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文档简介
主讲老师:陈郁生物制药技术专业教学资源库微生物染色法目录CONTENTS01、认识革兰氏染色02、革兰氏染色实验认识革兰氏染色PART01革兰氏染色法是细菌学中使用最广泛的一种染色方法,由一位丹麦医生汉斯·克里斯蒂安·革兰(HansChristianGram)于1884年所创立。经革兰氏染色后,可将细菌分为革兰氏阳性菌(G+)和革兰氏阴性菌(G-)。革兰氏染色法在鉴别细菌、研究细菌的致病性等发面具有极其重要的意义。认识革兰氏染色法革兰氏染色实验PART01与细菌细胞壁的结构和化学组成有关。实验原理实验原理G+细菌与G-细菌细胞壁的比较结构化学组成肽聚糖磷壁酸脂溶性物质G+一层厚多含量较高少G-两层薄少无多实验原理a、用紫色染料结晶紫染色b、用碘液媒染c、用酒精脱色d、用番红花红复染实验原理空隙染料脱色结果G+变小难流出保留紫色G-变大易流出无色
G+细菌与G-细菌细胞壁脱色过程中的变化结果:
G+(紫色),
G-(红色)菌种金黄色葡萄球菌、大肠杆菌纯培养物(18~24h)仪器显微镜材料
载玻片、香柏油、二甲苯、擦镜纸、吸水纸、染色缸等染料初染液(结晶紫)、媒染剂(碘液)、脱色剂(95%乙醇)、复染液(番红)实验材料实验步骤涂片染色镜检实验步骤(1).涂片A.加小滴水
B.涂成薄层
C.固定菌体
涂片制备过程实验步骤(2).染色01结晶紫初染1min02碘液媒染1min0395%酒精脱色
20s~30s0405细水冲洗细水冲洗细水冲洗细水冲洗涂片染色过程(3).镜检阳性G+阴性G-实验步骤(4)注意事项(1)载玻片:洁净无脂(3)涂片:均匀,宜薄,不宜
过厚(2)滴水和取菌量:不宜过多(4)加热固定:温度不宜过高(6)脱色时间:20~30s(5)水洗:不要直
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