝泡菜的腌制和样品处理：腌制甘蓝泡菜时，所用盐水需煮沸，其目的是____________________________________________。甘蓝样品处理过程中，加硫酸锌产生沉淀后，水浴加热的目的是____________________________________________________。然后冷却至室温，用滤纸过滤，用水淋洗2～3次，将________在容量瓶中定容。(2)测定亚硝酸盐含量：取10mL样品溶液，进行显色处理。用光程为1cm的________在550nm处测定光密度值。(3)甘蓝泡菜发酵过程中NR活性和亚硝酸盐含量均呈________的趋势。添加不同浓度的GSH处理均可________NR活性和亚硝酸盐含量的峰值。当添加GSH的质量分数较低时，NR活性和亚硝酸盐含量随着GSH浓度的增大而________。解析分析两坐标系中多组曲线发现，甘蓝泡菜发酵过程中NR活性和亚硝酸盐含量均呈先上升后下降的趋势，同时添加不同浓度的GSH处理均可抑制NR活性和亚硝酸盐含量的峰值。(1)腌制泡菜时，所用盐水需煮沸的目的主要是杀灭杂菌同时也去除氧气(因为需要厌氧发酵)。样品处理过程中需加硫酸锌产生沉淀，之后水浴加热是为了进一步让蛋白质沉淀。用滤纸过滤并用水淋洗2～3次，将滤液和洗涤液在容量瓶中定容。(2)测定光密度值时需要用光程为1cm的比色杯在550nm处测定。(3)根据前面的分析可知，甘蓝泡菜发酵过程中NR活性和亚硝酸盐含量均呈先上升后下降的趋势。添加不同浓度的GSH处理均可抑制NR活性和亚硝酸盐含量的峰值。当添加GSH的质量分数较低时，NR活性和亚硝酸盐含量随着GSH浓度的增大而降低。答案(1)杀灭杂菌(去除氧气)进一步让蛋白质沉淀滤液和洗涤液(2)比色杯(3)先上升后下降抑制降低5．利用不同微生物的发酵作用来制作果酒、果醋、腐乳和酸奶等食品的历史悠久，遍布民间，一般称作传统发酵技术。根据传统发酵技术的相关知识，回答以下问题：(1)果酒和果醋的制作①酵母菌是酿制葡萄酒不可缺少的微生物，如果要获得优质野生酵母菌最好在葡萄园的土壤中采样，利用酵母菌发酵制作葡萄酒要控制的温度为________。果醋发酵利用的微生物是________，接种时升高温度到________，且需要通气。②很多家庭都会酿酒。酿酒时先将米煮熟的目的是_____________________。冷却到30℃后才能加酵母菌的原因是_____________________。如果时常开坛盖舀酒，不久酒就会变酸，其原因是________________________________________________________________________(用化学方程式表示)。(2)腐乳的制作①豆腐上长出的白色菌丝主要是________。白色菌丝主要来自空气中的________。它的陈新代谢类型是________。②豆腐上长出的白色菌丝主要能分泌________酶和脂肪酶，将豆腐中的相应物质依次水解成小分子的________以及甘油和脂肪酸，因而通过发酵，豆腐中营养物质的种类________(填“增多”或“减少”)。③在制作腐乳时，加盐的作用是_________________________；抑制微生物生长。加入的卤汤中有酒和香辛料，它们除具有调节风味的作用外，还具有________作用。腐乳制作过程中，豆腐相当于微生物生长的________。(3)乳酸发酵①含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶。原因是________________________________________________________________。②在腌制泡菜过程中，起主要作用的微生物是________，用水封坛的作用是________，在制作过程中，如果________过高，腌制________过短，易造成细菌大量繁殖，________含量增加，对人体有害。测定泡菜中亚硝酸盐含量的原理是在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生________反应后，与N－1－萘基乙二胺盐酸盐结合形成________色染料。解析(1)酵母菌发酵的适宜温度为18～25℃，果醋发酵的菌种为醋酸菌，发酵的适宜温度为30～35℃，酿酒时利用酵母菌的无氧呼吸，但酿醋时则需要氧气参与；(2)豆腐上生长的白色菌丝来自空气中的毛霉孢子，其代谢类型为异养需氧型。在发酵时它以豆腐为培养基，分解豆腐中的营养物质，将人体不易消化或不能消化吸收的物质转化为人体易消化吸收的物质，因而豆腐中营养物质的种类增多了；(3)乳酸发酵时利用进行无氧呼吸的乳酸菌来完成，抗生素能抑制(或杀死)乳酸菌。在制作泡菜过程中操作不当会产生大量的对人体有害的亚硝酸盐。在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N－1－萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。答案(1)①18～25℃醋酸菌30～35℃②杀灭其他杂菌，使淀粉发生一定程度的水解太高的温度会抑制甚至杀死酵母菌C2H5OH＋O2eq\o(→,\s\up7(酶))CH3COOH＋H2O(2)毛霉毛霉孢子异养需氧型②蛋白肽和氨基酸增多③析出水分，使豆腐变硬抑制微生物生长(防腐)培养基(3)①抗生素能抑制或杀死乳酸菌②乳酸菌制造缺氧环境温度时间亚硝酸盐重氮化玫瑰红第2讲微生物的利用1．