蛋白质的提取和分离练习题

\o"点击文章标题可访问原文章链接"蛋白质的提取和分离练习题【基础达标】

1．选用猪、牛、羊成熟的红细胞作分离蛋白质的实验材料,下列是其优点的是（）

A.血红蛋白是无色蛋白

B.红细胞有细胞核

C.红细胞蛋白质含量高

D.红细胞DNA含量高

【答案】C

【解析】

哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核,核物质也消失,所以红细胞内几乎没有DNA；血红蛋白是有色蛋白，红细胞蛋白质含量高。故选C。

2．血红蛋白释放时，红细胞破裂的原因不包括（）

A.红细胞吸水膨胀

B.磁力搅拌器的充分搅拌

C.血红蛋白变性

D.甲苯对细胞膜的溶解

【答案】C

【解析】

血红蛋白释放时，红细胞破裂的原因是红细胞吸水膨胀、甲苯对细胞膜的溶解、磁力搅拌器的充分搅拌等，血红蛋白不会变性。故选C。

3．蛋白质分离和提取的步骤可分为（）

A.样品处理、凝胶色谱操作、SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳

B.样品处理、凝胶色谱操作、纯化

C.样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定

D.样品处理、纯化、粗分离、纯度鉴定

【答案】C

【解析】

蛋白质的提取和分离分为样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定四步。故选C。

4．将搅拌好的混合液离心来分离血红蛋白溶液时，第2层是（）

A.甲苯

B.血红蛋白水溶液

C.脂溶性物质的沉淀层

D.其他杂质的沉淀

【答案】C

【解析】

A项错误：甲苯层位于第1层；

B项错误：血红蛋白水溶液位于第3层；

C项正确：第2层是脂溶性物质的沉淀层；

D项错误：其他杂质的沉淀物位于第4层。

5．下列有关提取和分离血红蛋白的程序叙述错误的是（）

A.样品处理就是通过一系列操作收集到血红蛋白溶液

B.通过透析可以去除样品中分子质量较大的杂质,此为样品的粗提取

C.可通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去,即样品的纯化

D.可通过SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定血红蛋白的纯度

【答案】B

A项正确：样品处理是洗涤红细胞,使血红蛋白释放出来,通过离心法得到血红蛋白溶液；

B项错误：透析的原理是透析袋能使小分子物质自由进出,而袋内的大分子物质留在袋内即可除去样品中相对分子质量较小的杂质；

C项正确:凝胶色谱法中的凝胶内部通道只允许相对分子质量较小的蛋白质通过,而相对分子质量较大的蛋白质则被排阻在凝胶颗粒之外，即达到样品纯化的目的；

D项正确：判断纯化的蛋白质是否达到要求,通常用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳法对蛋白质的纯度进行鉴定。

【能力提升】

1．在血红蛋白分离过程中,如果红色区带歪曲、散乱、变宽,与其有关的是（）

A.血红蛋白释放

B.色谱柱的装填

C.洗脱过程

D.样品的处理

【答案】B

【解析】

如果凝胶色谱柱装填得很成功、分离操作也正确的话,能清楚地看到血红蛋白的红色区带均匀、狭窄、平整,随着洗脱液缓慢流出；如果红色区带歪曲、散乱、变宽,说明分离的效果不好,这与凝胶色谱柱的装填有关。故选B。

2．下列关于电泳的说法,不正确的是（）

A.电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程

B.带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动

C.蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于它所带净电荷的多少

D.用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳,蛋白质的电泳迁移率完全取决于分子的大小

【答案】C

A项正确：电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程；

B项正确：许多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解离的基团，在一定的pH下，这些基团会带上正电或负电，在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动；

C项错误：蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于它所带净电荷的多少及分子大小等因素；

D项正确：SDS能与各种蛋白质形成蛋白质—SDS复合物,SDS所带负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量,因而掩盖了不同种蛋白质间的电荷差异,使电泳迁移率完全取决于分子的大小。

3．蛋白质的分离与纯化是蛋白质研究的重要技术。下列有关叙述不正确的是（）

A.根据蛋白质分子不能透过半透膜的特性,可将样品中各种不同的蛋白质分离

B.根据蛋白质所带电荷性质的差异及分子大小等,可通过电泳法分离蛋白质

C.根据蛋白质相对分子质量的大小,可通过凝胶色谱法分离蛋白质

D.根据蛋白质的分子大小、密度不同,可通过离心沉降法分离蛋白质

【答案】A

A项错误：蛋白质分子是生物大分子,都不能通过半透膜,因此不能利用半透膜分离蛋白质；

B项正确：蛋白质分子所带电荷性质的差异及分子大小可以使蛋白质分子在电场中获得不同的迁移速度,因此可以利用电泳法分离蛋白质；

C项正确：蛋白质相对分子质量的大小不同,通过凝胶柱的时间不同,可通过凝胶色谱法分离蛋白质；

D项正确：蛋白质的分子大小、密度不同,具有不同的离心力,可通过离心沉降法分离蛋白质。

4．在蛋白质的提取和分离中,关于对样品处理过程,分析无误的是（）

A.洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐

B.洗涤时离心速度过小,时间过短,白细胞等会沉淀,达不到分离的效果

C.洗涤过程选用质量分数为0.1%的生理盐水

D.透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质

【答案】D

【解析】

A项错误：洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白；

B项错误：洗涤时离心速度过高,时间过长,会使白细胞等一同沉淀,达不到分离的效果；

C项错误：洗涤红细胞选用0.9%的生理盐水；

D项正确：透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质。5．凝胶色谱柱取长为40cm,内径为1.6cm,有关说法中,不正确的是（）

