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——前景机遇与技术趋势探析前瞻产业研究院2024年1月报告主创:徐文强院长报告制作:廖子璇1.2全国与深圳市合成生物产业发展现状1.3深圳市合成生物产业政策机遇1.4深圳市合成生物产业优势总结&1.2全国与深圳市合成生物产业发展现状1.3深圳市合成生物产业政策机遇1.4深圳市合成生物产业优势总结&用 1.1.1合成生物定义界定:让细胞为人类工作生产想要的物质用 1.1.1合成生物定义界定:让细胞为人类工作生产想要的物质合成生物学是一门以工程学思想为指导、多学科结合的新兴领域,通过一系列重新设计与技术改造生物体或细胞以使其具有新的能力,在此过程中设计与构建一系列新的标准化的生物元件、组件与系统,以实现理想的生物制造能力。合成生物学的本质是让细胞为人类工作生产想要的物质。该技术突破自然进化的限制,以“人工设计与编写基因组”为核心,可针对特定需求从工程学角度设计构建元器件或模块。合成生物学示意图资料来源:前瞻产业研究院整理1.1.2合成生物发展历程:中国当前处于发展新阶段合成生物发展历程合成生物发展历程期1990年10月,“人类基因组计划”在美国首先启动,进而英、日、法、德相继参与,1990年10月,“人类基因组计划”在美国首先启动,进而英、日、法、德相继参与,组成了国际“人类基因组计划”协作组。1994年,1994年,中国“人类基因组计划”(CHGP)启动1997年中国专家商议要申请加入国际“人类基因组计划”,推动中国基因组科学的发展。1997年中国专家商议要申请加入国际“人类基因组计划”,推动中国基因组科学的发展。1999年,1999年,国际“人类基因组计划”协作组公布了中国加入“人类基因组计划”的申请,并于同年9月1日正式向全世界宣布。1999年,北京华大基因研究中心成立,与遗传所人类基因组中心等共同承担基因序列工作。2005年,2005年,华大基因牵头中华协作组,承担的10%国际人类基因组单体型图计划(HapMap)在《Nature》发表2008年初,深圳华大基因研究院、英国桑格2008年初,深圳华大基因研究院、英国桑格研究所以及美国国立人类基因组研究所等多家机构共同启动了“千人基因组计划”。成果于2010年10月28日以封面文章形式发表在《自然》杂志上。2008年,中国科学院合成生物学重点实验室成立,是国内第一个合成生物学重点实验室2011年,2011年,国家植物基因研究中心(北京)第一届理事会第二次会议在遗传发育所召开2015年,2015年,华大面向全球发布自主研发的首款桌面型高通量测序系统BGISEQ-5002018年,2018年,华大在国际顶级学术期刊《细胞》上发表了迄今为止最大规模的中国人基因组学大数据研究成果2019年,2019年,深圳合成生物学创新研究院成立2021年12月,国家合成生物技术创新中心核心研发基地项2021年12月,国家合成生物技术创新中心核心研发基地项目主体完工2022年至今,由合成生物学带动的技术平台已经在很多领域落地应用。合成生物学的研究范式从大数据开始,经历数据挖掘、建模和演2022年至今,由合成生物学带动的技术平台已经在很多领域落地应用。合成生物学的研究范式从大数据开始,经历数据挖掘、建模和演算,最后发展到由人工智能(AI)引领的数字合成生物学。它把生命科学推向预测科学,使其有了强大的预测能力,成为融合实验科学、工程科学和预测科学的新兴交叉学科,AI赋能的数字合成生物学将会是未来行业发展的重要方向之一。