下表是筛选异养型细菌的培养基配方。KH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4·7H2O0.2gFeCl20.1gX1g维生素微量琼脂15g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到100mL(1)苯胺是致癌物质，土壤中有分解苯胺的异养型细菌，此培养基中的成分X除了为目的菌提供能源外，还能提供________(写全得分)，该培养基从作用看属于________培养基。制备固体培养基时调节pH在________步骤后；对培养基进行灭菌的常用方法是______________________________________________________。(2)左上图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图。则获得图B效果的接种方法是________。运用A所示接种方法统计的菌落常常比活菌的实际数目________。在探究“酵母菌种群数量变化”实验中，已知每个计数室由25×16＝400个小格组成，容纳液体的总体积为0.4mm3，观察到右上图中该计数室所示a、b、c、d、e5个中格共有酵母菌80个，则1ml样液中约有酵母菌________个(3)在以尿素为唯一氮源的培养基中加入________可初步鉴定该种细菌能够分解尿素，原理用方程式表示为________；在筛选能够分解纤维素的微生物过程中，常用到________染色法。解析(1)苯胺是致癌物质，土壤中有分解苯胺的异养型细菌，此培养基中的成分X除了为目的菌提供能源外，还需提供碳源和氮源，该培养基从作用看属于选择培养基，制备固体培养基时调节pH应在溶化步骤后；对培养基进行灭菌的常用方法是高压蒸汽灭菌。(2)获得图B效果的接种方法是平板划线法。运用A所示接种方法统计的菌落常常比活菌的实际数目低，原因是当两个或多个菌体连在一起时，平板上观察到的只是单个菌落；已知每个计数室由25个中格组成，容纳液体的总体积为0.4mm3，其中a、b、c、d、e5个中格共有酵母菌80个，该计数室共有80/5×25＝400个，0.4mm3＝4×10－4ml，则1ml样液中约有酵母菌400/(4×10－4)＝106个。(3)在以尿素为唯一氮源的培养基中加酚红指示剂可初步鉴定该种细菌能够分解尿素，原理用方程式表示为CO(NH2)2＋H2O→CO2＋2NH3，NH3会使培养基的碱性增强，pH升高，指示剂变红；在筛选能够分解纤维素的微生物过程中，常用到刚果红染色法。答案(1)碳源和氮源选择溶化高压蒸汽灭菌法(2)平板划线法少106(3)酚红指示剂CO(NH2)2＋H2O→CO2＋2NH3刚果红2．人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃，可用来发酵处理秸秆，提高秸秆的营养价值。为了增强发酵效果，研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株，并对其降解纤维素能力进行了研究。请回答下列问题：(1)在样品稀释和涂布平板步骤中，下列选项不需要的是________(填序号)。①酒精灯②培养皿③显微镜④无菌水(2)在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是________________________________________________________。(3)向试管内分装含琼脂的培养基时，若试管口粘附有培养基，需要用酒精棉球擦净的原因是_____________________________。(4)刚果红可以与纤维素形成红色复合物，但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。研究人员在刚果红培养基平板上，筛选到了几株有透明降解圈的菌落(如图)。图中降解圈大小与纤维素酶的________有关。图中降解纤维素能力最强的菌株是________(填图中序号)。(5)研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株J1和J4，在不同温度和pH条件下进行发酵，测得发酵液中酶活性的结果如图，推测菌株________更适合用于人工瘤胃发酵，理由是____________________。解析本题考查微生物的实验室培养与分离及其应用，意在考查考生对所学基础知识的理解能力和提取图形信息并进行分析推理的能力。(1)样品稀释需要无菌水，在酒精灯火焰附近操作，涂布平板需要培养皿，在酒精灯火焰附近操作，两者都不需要显微镜。(2)涂布平板时只能取少量菌悬液滴加到培养基表面，菌悬液量过多会导致菌体堆积，影响分离效果。(3)分装培养基时，试管口若粘附有培养基，则需用酒精棉球擦净，以免污染棉塞。(4)微生物培养过程中，纤维素被纤维素酶分解后，刚果红－纤维素红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈(降解圈)，降解圈越大，说明纤维素酶的量越多，活性越强。(5)在较高温度条件下J4菌种的纤维素酶活性较高，且J4菌种在较低pH条件下纤维素酶活性较高。发酵过程中，人工瘤胃中的温度升高、pH下降，故J4菌种更适合用于人工瘤胃发酵。