QBT 1940-1994 饲料酵母行业标准

4031主题内容与适用范围本标准适用于以菌体蛋白为主的饲料酵母。本标准不适用于以固体原料接种发酵，经干燥后获得的含酵母饲料。2引用标准GB191包装储运图示标志GB601化学试剂滴定分析(容量分析)用标准溶液的制备GB603化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备GB4634饲料粗纤维测定方法GB6004试验筛用金属编织方孔网GB6432饲料粗蛋白质测定方法GB6682分析试验室用水规格和试验方法GB8451食品添加剂中重金属限量试验法GB10648饲料标签·GB13079饲料中总砷的测定方法GB13091饲料中沙门氏菌的检验方法3术语3.1饲料酵母：指以碳水化合物(淀粉，糖蜜，以及味精、造纸、酒精等高浓度有机废液)为主要原料，经液态通风培养酵母菌，并从其发酵醪中分离酵母菌体(不添加其他物质),酵母菌体经干燥后制得的产3.2酵母菌：主要指产朊假丝酵母菌(Candidautilis),热带假丝酵母菌(Candidatropicalis),园拟酵母菌(Torulautilis),球拟酵母菌(Torulopsisutilis)和酿酒酵母菌(Saccharomycescerevisiae)等。3.3细胞数：指样品加水稀释后，在显微镜下能看见的酵母细胞数量。3.4粗纤维：指样品经稀酸、稀碱处理，脱脂去灰后的有机物(纤维素及少量半纤维素、木质素)的总称。3.5粗蛋白质：指样品经水洗除去无机氮化合物后，用凯氏定氮法测得的蛋白质含量。4技术要求4.1感官要求见表1。中华人民共和国轻工业部1994-04-23批准1994-12-01实施表1项县优等品一等品合格品淡黄至褐色具有酵母的特殊气味，无异臭味应通过SSW0.400/0.250mm的试验筛无异物4.2理化要求见表2。项目优等品一等品合格品水分，%≤8.09.0灰分，%≤8.09.0碘反应(以碘液检查)不得呈蓝色细胞数，亿个/克≥粗蛋白质，%≥粗纤维，%≤4.3卫生要求见表3。项目别优等品一等品合格品砷(以As计),mg/kg≤重金属(以Pb计),mg/kg≤沙门氏菌不得检出5试验方法5.1试验要求本方法中所用的水，在未注明其它要求时，均指蒸馏水或去离子水，应符合GB6682中三级水的规定。所用的试剂，在未注明规格时，均指分析纯(A.R)。试验方法中的“溶液”在未注明溶剂时，均为水溶测定样品，必须做平行试验。5.2水分5.2.1.原理样品于103℃直接干燥，所失质量的百分数即为该样品的水分。5.2.2仪器a.电热干燥箱：控温103℃±2℃;b.分析天平：感量0.1mg;d.干燥器：用变色硅胶作干燥剂。5.2.3分析步骤称取试样3g(称准至0.0002g)于已烘至恒重的称量瓶中，放入103C±2℃电热干燥箱内烘干5h5.2.4计算式中：X₁——样品的水分，%;m:——烘干前称量瓶加试样的质量，g;m₂——烘干后称量瓶加试样的质量，g。5.2.5结果的允许差平行试验测定值之差≤0.1%。5.3灰分5.3.1原理样品经550℃灼烧后所残留的物质，用百分数表示，即为该样品的灰分。a.高温炉：控温550℃±20℃;b.分析天平：感量0.1mg;c.瓷坩埚：50mL;d.干燥器：用变色硅胶作干燥剂。5.3.3分析步骤称取试样2g(称准至0.0002g)于已灼烧至恒重的瓷坩埚中，在电炉上慢慢加热使试样炭化至无烟，放入高温炉中，于550℃±20℃灼烧5h后，取出，盖上盖子，在空气中冷却约1min,移入干燥器中5.3.4计算式中：X₂——样品的灰分，%;m₁——灼烧前瓷坩埚加试样的质量，g;m₂--灼烧后瓷坩埚加试样的质量，g。5.3.5结果的允许差平行试验测定值之差≤0.1%。5.4碘反应碘液与样品中的淀粉反应呈蓝色，由此可判断样品中是否含有淀粉。5.4.2试剂a.碘溶液(0.1mol/L):称取1.3g碘和3.5g碘化钾，溶于50mL水，稀释至100mL,贮存于棕40.5b.