资料来源:前瞻产业研究院整理《工程生物学国《英国合成生物《至2030年国家《生物战略2019》《工程生物学:英国经济《工程生物学国《英国合成生物《至2030年国家《生物战略2019》《工程生物学:英国经济《产业结构调整指导目录《工业领域碳达峰实施方案》《关于加快传统制造业转《国务院关于全面加强基础《“十四五”原材料工业发展规划》1.1.2合成生物政策发展历程:中国合成生物产业起步相对较晚对比中国与欧美等发达国家的政策历程,中国合成生物产业起步相对较晚,但是发展速度惊人,从“十三五”开始,合成生物学被列为战略前瞻性重大科学问题和前沿共性生物技术,国家出台了一系列政策支持合成生物学的发展。 《向国会报告:合成生物学》《技术评估:合成生物学》《国防部科技优先事项》《面向生物经济的欧洲《面向生物经济的欧洲《国家生物质能战略的《关于合成生物学定义《欧盟生物经济战略进《英国生命科学《英国生命科学《世界领先IT国《世界领先IT国《关于扩大战略性新兴产业投资培育壮《关于扩大战略性新兴产业投资培育壮《加强“从0到1”基础研《加强“从0到1”基础研生物、未名拾优奇Editas 物 AgBiome、1.2.1全国合成生物产业现状:合成生物产业链覆盖面庞大合成生物学本身的发展和增长受益于多种技术的融合,从产业链来看,上游生物体设计企业主要提供底层技术和应用支持,比如DNA测序/合成/存储、基因编辑、蛋白设计和催化,代表性企业有Twist、金斯瑞、script、Codex等;中下游企业负责合成生物产品制造,例如材料与化学品等领域,代表性企业有金丹科技、海正生物、BioNTech等。资料来源:前瞻产业研究院整理产品替代工艺改进原材产品替代工艺改进原材料变化品1.2.2全国合成生物产业现状:合成生物产业应用领域广泛根据ResearchandMarkets披露的信息,2023年,中国合成生物市场规模达到11.5亿美元,随着应用场景的增多和技术的改善,市场逐渐扩容,合成生物在未来10年内将对各个行业产生重要影响。2023年中国合成生物学对不同行业的影响肉类和水产养殖生物制药美容生物制药美容非处方药医疗设备化学品化学品纺织品食品(不包水建筑机械矿业农业燃料手机资料来源:CBInsights波士顿咨询集团《合成生物学信息参考》前瞻产业研究院整理天津山东上海浙江1.2.3全国合成生物产业现状:各地区均积极布局合成生物领域天津山东上海浙江1.2.3全国合成生物产业现状:各地区均积极布局合成生物领域天津已经明确将生物制造作为带动未来经济高质量发展的关键力量,加快推动天津生物经济前瞻布局、创新发展。依托天津大学、中科院天津生物科技工程研究所、国家合成生物技术创新中心、教育部合成生物学前沿科学中心、合成生物学海河实验室等创新平台,天津将加快打造合成生物产业发其中,国家合成生物技术创新中心是国家级科技创新平台,是我国抢占全球生物产业技术创新制高点的“国之重器",是集核心技术研发、技术转移转化、企业培育、资本运营四位一体的新型研发平台。同时,天津还将建立特色产业基地,推动“生物制造谷”建设。进一步发挥天津港口、自贸试验区、自主创新示范区综合优势,与大型中央企业合作,在津设立健康糖产业园区。合成生物上市公司华熙生物,也在天津投资6.3亿,建成了全球山东汇聚了很多老牌的发酵企业。早在2017年,由青岛能源所、山东大学、齐鲁工业大学.、青岛蔚蓝生物集团等7家发起生物技术创新中心。华熙生物、金城药业、三元生物、山东赫达、山东福瑞达、青岛蔚蓝生物等合成生物技术相关企2023年1月,山东省"两会”政府工作报告中明确提出把“合成生物”产业作为大力培育支持的创新产突出”合成生物”等关键领域核心技术攻关,扎实推进先进制造业强省行动,着力深化新旧动能转换,加上海是我国第一个合成生物学重点实验室、第一个合成生物学科学联盟,第一个合成生物学专业委员会诞生地。从2020年开始,上海就密集发布了合成生物产业相关政策。