动物血液常规检测（动物实验室诊断技术）

血清分离、抗凝01血清分离02血液抗凝血清分离一

采完血后，先将血清放到37度静置2小时，然后再4度过夜，这样出的血清多。实在不行，将凝固的血液用针头划几下，效果比较好。如果成胶冻样，可以高速离心，就能分离出血清了。血液抗凝二草酸钠：是常用的抗凝剂，每1.5～2.0mg可抗凝1.0ml血液，可用于血液常规检验。因对红细胞大小有影响，故不能用红细胞压积测定，如测定红细胞压积时，可用双草酸盐抗凝剂或乙二胺四乙酸二钠。双草酸盐抗凝剂：

草酸钠0.8g草酸铵1.2g蒸馏水加至100ml溶解后吸取0.5ml，加入供采血试管或小瓶中，置干燥箱内（温度不超过80℃）烘干备用，可供5ml全血抗凝乙二胺四乙酸二钠：（EDTA－Na2）每10mg可使5ml全血抗凝；或配成10%的溶液，每2滴可使5ml全血抗凝。可适用于一般的血液学检查，特别是血小板计数，但因为影响血小板聚集和白细胞吞噬功能，不适合于血象及血小板功能检查。血液抗凝二3.8%枸橼酸钠溶液每0.5ml可使5ml全血抗凝。常用于血沉、凝血因子和血小板功能检查。因其毒性小又可作为血液保养液。但不适用于血液化学检验。由于抗凝剂溶解缓慢，故只能配成溶液，不能用粉剂。肝素肝素价格最贵，其优点是抗凝作用强，不影响血细胞的体积，不致溶血等，可用于多种血液生物化学分析和红细胞压积测定。但过量的肝素可引起白细胞聚集和血小板减少，故不适用于白细胞和血小板计数，也不适用于血涂片检查，因其在瑞氏染色时会出现蓝色背景，更不能用于凝血象的检查。通常用肝素粉剂配成1g/L水溶液。取0.5ml置小瓶内，放于37～50℃中烘干后贮于冰箱内保存。能使5ml血液不凝固，肝素抗凝剂应及时使用，放置过久易失效。怀疑传染病时，采血应防止到处流散，检后残余血液及所用器皿应进行消毒处理。红细胞计数的临床意义一红细胞计数的临床意义通常情况下,血液循环中的红细胞和血红蛋白数量能保持相对恒定。通过对红细胞和血红蛋白量的检查，以及红细胞形态学或生化改变的检查，对这些疾病的诊断具有一定的意义。（1）红细胞增多。机体脱水,见于严重呕吐、腹泻、大量出汗、急性胃肠炎、肠阻塞、肠变位、牛的瓣胃、真胃阻塞、渗出性胸、腹膜炎、日射病与热射病、某些传染病及发热性疾病、代偿机能不全的心脏病及慢性肺部疾患等。（2）红细胞减少。见于多种原因引起的贫血。二血红蛋白计数的临床意义血红蛋白浓度测定临床意义血红蛋白的测定，对各种贫血的诊断及鉴别诊断有着重要的意义，它是分析贫血性质不可缺少的指标。(1)血红蛋白增加：一般都是相对性的增加，见于各种原因引起的脱水，如腹泻、大出汗、肠阻塞、肠变位、瓣胃或真胃阻塞、胸腹腔的渗出性炎症等。(2)血红蛋白减少：血红蛋白减少比较常见，多见于出血性贫血、溶血性贫血、营养不良性贫血、传染性贫血、梨形虫病、营养衰竭症、急性钩端螺旋体病、胃肠道寄生虫病、溶血性毒物中毒等。(3)血红蛋白含量的减少只能反映贫血的程度，但不能标志贫血的特征与性质。因此，只有同时计算红细胞数，并依此而求得血色指数时，才能较全面的鉴别贫血的关系。几种动物血红蛋白和红细胞数红细胞比容测定临床意义一红细胞比容测定临床意义红细胞比积增高，见于各种原因所致脱水性病；红细胞比积降低，见于各种贫血。二红细胞指数测定的临床意义红细胞指数测定的临床意义根据红细胞的大小和色素的高低进行贫血的形态学分类，有助于贫血的病因诊断。细胞的大小和色素的高低不但可经显微镜直接观色也可经过测定及计算出红细胞的三个平均值来判断，细胞的大小根据MCV判断，色素的高低根据MCHC判断。红细胞沉降率测定一红细胞沉降率测定（血沉测定）