答案(1)③(2)培养基表面的菌悬液会出现积液，导致菌体堆积，影响分离效果(3)避免培养基污染棉塞(4)量与活性①(5)J4发酵过程会产热和产酸，J4菌株在较高温度和酸性环境下酶的活性更高3．烧伤病人容易感染绿脓杆菌，引起化脓性感染，比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素都是常用的抗绿脓杆菌的药物。临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，从病人身上获取少量样本，按照一定的实验步骤操作，以确定该病人体内的绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性。(1)获取绿脓杆菌单菌落：配制适于绿脓杆菌生长的培养基，培养基中的营养成分一般含有________、生长因子、水和无机盐，调节pH至7，灭菌处理，待培养基冷却至50℃时，在________附近倒平板。经过选择培养、鉴别等步骤获得单菌落。(2)检测绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性：取该单菌落适当稀释，用________法接种于固体培养基表面，使其均匀生长，布满平板。将分别含等剂量的比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素的相同大小的小滤纸圆片均匀置于该平板上的不同位置，适宜条件培养一段时间，结果是含不同抗生素的滤纸片周围均出现透明圈，这说明绿脓杆菌对上述抗生素________；含头孢菌素的滤纸片周围的透明圈比含美罗培南的小，这说明绿脓杆菌对头孢菌素的敏感性比美罗培南________；含比阿培南、碳青霉烯类的滤纸片周围的透明圈也比含美罗培南的小，且比阿培南透明圈中出现了一个菌落，请推测此菌落产生的可能原因：一是________，二是抗________的绿脓杆菌(或绿脓杆菌产生耐药性突变)形成的菌落。(3)根据上述实验结果，为达到抗绿脓杆菌的目的，对于该患者来说最好应选用抗生素________。解析(1)培养绿脓杆菌的培养基中营养成分一般含有碳源、氮源、生长因子、水和无机盐。接种时要进行无菌操作，需待培养基冷却至50℃时，在酒精灯火焰附近倒平板。(2)检测绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性：应取该单菌落适当稀释，用稀释涂布平板法接种于固体培养基表面，使其均匀生长，布满平板。将分别含等剂量的比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素的相同大小的小滤纸圆片均匀置于该平板上的不同位置，如果绿脓杆菌对上述抗生素敏感，含不同抗生素的滤纸片周围均出现透明圈。含头孢菌素的滤纸片周围的透明圈比含美罗培南的小，说明绿脓杆菌对头孢菌素的敏感性比美罗培南弱；含比阿培南、碳青霉烯类的滤纸片周围的透明圈也比含美罗培南的小，且比阿培南透明圈中出现了一个菌落，可能原因是杂菌污染或抗比阿培南的绿脓杆菌形成的菌落。(3)绿脓杆菌对美罗培南更敏感，对该患者来说最好应选用抗生素美罗培南。答案(1)碳源和氮源酒精灯火焰(2)稀释涂布平板敏感弱杂菌污染比阿培南(3)美罗培南4．为了研究接种量对酵母菌种群数量的影响。请根据以下提供的实验材料，以酵母菌活细胞数及细胞总数(活细胞数和死细胞数之和)为检测指标，完善实验思路，预测实验结果并进行分析与讨论。材料与用具：培养瓶、酵母菌液、美蓝染料(氧化型为蓝色，还原型为无色；使用的美蓝为氧化型，且能进入细胞)、液体培养基、高压蒸汽灭菌锅、移液器、摇床、血细胞计数板、吸管、显微镜等。(要求与说明：定时取样，培养足够时间；细胞计数的具体操作过程不作要求；培养过程中不更换培养液；实验条件适宜)请回答：(1)完善实验思路：①对液体培养基用________进行灭菌后，然后均分到3组培养瓶中。用移液器吸取________的酵母菌液，分别接种入3组培养瓶。②从各组培养瓶各吸取0.1mL酵母菌培养液，________，室温染色适宜时间。立即在显微镜下用血细胞计数板计数________细胞和________细胞，统计细胞总数，并记录。③将3组培养瓶放在摇床上恒温培养。④________________________________________________。⑤________________________________________________。(2)预期实验结果(设计一个坐标系，并绘制不同接种量下酵母菌活细胞数的变化曲线)。(3)分析与讨论：①美蓝染色后活的酵母细胞从蓝色变为无色的原因是_______________________________________________________。②在整个实验过程中，直接从静置的培养瓶中取培养原液计数的做法是错误的，请纠正错误：______________________________________________。解析(1)①用高压蒸汽灭菌锅对液体培养基进行灭菌后，然后均分到3组培养瓶中。用移液器吸取3种不同接种量的酵母菌液，分别接种入3组培养瓶。②从各组培养瓶各吸取0.1mL酵母菌培养液，加入美蓝染料适量，摇匀，室温染色适宜时间。立即在显微镜下用血细胞计数板计数无色酵母活细胞和蓝色酵母死细胞，统计细胞总数，并记录。