2022年11月21日发布《上海市加快打造全球生物医药研发经济和产业化高地的若干政策措施》瞄准合成生物学、基因编辑、干细胞与再生医学、细胞治疗与基因治疗、人工智能辅助药物设计等重点领域,布局若千市级科技重大专项和战略性2023年10月,上海市印发《上海市加快合成生物创新策源打造高端生物制造产业集群行动方案(2023-2025年)》,目标到2025年培育1至2家年销售收入超过10亿元的优势企业,建设3个左右具有特色和国内领先优势的产业基地;到2030年,基本建成具有全球影响力的高2023年2月20日,浙江省发布了《浙江省人民政府办公厅关于培育发展未来产业的指导意见》,提出要优先发展”合成生物”等9个快速成长的未来产业。具体包括加快发展定量合成、基因编辑、蛋白质设计、细胞设计、高通量筛选等前沿技术,推动合成生物技术在生物智造、生物育种等领域的颠浙江省的合成生物产业布局主要集中在杭州市。人才方面,杭州在合成生物领域已拥有郑裕国院士、杨立荣教授、李永泉教授等一批行业领域顶级专家,引进了曾安平院士、王宝俊教授等一批“鳃鹏计划”人才,逐渐形成了以浙江大学、西湖重点平台方面,杭州获批建设了国家化学原料药合成工程技术研究中心,布局微生物生化与代谢工程、生物有机合成、药物合成生物学等省级重验室。2023年7月,浙江省合成生物产业技术联盟,由浙江大学杭州国际科创中心牵头,传化集团等多家企事业2023年8月,传化科技城核心产业载体-钱湾生物港正式开园,将逐步构建起以合成生物为核心的生物技术产业集群,打造国内首个"合成生物成果转化基地”,横向兼顾CGT、医疗器械,纵向聚焦化工、农业等领域对合成生物的应用,发挥传化集团“链主”优势,构建合成生物“科研-转化-产品”资料来源:前瞻产业研究院整理 2017年2018年02019年2022年激发创意 2017年2018年02019年2022年激发创意1.2.4深圳合成生物产业现状:深圳较早布局合成生物学赛道一直以来,深圳始终瞄准国家和“双区”建设的重大战略需求,着力融合信息技术(IT)和生物技术(BT不断抢占科技发展的制高点。除了出台多个扶持行业发展的政策外,深圳首创的“楼上楼下”创新创业综合体模式,诞生了众多合成生物的明星企业。聚焦合成生物领域,表面是科研人员与企业人员在同一栋资料来源:前瞻产业研究院整理基础技术基因测序技术基因编辑技术基因合成技术合成生物平台搭建及产品制造1.2.5深圳合成生物产业现状:产业链布局较为完善基础技术基因测序技术基因编辑技术基因合成技术合成生物平台搭建及产品制造1.2.5深圳合成生物产业现状:产业链布局较为完善医疗健康、工业化学品等领域医疗健康、工业化学品等领域资料来源:前瞻产业研究院整理•2018年光明区成立以来,•2018年光明区成立以来,光明区合成生物产业创下多项“首位”•首创“楼上楼下”创新创业综合•在深圳市重点培育的1.2.6深圳合成生物产业现状:光明区发展形势较好作为大湾区综合性国家科学中心先行启动区,光明科学城承载建设了全球首个合成生物研究重大科技基础设施,同时深圳市工程生物产业创新中心、中国科学院深圳理工大学(筹)合成生物学院、合成生物产业园等相继落地。截至2022年,深圳光明区内合成生物企业总量已突破80家,总估值超270亿资料来源:前瞻产业研究院整理深圳八大未来产业深圳八大未来产业123456781.3.1深圳合成生物政策机遇:合成生物为八大未来产业之首2022年6月,深圳发布《关于发展壮大战略性新兴产业集群和培育发展未来产业的意见》,前瞻布局8大未来产业,其中合成生物位列8大未来产业之首,《意见》提出要重点发展合成生物底层技术、定量合成生物技术、生物创制等领域,加快突破人工噬菌体、人工肿瘤治疗等创制关键技术,推进合成生物重大科技基础设施建设,建设合成生物学研发基地与产业创新中心。