(高清版)GBT 40459-2021 肥料中多种植物生长调节剂的定性筛选 液相色谱-质谱联用法

GB/T40459—2021肥料中多种植物生长调节剂的定性筛选液相色谱-质谱联用法国家市场监督管理总局国家标准化管理委员会IGB/T40459—2021本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由中国石油和化学工业联合会提出。本文件由全国肥料和土壤调理剂标准化技术委员会(SAC/TC105)归口。本文件起草单位：山东省产品质量检验研究院、上海化工院检测有限公司、云南省化工产品质量监天邦化工有限公司、临沂市检验检测中心。1GB/T40459—2021肥料中多种植物生长调节剂的定性筛选液相色谱-质谱联用法本文件描述了肥料中多种植物生长调节剂的定性筛选液相色谱-质谱联用法。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法本文件没有需要界定的术语和定义。4原理5试剂和材料5.4甲酸溶液(I):准确移取0.10mL甲酸(5.3),用水稀释至1000mL。5.5甲酸溶液(Ⅱ):准确移取1.0mL甲酸(5.3),用水稀释至1000mL。5.6甲醇-甲酸溶液：准确量取200mL甲酸溶液(Ⅱ)(5.5),用甲醇(5.2)稀释至1000mL,混匀。现配现用。2GB/T40459—2021醇溶解并定容至刻度线，得到质量浓度为1000pg/mL的标准储备液，置于-18℃条件下避光保存。浓度为1pg/mL。现用现配。中复硝酚钠、赤霉酸、萘乙酸、脱落酸、2,4-D、吲哚丁酸和吲哚-3-乙酸的质量浓度为50ng/mL、6.2高速离心机：转速不低于6000r/min。6.5漩涡混合器。7分析步骤7.2样品提取称取0.1g～0.3g样品(精确至0.0001g),准确加入甲醇-甲酸溶液25mL于离心管中，用漩涡混合器均质1min,25℃下超声波清洗器中水浴超声30min,然后在6000r/min条件下离心5min,取上7.3色谱及质谱参考条件c)流动相：甲醇(5.2)-甲酸溶液(I)(5.4),3GB/T40459—2021表1液相色谱梯度洗脱条件时间/min流动相[甲醇(5.2)]/%流动相[甲酸溶液(I)(5.4)]/%0质谱参考条件如下：a)离子源类型：电喷雾离子源(ESI);b)电离方式：电喷雾电离，氯吡脲、烯效唑、多效唑和6-苄氨基嘌呤采用正离子模式(ESI+),复d)毛细管电压：+3500V,—2000V;e)离子源温度：260℃;f)鞘气温度：300℃;j)检测方式：多反应监测(MRM),多反应监测条件参见附录B中表B.1。7.4测定7.4.1标准工作曲线的绘制将标准工作溶液(5.10),按照浓度由低到高的顺序依据仪器条件(7.3)进行测定，以定量离子色谱峰的峰面积为纵坐标，与其对应的标准溶液浓度为横坐标作图，绘制标准工作曲线。按7.3的仪器条件对标准工作溶液和样品溶液进行测定，如果样品溶液中色谱峰的保留时间与标准物质色谱峰的保留时间一致；且样品溶液中监测离子的相对丰度比与相当浓度的标准溶液的监测离子对的相对丰度比的偏差不超过表2的规定范围，则可判定样品中存在相应的目标成分。多种植物生长调节剂标准物质总离子流图和提取离子质谱图参见附录C。表2定性测定时相对离子丰度最大允许偏差K>5020<K≤5010<K≤20K≤10士20士30士504GB/T40459—2021取预处理后的待测液(7.2),按照条件(7.3)进行测定，记录色谱峰的保留时间和峰面积，由色谱峰的峰面积可从标准曲线上求出待测物的浓度。样品溶液中待测物的响应值均应在仪器测定的线性范围之内，外标法定量。待测物含量高的试样用甲醇-甲酸溶液(5.6)稀释后测定。7.5空白试验除不称取试样外，均按上述步骤进行。7.6平行试验做两份试样的平行测定。8试验数据处理试样中被测组分的含量X,以质量分数计，单位以毫克每千克(mg/kg)表示，按式(1)计算： (1)式中：p;——由标准曲线查得样品溶液中待测物的质量浓度，单位为纳克每毫升(ng/mL);po——由标准曲线查得空白溶液中待测物的质量浓度，单位为纳克每毫升(ng/mL);V——样品提取后的提取溶液体积，单位为毫升(mL);D;——样品稀释倍数；计算结果至少保留两位有效数字，取平行测定结果的算术平均值作为测定结果。注：复硝酚钠含量以5-硝基邻甲氧基苯酚钠、4-硝基苯酚钠和2-硝基苯酚钠的含量总和计。