DB32-T 2736-2015铁皮石斛无菌播种苗生产技术规程

ICS65.020.20

B31

备案号：44814-2015DB32

江苏省地方标准

DB32/T2736-2015

铁皮石斛无菌播种苗生产技术规程

Technicalcodeforproducingasepticseedlingsof

DendrobiumofficinalekimuraetMigo

2015-02-15发布2015-04-15实施

江苏省质量技术监督局发布

DB32/T2736-2015

铁皮石斛无菌播种苗生产技术规程

1范围

本标准规定了铁皮石斛无菌播种苗生产环境的消毒灭菌、培养基配制、培养条件调控、无菌播种苗

生产工艺流程，以及商品苗的质量分级、包装、运输等。

本标准适用于铁皮石斛无菌播种苗的生产。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。

不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

NY/T2306-2013花卉种苗组培快繁技术规程

LY/T1882-2010林木组织培养育苗技术规程

3术语和定义

本标准采用下列定义。

3.1

铁皮石斛无菌播种苗asepticseedlingsofDendrobiumofficinalekimuraetMigo

以铁皮石斛成熟蒴果的种子通过组织培养方法，在培养基上进行无菌播种、培养获得的种苗。

3.2

萌发培养cultureofgermination

从种子播种，萌发出新叶的培养过程。

3.3

生长培养cultureofgrowth

萌发培养结束，将幼苗稀开转接至生长培养基，形成植株的培养过程。

3.4

生根培养cultureofrooting

生长培养结束，将幼苗再一次稀开转接至生根培养基，形成根系，成为成品苗的培养过程。

4生产场地与设备

按照NY/T2306-2013中的规定执行。

1

DB32/T2736-2015

5容器和器械清洗

容器采用650ml兰花组培瓶。清洗按照NY/T2306-2013中的规定执行。

6培养基配制和贮存

按照NY/T2306-2013和LY/T1882-2010中的规定进行。其中固化剂（琼脂等）可以采用粉末状，不

需先加热溶化，和其它配制溶液混合均匀，在分装机内定容后，pH调整至5.7~5.8。边均匀搅拌、边分

装。

7灭菌、接种、培养室操作

按照NY/T2306-2013中的规定执行。

8无菌播种苗生产流程

8.1无菌播种苗生产流程图

参见附录A。

8.2蒴果的采集及处理

8.2.1采集地选择

采集地周围1km范围内应无其它种类石斛。

8.2.2采收和保存

经自然或人工授粉后，蒴果开始转黄时，选择饱满的果实连茎一起采收，采收后放于阴凉干燥处备

用。

8.2.3蒴果处理

取完整的蒴果在超净工作台上切除果柄和花蒂，按照NY/T2306-2013中的规定执行灭菌。灭菌后的

蒴果在超净台上晾干，当天播种。

8.3萌发培养

将灭菌的蒴果，置于无菌滤纸上，在蒴果花蒂端切开一小口，用镊子夹住花柄端在培养瓶瓶口轻轻

抖动，边抖动边转动培养瓶，将种子均匀地播撒于萌发培养基表面。一个蒴果接种5~8瓶。

接种后的培养瓶放于培养室，前3d为暗培养，第4d始光照强度为14.4~18μmol·m-2·s-1，第7d后光照

强度增加至27~36μmol·m-2·s-1，光照时间为12h/d；温度25±3℃；培养60~90d。

8.4生长培养

幼芽长至1~3mm时转接至生长培养基中进行培养，每瓶150~200株。

转接后的培养瓶放于培养室，光照强度为36~72μmol·m-2·s-1，光照时间为12h/d；温度为25±3℃；培

养60~90d。

8.5生根培养

2

DB32/T2736-2015

幼苗长至1~1.5cm时转接至生根培养基中进行培养，每瓶20~40株。

转接后的培养瓶放于培养室，培养条件同8.4。

8.6标签

每次接种后，将标注好播种日期、品种号、操作人工号等信息的标签贴于培养瓶上。

8.7炼苗

当幼苗长至3~5cm高时，将培养瓶放置于温室自然散射光下炼苗，光照强度为144~180μmol·m-2·s-1，

温度25±5℃，炼苗7~15d，即可进行销售或种植。

9商品苗质量

9.1质量要求

商品苗应为非污染、无烂茎、烂根、黄叶；叶片4片以上，正常展开，叶色翠绿。650ml兰花组培瓶

每瓶40-45株。

9.2商品苗分级

表1铁皮石斛商品苗分级

根叶片株高茎粗

等级

（条）（片）（cm）（cm）

一级苗3~5＞6≥5.0≥0.3

二级苗2~34~6≥3≥0.2

10出售

10.1包装

铁皮石斛瓶苗直立放置在塑料筐或纸箱中，包装箱应该结实牢固并设有透气孔，并有保持向上的标

识，装箱后贴上标签。

10.2标签

每批苗应有标签，标明无菌苗生产单位、品种、苗龄、等级、数量、出苗日期、批号、标准号、苗