深圳七大战略新兴产业及20大产业集群12345678造9资料来源:《关于发展壮大战略性新兴产业集群和培育发展未来产业的意见》前瞻产业研究院整理1.3.2深圳合成生物政策机遇:未来合成生物有望成长为战略性新兴产业1.3.2深圳合成生物政策机遇:未来合成生物有望成长为战略性新兴产业支持探索未来产业相关科学问题点专项。支持与香港、澳门的高校和科研机构开展提升科研平台保障能力2022年6月,深圳出台了《深圳市培育发展未来产业行动计划(2022—提升科研平台保障能力2022年6月,深圳出台了《深圳市培育发展未来产业行动计划(2022—2025年)》,本措施重点支持八大未来产业,其中合成生物、区块链、细胞与基因、空天技术等未来产业在5至10年内有望成长为战略性新兴产业。材料基因组等重大科技基础设施、质量基础施、自然科技资源库以及野外科学观测研究支持建设概念验证中心、中试验证和成果转化基地推动未来产业交叉融合发展算”、“量子计算+合成生物”等未来产业跨界融合示技术在细胞与基因治疗、细胞与基因技术在生物资料来源:前瞻产业研究院整理1.3.3深圳合成生物政策机遇:全国首个产业专项扶持政策2021年10月,光明区发布了全国首个合成生物领域专项扶持政策——《光明区关于支持合成生物创新链产业链融合发展的若干措施》,“真金白银”支持合成生物战略科技力量建设、创新链建设、产业链建设等,其中,合成生物科技专项配套资助项目,单个单位年度资助金额最高为1000万元。01010202•对新取得FDA、EMA、PMDA等机构批准获得境•对取得国家食品药品监督管理局核准的化妆0303•加快培育引进行业龙头CRO、CMO、CDMO等合成生物•对建设合成生物领域中试、合成生物专用CNAS认证0404资料来源:《光明区关于支持合成生物创新链产业链融合发展的若干措施》前瞻产业研究院整理1.4深圳市合成生物产业优势总结当前,深圳已经成为我国合成生物产业发展最为迅猛的城市之一,深圳建设了国内首个合成生物产业园、推出国内首只合成生物天使基金、发布国内首个支持合成生物产业政策,召开了国内最大合成生物产业大会,助力合成生物从科学研究到产业转化再到产业集群的两次跨越。产业链布局较为完善 产业优势 政策优势全国首个产业专项扶持政策资料来源:前瞻产业研究院整理2.1合成生物行业中长期发展规划滞后2.2合成生物行业面临选品难题和工艺放大难题2.3合成生物行业产业化能力不足2.4合成生物行业应用研发主体错位2.1合成生物中长期发展规划滞后:许多监管领域处于空白地带我国从顶层设计上明确了合成生物的重要战略地位,并逐步加强了该领域的国家宏观战略谋划,但合成生物领域的长期、短期技术发展路线整体规划,技术发展实施路径、生物伦理监管体系构建等仍处于空白地带。目前,合成生物学领域的专项政策规划并未出台,如何实现从基础研究到技术创新,从工程平台建设到产品开发、产业转化等多层次、分阶段的发展方式和发展路径仍不明确。资料来源:前瞻产业研究院整理排出摄入2.2.1选品难题:错误的选品将带来较大的代价排出摄入2.2.1选品难题:错误的选品将带来较大的代价首先,选品要评估市场空间及需求刚性。选品是合成生物学产品生产过程的第一个门槛,需要理性评估目标产品利用生物合成途径生成的难度,并与其他生成路径进行比较。错误的选品在进入后期商业化开发阶段后失败带来的代价较大。其次,选品要适合合成生物学方法生产。能量和生物质能量和生物质intracellularextracellular资料来源:动脉网倍生生物中国科学院前瞻产业研究院整理生物合成+化学合成2.2.2工艺放大难题:可能导致项目整体耗时及成本大幅提升生物合成+化学合成2.2.2工艺放大难题:可能导致项目整体耗时及成本大幅提升在利用合成生物学方式生产产品时,产物结构越复杂,对应的代谢通路优化的复杂度以及分离纯化的难度也呈指数级提升,导致项目整体耗时及成本大幅提升。