碘指示液：吸取10mL碘溶液(0.1mol/L),用水稀释至100mL.5.4.3分析步骤称取试样0.50g,加入10mL水稀释摇匀，用吸管滴加0.5mL碘指示液，观察是否呈现蓝色，并作记录5.5细胞数5.5.1原理样品加水稀释后，滴入血球计数板内，通过显微镜直接计数法，测定出计数室内的酵母细胞数，再根据计数室的体积，计算出该样品的细胞数。5.5.2仪器a.血球计数板；b.生物显微镜；c.分析天平：感量0.1mg。5.5.3分析步骤称取试样0.5～1.0g(称准至0.0002g),加水稀释至100mL,充分摇匀(摇时可加入数十粒小玻璃球以便使样品中的细胞充分分散),吸取1mL该菌液再稀释100倍(稀释倍数应以血球计数板的每小格内含有1～2个酵母细胞为宜)。取一干净的血球计数板，将盖玻片置于计数板上，用吸管吸取稀释后的菌液，加1滴于盖玻片边缘菌液自行渗入，充满整个计数室。静置1～2min,使细胞全部沉降至计数板表面。用生物显微镜计数(至少需数100个小格)。5.5.4计算式中：X₃---样品的细胞数，亿个/克；n——所数得的小格数；A---n个小格内酵母细胞的总数，个；D-—试样的稀释倍数；m---试样的质量(以干物质计),g;400--血球计数板上总的小格数；10⁴---相当于计数室容积扩大为1mL时的换算系数。5.5.5结果的允许差平行试验测定值之差≤10%。5.6粗蛋白质5.6.1A法5.6.1.1样品处理称取试样0.2g(称准至0.0002g)于250mL烧杯中，加入50mL水，煮沸。静置1h,用双层定量滤纸过滤。于50～60℃烘至略干时，将滤纸卷成细卷放入凯氏烧瓶中，测其蛋白质含量。5.6.1.2分析步骤按GB6432执行。5.6.2B法5.6.2.1原理先用水洗去被测样品中的无机氮化合物，然后采用凯氏定氮法测定，样品与硫酸和催化剂一同加热硝化，使其蛋白质分解。生成的氨与硫酸结合生成硫酸铵，然后加碱蒸馏，使氨逸出，用过量硼酸吸收后，以酸滴定测出氮含量，在乘以氮与蛋白质的换算系数，即为该样品的蛋白含量。HMi5.6.2.2仪器a.凯氏定氮仪：成套或自行组装的常量蒸馏式；5.6.2.3试剂和溶液a.不含氮的水：取强碱性及强酸性阴阳离子交换树脂(2:1),依次装入直径3cm、长5cm的交换柱中，将水以3～5mL/min的流速通过交换柱；b.浓硫酸：98%;c.氢氧化钠溶液(400g/L):称取400g氢氧化钠溶于1L不含氮的水中，静置，吸取上层清液于带橡皮塞的瓶内；d.硼酸溶液(20g/L):称取2g硼酸，用不含氮的水溶解，并定容至100mL;和无水硫酸钾按1:9的比例混合并研细；f.盐酸标准溶液[c(HCl)=0.1mol/L];按GB601配制与标定；g.溴甲酚绿混合指示液：5g/L溴甲酚绿乙醇溶液和1g/L甲基红乙醇溶液按等体积混合。5.6.2.4分析步骤a.样品处理称取试样0.2g(称准至0.0002g)于250mL烧杯中，加入50mL水，煮沸。静置1h,用双层定量滤纸过滤。于50～60℃烘至略干时，将滤纸卷成细卷放入凯氏烧瓶中，测其蛋白质含量。采用成套仪器测定样品的蛋白质含量，按使用说明进行操作。自行组装的仪器按下述方法进行操b.样品消化将滤纸卷成细卷放入250mL凯氏烧瓶中，加入5g混合催化剂，缓缓沿壁加入10mL浓硫酸，摇匀，在通风橱内文火加热至泡沫停止发生后，大火使之沸腾。待溶液清亮后，再继续加热20～30min。c.蒸馏尖端插入盛有20g/L硼酸溶液25mL和溴甲酚绿混合指示液2～3滴的三角瓶中，馏出管尖端应在液面之下。通过加液管加入400g/L氢氧化钠溶液40mL于凯氏烧瓶中，轻轻摇勾，使内容物混匀，然后加热蒸馏。待馏出液达到约100mL时，停止蒸馏。d.滴定用0.1mol/L盐酸标准溶液滴定馏出液，颜色由蓝绿色消失转变为灰红色即为终点。记录消耗盐酸标准溶液的毫升数。5.6.2.5计算a.