导致液相色谱柱失效的4个常见问题及解决办法 液相色谱解决方案

第第页导致液相色谱柱失效的4个常见问题及解决办法液相色谱解决方案液相色谱仪的色谱柱在使用一段时间后，会出现一定的常见故障，如果不能很好的判断并解决就会影响色谱柱的使用效果，从而影响样品的分析结果。液相色谱柱1筛板堵塞色谱柱入口筛板堵塞是zui常见的问题之一，会导致柱压升高、色谱峰拖尾、塔板数降低等问题。通常分析样品中微粒杂质zui右可能堵塞色谱柱入口，因此分析时，需要先过滤或者离心，乳浊或浑浊样品应以0.25m滤膜处理，也可用针头过滤器过滤。进样器与泵密封垫的磨损也会带入微粒，在进样阀与色谱柱之间使用0.25m或0.45m的在线过滤器，通常可以避免这类问题。2强保留样品组分强吸附性的样品组分吸附在柱头填料上，能严重地影响色谱柱寿命。像生物组织或体液的提取物、天然产物等复杂样品，极易造成柱头的污染。相对较纯的样品，一般不会出现这一问题。色谱柱应用中，色谱峰严重拖尾或分裂往往是强保留污染物在柱头吸附的体现。3色谱柱装填不良装填不良的色谱柱，在短时间应用后，填充床的压缩通常使柱头处产生塌陷，导致柱效突然降低。色谱柱的初始评价指标，如塔板数、不对称因子等往往不能很好地表征色谱柱床层的稳定性，这种情绪只能在实际应用中发现。4压力因素液相色谱仪色谱柱使用过程中的骤然压力波动、机械撞击或温度骤然变化都会对色谱柱床层产生影响，导致峰形变差和柱效降低。进样过程中，进样阀转动太慢可引起压力波动，使色谱柱床产生裂隙，在柱切换时也存在同样的问题。使用填充良好的色谱柱，在较低柱压下操作，可大大减少由压力波动造成的色谱柱损坏。高效液相色谱仪常见故障解决方法

高效液相色谱仪是由储液器、泵、进样器、色谱柱、查看器、记录仪等几有些构成。储液器中的活动相被高压泵打入体系，样品溶液经进样器进入活动相，被活动相载入色谱柱（固定相、内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不一样的分配系数，在两相中作相对运动时，经过重复屡次的吸附-解吸的分配进程，各组分在移动速度上发生较大的不一样，被别离成单个组分顺次从柱内流出，经过查看器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱方式打印出来。高效液相色谱仪常见故障解决方法：故障1活动相内有气泡，封闭泵，翻开泄压阀，翻开purge键，清洁脱气，气泡不断从过滤器冒出，进入活动相，不管翻开purge键几回，都无法清除不断发生的气泡。因素过滤器长时刻沉浸于乙酸铵等缓冲液内，过滤器内部由于霉菌的成长繁衍，构成菌团，阻塞了过滤器，缓冲液难以流畅地经过过滤器，空气在泵的压力作用下经过滤器进入活动相。处理过滤器浸泡于5%硝酸溶液中，超声清洁几分钟即可；亦可将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中12～36小时，悄悄震荡几回，再将过滤器用纯水清洁几回，翻开泄压阀，翻开purge键，清洁脱气，如仍有气泡不断从过滤器冒出，持续将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中，如没有气泡不断从过滤器中冒出，阐明过滤器内部的霉菌菌团已被硝酸损坏，活动相能够流畅地经过过滤器。翻开泄压阀，翻开泵，流速调至1.0～3.0ml/min，纯水冲刷过滤器1小时摆布。即可将过滤器清洁洁净。封闭泄压阀，纯甲醇冲刷半小时即可。故障2柱压高因素：缓冲液盐分如（乙酸铵等）堆积于柱内；样品污染堆积。处理关于第一种状况先用40～50℃的纯水,低速正向冲刷柱子，待柱压逐步降低后，相应进步流速冲刷，柱压大幅度降低后，用常温纯水冲刷，之后用纯甲醇冲刷柱子30分钟；关于第二种状况，由样品的堆积导致污染的C18柱，和纯水反向冲刷柱子，然后换成甲醇冲刷，接着用甲醇+异丙醇（4+6）冲刷柱子（冲刷时刻的长短由样品污染的状况而定），再用换成甲醇冲刷，然后用纯水冲刷，最终甲醇冲刷正向冲刷柱子30分钟以上。故障3既无压力指示，又无液体流过[1；。泵密封垫圈磨损；很多气泡进入泵体。处理关于第一种状况，替换密封垫圈；关于第二种状况，在泵作用的一起，用一个50ml的玻璃针筒在泵的出口处协助抽出空气。故障4压力动摇大，流量不稳定.因素体系中有空气或者单向阀的宝石球和阀座之间夹有异物，使得两者不能密封。处理作业中留意调查活动相的量，确保不锈钢滤器沉入储液器瓶底，防止吸入空气，活动相要充沛脱气[2；。如为单向阀和阀座之间夹有异物，拆下单向阀，放入盛有丙酮的烧杯用超声波清洁.故障5出峰欠安，峰分叉。因素色谱柱被污染；柱头填料陷落。处理关于第一种状况，先用纯水反向冲刷柱子，然后换成甲醇冲刷，接着用甲醇+异丙醇（4+6）冲刷柱子（冲刷时刻的长短由样品污染的状况而定），再换成甲醇冲刷，然后用纯水冲刷，最终甲醇冲刷正向冲刷柱子30分钟以上。如冲刷后仍然出峰欠安，则考虑第二种状况。关于第二种状况,拧开柱头，查看柱填料是不是硬结或陷落。去掉硬结有些(污染的填料