在所有环节均采用生物合成难度较大时,选择将部分步骤通过化学合成的方式实现,构建生物合成与化学合成的组合,则可能实现整体的成本和效率的最优,提升规模化生产成功率。Amyris规模化生产青蒿素生物合成与化学合成结合办法Artemisinicacid资料来源:资料来源:AmyrisScience前瞻产业研究院整理2.32.3合成生物产业化能力不足:创新成果产业化应用实践较少2015年以来,我国在合成生物领域研究发文跃居全球第二,但论文篇均影响力低于世界平均水平。我国合成生物领域论文的整体质量还不够高,且研究发文领域多集中在应用领域,论文在前沿和核心技术领域的创新能力与欧美发达国家仍有较大差距;同时,虽然国内研究机构应用研究成果凸显,但创新成果的产业化应用实践较少,科企融合度较低,对产业的推动力量较弱,近几年全球合成生物学主要研究项目和成果都集中在欧美等国家。西班牙瓦伦西亚大学“通过国际合作促进合成生物学标准化”研究项目,约220万欧元Ronmilo等将大肠杆菌碳源从有机碳转化为二氧化碳1、Biotechrabbit公司研发出无细胞蛋白合成系统2、TarrynMiller等制造出“人工叶绿体”1、ShaoYY等利用CRISPR-Cas创建单染色体啤酒酵母细胞2、Sc2.0计划完成单酵母染色体组装1、澳大利亚国立大学”提高作物抗逆性和产量的智能植物和解决方案”项目,2000万澳元2、丹麦技术大学“合成生物学指导下的恶臭假单胞菌生物氟化工程”项目,800万欧元3、西班牙高等科学研究理事会“基于合成微生物联盟的黄酮类化合物合成生物学生产平台”项目,740万欧元麦考瑞大学建设“合成生物学卓越中心”麻省理工设计出第一个完全依赖蛋白质互作的合成生物学电路美国马里兰大学医学院宣布首例转基因猪心脏移植手术实现1、ACSSyntheticBiology指出,合成生物学有可能颠覆现有腺相关病毒(AAVs)的生产模式合成生物行业发展1、DavidBaker团队发布RoseTTAFold,基于大规模深度学习的结构建模范围从真核细胞的蛋白质单体扩展到了蛋白质复合物,并可以预测蛋白质-蛋白质相互作用的分子细节2、WendellLim团队设计了两步正反馈电路,使T细胞能够根据抗原密度阈值来分辨目标1、乔治亚研究院利用新开发的合成生物学和基因工程技术,使用重组的4-hydrophenylacetate3-monooxygenase和FAD还原酶基因,改造肠道中的益生菌2、伊利诺伊大学厄巴纳·香槟分校的团队于《Cell》发表论文,实现了有史以来最完整的活细胞计算机模拟帝斯曼的开创性研究合成生物法生产维生素A,即将全面上市资料来源:Regenesis前瞻产业研究院整理2.4合成生物应用研发主体错位:缺乏大型产业巨头和优质初创企业我国合成生物学应用研究主要以科研院所为主体,缺乏大型产业巨头和优质初创研发企业。目前国内生物合成行业的主要代表企业为凯赛生物、衍进科技和迪赢生物等,企业多为初创公司,规模相对较小,与欧美发达国家形成的大型跨国企业巨头,协同多投融资渠道的初创企业融合发展的产业格局相比仍有较大差距。虽然近两年不断有新的创新型合成生物公司出现,但主要为平台工具服务和应用产品导向型公司,涉及使能技术开发的公司较少,产业主体规模和自主创新能力均较弱。资料来源:前瞻产业研究院整理3.1合成生物产业技术特点3.2基因测序技术趋势与突破方向3.3基因编辑技术趋势与突破方向3.4基因组装技术趋势与突破方向3.5基因合成技术趋势与突破方向3.6酶的定向进化技术趋势与突破方向菌体 厂3.1.1合成生物产业技术特点菌体 厂3.1.1合成生物产业技术特点合成生物是典型的交叉学科。