③将3组培养瓶放在摇床上恒温培养。④每隔相同时间重复②步骤。⑤统计分析实验所得数据。(2)设计一个坐标系并绘制不同接种量下酵母菌活细胞数的变化曲线时应注意：①横纵坐标的含义和单位；②必须绘制出三条曲线(代表不同接种量)且每条曲线要绘制出大致的变化趋势；③要对三条曲线做出明确的示例标注。(3)①实验中美蓝染色后活的酵母细胞从蓝色变为无色的原因是活酵母菌细胞呼吸产生还原氢，能使美蓝从蓝色的氧化型变为无色的还原型。②若在实验过程中直接从静置的培养瓶中取培养原液计数，会导致培养液中酵母菌分布不均匀，使计数结果不准确，正确的做法是摇匀培养液后再取样，培养后期的样液稀释后再计数。答案(1)①高压蒸汽灭菌锅3种不同接种量②加入美蓝染料适量，摇匀无色酵母活蓝色酵母死④每隔相同时间重复②⑤统计分析实验所得数据(2)如图(3)①活酵母菌细胞呼吸产生还原氢，能使美蓝从蓝色的氧化型变为无色的还原型②摇匀培养液后再取样，培养后期的样液稀释后再计数5．金黄色葡萄球菌具有高度耐盐性，在血平板(培养基中添加适量血液)上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色。下面是某研究小组测定自来水中金黄色葡萄球菌浓度的实验操作。请回答下列问题：(1)金黄色葡萄球菌的培养基为7.5%NaCl牛肉膏蛋白胨培养基，根据实验目的应选择________(填“固体”“液体”)培养基，培养基中加入7.5%NaCl的作用是_____________________________。(2)在制作血平板时需等平板冷却后，方可加入血液，以防止________________，血平板在使用前，需置于恒温培养箱中适宜温度下培养一段时间的目的是________________________________。(3)取10mL自来水样，加入________稀释成10－1的自来水样，依次操作，制作稀释10－2、10－3、10－4倍的自来水样。(4)将0.1mL10－1～10－4的四个稀释样液，分别接种到4组(每组3个)血平板上的方法是____________。在血平板上，金黄色葡萄球菌菌落的周围会出现________。若在10－3的3个血平板上，金黄色葡萄球菌菌落数分别为42、38和37，则每升自来水中的活菌数约为________个。解析(1)7.5%NaCl牛肉膏蛋白胨培养基中含有蛋白质，所以可提供氮源和碳源，又含有水和NaCl，利于金黄色葡萄球菌的筛选。(2)在制作血平板时需等平板冷却后，方可加入血液，以防止高温破坏血细胞，血平板在使用前，需置于恒温培养箱中一段时间的目的是检测血平板是否符合无菌要求。(3)取10mL自来水样，加入90ml无菌水稀释成10－1倍的自来水样，依次操作，制作稀释10－2、10－3、10－4倍的自来水样。(4)将0.1mL10－1～10－4的四个稀释样液，分别接种到4组(每组3个)血平板上的方法是稀释涂布平板法，据题意，“金黄色葡萄球菌在血平板上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色”，因此在血平板上，金黄色葡萄球菌菌落的周围会出现透明圈(溶血圈)，若在10－3组的3个血平板上，金黄色葡萄球菌菌落数分别为42、38和37，则每升自来水的活菌数约为(42＋38＋37)÷3÷10－3×103×10＝3.9×108个。答案(1)固体利于金黄色葡萄球菌的筛选(2)高温破坏血细胞检测血平板是否符合无菌要求(3)90mL无菌水(4)稀释涂布平板法透明圈(溶血圈)3.9×1086．玉米和麦草的秸秆可以用来生产燃料乙醇，秸秆的主要成分是纤维素，回答下列问题：(1)纤维素分解菌多分布在________的土壤中，纤维素酶是一种复合酶，一般包括三种成分，C1酶，________和________。(2)从土壤中筛选纤维素分解菌需要配制________培养基，该培养基中需要加入纤维素粉作为唯一的________。(3)梯度稀释后，要将样品均匀涂布在用于鉴别纤维素分解菌的培养基上，在该培养基中需要加入的特殊染料是________，当形成菌落以后可以根据菌落周围是否产生________来筛选纤维素分解菌。当利用涂布器涂布平板之后需要对涂布器进行________处理。(添“消毒”或者“灭菌”)(4)产生葡萄糖后需要用到________(微生物种类)发酵产生酒精，还需使用________检测产物是否为酒精。解析(1)纤维素分解菌多分布在富含纤维素的土壤中，纤维素酶一般包括C1酶、Cx酶、葡萄糖苷酸三种成分。(2)筛选纤维素分解菌需要配制选择培养基，该培养基中需要加入纤维素作为唯一的碳源。(3)鉴别纤维素分解菌的培养基上含有特殊染料是刚果红，刚果红能与纤维素形成红色复合物，当形成菌落以后可以根据菌落周围是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。利用涂布器涂布平板后需要对涂布器进行灭菌处理。(4)酵母菌发酵产生酒精，可以使用酸化的重铬酸钾溶液检测产物是否为酒精。答案(1)富含纤维素Cx酶葡萄糖苷酶(2)选择碳源(3)刚果红透明圈灭菌(4)酵母菌重铬酸钾7．研究人员为获得用于烟气脱硫的脱硫细菌，进行了如下操作。请回答：(1)取样：在某热电厂烟囱周围区域采集土样，取样用的小铁铲和盛装土样的信封在使用前都需要________。(2)选择培养：此步骤的目的是增加________浓度。(3)驯化脱硫细菌：将目的菌转移到含少量无菌水的锥形瓶中，边搅拌边持续通入SO2气体。