芳胺类药物分析-对氨基苯甲酸酯类

药物分析药分教研室陈九章胺类药物的检测目录CONTENTS酰胺类苯甲酸酯类苯乙胺类132...第一节

一、结构与性质（一）化学结构母核结构：盐酸丁卡因盐酸普鲁卡因苯佐卡因盐酸普鲁卡因胺典型药物：（二）理化性质1.溶解性

游离碱难溶于水，可溶于有机溶剂。盐酸盐易溶于水和乙醇，难溶于有机溶剂。2.芳香第一胺反应

具有芳伯氨基或潜在芳伯氨基，盐酸丁卡因除外。3.水解性

含有酯键，易水解。4.弱碱性

含有叔氮原子，具弱碱性，苯佐卡因除外。5.光谱吸收特性

紫外吸收；红外吸收。二、盐酸普鲁卡因及其制剂的检验（一）性状本品为白色结晶或结晶性粉末；无臭。在水中易溶，在乙醇中略溶，在三氯甲烷中微溶，在乙醚中几乎不溶。盐酸普鲁卡因注射剂为无色的澄明液体。（二）鉴别1.水解反应

取本品约0.1g，加水2ml溶解后，加10%氢氧化钠溶液1ml，即生成白色沉淀；加热，变为油状；继续加热，产生的蒸气能使湿润的红色石蕊试纸变为蓝色；热至油状物消失后，放冷，加盐酸酸化，即析出白色沉淀。2.芳香第一胺反应

取供试品约50mg，加稀盐酸1ml，必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加0.1mol/L亚硝酸钠溶液数滴，加与0.1mol/L亚硝酸钠溶液等体积的1mol/L脲溶液，振摇1min，滴加碱性β-萘酚试液数滴，生成橙黄到猩红色的沉淀。3.氯化物的反应

取供试品溶液，加稀硝酸使成酸性后，滴加硝酸银试液，即生成白色凝乳状沉淀；分离，沉淀加氨试液即溶解，再加稀硝酸酸化后，沉淀复生成。4.红外光谱法

本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集397图）一致。5.盐酸普鲁卡因注射剂鉴别在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。（三）检查1.盐酸普鲁卡因

本品杂质检查除需检查“溶液的澄清度”“干燥失重”“炽灼残渣”“铁盐”及“重金属”等一般杂质外，还应检查以下特殊杂质：（1）酸度检查：取本品0.40g，加水10ml溶解后，加甲基红指示液1滴，如显红色，加氢氧化钠滴定液（0.02mol/L）0.2ml，应变为橙色。（三）检查1.盐酸普鲁卡因

（2）对氨基苯甲酸的检查：采用高效液相色谱法外标法进行检查。2.盐酸普鲁卡因注射液

本品主要杂质检查项目有pH、有关物质、渗透压摩尔浓度、细菌内毒素及注射剂项下有关的各项规定（通则0102）。“有关物质”检查：采用高效液相色谱法进行检查。供试品溶液色谱图中如有与对氨基苯甲酸峰保留时间一致的色谱峰，按外标法以峰面积计算，不得过盐酸普鲁卡因标示量的1.2%，其他杂质峰面积的和不得大于对照溶液的主峰面积（1.0%）。（四）含量测定1.盐酸普鲁卡因原料药的含量测定

（1）测定原理：盐酸普鲁卡因中因含有芳香第一胺，可在酸性溶液中与亚硝酸钠定量反应，生成重氮盐，现行版《中国药典》（2020年版）采用亚硝酸钠法中的重氮化滴定法进行含量测定，采用永停滴定法指示终点。

（2）测定方法：取本品约0.6g，精密称定，照永停滴定法（通则0701），在15～25℃，用亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定。每1ml亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）相当于27.28mg的C13H20N2O2·HCl。本品按干燥品计算，含C13H20N2O2·HCl不得少于99.0％。（3）亚硝酸钠滴定法的主要条件：重氮化反应的速度受多种因素的影响，亚硝酸钠滴定液及反应生成的重氮盐也不够稳定，因此在测定中应注意以下主要条件。

①加入适量溴化钾加快反应速度：

由于NOBr的生成速度快，生成量比NOCl的量大得多，即：加入溴化钾后，在供试液中可以提高NO+的浓度，从而加速了重氮化反应。②加过量盐酸加速反应：因胺类药物的盐酸盐较其硫酸盐的溶解度大，反应速度也较快，所以多采用盐酸。按照化学反应在式，1mol的芳胺需与2mol的盐酸作用，但实际测定时往往加入过量的盐酸，主要作用有加快重氮化反应速度；重氮盐在酸性溶液中更稳定；防止生成偶氮氨基化合物，影响测定结果。

③滴定温度为室温（10～30℃）：温度高，重氮化反应速度快；但温度太高，可使亚硝酸逸失，并使重氮盐分解；温度过低则反应太慢，因此一般在室温条件下进行。

④滴定方式：先快后慢。若使用自动永停终点仪，则直接将滴定管尖端和电极插入液面下，在磁力搅拌器搅拌下由仪器自动滴定。⑤终点指示方法：亚硝酸钠滴定法的终点指示方法有电位法、永停滴定法、外指示剂法和内指示剂法等。《中国药典》（2020年版）采用永停法指示亚硝酸钠滴定法的终点。

（4）含量计算：

原料药

2.盐酸普鲁卡因注射液的含量测定

本品为盐酸普鲁卡因加氯化钠适量使成等渗的灭菌水溶液。含盐酸普鲁卡因（C13H20N2O2·HCl）应为标示量的95.0％～105.0％。《中国药典》（2020年版）采用高效液相色谱法外标法测定含量。（1）色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以含0.1%庚烷磺酸钠的0.05mol/L磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节pH至3.0）-甲醇（68∶32）为流动相；检测波长为290nm，理论板数按普鲁卡因峰计算不低于2000。普鲁卡因峰与相邻杂质峰的分离度应符合要求。（2）测定法：精密量取本品适量，用水定量稀释制成每1ml中含盐酸普鲁卡因0.02mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取10μl注入液相色