DB54T 0317-2024 冬虫夏草中虫草酸的测定 液相色谱法

54ICS：67.05054CCS：B04DB54/T0317—2024冬虫夏草中虫草酸的测定 液相色谱法2024-04-08发布 2024-05-08实施西藏自治区市场监督管理局 发布DB54/T0317DB54/T0317—2024PAGE\*ROMANPAGE\*ROMANII目 次前言 II范围 1原理 1试剂和材料 1仪器和设备 1试样的制备和保存 2分析步骤 2结果计算 2精密度 3检出限和定量限 3附录A 虫草酸液相色谱图 4前  言本文件按照GB/T1.1-2020规则起草。本文件由拉萨海关技术中心提出。本文件由西藏自治区市场监督管理局归口。治区标准化研究所、福州海关技术中心、广州海关技术中心。文艺、唐庆强、刘青、魏霜、席静。DB54/T0317DB54/T0317—2024PAGEPAGE1冬虫夏草中虫草酸的测定 液相色谱法范围本文件规定了冬虫夏草中虫草酸的测定方法。原理样品经水浸泡、超声提取，采用液相色谱分离、示差检测器检测，外标法定量。试剂和材料除非另有说明，本方法所用试剂均为色谱纯，水为GB/T6682规定的一级水。试剂乙腈（C2H3N）：色谱纯。标准品虫草酸(C7H12O6，CAS:69-65-8)：纯度≥99.0%。标准溶液配制1.0g100mL10000.0mg/L准储备液，4℃避光冷藏。3.3.2 0200.0500.01000.02000.05000.0mg/L4℃避光冷藏。材料水相微孔滤膜：0.22µm。塑料离心管：50mL。仪器和设备高效液相色谱仪，带有示差检测器。超纯水仪系统。0.1mg0.01g。离心机：转速≥4000r/min。超声波清洗仪。试样的制备和保存冬虫夏草样品去除泥沙至无肉眼可见外来杂物，自然风干，水分＜10g/100g。研磨成粉末，60目筛子过筛，混匀，常温保存。分析步骤样品处理0.70g50mL15ml15h（或放置过夜30min4000r/mn5min50mL复超声步骤2次，将水相转移到同一50mL容量瓶中，并用水定容至刻度，混匀。取适量上清液过0.22μm滤膜，待液相色谱测定。色谱条件色谱柱：糖类分离色谱柱，250mm×4.6mm，5µm。或其他具有同等分析效果的色谱柱。柱温：30℃。流动相：乙腈＋超纯水=75＋25（V:V）。流速：1.0ml/min。进样量：10L。示差折光检测器池温度：35℃。测定待系统稳定后，按上述色谱条件依次进样。用虫草酸标准系列溶液进样后，以标液浓度对峰面积作标准曲线。标法计算样品中虫草酸的含量。空白试验除不加试样外，均按上述步骤进行。结果计算样品中虫草酸的含量计算按式(1)计算，计算结果需扣除空白值：（cc0）v式(1)中：

xm10000

(1)x——样品中虫草酸的含量，单位为%；c——从标准曲线中求得样品溶液中虫草酸的含量，单位为毫克每升（mg/L）；c0——空白溶液中虫草酸的含量，单位为毫克每升（mg/L）；v——样液定容体积，单位为毫升（ml）；m——冬虫夏草的质量，单位为克（g）；10000——单位由mg/kg转换为%的换算因子。计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留三位有效数字。精密度在重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。检出限和定量限虫草酸的方法检出限为1.5mg/kg，定量限为4.5mg/kg。附录A（资料性）虫草酸液相色谱图500mg/L虫草酸标准溶液液相色谱图见图A.1虫草酸mV25.0虫草酸22.520.017.515.012.51