凝胶成像系统原理常见问题分析解答 凝胶成像系统常见问题解决方法

第第页凝胶成像系统原理常见问题分析解答凝胶成像系统常见问题解决方法一、凝胶成像系统的原理？

样品在电泳凝胶或者其他载体上的迁移率不一样，以标准品或者其他的替代标准品相比较就会对未知样品作一个定性分析。这个就是图像分析系统定性的基础。依据未知样品在图谱中的位置

一、凝胶成像系统的原理？

样品在电泳凝胶或者其他载体上的迁移率不一样，以标准品或者其他的替代标准品相比较就会对未知样品作一个定性分析。这个就是图像分析系统定性的基础。依据未知样品在图谱中的位置可以对其作定性分析，就可以确定它的成份和性质。

样品对投射或者反射光有部分的吸取，从而照相所得到的图像上面的样品条带的光密度就会有差异。光密度于样品的浓度或者质量成线性关系。依据未知样品的光密度，通过于已知浓度的样品条带的光密度指相比较就可以得到未知样品的浓度或者质量。这就是图像分析系统定量的基础。接受较新技术的紫外透射光源和白光透射光源使光的分布更加均匀，最大限度的除去了光密度不均造成的对结果的影响。

二、凝胶成像的适用范围？

1.蛋白质、核酸、多肽、氨基酸、多聚氨基酸等其他生物分子的分别纯化结果作定性分析。

2.可以确定生物分子的分子量。

3.可以应用于生物分子的定量分析中。

三、凝胶成像一般操作步骤？

1.打开凝胶成像系统开关。

2.打开电脑，系统自动打开并进入成像软件。

3.打开凝胶成像系统前面板，选择使用紫外透射光源或者白光透射光源，将相应光源安置到位。

4.将样品放置在透射光源的样品台上。

5.在成像操作界面里面选择使用Upperwhite光源，点击绿色（即时成像）按钮。

四、是不是像素越高，产品就越好？

像素是要针对成像设备来看的，比如数码相机与CCD的像素就不具备可比性，其次CCD本身的质量比单纯的像素高处与低处更紧要。对于同级别CCD紧要的指标是其大小，也就是CCD尺寸，尺寸越大其本身价值就成几何倍地增长。

五、配件紫外反射灯源的紧要用途为何？

紫外反射灯源使用并不广泛，紧要是供应非透亮材质的DNA跑胶载体如纸层析等的成像需要而使用。由于比较常用的还是透亮的琼脂糖凝胶与聚丙烯酰胺凝胶，透射光源完全可以充分，因此将紫外反射光源作为选配件不列入标配中。

六、为何要接受自动变焦镜头，有何意义？

自动变焦镜头无需手动调整，可操作性强，同时也削减了EB潜在的污染机会。再者使得将CCD内置成为了可能，从而达到防灰防尘防震的目的，更好地保护了核心部件延长产品的使用寿命。

七、如何看待CCD的一些紧要技术参数？

CCD的紧要技术参数有CCD尺寸，有效像素，信噪比，采集位数等。其中CCD尺寸与信噪比都是影响成像的关键因素，尺寸越大能接受的信号就越多。而热噪音越低，信噪比就越高，成像质量也就越好。采集位数指颜色灰度的表达范围。如采集位数为8则表示有2的8次方数量的灰度来还原颜色。

八、紫外对人体有损害，是否具有防护措施？

紫外对人体，特别是眼睛有确定损害，TOCAN凝胶成像系统具备紫外防护设施，在紫外灯开启的状态下，如不慎打开暗箱，紫外灯会自动熄灭防止对人体的损害。

九、能否在凝胶成像上直接切胶？

TOCAN凝胶成像可以，如需直接切胶，首先按系统中心的察看窗，打开装有进口防紫外玻璃的察看窗口，然后打开左右两侧专为割胶所设计的小门，即可进行切胶操作。

10、如何调整焦距聚焦光圈以获得高质量的图片？

三个紧要的可调参数分别是焦距聚焦和光圈。其中焦距调整清楚度，聚焦调整图像大小，光圈调整明暗。一般先把光圈调整到适合的亮度后，再调整聚焦将图像放到最大，最后调解焦距，在图像较大的情况下焦距比较简单调整到清楚状态，然后再把图像缩放在适合大小后成像即可。

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1.打开成像仪器电源，将样品放入工作台。

2.双击桌面上图标，打开quantityone软件，或从开始—程序—thediscoveryseries/quantityone进入。

3.从file下拉菜单中选择chemidoxxrs，打开图像采集窗口。

4.selectapplication选择相关应用：

auvtransillumination透射uv：针对dnaeb胶或其他荧光；

bwhitetransillumination透射白光：针对透光样品如蛋白凝胶，x—光片；

cwhiteepillumination侧面白光：针对不透光样品或蛋白凝胶；

dchemiluminescnece化学发光，不打开任何光源。

5.单击live/focus按钮，激活实时调整功能，此功能有三个上下键按钮：iris（光圈），zoom（缩放），focus（聚焦），可在软件上直接调整或在仪器面板上手工调整，调整步骤：a调整iris至适合大小；b点zoom将胶适当放大；c调整focus至图像清楚。

6.如是dnaeb胶或其他荧光，单击autoexpose，系统将自动选择曝光时间成像，如不充分，单击manualexpose，并输入曝光时间（秒），图像充分后保存。

如是蛋白凝胶，接第5步骤直接将清楚的图像保存即可；如是化学发光样品，将滤光片位置换到chemi位（仪器上方右侧），将光圈开到最大，输入manualexpose时间，可对化学发光的弱信号进行长时间累积如30min，或单击liveacquire进行多帧图像实时采集，在对话框内定义曝光时间长短，采集几帧图像，在采集的多帧图像中选取充分的保存。

注意事项：

1.请勿将潮湿样品长期放在暗箱内，以防腐蚀滤光片，更不要将液体溅到暗箱底板上，以免烧坏主板。

2.使用后将平台擦干净，以防有水损坏ccd；切胶时在平台上垫上保鲜膜，以防划损平台。

3.仪器使用完后请适时关闭电源，特别是chemidoxxrs的ccd电源。

4.只有在进行化学发光试验时才需要提前打开冷ccd预热30min再使用，其他操作无需预热。

请勿使用掌控成像仪的电脑上网，也不要自行重装电脑操作系统或给操作系统升级。如今，凝胶成像分析系统已经不仅仅是种凝胶记下的手段，普遍应用于蛋白、DNA的凝胶记下中了，更是种印迹分析，数据获得的方式。要选择个合适的凝胶成像系统，各人要求依据目前的预算和将来讨论要求来决议，市场上有浩繁的类型和型号可供选用，但是大要务必记住常常留意新的产品动向――快速进展的光学技术和成像分析软件或许能实现你以前想都不敢想的便利操作。假如你现在就要求台凝胶成像系统，虽然目前你们试验室很小并且预算很紧，或者你不要求很多花俏的凝胶成像系统的功能，但是预知将来可能会要求更多多而杂的性能的时候，好购买台能允许你升到充分你将来要求的凝胶成像系统。

总之选