从技术过程来看,经历了上游底盘设计、菌种构建;中游的发酵条件优化;以及下游的分离提取。当中不仅运用到了分子生物学技术、AI深度学习、高通量筛选等方法,还用到了发酵工艺放大、流体力学、分离提取制备等技术。III资料来源:前瞻产业研究院整理3.1.2合成生物工艺优势以合成生物生产流程的特点,合成生物被认为是绿色、环保、高效、可循环可再生的生产方式。相比化学合成工艺、天然提取工艺,有着明显的优势。因此,合成生物被认为是最有潜力替代化学合成、天然提取等成熟工艺的新型技术手段。合成生物也被政府、资本界和产业界赋予了厚望。高高资料来源:前瞻产业研究院整理对少量样本或少量基因组靶点(≤20个)的小DNA区域进行测序时,对少量样本或少量基因组靶点(≤20个)的小DNA区域进行测序时,三代测序读长长、成本3.2.1基因测序技术:NGS测序应用更为广泛基因测序不同技术互为补充,NGS测序应用更为广泛。伴随对基因测序理解的不断深入,不同测序技术与方法亦不断涌现。在下游较为成熟的商业化应用中,二代高通量测序在各个细分场景均有一席之地,二代与三代测序的应用场景尽管有所重合,但由于技术特点不同,也具备各自独特的应用领域。费查定量PCR资料来源:ThermoFisherIlluminaOxfordNanopore前瞻产业研究院整理.2基因测序技术:新兴技术体系及应用概念不断涌现得益于测序技术的持续进步和测序成本的快速下降,NGS应用不仅局限于全基因组分析,更深入推动了基础科研上基因组学和临床上疾病精准医疗的进步。考虑到不同细胞测序的差异性,以及测序在体内不同位置/时间上的更加丰富信息,更多全新领域及概念逐步进入基因测序领域的探索范畴。单细胞测序与传统测序区别和扩增单个细胞里的多组学物质(包括DNA、RNA组测序的基础上,通过空间解析转录组学的方法,定组织中的空间位置,我们认为有望成为补充医学图像资料来源:GSK前瞻产业研究院整理3.3.1基因编辑技术:第三代基因编辑技术备受人们关注3.3.1基因编辑技术:第三代基因编辑技术备受人们关注第二代基因编辑技术第三代基因编辑技术第一代基因编辑技术第二代基因编辑技术第三代基因编辑技术TALENs(转录激活因子效应物)是继ZFTALENs在结构上与ZFNs类似,是由DNA结合蛋白TALENs(转录激活因子效应物)是继ZFTALENs在结构上与ZFNs类似,是由DNA结合蛋白-TALE蛋白和FokⅠ资料来源:中关村前瞻产业研究院整理3.3.2基因编辑技术:CRISPR/Cas技术优势明显基因编辑是一种新兴的能够较为精确的对生物体基因组特定目标基因进行修饰的基因工程技术。作为革命性的基因编辑技术,CRISPR/Cas的优势非常明显,相较于ZFNs和TALENs,CRISPR/Cas的设计难度和构建难度都要小的多,成本更低,开发周期更短,靶向修饰效率更高,此外CRISPR/Cas还具有可以多靶点编辑和可以编辑RNA的优势,这是前两种技术所不具备的。进行编辑期难是因子效应难是资料来源:中关村前瞻产业研究院整理3.3.3基因编辑技术:CRISPR2.0新技术问世CRISPR/Cas9被认为是CRISPR1.0,其开创了基因编辑新时代,但局限性也非常明显。目前已有一批CRISPR2.0新技术问世,能以比CRISPR1.0更精确、更通用的方式编辑DNA。CRISPR1.0基因编辑疗法获批,为下一代基因编辑技术走上舞台中央奠定了基础。资料来源:深究科学前瞻产业研究院整理(polymerasecycling(polymerasecyclingassembly,PCA)。