高考生物复习生物技术实践第39讲微生物的培养及应用全国公开课一等奖百校联赛示范课赛课特等奖课件

第39讲微生物培养及应用备考·最新考纲1.微生物分离和培养。2.培养基对微生物选择作用。第1页考点一微生物试验室培养[自主梳理]1.培养基(1)概念：人们按照微生物对

不一样需求,配制出供其

营养基质。(2)营养组成：普通都含有

和无机盐。另外，还需要满足微生物生长对

、氧气以及

要求。营养物质生长繁殖水、碳源、氮源pH特殊营养物质固体液体第2页2.无菌技术(1)关键：预防

入侵。(2)不一样对象无菌操作方法[连一连]外来杂菌第3页3.大肠杆菌纯化培养(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基(2)纯化大肠杆菌方法①纯化培养原理：想方设法在培养基上得到

肉眼可见

，即可取得较纯菌种。②纯化大肠杆菌关键步骤：

。③惯用微生物接种方法有两种a.平板划线法：是经过

在琼脂固体培养基表面

操作，将聚集菌种逐步稀释分散到培养基表面。由一个细胞繁殖而来称量灭菌倒平板菌落接种接种环连续划线第4页b.

法：是将菌液进行一系列

，然后将

菌液分别涂布到琼脂固体培养基表面，进行培养。(3)菌种保留方法①对于频繁使用菌种，能够采取

方法。②对于需要长久保留菌种，能够采取

方法。稀释涂布平板梯度稀释不一样稀释度暂时保藏甘油管藏第5页[跟进题组]1.微生物培养过程中，要十分重视无菌操作，当代生物学试验中许多方面也要进行无菌操作，预防杂菌污染，请分析以下操作中错误是(

)①煮沸消毒能够杀死微生物营养细胞和部分芽孢

②接种操作要在酒精灯火焰附近进行

③无菌繁殖脱毒苗时，植物外植体要进行消毒

④家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌

⑤培养基要进行高压蒸汽灭菌

⑥加入培养基中指示剂和染料不需要灭菌A.①③ B.②④ C.③⑤ D.④⑥第6页解析无菌操作包含消毒和灭菌。需进行消毒处理有植物外植体及操作人员双手等，需进行灭菌有器皿、培养基、添加剂(指示剂或染色剂)等。煮沸能够杀死微生物营养细胞和一部分芽孢，属于消毒；为预防空气中杂菌污染，接种时要在酒精灯火焰附近进行；家庭制作葡萄酒时所利用微生物是葡萄表面酵母菌，故不能灭菌；培养基常进行高压蒸汽灭菌。故④⑥操作错误。答案

D第7页2.下列图甲、乙是微生物接种惯用两种方法，请回答相关问题。(1)图甲是利用________法进行微生物接种，图乙是利用________法进行微生物接种。这两种方法所用接种工具分别是________和________；对这两种接种工具进行灭菌和消毒方法依次是________和酒精消毒。(2)接种操作为何一定要在火焰附近进行？___________________________________________________。第8页(3)下列图是采取上述接种方法接种后培养效果图解，其接种方法是________(填“图甲”或“图乙”)。答案