A.一般凝胶色谱柱直径的大小不会影响分离的效果

B.凝胶色谱柱过高,超过1m,不影响分离的效果

C.凝胶色谱柱过矮,则影响混合物的分离度

D.凝胶色谱柱直径过大会耗用过多洗脱液,样品的稀释度过大

【答案】B

【解析】

一般凝胶色谱柱直径的大小不影响分离的效果,但是直径过大会造成洗脱液体积增大,样品的稀释度过大,因此应选择直径不超过2cm的色谱柱。凝胶色谱柱的高度与分离度有关,一般不超过1m。故选B。

【终极闯关】

1、（2015年广东省三校联考）下列有关红细胞的叙述，正确的是（）

A.鸡的红细胞中不含DNA分子

B.通过差速离心法可以从牛成熟红细胞中分离各种细胞器

C.蛙的红细胞无丝分裂过程中没有染色体的复制

D.从红细胞中提取血红蛋白过程洗涤的目的是去除杂蛋白

【答案】D

【解析】

鸡属于鸟类，红细胞中含DNA分子，A项错误；

牛属于哺乳动物，其成熟的红细胞中没有各种细胞器，B项错误；

无丝分裂有染色体的复制和细胞核的分裂，C项错误；

提取血红蛋白过程洗涤的目的是去除杂蛋白，D项正确。

2．（2015年四川省雅安中学月考）下图是用除去DNA的滤液进行血红蛋白的提取和分离实验的装置，下列有关叙述不正确是（）

A．首先用图甲装置对滤液进行处理，其目的是去除相对分子质量较小的杂质

B．图乙装置的试管中收集到的液体中最先出现的是相对分子质量较小的蛋白质

C．用图乙装置分离血红蛋白时，待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，用试管收集流出液，每管收集5mL，连续收集

D．图丙装置中电泳法分离提纯血红蛋白的原理是血红蛋白带有一定量的电荷，在电场的作用下向一极移动

【答案】B

透析袋是一种半透膜，小分子能自由进出，大分子保留在袋内，可去除样品分子量较小的杂质，A正确；

凝胶色谱法最先出现的是相对分子质量较大的蛋白质，B错误；

用图乙装置分离血红蛋白时，待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，用试管收集流出液，每管收集5mL，连续收集，C正确；

图丙装置中电泳法分离提纯血红蛋白的原理是血红蛋白带有一定量的电荷，在电场的作用下向一极移动，D正确。3．（2015届广东省江门市高三3月模拟考试生物试卷）下列关于分离技术或方法的叙述，错误的是（）

A.将细胞匀浆放入离心管中进行差速离心可分离各种细胞器

B.用含有刚果红的培养基可分离出能分解尿素的微生物

C.利用DNA和其它杂质在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同的特性分离出DNA

D.使用凝胶色谱法可以分离不同相对分子质量的蛋白质

【答案】B

【解析】

分离各种细胞器的常用方法是差速离心法，A项正确；

加入酚红指示剂可用来鉴定分解尿素的细菌，B项错误；

利用DNA和蛋白质等其它成分在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，利用这一特性，选择适当的盐浓度可分离出DNA，C项正确；

凝胶色谱法，是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法，D项正确。

4．（2015届江西南昌二中高三月考）可以利用哺乳动物成熟的红细胞为实验材料进行的实验有（）

①制备较纯净的细胞膜

②运用差速离心法分离各种细胞器

③DNA的粗提取

④分离并纯化血红蛋白

⑤制成细胞悬浮液进行细胞培养

A．②③B．③⑤

C．①④D．④⑤

【答案】C

哺乳动物成熟的红细胞无细胞核和众多的细胞器，因此制备较纯净的细胞膜使用哺乳动物成熟的红细胞为原料最好，故①正确；

由于哺乳动物成熟的红细胞没有细胞器，故②错误；

由于哺乳动物成熟的红细胞无细胞核，没有DNA分子，故③错误；

哺乳动物成熟的红细胞中含有血红蛋白，故④正确；

哺乳动物成熟的红细胞无细胞核，不能进行分裂，故⑤错误。

综上所述，故C正确。

5、（2011广东卷）以下关于猪血红蛋白提纯的描述,不正确的是（）

A.洗涤红细胞时,使用生理盐水可防止红细胞破裂

B.猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核,提纯时杂蛋白较少

C.血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测

D