木检验证书号等。

10.3运输

当温度超过30℃或低于5℃时，装运的车厢应有空调，温度调节至25±3℃。到目的地后应立即拆

封，放置到待移栽区域。

3

DB32/T2736-2015

AA

附录A

（资料性附录）

铁皮石斛无菌播种苗生产流程

优良亲本制种

灭菌

无菌蒴果

播种

萌发培养

60~90d后转接

生长培养

90~120d后转接

生根培养

90~120d

成品苗

炼苗7~15d

商品苗

销售

图A.1铁皮石斛无菌播种苗生产流程

_________________________________

4

DB32/T2736-2015

前言

本标准按GB/T1.1-2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》编制。

本标准由苏州神元生物科技股份有限公司提出。

本标准起草单位：苏州神元生物科技股份有限公司、苏州市铁皮石斛研究院。

本标准起草人：滕士元、史骥清、郭传敏、赵锋、时剑、孙贺、王译、侯森广、张琳琳。

I

DB32/T2736-2015

铁皮石斛无菌播种苗生产技术规程

1范围

本标准规定了铁皮石斛无菌播种苗生产环境的消毒灭菌、培养基配制、培养条件调控、无菌播种苗

生产工艺流程，以及商品苗的质量分级、包装、运输等。

本标准适用于铁皮石斛无菌播种苗的生产。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。

不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

NY/T2306-2013花卉种苗组培快繁技术规程

LY/T1882-2010林木组织培养育苗技术规程

3术语和定义

本标准采用下列定义。

3.1

铁皮石斛无菌播种苗asepticseedlingsofDendrobiumofficinalekimuraetMigo

以铁皮石斛成熟蒴果的种子通过组织培养方法，在培养基上进行无菌播种、培养获得的种苗。

3.2

萌发培养cultureofgermination

从种子播种，萌发出新叶的培养过程。

3.3

生长培养cultureofgrowth

萌发培养结束，将幼苗稀开转接至生长培养基，形成植株的培养过程。

3.4

生根培养cultureofrooting

生长培养结束，将幼苗再一次稀开转接至生根培养基，形成根系，成为成品苗的培养过程。

4生产场地与设备

按照NY/T2306-2013中的规定执行。

1

DB32/T2736-2015

5容器和器械清洗

容器采用650ml兰花组培瓶。清洗按照NY/T2306-2013中的规定执行。

6培养基配制和贮存

按照NY/T2306-2013和LY/T1882-2010中的规定进行。其中固化剂（琼脂等）可以采用粉末状，不

需先加热溶化，和其它配制溶液混合均匀，在分装机内定容后，pH调整至5.7~5.8。边均匀搅拌、边分

装。

7灭菌、接种、培养室操作

按照NY/T2306-2013中的规定执行。

8无菌播种苗生产流程

8.1无菌播种苗生产流程图

参见附录A。

8.2蒴果的采集及处理

8.2.1采集地选择

采集地周围1km范围内应无其它种类石斛。

8.2.2采收和保存

经自然或人工授粉后，蒴果开始转黄时，选择饱满的果实连茎一起采收，采收后放于阴凉干燥处备

用。

8.2.3蒴果处理

取完整的蒴果在超净工作台上切除果柄和花蒂，按照NY/T2306-2013中的规定执行灭菌。灭菌后的

蒴果在超净台上晾干，当天播种。

8.3萌发培养

将灭菌的蒴果，置于无菌滤纸上，在蒴果花蒂端切开一小口，用镊子夹住花柄端在培养瓶瓶口轻轻

抖动，边抖动边转动培养瓶，将种子均匀地播撒于萌发培养基表面。一个蒴果接种5~8瓶。

接种后的培养瓶放于培养室，前3d为暗培养，第4d始光照强度为14.4~18μmol·m-2·s-1，第7d后光照

强度增加至27~36μmol·m-2·s-1，光照时间为12h/d；温度25±3℃；培养60~90d。

8.4生长培养

幼芽长至1~3mm时转接至生长培养基中进行培养，每瓶150~200株。

转接后的培养瓶放于培养室，光照强度为36~72μmol·m-2·s-1，光照时间为12h/d；温度为25±3℃；培

养60~90d。

8.5生根培养

2

DB32/T2736-2015

幼苗长至1~1.5cm时转接至生根培养基中进行培养，每瓶20~40株。

转接后的培养瓶放于培养室，培养条件同8.4。

8.6标签

每次接种后，将标注好播种日期、品种号、操作人工号等信息的标签贴于培养瓶上。

8.7炼苗

当幼苗长至3~5cm高时，将培养瓶放置于温室自然散射光下炼苗，光照强度为144~180μmol·m-2·s-1，

温度25±5℃，炼苗7~15d，即可进行销售或种植。

9商品