1.定义红细胞沉降率，简称血沉率，是指将抗凝血装入特制的玻璃管中，在一定的时间内，观察红细胞下沉的毫米数。红细胞沉降速度主要与红细胞钱串状的形成、红细胞数目的多少、血浆蛋白的组成有关。测定血沉的方法很多，有魏氏法、温氏法、涅氏法、倾斜法、微量法等。在兽医临床中，以魏氏法较常用。红细胞沉降率测定的临床意义二临床意义①血沉率加快。常见于各种贫血性疾病、炎症性疾病及组织损伤或坏死（如结核病、风湿热、全身性感染等）。随着疾病的好转，血沉率逐渐变慢并恢复正常。②血沉率减慢。常见于机体严重的脱水，如胃扩张、肠阻塞、急性胃肠炎、瓣胃阻塞、发热性疾病、酸中毒等。白细胞数的正常参考值一白细胞计数的临床意义二白细胞计数的临床意义（1）白细胞增多。见于大多数细菌性传染病和炎性疾病，如炭疽、腺疫、巴氏杆菌病、猪丹毒、纤维素性肺炎、小叶性肺炎、腹膜炎、肾炎、子宫炎、乳房炎、蜂窝织炎等疾病。此外，还见于白血病、恶性肿瘤、尿毒症、酸中毒等。（2）白细胞减少。见于某些病毒性传染病，如猪瘟、马传染性贫血、流行性感冒、鸡新城疫、鸭瘟等；各种疾病的濒死期和再生障碍性贫血；长期使用某些药物时，如磺胺类药物、青霉素、链霉素、氯霉素、氨基比林、水杨酸钠等。白细胞分类计数的临床意义一白细胞分类计数临床意义⑴中性粒细胞增多。见于急性感染或胃肠炎、肺炎、子宫炎、乳房炎等炎症，某些传染病如猪丹毒、结核等，以及大手术后、外伤、酸中毒前期、烫伤等。嗜中性粒细胞核象变化 嗜中性粒细胞核象是指其细胞核的分叶状态,反映细胞成熟程度。因此,嗜中性粒细胞核象变化是反映某些疾病的病情和预后。正常时血中中性粒细胞的分叶居多，仅有少量杆状核粒细胞，杆状核与分叶核之间的正常比值为1:13，如比值增大，即杆状粒细胞增多或出现杆状核以前更幼稚阶段的粒细胞称为核左移。如分叶核粒细胞分叶过多，分叶在5叶以上的细胞超过0.03时，称为核右移。核左移,同时白细胞总数增高，称为再生性左移，表示机体的反应性强，常见于感染，急性中毒、急性溶血、急性失血等。细胞总数和中性粒细胞百分数略增高，并核左移，表示感染程度较轻、机体抵抗力强。但核左移而白细胞总数不增高，甚至减少者，称为退行性左移。见于再生障碍性贫血。核右移,见于重度的贫血和应用抗代谢药物治疗后及感染的恢复期，但在疾病进展期出现中性粒细胞核右移变化，则提示预后不良。白细胞分类计数的临床意义二⑵中性粒细胞减少。见于病毒感染性疾病、再生障碍性贫血、缺铁性贫血，化学药品等均可引起。⑶嗜酸性粒细胞增多。主要见于变态反应性疾病（如过敏反应）、如肝片吸虫、旋毛虫病等寄生虫病、皮肤病、以及注射血清之后等。⑷嗜酸性粒细胞减少。见于毒血症、尿毒症、严重创伤、中毒、饥饿及过劳等。⑸嗜碱性粒细胞的增多与减少。此种情况比较少见，无临床意义。⑹淋巴细胞增多。见于某些感染性疾病，如猪瘟、流行性感冒等病毒感染，如结核杆菌、布氏杆菌等细菌感染，以及某些血孢子虫病。⑺淋巴细胞减少。当嗜中性白细胞增多，常常伴淋巴细胞减少，是机体与病原处于激烈斗争阶段，以后淋巴细胞由少逐渐增多，常为预后良好的象征。⑻单核细胞增多。见于某些原虫性疾病如焦虫病、锥虫病，某些慢性细菌性疾病如结核、布氏杆菌病以及某些病毒性疾病如马传染性贫血等。⑼单核细胞减少。主要见于急性传染病的初期和各种疫病的垂危期。各种白细胞的形态特征一马血涂片（仿史言，1987）1.嗜碱性粒细胞2、3.嗜酸性粒细胞4.幼稚嗜中性粒细胞5.杆状核嗜中性粒细胞6.分叶核嗜中性粒细胞7.单核细胞8.大淋巴细胞9.中淋巴细胞10.小淋巴细胞11.血小板12.单独红细胞13.串状红细胞猪血涂片（仿史言，1987）1.嗜碱性粒细胞2.幼稚型嗜酸性粒细胞3.分叶核嗜酸性粒细胞4.幼稚嗜中性粒细胞5.杆状核嗜中性粒细胞6.分叶核嗜中性粒细胞7.单核细胞8.大淋巴细胞9.中淋巴细胞10.小淋巴细胞11.浆细胞12.血小板13.红细胞白细胞分类计数二白细胞分类计数（1）嗜中性粒细胞。嗜中性粒细胞约是红细胞2倍大，成熟程度不同，各阶段的细胞又各有其特点：幼稚粒细胞。