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文档简介

考点二动物细胞融合技术与单克隆抗体1.动物细胞融合技术[易错提示]灭活病毒诱导法是动物细胞融合特有的方法。2.单克隆抗体及其应用(1)制备原理:一种B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体,B淋巴细胞在体外无限增殖;骨髓瘤细胞能在体外;B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合得到的细胞,既能无限增殖,又能产生特异性抗体。[易错提示]血清抗体与单克隆抗体的比较名称产生特点血清抗体由浆细胞分泌一般从血清中分别,产量低、纯度低、特异性差单克隆抗体由杂交瘤细胞分泌特异性强、灵敏度高、能大量制备(2)制备过程。(3)优点。①能精确地识别的微小差异。②与特定发生特异性结合。③可以大量制备。(4)用途。①作为诊断试剂,如利用同位素或荧光标记的单克隆抗体定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病。②用于治疗疾病和,如抗体—药物偶联物(ADC)。[答案自填]1.一个灭活病毒细胞膜的流淌性杂交细胞单克隆抗体2.(1)不能无限增殖杂交瘤(2)杂交瘤细胞能分泌所需抗体(3)①抗原②抗原(4)②运载药物[模型命题点思索]为研制抗病毒A的单克隆抗体,某同学以小鼠甲为试验材料设计了以下试验流程。回答下列问题:(1)上述试验前必需给小鼠甲注射病毒A,该处理的目的是_____________________________________________________。(2)写出以小鼠甲的脾脏为材料制备单细胞悬液的主要试验步骤:_____________________________________________________。(3)为了得到能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞,须要进行筛选。图中筛选1所接受的培育基属于,运用该培育基进行细胞培育的结果是__________________________________________________。图中筛选2含多次筛选,筛选所依据的基本原理是_____________________。(4)若要使能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞大量增殖,可接受的方法有________________________________(答出2点即可)。提示:(1)诱导小鼠甲产生能够分泌抗病毒A抗体的B淋巴细胞(2)取小鼠甲的脾脏用机械法或用胰蛋白酶处理,使其分散成单个细胞,加入培育液制成单细胞悬液(3)选择培育基只有杂交瘤细胞能够生存抗原与抗体的反应具有特异性(4)将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内增殖;将杂交瘤细胞在体外条件下大规模培育1.植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较2.单克隆抗体制备过程中两次筛选的缘由、方法及目的项目第一次筛选其次次筛选筛选缘由诱导融合后会得到多种杂交细胞,另外还有未融合的细胞由于小鼠在生活中还受到其他抗原的刺激,所以经选择性培育获得的杂交瘤细胞中有能产生其他抗体的细胞筛选方法用特定的选择培育基筛选:未融合的细胞和同种细胞融合后形成的细胞(“B—B”细胞、“瘤—瘤”细胞)都会死亡,只有杂交瘤细胞(“B—瘤”细胞)才能生长用多孔培育皿培育,在每个孔只有一个杂交瘤细胞的状况下起先克隆化培育和抗体检测,经多次筛选得到能产生特异性抗体的细胞群筛选目的得到杂交瘤细胞得到能分泌所需抗体的杂交瘤细胞考向1动物细胞融合1.(2024·江苏选择考改编)下图表示利用细胞融合技术进行基因定位的过程,在人—鼠杂交细胞中人的染色体会以随机方式丢失,通过分析基因产物进行基因定位。现检测细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中人的4种酶活性,只有Ⅱ具有芳烃羟化酶活性,只有Ⅲ具有胸苷激酶活性,Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脱氢酶活性。下列相关叙述错误的是()A.加入灭活仙台病毒的作用是促进细胞融合B.细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分别为人—人、人—鼠、鼠—鼠融合细胞C.芳烃羟化酶基因位于2号染色体上,乳酸脱氢酶基因位于11号染色体上D.胸苷激酶基因位于17号染色体上,磷酸甘油酸激酶基因位于X染色体上解析:选B。动物细胞融合过程中,可以利用灭活的仙台病毒促进细胞融合,A项正确。细胞Ⅲ中保留了人的X、11、17号染色体,故不会是鼠—鼠融合细胞,B项错误。分析题图可知,Ⅰ保留X、11号染色体,Ⅱ保留2、11号染色体,具有芳烃羟化酶活性,Ⅲ保留X、11、17号染色体,具有胸苷激酶活性,Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脱氢酶活性,所以限制芳烃羟化酶合成的基因位于2号染色体上,限制胸苷激酶合成的基因位于17号染色体上,限制磷酸甘油酸激酶合成的基因位于X号染色体上,限制乳酸脱氢酶合成的基因位于11号染色体上,C项、D项正确。考向2单克隆抗体的制备及应用2.人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白,制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。下面是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图。下列有关分析错误的是()A.体外培育单个B淋巴细胞也可以获得大量抗HCG的抗体B.过程③培育后的细胞均能产生特定抗体C.图中细胞集落a可用于大规模培育,生产抗HCG单克隆抗体D.图中能产生单克隆抗体的细胞在培育过程中不会出现接触抑制的现象解析:选A。体外培育的单个B淋巴细胞无法无限增殖,故不能获得大量抗HCG的抗体,A项错误;过程③培育后的细胞是经过多孔玻璃板筛选得到的杂交瘤细胞,均能产生特定抗体,B项正确;据题图可知,题图中细胞集落a能够产生阳性反应,故可用于大规模培育,生产抗HCG单克隆抗体,C项正确;由于杂交瘤细胞既保留了鼠瘤细胞无限增殖的特点,又有B淋巴细胞产生特异性抗体的作用,所以题图中能产生单克隆抗体的细胞在培育过程中不会出现接触抑制的现象,D项正确。3.(2024·广州一模)双特异性抗体(BsAb)是一种能够同时结合两种抗原的抗体。CD19和CD47是淋巴瘤细胞广泛表达的表面标记物(CD19在B细胞表面普遍存在,CD47在正常组织细胞上普遍存在)。探讨人员将两种产生不同抗体的杂交瘤细胞融合成双杂交瘤细胞,最终得到了能同时结合CD19和CD47的BsAb,它可以结合同一靶细胞上两种不同的抗原,通过这种“双靶向”模式增加对肿瘤细胞的选择性,在体内、体外试验中均可显著杀伤淋巴瘤细胞。下列叙述错误的是()A.同时注射2种抗原后提取B细胞,易得大量同时分泌两种抗体的浆细胞B.获得BsAb的过程中,筛选双杂交瘤细胞的依据是抗原—抗体的特异性结合C.运用BsAb治疗对正常细胞的损伤小于联合运用CD19单抗和CD47单抗D.若BsAb的部分结构发生变更,可能会出现治疗效果降低的状况解析:选A。一种浆细胞只能分泌一种相应的抗体,不能同时分泌两种抗体,A项错误;双杂交瘤细胞能产生BsAb,依据抗原—抗体的特异性结合,可筛选出能产生抗CD19和CD47的BsAb的双杂交瘤细胞,B项正确;依据题意可知,CD19在B细胞表面普遍存在,CD47在正常组织细胞上普遍存在,运用BsAb治疗,可识别同时具有

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