9允许差在同一实验室，由同一操作者使用相同设备，按相同的测试方法，并在短时间内对同一被测对象相互独立进行测试获得的两次独立测试结果的绝对差值不大于这两个测定值的算术平均值的20%,以大于这两个测定值的算术平均值的20%的情况不超过5%为前提。5(资料性)多种植物生长调节剂信息多种植物生长调节剂信息表见表A.1。表A.1多种植物生长调节剂信息表序号化合物英文名称分子式相对分子质量CAS号结构式1复硝酚钠Sodiumnitrophenolate22-硝基苯酚钠2-NitrophenolSodiumSaltC₆H₄NNaO₃824-39-50Na0Na-034-硝基苯酚钠4-NitrophenolSodiumSaltC₆H₄NNaO₃824-78-2之之o45-硝基邻甲氧基苯酚钠5-NitroguaiacolSodiumSaltC₇H₆NNaO₄67233-85-6(Na-52,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)2,4-DichlorophenoxyaceticacidCgH₆Cl₂O₃221.0494-75-76脱落酸AbscisicacidC₁₅H₂oO₄264.3214375-45-2(7萘乙酸1-NaphthylaceticacidC₂H₁₀O₂86-87-3OLIOLI8赤霉酸GibberellicacidCi9H₂₂O₆77-06-5OHOHOOIIU6GB/T40459—2021表A.1多种植物生长调节剂信息表(续)序号化合物分子式相对分子质量CAS号9吲哚-3-乙酸C₁₀H₉NO₂H吲哚丁酸4-(3-indolyl)-C₁2H₁₃NO₂氯吡脲ForchlorfenuronC₁2H₁₀ClN₃O68157-60-8烯效唑Uniconazole83657-22-1多效唑Paclobutrazol6-苄氨基嘌呤6-Benzylaminopurine7GB/T40459—2021(资料性)多反应监测(MRM)条件多反应监测(MRM)条件见表B.1。表B.1多反应监测(MRM)条件序号目标物定性离子对(m/z)定量离子对(m/≈)锥孔电压/V碰撞能量/eV12-硝基苯酚钠138.0>92.0138.0>108.0138.0>108.024-硝基苯酚钠138.0>92.0138.0>108.0138.0>108.035-硝邻甲氧基苯酚钠168.0>123.0168.0>153.0168.0>153.04萘乙酸185.0>113.0185.0>141.0185.0>141.055脱落酸263.0>153.0263.0>153.0263.0>219.06赤霉酸345.0>143.0345.0>143.0345.0>239.072,4-D219.0>125.0219.0>161.0219.0>161.08吲哚-3-乙酸174.0>130.0174.0>130.0174.0>128.19吲哚丁酸201.9>115.9201.9>158.0201.9>158.0氯吡脲248.0>129.0248.0>129.0248.0>155.0烯效唑292.0>70.0292.0>70.0292.0>125.0多效唑294.0>70.0294.0>70.0294.0>125.06-苄氨基嘌呤226.1>147.9226.1>91.1226.1>91.18(资料性)标准物质的总离子流质谱图和提取离子质谱图标准物质的总离子流质谱图见图C.1,提取离子质谱图见图C.2～图C.4。'min图C.1标准物质的总离子流质谱图95.170226.1>91.15.1706卡氨基嘌呤离子对6卡氨基嘌呤离子对226,1>147,906.780294.0>70.04-2-6.7806.780294.0>125.02-106.190248.0>129.00.5-o3232248.0>155.07.350122292.0>70.001292,0>125,0min图C.2标准物质(多效唑、烯效唑、氯吡脲和6-苄氨基嘌呤)的提取离子质谱图强度/%强度/%0-20-00-2.540-0-50-219,0>125.02,4-D离了对219.0>161.04.898138.0>92.04.8982硝基苯酚钠离子对138.0>108.04.899138.0>92.04,8984-基苯险钠离子对138.0>108.04.951168.0>123.04.9515硝基邻甲氧基苯酚钠离子对4.951168.0>153.04.8084.808345.0>143.04.808赤霉酸离子对345.0>239.0253255.9916.002ll