驯化几分钟后接种到固体培养基上，待长出菌落后再重复上述步骤，并逐步延长通入SO2的时间，与此同时逐步降低培养基的pH。由此分离得到的脱硫细菌具有________和________的能力。(4)培养与观察：培养一段时间后，可选取脱硫细菌________稳定时的记录作为结果。(5)培养大量的目的菌用于生产，研究人员需连续取样进行计数，计数方法一般有稀释涂布平板法和________法。当用前者进行计数时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的________。统计平板上的菌落数即可推测出样品中含有的活菌数目。通常情况下，用此计数方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目________。解析(1)分离获得所需微生物时，无菌操作是关键，因此，取样用的小铁铲、盛装土样的信封在使用前都需要灭菌处理。(2)选择培养的目的是让所需目的菌生长繁殖，而其他不需要的微生物生长受到抑制，从而增加目的菌的浓度。(3)在脱硫细菌的驯化过程中，逐步增加二氧化硫的浓度和降低培养基的pH，在这一环境中生长的微生物具有耐受二氧化硫和适应酸性环境的能力。(4)当固体培养基上菌落数目稳定时，说明几乎所有的活菌都形成了菌落，以稳定时的菌落数目作为记录结果，所得数据更为准确。(5)对微生物进行计数的方法有稀释涂布平板法和显微镜直接计数法。一个活菌经过繁殖在固体培养基表面形成一个菌落，但有时一个菌落可能是由2个或多个活菌繁殖形成的，这样根据菌落数推测出的活菌数往往比实际数目偏小。答案(1)灭菌(2)脱硫细菌(3)耐受SO2适应酸性环境(4)菌落数目(5)显微镜直接计数一个活菌少第3讲酶的应用1．为探究洗衣粉加酶后的洗涤效果，将一种无酶洗衣粉分成3等份，进行3组实验。甲、乙组在洗衣粉中加入1种或2种酶，丙组不加酶，在不同温度下清洗同种化纤布上的2种污渍，其他实验条件均相同，下表为实验记录。请回答下列问题。水温/℃1020304050组别甲乙丙甲乙丙甲乙丙甲乙丙甲乙丙清除血渍时间/min67668852518336347711126891167清除油渍时间/min93789587639182468575277769868(1)提高洗衣粉去污能力的方法有________。甲组在洗衣粉中加入了________。乙组在洗衣粉中加入了________。(2)甲、乙组洗涤效果的差异，说明酶的作用具有_________________。(3)如果甲、乙和丙3组均在水温为80℃时洗涤同一种污渍，请比较这3组洗涤效果之间的差异并说明理由__________________________________________________。(4)加酶洗衣粉中的酶是用特殊的化学物质包裹着的，遇水后包裹层很快溶解，释放出来的酶迅速发挥催化作用。请说明这是否运用了酶的固定化技术及其理由。____________________________________________________________。解析(1)由表格数据可知提高洗衣粉去污能力的方法有加酶和适当提高温度。甲组去除血渍所需的时间相对较短，而血渍的主要成分是蛋白质，说明甲组洗衣粉中加入了蛋白酶；乙组去除血渍和油渍的时间都相对较短，说明乙组洗衣粉中加入了蛋白酶和脂肪酶。(2)甲、乙组洗涤效果的差异，主要原因是其中酶种类不同，说明酶具有专一性。(3)酶的作用条件温和，高温(80℃)会使酶活性丧失，因此三组之间没有差异。(4)由于加酶洗衣粉中的酶未固定在不溶于水的载体上，也不能重复利用，所以没有利用酶的固定化技术。答案(1)加酶和适当提高温度蛋白酶蛋白酶和脂肪酶(2)专一性(3)没有差异；因为高温使酶失活(4)未运用酶的固定化技术；因为酶未固定在不溶于水的载体上，也不能重复利用2．果胶酶能分解果胶等物质，可以用来澄清果蔬饮料，在食品加工业中有着广泛的应用。回答下列问题：(1)果胶酶是分解果胶的酶的总称，包括________、果胶分解酶和________。食品工业中之所以使用果胶酶澄清果蔬饮料，是因为果胶酶能破坏植物的________结构。(2)微生物是生产果胶酶的优良生物资源。分离和筛选能产生果胶酶的微生物，使用的培养基应该以_________为唯一碳源；为了纯化该生物，需要在________(填“固体”或“液体”)培养基上接种菌种，最常用的接种方法有____________________________________。(3)在榨制果汁前，要将果胶酶和果泥混匀保温，目的是提高出汁率；过滤后要用果胶酶处理果汁，目的是______________________。(4)根据下表实验结果，________(填“能”或“不能”)确定40℃就是果胶酶的最适温度。1020304050607080813152515121110解析(1)果胶是由半乳糖醛酸聚合而成的一种高分子化合物，果胶酶包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶等，它们能催化果胶的分解，瓦解植物细胞壁。(2)筛选和分离能够产生果胶酶的微生物时，应该使用以果胶为唯一碳源的选择培养基，为了纯化该生物，需要在固体培养基上进行，最常用的接种方法有平板划线法或稀释涂布平板法。(3)榨制果汁前，要将果胶酶与果泥混匀保温，目的是分解细胞壁，提高出汁率。过滤后要用果胶酶处理果汁，目的是分解果汁中的果胶，使果汁变澄清。