江苏省新沂市高中生物第四章生物化学与分子生物学技术实践4.1蛋白质的分离与纯化方法教案(选修1)

江苏省新沂市高中生物第四章生物化学与分子生物学技术实践4.1蛋白质的分离与纯化方法教案(选修1)PAGEPAGE4蛋白质的分离与纯化方法教学目标：1、知识与技能：掌握蛋白质的分离与纯化方法，知道从生物材料中提取芳香油2、过程与方法：掌握蛋白质的分离与纯化三种方法的比较过程3、情感态度价值观：培养学生科学实验的观点。教学重点：蛋白质的分离与纯化教学难点：蛋白质的分离与纯化，从生物材料中提取芳香油教学方法：自主、合作、探究学习。教具使用：无共案部分个案部分教学过程教师主导活动学生主体活动课前：布置学习目标和预习提纲，要求学生完成预习任务，下发及收缴批改导学案（附导学案）学生进行预习，完成导学案。课中：对上节课存在问题进行点拨。新授：根据学生自学情况，引导学生分析主要的问题。强调以下几点。【思维点拨】1．说明用透析法、离心沉降法和电泳等方法纯化蛋白质的原理和大致过程。2．影响电泳泳动速度的主要因素有哪些?这些因素是如何影响泳动速度的?3．“血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳”实验最关键的一步是什么?你能说出这一步的操作要求吗?4．漂洗后的薄膜上可以看到几条色带?分别代表什么?5．植物芳香油提取的常用方法有哪些?这均带负电荷移向正极。由于血清中各蛋白组分等电点不同而致表面净电荷量不等，加之分子大小和形状各异，因而电泳迁移率不同，彼此得以分离。电泳后，CAM经染色和漂洗，可清晰呈现清蛋白、α1一球蛋白、α2一球蛋白、β球蛋白、γ一球蛋白5条区带，比色即可计算出血清各蛋白组分的相对百分数。布置学生课堂检测，并重点提示。学生对上节存在问题进行讨论。学生自学基础知识。学生根据导学案内容讨论并展示个人、小组成果。思考：蛋白质的分离常用的细胞破碎的方法：抽提方法：纯化主要是根据：常用的方法：醋酸纤维薄膜电泳的实验的基本步骤：色带：学生完成课堂检测课后：布置课外作业及下一节预习提纲。（见导学案）学生完成课外作业及下一节预习。板书设计生物成分的分离与测定技术蛋白质的分离常用的细胞破碎的方法：抽提方法：纯化主要是根据：常用的方法：醋酸纤维薄膜电泳的实验的基本步骤：色带：教学札记三、其他补充教学资料（各位教师根据各班教学特点选择补充资料，可另附纸）

高二生物生物成分的分离与测定技术导学案使用时间：编制人：一、学习目标：知道蛋白质的分离常用的细胞破碎的方法，蛋白质抽提方法，掌握蛋白质的分离与纯化方法。二、知识构成：1．蛋白质的分离常用的细胞破碎的方法有：根据蛋白质的不同特性，分别可选择哪些抽提方法？、、蛋白质的纯化主要是根据之间以及之间在、、、等方面存在的差异进行的。常用的方法包括、、等。2．用电泳分离纯化蛋白质时，泳动速度主要取决于，即。此外，、等因素对泳动速度也有影响。3．血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳的实验的基本步骤包括：、、、、、、、、、。4．浸泡醋酸纤维薄膜前，用笔做记号是在(填“光泽面”或“非光泽面”)；点样是在(填“光泽面”或“非光泽面”)；平悬薄膜时，(填“光泽面”或“非光泽面”)朝上。5．经电泳后，可以在薄膜上看到条色带，它们分别是、、、、。'6．植物芳香油的提取方法有和等。三、学法和自检：本节内容主要通过看书、分析蛋白质的提取、分离、纯化的不同方法。动手试一试：1]盐析法分离蛋白质的原理是()A．破坏蛋白质的一级结构B．破坏蛋白质的二级结构C．破坏蛋白质水化膜而改变溶解度D．使蛋白质发生变性沉淀2]利用透析法将蛋白质和其他小分子物质分离的原理是()利用蛋白质分子不能透过半透膜的特性B．利用蛋白质分子的水溶性C．利用蛋白质分子的胶体性D．利用蛋白质分子所带电荷3]．下列关于血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳实验的说法不正确的是()A．实验所用的巴比妥缓冲液的pH为8．6B．点样是在薄膜的光泽面上进行的C．实验后可以得到五条色带D．整个实验最关键的步骤是点样4]．有一混合蛋白质溶液，各种蛋白质的pH分别为4．5、5．2、6．6、7．2，电泳时欲使其中三种泳向正极，则缓冲液的pH应该是()A．2．0B．5．0C．6．0D．7．0

课题生物成分的分离与测定技术四、达标检测1．(多选)在蛋白质粗提取时，破碎细胞的方法有()A．研磨法B．超声波法C．酶解法D．机械破碎2．分离水溶性蛋白质所选用的提取溶剂是()A．酸性溶液B．碱性溶液C．中性缓冲液D．有机溶剂3．(多选)纯化蛋白质的原理是根据不同蛋白质之间以及蛋白质与其他分子之间在哪些等方面存在的差异进行的()A．分子大，B．溶解度C．所带电荷的多少D．吸附性质4．某蛋白质等电点为7．5，在pH6．O的缓冲液中进行自由界面电泳，其泳动方向为()A．向负极移动B．向正极移动C．不运动D．同时向正极和负极移动5．在pH5．12时进行电泳，哪种蛋白质既不向正极移动也不向负极移动()A．血红蛋白：pI(等电点)一7．07B．鱼精蛋白：pI一12．20C．a1一球蛋白：pI一5．06D．B一球蛋白：pl=5．126．血清蛋白电泳时通常用pH8．6的缓冲液，此时各种蛋白质所带的电荷为()A．清蛋白带正电荷，其他蛋白带负电荷B．清蛋白带负电荷，其他蛋白带正电荷C．各种蛋白均带正电荷D．各种蛋白均带负电荷7．(多选)支持物电泳常采用的支持物有()A．滤纸B．醋酸纤维薄膜C．大分子凝胶D．纤维素五、学习小结和课外作业：1、学习小结：2、上本作业：列举蛋白质粗提取时次报的破碎、蛋白质的抽提、纯化方法。3、课本：64页123454、补充练习：8．请根据血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳实验回答下列问题：(1)实验所用的主要试剂有：(2)实验所用的缓冲液的pH为，因为。(3)点样应点在薄膜的面，方法是用在血清中蘸一下，在离薄膜一端cm处轻轻按下，随即提起。(4)实施电泳时，所用电压为，膜宽电流强度，时间。(5)实验结果时，薄膜上呈条色带，分别代表。9．选择正确答案的序号。、清蛋白一球蛋白、一球蛋白、一球蛋白、球蛋白A．清蛋白B．α1一球蛋白C．α2--球蛋白D．β一球蛋白E．γ一球蛋白(1)在正常人血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳图谱中泳动最快的是()(2)在正常人血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳图谱中泳动最慢的是()(3)在正常人血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳图谱中区带最深的是()(4)在正常人血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳图谱中区带最浅的是()(5)正常人血清中的各种蛋白质，在pH8．6的缓冲液中负电性最强的是()(6)正常人血清中的各种蛋白质，在pH8．6的缓