3.4基因组装技术:低成本、自动化、一体化是发展方向基因组装技术相对成熟,低成本、自动化、一体化是未来发展方向。受到技术的限制,DNA片段从头合成的长度有限,更长基因或基因组有赖于通过核苷酸片段的酶促组装或体内组装获得,通常使用的寡核苷酸组装方法有两种:连接酶组装法(ligasechainreaction,LCR)和聚合酶组装法OEOE-PCR技术(Overlapextensionpolymerasechainreaction,OE-PCR),这种方法可以用于组装更长片段的DNA。OE-PCR示意图如左图所示,将末端具有重叠序列的DNA片段经聚合酶延伸得到融合的DNA,一般可以将2-6个DNA片段按比例混合作作为引物,进行重叠延伸,同时要保证相邻的两个DNA片段之间有20-40bp的同源重叠区。由于OE-PCR方法操作简单,省时省力,已经得到了广泛的应用。资料来源:《DNA组装技术》前瞻产业研究院整理3.5.1基因合成技术:生物合成时代已缓缓拉开序幕基因合成技术大体可以分为化学法和生物法。第一代技术是固相合成法;第二代则是芯片合成法,主要有光化学法、喷墨法、电化学法,可以并行进行多条不同序列基因合成;第三代则是酶促合成法,其合成副产物少、条件温和。一代合成(固相柱式)二代合成(固相芯片)三代合成(生物酶) 法法Script/Nuclera/MolecularATdT-dNTP交联体(AnsaBiot资料来源:中合基因前瞻产业研究院整理3.5.2基因合成技术:生物合成时代已缓缓拉开序幕以生物制造及生物医药产业为代表的生命科学产业的飞速发展倒推DNA合成技术向第三代-生物合成技术迈进。近年来,DNA生物合成技术及装备开发屡有突破,第三代DNA合成技术-生物合成的时代已缓缓拉开序幕。使用有毒有机化学品或第三方DNA服务提供商的延长交付等2021年6月2022年7月2023年3月2023年8月资料来源:前瞻产业研究院整理3.6.13.6.1酶的定向进化技术:快速获得拥有特定性能的酶酶的定向进化,旨在试管中模拟自然进化过程,通过提高基因突变率和设计特殊的筛选、选择方法,快速获得拥有特定性能的酶。因此,定向进化又被称为“代替自然选择的上帝之手”,为试管中的达尔文主义。酶的定向进化步骤通过对蛋白编码序通过对蛋白编码序列进行随机突变、定点突变或重组构建基因突变体库定向筛选、选择以获得具有改进表型的突变体以该突变体作为下一直到获得性能最优的突变体资料来源:蛋白质定向进化原理《定向进化在蛋白质工程中的应用研究进展》前瞻产业研究院整理基于CRISPR的体内突变方法基于CRISPR的体内突变方法注:a—基于CRISPR-CAS9同源重组的突变;b—基于NCAS9和DNA聚合酶I的突变;c—基于NCAS9和碱基编辑器的突变3.6.2酶的定向进化技术:高效构建多样化的基因突变体库高效构建多样化的基因突变体库是定向进化的关键步骤之一。早期通过化学试剂(如甲磺酸乙酯、亚硝酸等)或射线对基因进行无差别随机突变的传统方法,由于突变率低并且极易造成基因组不稳定而逐渐被淘汰。取而代之的是一系列相对可控且有高突变率的体外突变法和体内突变法。基于CRISPR-Cas9同源重组的突变基于n资料来源:《定向进化在蛋白质工程中的应用研究进展》前瞻产业研究院整理术术3.6.3酶的定向进化技术:高通量定向进化的新方法创建序列覆盖率高、多样性强的突变体库,能最大程度挖掘不同氨基酸序列与其对应表型之间的关系,理论上能够提高获得理想突变体的概率。然而,绝大部分筛选和选择技术通量低、准确性差,导致难以实现对目标蛋白质序列全面且深入的挖掘。因此,开发更快速、灵敏、准确的高通量筛选技术,是提高定向进化效率的关键
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