(1)平板划线稀释涂布平板接种环涂布器灼烧灭菌(2)火焰附近存在着无菌区域(3)图乙第9页1.试验室惯用消毒和灭菌方法项目概念惯用方法应用范围消毒使用较为温和物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分微生物(不包含芽孢和孢子)煮沸消毒法：在100℃下煮沸5～6min普通物品巴氏消毒法：在70～75℃下煮30min或在80℃下煮15min一些不耐高温液体，如牛奶化学药剂消毒法如用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源等紫外线消毒法：紫外灯照射30min接种室、操作台第10页灭菌使用强烈理化原因杀死物体内外全部微生物(包含芽孢和孢子)灼烧灭菌：酒精灯火焰接种工具灭菌和试管口灭菌干热灭菌：在160～170℃下灭菌1～2h玻璃器皿、金属工具灭菌高压蒸汽灭菌：在压力为100kPa，温度为121℃条件下，灭菌15～30min培养基及容器灭菌第11页2.两种纯化细菌方法比较项目优点缺点适用范围平板划线法能够观察菌落特征，对混合菌进行分离不能计数适适用于好氧菌稀释涂布平板法能够计数，能够观察菌落特征吸收量较少，较麻烦，平板不干燥效果不好，轻易蔓延适适用于厌氧菌和兼性厌氧菌第12页3.平板划线操作3个易错点(1)灼烧接种环之后，要冷却后再进行取种，以免温度太高杀死菌种(2)划线时最终一区域不要与第一区域相连(3)划线用力要大小适当，预防用力过大将培养基划破第13页考点二微生物筛选和计数[自主梳理]1.土壤中分解尿素细菌分离与计数项目详细内容试验原理(1)能合成细菌才能分解尿素(2)配制以为唯一氮源培养基，能够生长细菌就是能分解尿素细菌数量统计(1)

法(显微镜下用特定细菌计数板或血细胞计数板)(2)间接计数法：试验流程土壤取样→配制土壤溶液和制备培养基→

→涂布平板与培养→菌落

脲酶尿素直接计数稀释涂布平板法系列稀释计数第14页2.分解纤维素微生物分离(1)纤维素酶①组成：纤维素酶是一个

，普通认为它最少包含三种组分，即

。②作用复合酶C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶纤维二糖葡萄糖(2)纤维素分解菌筛选①原理红色复合物透明圈第15页②筛选方法：

染色法，即经过是否产生

来筛选纤维素分解菌。③培养基：以

为唯一碳源选择培养基。④试验流程土壤取样：富含

环境↓选择培养：用

培养，以增加纤维素分解菌浓度↓

：制备系列稀释液↓涂布平板：将样品涂布到

培养基上↓挑选产生

菌落刚果红透明圈纤维素纤维素选择培养基梯度稀释判别纤维素分解菌透明圈第16页3.判断正误(1)选择培养基能够判定某种微生物种类(

)(2)从物理性状角度看，选择培养基多属于固体培养基(

)(3)对细菌进行计数只能采取稀释涂布平板法，而不能用平板划线法(

)(4)筛选能分解尿素细菌所利用培养基中，尿素是唯一氮源(

)(5)分解尿素细菌在分解尿素时，能够将尿素转化为氨，使得培养基酸碱度降低(

)(6)纤维素是组成植物细胞壁主要成份在纤维素酶作用下，纤维素能够水解成葡萄糖(

)答案

(1)×

(2)√

(3)×

(4)√

(5)×

(6)√第17页[跟进题组]1.苯酚是工业生产排放有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚微生物。某工厂产生废水中含有苯酚，为了降解废水中苯酚，研究人员从土壤中筛选取得了只能降解利用苯酚细菌菌株，筛选主要步骤如图所表示，①为土壤样品。请回答以下问题：第18页(1)②中培养目标菌株选择培养基中应加入________作为碳源，②中不一样浓度碳源培养基________(A.影响；B.不影响)细菌数量，假如要测定②中活细菌数量，常采取________法。(2)④为对照，微生物在④中不生长，在⑤中生长，④与⑤培养基主要区分在于___________________________________；使用____________________法能够在⑥上取得单菌落。采取固体平板培养细菌时进行倒置培养原因是_______________________________________________________________________。(3)试验过程中怎样预防其它微生物污染？___________________________________________________。第19页答案

