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文档简介
FDP:膀胱癌细胞产生血管内皮生长因子,增加外周血管的通透性,外渗的纤维蛋白原转变为纤维蛋白,在纤维蛋白酶作用下分解为FDP(纤维蛋白降解产物)。敏感性和特异性分别为68%、78%。端粒酶:在生殖细胞和肿瘤细胞中出现,体细胞中不表达,敏感性和特异性分别为74%、79%。透明质酸和透明质酸酶:二者合用敏感性、特异性达92%、85%。FCM:敏感性、特异性分别为58%、83%(非整倍体细胞)。BLCA-4:为核基蛋白的一种,对膀胱癌诊断的敏感性、特异性达96%、100%。其它标记物:细胞角蛋白、LewisX抗原、微卫星及表面分子,如M344抗原、19A211、DD23、CD44等。膀胱癌新的肿瘤标记物---NMP22
膀胱镜检+组织活检:膀胱癌诊断的金标准缺点:侵入性,不适合大量人口普查,主观影响因素大。尿细胞学检查:诊断膀胱癌及术后监测复发常用非侵入性检查。缺点:假阴性高、敏感性差。目前,迫切需要侵入性小,更敏感、更客观的诊断技术。
NMPs(nuclearmatrixprotein,核基蛋白)是细胞核的动态骨架,决定细胞核的形态,维持DNA的三维结构,是细胞核的结构单位。
NMP22(NMPs的一种)是尿路上皮特异性肿瘤相关标记物。在BTCC中NMP22因肿瘤细胞凋亡由细胞核释放进入尿中。NMPs的生物学特性1974年Berezney和Caffy首次提出NMPs的概念。研究证明:NMPs主要由核纤层蛋白、核孔复合体、核糖蛋白网架结构构成,是细胞核内部框架结构的关键部分。决定胞核的形态,调控有丝分裂过程。在DNA复制,RNA合成,激素的连接,基因表达的调控中起重要作用。NMPs与肿瘤的关系
NMPs在许多重要的生理活动中起关键作用,许多细胞癌变都伴随着NMP的改变。许多肿瘤特异性NMPs被发现:Robert(1996)对癌变和正常膀胱组织进行比较后发现了6种存在于癌变组织中的蛋白,而正常组织中无表达,它们是NMPs,BLCA-1~BLCA6。Mark(1996)对膀胱癌病人的尿液进行检测后发现一种核基质蛋白NMP22的含量特别高,用NMP22值预测膀胱癌病人术后复发的危险性,有较高的敏感性和特异性。NMP22的检测单抗的制备:膀胱癌细胞核------提纯NMP22-----免疫小鼠-----获取单抗(mAB302-22,Mab302-18)----制备酶联免疫反应试剂盒(ELLIS)。检测:试剂盒(标准品、参照品、检验样品)------与NMP22结合-----洗涤后与标有地高辛的单抗反应------与抗地高辛酶联抗体反应------邻苯二胺显色-----与标准品吸收光度曲线比较。(抗原在尿液中的浓度直接反映于呈色强度)临界值的确定
David等用尿NMP22值诊断膀胱癌的研究中用6.4u/ml和10.0u/ml作临界值,结果与膀胱镜检和活检对比:敏感性特异性6.4u/ml68.2%79.8%10.0u/ml48.5%91.8%Sinan等报道:敏感性特异性6.4u/ml88%69%10.0u/ml73%81%
美国FDA进行大量数据统计后,在兼顾敏感性和特异性的基础上确定临界值为10.0u/ml。NMP22与其它方法的比较Craig对330名可疑病人进行尿NMP22测定、尿脱落细胞检查与组织活检对比:敏感性特异性P值NMP22100%85%(临界值10u/ml)<0.001
尿脱落细胞33%100%Albert按分期分级进行了比较:
敏感性(%)NMP22测定尿脱落细胞检查Ta83.320.0T197.764.4G186.237.9G297.244.4G3
90.080.0Landman等对47例证实为膀胱癌的病人,分别用NMP22、端粒酶、BTA、尿细胞学检查进行比较(敏感性%)。NMP22和端粒酶比BTA、尿细胞学检查具有更高的灵敏度。
分期
分级
TaT1或更高CisG1G2G3NMP22818267698693端粒酶8091100657293BTA406433133679尿细胞学40266766379
NMP22与膀胱癌分期分级的关系David等对临床分期不同病人的尿NMP22值比较:例数平均值u/ml中位数u/mlP值Ta4431.18.42T16169.359.3<0.02Miyanga等将病人分为表浅组(Tis,Ta,T1),浸润组(T2、T3、T4)进行比较,阳性率前者为70%,后者为100%,两组差异有统计学意义(P〈0.05)。NMP22与膀胱癌分级的关系David等对分级不同病人的尿NMP22进行比较:
例数平均值u/ml中位数u/mlP值G11312.43.02<0.001(G1vsG2)G22724.29.14无显著差异G32634.539.5<0.001(G1vsG3)影响NMP22的因素年龄、性别、种族、吸烟等
Gennaro等报道:健康组样本中〈50岁比〉50岁值要低,女性高于男性。与种族、吸烟无明显相关性。不受非泌尿系良性疾病的影响:如糖尿病、心脏病、自身免疫病等。泌尿系疾病对NMP22的影响:
Miyanaga等对面280位住院和门诊病人、20位健康者进行比较:
NMP22u/ml
阳性比阳性率中位数范围TCC38/4780.9%40.10.0-6731.3有TCC史11/3234.4%6.10.5-555.7其它尿路癌11/2642.3%6.00.0-544.9尿结石13/2650.0%11.11.4-3207.7尿路感染19/19100%150.627.2-58228.4BPH5/3215.6%4.20.0-258.9其它疾病15/4334.9%5.00.0-206.6肾脏疾病11/4325.6%5.90.3-197.1健康者0/200.0%1.80.2-6.8不同时段的尿液影响:Miyanaga等分别取6,12,18时,三个不同时段的尿液标本检测,结果显示不同时段的尿液标本值,无统计学差异.血尿的影响:Schacfer研究报道,尿标本中含有3.0X106/ml红细胞时,相当于10个/HP,NMP22值很少超过10u/ml.血清NMP22与尿NMP22的关系:Miyanaga,Akaza等对血清,尿NMP22分别测定,结果两者之间无显著差异.尿NMP22检测的优点敏感性强:比脱细胞检查更敏感,尤其在Ta期和高分化肿瘤时,准确性强.不受血尿影响:BTA等方法因含有血样造成检查结果有误.无痛苦,无创伤的检测.方法简单
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