(4)该实验只能得出在所设计的温度下，40℃的酶活性高，由于没有设计40℃左右，缩小温度梯度的实验，如梯度为1的实验，观察果汁量，因此不能确定40℃就是果胶酶的最适温度。答案(1)多聚半乳糖醛酸酶果胶酯酶细胞壁(2)果胶固体平板划线法或稀释涂布平板法(3)使果汁变澄清(4)不能3．为探究温度对酶活性的影响，某兴趣小组做了如下实验。第一步：在T1和T2两个不同温度条件下，利用淀粉酶催化淀粉水解，编组为A、B。反应结束后使淀粉酶失活。第二步：从A、B两组装置中取出等量溶液，分别倒入U型管的甲、乙两侧，此时两侧液面高度相同，一段时间后观察U型管两侧液面高度变化。请回答下列问题：(1)淀粉酶能催化淀粉水解的原理是__________________________________。(2)该实验选用淀粉酶，而不用H2O2酶作为研究对象的原因是_______________；实验中的无关变量有_____________________________________(至少需写两个)。(3)若甲侧液面高于乙侧，则说明该淀粉酶的活性在T1温度下________(填“大于”“小于”或“等于”)T2温度下。(4)为确定T1温度和该淀粉酶最适温度的关系，利用T3温度(T3＞T1)替代T2温度重复上述实验，若甲侧液面低于乙侧，则说明该淀粉酶的最适温度_________(填“一定”或“不一定”)大于T1温度。解析(1)酶的作用机理是降低化学反应的活化能。(2)温度会直接影响H2O2分解而影响实验结果，所以不能用过氧化氢酶探究温度对酶活性的影响。实验中，自变量是温度，则淀粉酶溶液的浓度、用量等属于无关变量。(3)若甲侧液面高于乙侧，则说明该淀粉酶的活性在T1温度下大于T2温度下，产生的产物多，导致浓度高，吸收了水分，液面升高。(4)用了比T1温度高的T3温度，结果乙液比甲液高，说明乙液中酶的活性高，即说明该淀粉酶的最适温度一定大于T1温度。答案(1)酶能显著降低化学反应的活化能(2)温度会直接影响H2O2分解而影响实验结果淀粉酶溶液的浓度、用量(淀粉溶液的浓度、用量、pH等其他合理答案)(3)大于(4)一定4．回答与果胶、淀粉等提取和利用有关的问题：某植物富含果胶、淀粉、蛋白质和纤维素成分。某小组开展了该植物综合利用的研究。(1)果胶提取工艺研究结果表明，原料先经过一段时间沸水漂洗的果胶得率(提取得到的果胶占原粒质量的百分率)显著高于常温水漂洗的果胶得率，最主要原因是沸水漂洗________(A.有助于清洗杂质和去除可溶性糖B．使植物组织变得松散C．使有关酶失活D．有利于细胞破裂和原料粉碎制浆)。(2)在淀粉分离生产工艺研究中，为促进淀粉絮凝沉降，添加生物絮凝剂(乳酸菌菌液)，其菌株起重要作用。为了消除絮凝剂中的杂菌，通常将生产上使用的菌液，采用______________，进行单菌落分离，然后将其________，并进行特性鉴定，筛选得到纯的菌株。(3)在用以上提取过果胶和淀粉后的剩渣加工饮料工艺研究中，将剩渣制成的汁液经蛋白酶和纤维素酶彻底酶解处理后，发现仍存在浑浊和沉淀问题。可添加______________使果胶彻底分解成半乳糖醛酸，再添加______________，以解决汁液浑浊和沉淀问题。(4)在建立和优化固定化酶反应器连接生产工艺研究中，通常要分析汁液中各种成分的浓度和所用酶的活性，然后主要优化各固定化酶反应器中的________________________(答出2点即可)、反应液pH和酶反应时间等因素。其中，酶反应时间可通过____________________来调节。答案(1)C(2)划线分离法(或涂布分离法)扩大培养(3)果胶酶淀粉酶使淀粉分解(4)固定化酶的量、反应液温度控制反应器液体流量(或体积)5．根据材料回答下列有关问题：Ⅰ.某大学科研人员利用双重固定法，即采用戊二醛作交联剂(使酶相互连接)，用海藻酸钠来包埋小麦酯酶，研究固定化酶的性质，并对其最佳固定条件进行了探究。下图显示的是部分研究结果。(注：酶活力为固定化酶催化化学反应的总效率，包括酶的活性和酶的数量)(1)从图1可以看出，固定化小麦酯酶比游离的小麦酯酶对温度变化的适应性更________。(2)从图2可以看出，海藻酸钠浓度为________时，小麦酯酶活力最强。当海藻酸钠浓度较低时，酶活力较低的原因是________。Ⅱ.某实验小组的同学制备固定化酵母细胞的过程如下：①活化酵母细胞：称取定量干酵母与定量蒸馏水混合并搅拌，使酵母细胞活化；②配制CaCl2溶液：将无水CaCl2溶解在定量蒸馏水中，配制成一定浓度的CaCl2溶液；③配制海藻酸钠溶液：将定量的海藻酸钠直接溶解在定量的蒸馏水或无菌水中，配制成溶液；④海藻酸钠溶液和酵母细胞混合：将活化的酵母细胞迅速加入刚配制成的海藻酸钠溶液中，充分搅拌混合均匀；⑤固定化酵母细胞：用注射器以恒定的速度缓慢地将海藻酸钠和酵母细胞混合液滴加到配制好的CaCl2溶液中，观察凝胶珠形成情况。(1)请你改正其中两处错误的操作：第一处：_____________________________________________；第二处：_____________________________________________。(2)刚形成的凝胶珠要在CaCl2溶液中浸泡30min左右，目的是_______________。(3)如果制作的凝胶珠颜色过浅，呈白色，则说明海藻酸钠浓度________(填“过低”或“过高”)。