(1)苯酚A稀释涂布平板(2)④培养基没有加入苯酚作为碳源，⑤培养基加入苯酚作为碳源稀释涂布平板法或平板划线预防冷凝后形成水珠滴落在培养基上污染培养基(3)培养基灭菌，接种环境灭菌，接种过程无菌操作第20页2.(·新课标全国卷Ⅰ)植物秸秆中纤维素可被一些微生物分解。回答以下问题。(1)分解秸秆中纤维素微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成复合酶，其中葡萄糖苷酶可将________分解成________。(2)在含纤维素培养基中加入刚果红(CR)时，CR可与纤维素形成________色复合物。用含有CR该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌菌落为中心________。第21页(3)为从富含纤维素土壤中分离取得纤维素分解菌单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基(成份见下表)：

酵母膏无机盐淀粉纤维素粉琼脂CR溶液水培养基甲＋＋＋＋－＋＋培养基乙＋＋＋－＋＋＋注：“＋”表示有，“－”表示无。据表判断，培养基甲________(填“能”或“不能”)用于分离和判别纤维素分解菌，原因是____________________；培养基乙________(填“能”或“不能”)用于分离和判别纤维素分解菌，原因是____________________________________。第22页答案

(1)纤维二糖葡萄糖(2)红透明圈(3)不能液体培养基不能用于分离单菌落不能培养基中没有纤维素，不会形成CR—纤维素红色复合物，即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌第23页1.选择培养基与判别培养基比较种类制备方法原理用途举例选择培养基培养基中加入一些化学物质依据一些微生物对一些物质或环境条件癖好、抗性而设计从众多微生物中分离所需微生物加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌判别培养基培养基中加入某种指示剂或化学药品依据微生物产生某种代谢产物与培养基中特定试剂或化学药品反应，产生显著特征改变而设计判别不一样种类微生物伊红-美蓝培养基能够判别大肠杆菌第24页2.选择培养基四种常见制备方法或实例第25页3.分离纤维素分解菌所用两种培养基比较分离纤维素分解菌试验中先用选择培养基，再用判别培养基。(1)选择培养基为液体培养基，以纤维素作为碳源和能源微生物能够正常生长，而其它绝大多数微生物不能正常生长；因培养基中无凝固剂，为液体培养基，利用液体培养基能使营养成份被充分消耗，以增加纤维素分解菌浓度。(2)判别培养基含琼脂，为固体培养基，细菌可在培养基上形成肉眼可见菌落。刚果红染色法应用就是判别培养基。第26页易错易混防范清零[易错清零]易错点1误认为全部微生物培养基中均需加入“生长因子”点拨碳源、氮源、水分、无机盐、生长因子是微生物生长必需五大营养成份，但大多数培养基中都含碳源、氮源水分、无机盐四类物质，可能不需额外添加“生长因子(如维生素)”，这是因为许多微生物可自行合成这些生长因子，而对那些合成能力有限或不能合成生长因子微生物(如乳酸菌)，则需在培养基中添加诸如维生素等生长因子第27页易错点2混同两种“对照组”与“重复组”点拨

(1)两种对照组作用比较①判断培养基中“是否有杂菌污染”，需将未接种培养基同时进行培养。②判断选择培养基“是否含有筛选作用”，需设置牛肉膏蛋白胨培养基进行接种后培养，观察两种培养基上菌落数目，进行对比得出结论。(2)重复组设置及作用为排除偶然原因对试验结果干扰，在每一稀释度下宜设置3个平板作重复组，选择菌落数均在30～300且数目相差不大三个平板，用“平均值”代入计数公式给予计算菌落数第28页易错点3不明确每次划线操作中“灼烧接种环”目标或误认为划线结束后“无须灼烧接种环”点拨平板划线法纯化大肠杆菌时不一样阶段灼烧接种环目标不一样①第一次操作：杀死接种环上原有微生物。②每次划线之前：杀死上次划线后接种环上残留菌种，使下次划线菌种直接起源于上次划线末端。③划线结束后：杀死接种环上残余菌种，防止细菌污染环境和感染操作者。第29页易错点4不知道菌落计数比实际值“偏高”还是“偏低”点拨稀释涂布平板法统计样品中菌落数目往往比实际数目“低”。这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到