样品的总氮含量按式(4)计算： 式中：X₄——样品的总氮含量，%;V₁——空白滴定时消耗盐酸标准溶液的毫升数，mL;Vz-—试样滴定时消耗盐酸标准溶液的毫升数，mL;c——盐酸标准溶液的浓度，mol/L;0.014-—与1.00mL盐酸标准溶液〔c(HCl)=1.000mol/L〕相当的以克表示的氮的质量。b.样品的蛋白质含量按式(5)计算：X₅=X₄×6.25…………(5)式中：X₅…-样品的蛋白质含量，%;X₄--样品的总氮量，%;6.25----氮换算成蛋白质的系数。5.6.2.6结果的允许差测定总氮平行试验测定值之差≤0.1%。5.7粗纤维按GB6434执行。5.7.2.1原理乙醇除去醚溶物，经高温灼烧扣除灰分，所余量称为该样品的粗纤维含量。5.7.2.2仪器a.分析天平：感量0.1mg;b.电热干燥箱：控温103℃±2℃;c.高温炉：控温550℃士20℃;g.古氏坩埚：30mL。应预先加入30mL酸洗石棉悬浮液，再抽干，以石棉厚度均匀，不透光为宜；h.粗纤维自动分析仪。5.7.2.3试剂和溶液a.硫酸溶液(12.5g/L);b.氢氧化钠溶液(12.5g/L);c.盐酸：1+3溶液；d.酸洗石棉：市售或自制(将中等长度酸洗石棉在盐酸溶液(1+3))中煮沸45min,过滤后于550C灼烧16h,用12.5g/L硫酸溶液浸泡且煮沸30min。过滤并用水洗净酸。用12.5g/L氢氧化钠溶液煮沸30min,过滤。再用少量硫酸溶液洗一次，用水洗净，烘干后于550℃灼烧2h,其试验结果为每克石棉含粗纤维值小于1mg);e.乙醇：95%,化学纯；5.7.2.4分析步骤采用粗纤维自动分析仪测定样品的粗纤维含量，按仪器说明书进行操作。非自动测定仪按下述要求进行操作。称取试样2g(称准至0.0002g),放入消煮器中，加入已沸腾的12.5g/L硫酸溶液200mL和1滴正丁醇，立即加热，应使其在2min内沸腾，且连续微沸30min,过滤，用沸器中，加入已沸腾的12.5g/L氢氧化钠溶液200mL,同样准确微沸30min。立即在铺有石棉的古氏坩埚上抽滤，先用25mL硫酸溶液(12.5g/L)洗涤，再用沸蒸馏水洗至滤液为中性。用15mL乙醇洗涤残渣，再用15mL乙醚洗涤残渣，将古氏坩埚和残渣放入烘箱，于103℃±2℃下烘干2h,移入干燥器中冷却至30min,称量。再于550℃±20℃的高温炉中灼烧5h,取出，冷却约1min后，放入干燥器中冷却至5.7.2.5计算式中：X₆~—样品的粗纤维含量，%;………m₁——103℃烘于后坩埚及试样残渣的质量，g;m₂—550℃灼烧后坩埚及试样灰分的质量，g。5.7.2.6结果允许差平行试验测定值之差≤0.1%。5.8砷按照GB13079执行。5.9重金属按照GB8451执行。5.10沙门氏菌按照GB13091执行。6检验规则6.1组批格证的产品为一批。6.2抽样按表4抽取样品。(袋)抽取样本数(袋)合格判定数不合格判定数512812233201～35000346.3不合格分类A类不合格-—砷、重金属、沙门氏菌、碘反应、细胞数、粗蛋白质、粗纤维。6.4交收检验6.4.1产品出厂前，应由生产厂的质检部门负责按本标准规定逐批进行检验。符合标准要求，并签署质量合格证产品方可出厂。6.5交收检验判定规则6.5.1按表3抽取样本，进行包装和净重的检查。达到不合格判定数者，则判整批产品为不合格品。6.5.2按表3抽取样本，再从每个样本中抽取100g样品，将所抽取的样品混匀，用对角四分法分为两份，一份封存备查，另一份做感官和理化分析。按表1和表2中规定的指标进行检测。如有某项指标不符合标准要求时，可重新自两倍量包装中抽取样品进行复验。以复验结果为准。若仍有一项A类不合格或两项B类不合格达不到标准要求时，则判该批产品为不合格品。6.6型式检验6.6.1一般情况下，企业半年进行一次型式检验，但有下列情况之一时，亦须进行型式检验。a.更改主要原辅材料；b.更改关键工艺；c.新试制的产品或正常生产的产品停产3个月以上(或半年),重新恢复生产时