答案Ⅰ.(1)强(2)3%酶的数量不足Ⅱ.(1)配制海藻酸钠溶液时应小火或间断加热至完全溶化海藻酸钠溶液应冷却至室温后再加入酵母细胞(2)让凝胶珠形成稳定的结构(3)过低第4讲生物技术在食品加工及其他方面的应用1．随着人类基因组计划的进展和多种生物基因组测序工作的完成，人类跨入了后基因组和蛋白质组时代。对蛋白质进行研究时，首先要获得纯度较高的蛋白质。下图是某生物兴趣小组在“蛋白质的提取和分离”实验中，准备从猪的血液中初步提取血红蛋白，设计的“血红蛋白提取、分离流程图”：eq\x(\a\al(实验准备：配制缓冲,液血细胞悬液))→eq\x(\a\al(样品处理：洗涤、,破碎、离心等))eq\x(蛋白质粗分离、透析)→eq\x(\a\al(纯化、纯度鉴定、,凝胶色谱法、电泳等))请回答下列有关问题：(1)样品处理中红细胞的洗涤要用________反复冲洗、离心。向红细胞悬液中加入一定量的低浓度pH＝7.0的缓冲液并充分搅拌，可以破碎红细胞，破碎细胞的原理是________________________。(2)血红蛋白粗分离阶段，透析的目的是_________________，若要尽快达到理想的透析效果，可以____________________(写出一种方法)。(3)血红蛋白的纯化是通过____________________法将相对分子质量大的杂质蛋白除去。(4)电泳利用了待分离样品中各种分子的______________等的差异，而产生不同迁移速度，实现各种分子的分离。(5)一同学通过血红蛋白醋酸纤维薄膜电泳，观察到正常人和镰刀型细胞贫血症患者的血红蛋白电泳结果如上图所示。由图可知携带者有________种血红蛋白，从分子遗传学的角度作出的解释是____________________________________________________。解析(1)样品处理中红细胞的洗涤要用生理盐水反复冲洗、离心。向红细胞悬液中加入一定量的低浓度pH＝7.0的缓冲液并充分搅拌，可以破碎红细胞，破碎细胞的原理是渗透原理(当外界溶液浓度低于动物细胞内液浓度时，细胞吸水涨破)。(2)血红蛋白粗分离阶段，透析的目的是除去小分子杂质。(3)电泳利用了待分离样品中各种分子的带电性质以及分子大小、形状等的差异，而产生不同的迁移速度，实现各种分子的分离。(4)由如图2可知携带者有2种血红蛋白，因为携带者具有(控制血红蛋白的)一对等位基因，可以控制合成两种不同的蛋白质。答案(1)生理盐水渗透(作用)原理(当外界溶液浓度低于动物细胞内液浓度时，细胞吸水涨破)(2)除去小分子杂质增加缓冲液的量或及时更换缓冲液(3)凝胶色谱(4)带电性质以及分子大小、形状(5)2携带者具有一对等位基因，可以控制合成两种不同的蛋白质2．生物组织中存在多种有机物，不同的有机物其提取与鉴定方法不尽相同。根据所学知识，请回答下列问题。(1)采用蒸馏法提取玫瑰油时，向初步提取的乳化液中加入________，作用是___________________________________。(2)采用压榨法提取橘皮精油时，提取之前需用________浸泡，以提高出油率。为了使橘皮油易与水分离，还要分别加入相当于橘皮质量0.25%的________和5%的________，并调节pH至7～8。(3)采用萃取法从胡萝卜中提取胡萝卜素的主要步骤是：粉碎、干燥、萃取、________、________。干燥时，要注意控制________，否则会引起胡萝卜素的分解；萃取的效率主要取决于萃取剂的________，同时还受原料颗粒的大小、含水量等条件的影响；在对提取的胡萝卜素粗品通过纸层析法进行鉴定时应与________做对照。解析(1)采用蒸馏法提取玫瑰油时，由于氯化钠能增加盐的浓度，有利于油水分层，应向初步提取的乳化液中加入氯化钠。(2)采用压榨法提取橘皮精油时，提取之前需用石灰水浸泡，以提高出油率。为了使橘皮油易与水分离，还要分别加入相当于橘皮质量0.25%的NaHCO3和5%的Na2SO4，并调节pH至7～8。(3)采用萃取法从胡萝卜中提取胡萝卜素的主要步骤是：粉碎、干燥、萃取、过滤、浓缩。干燥时要注意控制温度和时间，否则会引起胡萝卜素的分解；萃取的效率主要取决于萃取剂的性质和使用量，同时还受原料颗粒的大小、含水量等条件的影响；在对提取的胡萝卜素粗品通过纸层析法进行鉴定时应与标准样品做对照。答案(1)氯化钠增加盐的浓度，有利于油水分层(2)石灰水NaHCO3Na2SO4(3)过滤浓缩温度和时间性质和使用量标准样品3．如图1是在发酵罐内利用三孢布拉氏霉菌发酵生产β－胡萝卜素过程中，菌体生物量及β－胡萝卜素产量随时间变化的曲线图。图2是样品层析结果及与β－胡萝卜素标准样品的比对。请回答下列问题：(1)发酵罐内三孢布拉氏霉菌培养基按物理形态分应为________，玉米粉和豆饼为微生物的生长分别主要提供________。在接入菌种前，应对培养基进行________，以避免杂菌污染。(2)图1中，菌体的最快增长出现在第________h，菌体的生物量到达最大值后下降，其原因是______________________________________，为保证连续的生产，应采取的措施是_________________________________________________。