其细胞浆呈粉红色或蓝色，细胞浆中的颗粒蓝红色的微细颗粒；细胞核为椭圆形，呈红紫色，染色质细致。杆状核粒细胞。其细胞浆呈粉红色，细胞浆中的颗粒粉红色、蓝色的微细颗粒；细胞核为马蹄形或腊肠形，呈浅紫蓝色，核染色质细致。分叶核粒细胞。细胞核分叶，多为2～3叶，核的颜色呈深紫蓝色、核染色质粗糙其细胞浆呈浅粉红色，细胞浆中颗粒为粉红色或紫红色的微细颗粒。⑵嗜酸性粒细胞。与嗜中性粒细胞大致相等或稍大。细胞核为杆状或分叶，以2～3叶居多，呈淡蓝色，核染色质粗糙。细胞浆呈蓝色或粉红色，嗜酸性颗粒为粗大的深红色颗粒，分布均匀。⑶嗜碱性粒细胞。大小与嗜中性粒细胞相似，细胞核为杆状或分叶，以2～3叶居多，呈淡紫蓝色，细胞浆呈粉红色，嗜碱性颗粒为较粗大的蓝黑色颗粒，分布细胞的边缘不均。白细胞分类计数二⑷淋巴细胞。有大淋巴细胞和小淋巴细胞。细胞核为圆形，有的凹陷，呈深紫蓝色，核染色质致密；细胞浆少，呈深蓝色或天蓝色，深染时有透明带。⑸单核细胞。比其他白细胞都大；胞核为豆形、圆形、椭圆形、“山”字形等，呈淡蓝紫色，核染色质细致而疏松，细胞浆多呈灰蓝色或天蓝色，许多细小的淡紫色颗粒。红细胞计数（传统法）一（1）器材红细胞稀释管或沙利氏吸血管、5ml刻度吸管、小试管、血盖片、血细胞计数板、计数器、显微镜。（2）红细胞稀释液红细胞稀释液为0.85％氯化钠液或赫母氏液（氯化钠1g、硫酸钠（Na2S04•10H20）5g，升汞0.5g，蒸馏水200m1）。（3）血细胞计数板及其构造临床上常用的血细胞数板是一块特制厚玻板。玻板中间有横沟将其分为3个狭窄的平台，两边的平台各刻有划格，为计数室,每一室分为9个大方格，每一个大方格的面积为1mm2,中央一大格，由双线划为25个中格，每个中格以单线又划为16个小格，共400小格（每小格的容积为1／4000mm3），供红细胞计数用。四角的大格，各分为16个中格，供白细胞计数用（如图2.4）。计数时，要注意压在线上的血细胞在内，压在线上的细胞，遵守“数左不数右，数上不数下”的计数法则。（4）测定方法①红细胞吸管稀释法用细胞稀释管吸取血液至刻度“0.5”，用脱脂棉球拭去吸管外面及尖端的血迹。迅速将吸管插入红细胞稀释液内,吸取稀释液至刻度“101”处，然而将吸管的两端夹持于拇指与中指（或食指）之间，振荡时应转换方向，以使血液和稀释液充分混合均匀。倾斜执握吸管，以管尖接触血盖片边缘与计数室空隙处，小心充液，使管尖的小滴稀释血液借毛细管的作用自然引入计数室。将充好稀释血液的计数室置于水平的显微镜载物台上，静置3min，用低倍镜或高倍镜计数。计算计数室中央大方格的四角和中央5个中方格内的红细胞数（R）计数室充液与血细胞计数顺序血涂片的制作一（一）制作血涂片取一干燥洁净的玻片为载玻片。另取一边缘平滑的玻片作为推片。取供检血液一滴置于载玻片一端，用推片的一端放在血滴上，稍移推片，使血滴沿推片边缘均匀展开，然后将推片与载玻片保持呈45°均匀而迅速地将推片沿玻片表面推至玻片另一端（图2.6），形成头体尾明显的血膜，使其快速干燥（切忌加热干燥）。注意血涂片要求分布均匀，标明畜别、编号及日期，作染色备用。血片涂制法 血片分区计数法1.推片放血滴前现后拉2.向前推动推片 1.四区法2.三区法2.中央一区法3.手的姿势（二）染色①瑞特氏染色法。取已干燥的血涂片，用蜡笔在血膜两端划线，将血涂片放平（置于染色架上）。用滴管滴瑞氏染液3～5滴于涂片上，轻轻晃动或染色架，使染液布满整个血膜，放置约１～２min。加入等量缓冲液（也可用重蒸馏水代替），用吸球轻轻吹动，使染液与缓冲液充分混匀，放置染色约5～10min。然后用细小流水自片端冲去染液，切勿先倾去染液再用水冲。染色血片自然干燥后即可镜检。②姬姆萨氏染色法。在干燥的血片上滴加甲醇2～3滴，使血膜固定3～5min，姬姆萨应用液染色20～４0min，用蒸馏水冲洗、