(3)β－胡萝卜素常用的提取方法为________法，实验表明，石油醚的提取效果远好于丙酮和酒精，原因是______________________________________________________________________________________________________________。(4)将萃取的胡萝卜素样品与β－胡萝卜素标准样品进行比对，结果如图2。从图中分析可知，色带________为β－胡萝卜素。解析(1)发酵罐内三孢布拉氏霉菌培养基按物理形态分应为液体培养基，玉米粉和豆饼为微生物的生长分别主要提供碳源和氮源。在接入菌种前，应对培养基进行高压蒸汽灭菌，以避免杂菌污染。(2)图1中，菌体的最快增长出现在第100h，菌体的生物量到达最大值后下降，其原因是营养物质缺乏，有害代谢产物积累，为保证连续的生产，应采取的措施是连续加入新的培养液，同时排出代谢产物。(3)提取β－胡萝卜素常用的方法为有机溶剂萃取法，实验表明，石油醚的提取效果远好于丙酮和酒精，原因是石油醚为水不溶性有机溶剂，萃取效果好。(4)从图中分析可知，色带Ⅰ为β－胡萝卜素，萃取的胡萝卜素样品含有其他色素杂质，通过纸层析结果都有两个点。其余两色带在固定相中移动的速度慢，说明其极性比β－胡萝卜素高，且具有亲水性，易与滤纸上吸附的水结合。答案(1)液体培养基碳源和氮源高压蒸汽灭菌(2)100营养物质缺乏，有害代谢产物积累连续加入新的培养液，同时排出代谢产物(3)有机溶剂萃取石油醚为水不溶性有机溶剂，萃取效果好(4)Ⅰ4．青蒿素，无色针状晶体，易溶于有机溶剂，不溶于水，不易挥发。获取途径主要是从黄花蒿中直接提取得到。根据生物相关知识，回答下列问题：(1)使用水蒸气蒸馏法________(填“适于”或“不适于”)提取青蒿素，原因是____________________________________________。(2)从黄花蒿中提取青蒿素时，应采用________法，并且通常在提取前将黄花蒿茎叶进行________和干燥，以提高效率；干燥过程应控制好________和________，以防止青蒿素分解。(3)提取过程中宜采用________加热以防止燃烧、爆炸；所得液体浓缩前需进行________。(4)最后需要对所提取物质进行________，以确定是否提取到青蒿素。解析(1)水蒸气蒸馏法适用于蒸馏挥发性物质，而青蒿素不易挥发。(2)青蒿素易溶于有机溶剂，适合用萃取法进行分离，萃取前将原料进行粉碎和干燥，以便提高效率，干燥的温度和时间要控制好，防止萃取物分解。(3)水浴加热可以防止因受热不均引起燃烧和爆炸，萃取后需要先过滤，再浓缩。(4)必须经过鉴定才能确定所得提取物是青蒿素答案(1)不适于水蒸气蒸馏法适用于蒸馏挥发性物质，而青蒿素为非挥发性物质，不能随水蒸气蒸馏出(2)萃取粉碎温度时间(3)水浴过滤(4)鉴定5．桉叶油的化学性质与玫瑰精油相似，其中含有的黄酮、熊果醇、精油等多种成分具有抑菌作用。某生物兴趣小组提取了桉叶油，并对桉叶油的抑菌活性进行了研究，回答下列问题：(1)提取桉叶油时应选择________(填“新鲜”或“烘干”)的桉树叶，原因是__________________________________________。(2)可采用水蒸气蒸馏法提取桉叶油，原因是桉叶油具有________________________的特点；此法不适用于胡萝卜素的提取，原因是______________________________。从蒸馏出的油水混合物中分离的油层还会含有一定的水分，需要添加________除水。(3)该小组采用抑菌圈法检测桉叶油的抑菌活性。抑菌圈法是利用待测药物在琼脂平板中扩散使其周围的细菌生长受到抑制而形成透明圈(即抑菌圈)，再根据抑菌圈大小判定待测药物抑菌效价的一种方法。下表是该小组检测对照组和实验组对供试菌的抑菌作用(抑菌圈的大小/mm)得到的实验结果：无菌水(对照组)桉叶油(实验组)枯草芽孢杆菌09.00金黄色葡萄球菌07.67大肠杆菌09.67白色念珠菌09.33对照组应________(填“接种”或“不接种”)细菌。由表中数据可知，桉叶油对________的抑菌效果最强。解析(1)因新鲜桉树叶中桉叶油含量高，而且桉叶油易挥发，故提取桉叶油时应选择新鲜的桉树叶。(2)桉叶油化学性质稳定、易挥发、难溶于水，故可采用水蒸气蒸馏法提取桉叶油；由于胡萝卜素化学性质稳定、不易挥发、不溶于水，不能随水蒸气蒸馏出，易溶于某些有机溶剂，可以使用有机溶剂萃取；从蒸馏出的油水混合物中分离的油层还会含有一定的水分，需要添加无水硫酸钠除水。(3)据题意可知，该对照实验是检测桉叶油的抑菌活性，自变量是是否有桉叶油，故对照组也应接种细菌。由表中数据可知，接种大肠杆菌的抑菌圈最大为9.67，故桉叶油对大肠杆菌的抑菌效果最强。答案(1)新鲜桉叶油易挥发，新鲜桉树叶中桉叶油含量高(2)化学性质稳定、易挥发、难溶于水胡萝卜素不易挥发，不能随水蒸气蒸馏出无水硫酸钠(3)接种大肠杆菌6．姜黄是传统药食两用植物，姜黄根茎中的活性物质，微溶于水，可溶于乙醇、丙酮和氯仿等。用其提取的姜黄素具有抗肿瘤活性，临床应用十分广泛。回答下列问题。(1)根据姜黄素____________________的特点，可采用有机溶剂萃取的方法，萃取剂要注意其________和使用量，以提高萃取效率。(2)姜黄素存在于细胞中，用萃取剂浸泡提取前，先要对姜黄根茎进行________和干燥处理，这样有助于________的破裂，溶剂也容易进入细胞内部直接溶解溶质。萃取液在浓缩之前，还要进行________，除去萃取