莨菪烷类抗胆碱药物的分析

莨菪烷类抗胆碱药物的分析一、典型药物

由莨菪烷衍生氨基醇和不同有机酸缩合成酯类生物碱,常见颠茄生物碱类和古柯生物碱第一节莨菪烷类药物的结构和性质第2页,共35页，2024年2月25日，星期天

硫酸阿托品氢溴酸东莨菪碱（atropinesulfate）(copolaminehydrobromide）α-（羟甲基）苯乙酸8-甲基-8-氮杂双环〔3，2，1〕-3-辛酯硫酸盐9-甲基-3-氧杂-9-氮杂三环[3.3.1.02,4]壬烷-7-醇(-)-alpha-(羟甲基)苯乙酸酯第3页,共35页，2024年2月25日，星期天

硫酸莨菪碱

氢溴酸山莨菪碱

第4页,共35页，2024年2月25日，星期天1.水解性结构中具有酯的结构，易水解。

阿托品，水解生成莨菪醇(Ⅰ)和莨菪酸(Ⅱ)。

莨菪醇(Ⅰ)莨菪酸(Ⅱ)二、主要理化性质第5页,共35页，2024年2月25日，星期天2.碱性

阿托品和东莨菪碱的结构中，五元脂环上含有叔胺氮原子,具有较强的碱性,易与酸成盐。如阿托品的pKb1为4.35。东莨菪碱三元氧环的存在，N上孤电子产生显著立体效应（增强了空间位阻），使N原子不易给出电子，碱性较弱（与莨菪碱比）。第6页,共35页，2024年2月25日，星期天

3.旋光性

氢溴酸东莨菪碱结构中含有不对称碳原子，呈左旋体，比旋度为-24ο至-27ο，而阿托品结构中虽然也含有不对称碳原子，但因外消旋化而为消旋体，无旋光性。利用此性质可区别阿托品与东莨菪碱。

硫酸阿托品氢溴酸东莨菪碱第7页,共35页，2024年2月25日，星期天一、托烷生物碱类Vitaili（维特立）反应

阿托品、东莨菪碱、山莨菪碱等托烷类生物碱均显莨菪酸结构的特征反应

第二节鉴别试验生物碱水解莨菪酸发烟硝酸

三硝基衍生物KOH（C2H5OH）固体KOH有色的醌型产物第8页,共35页，2024年2月25日，星期天莨菪酸用发烟硝酸加热处理，发生硝基化反应，生成三硝基衍生物；再加氢氧化钾醇液和一小粒固体氢氧化钾，显深紫色，此反应称为Vitaili反应.为莨菪酸的特征反应。第9页,共35页，2024年2月25日，星期天二、与硫酸-重铬酸钾的反应

本类药物水解后，生成的莨菪酸，可与硫酸和重铬酸钾在加热的条件下，发生氧化反应，生成苯甲醛，而逸出类似苦杏仁的臭味。其反应式为：第10页,共35页，2024年2月25日，星期天三、与生物碱显色剂或沉淀剂反应

本类药物具有碱性，可与生物碱沉淀剂生成沉淀。生物碱类酸性水溶液中，常可与重金属盐类（碘化铋钾、碘化汞钾、碘-碘化钾、二氯化汞等）和大分子的酸类（磷钼酸、硅钨酸等）沉淀剂反应生成难溶盐或、不溶性盐、复盐或配位化合物沉淀，而可作鉴别。第11页,共35页，2024年2月25日，星期天生物碱沉淀试剂反应条件及结果碘化铋钾试液橙红或棕红色沉淀碘化钾碘试液棕色或棕褐色沉淀碘化汞钾试液在酸性或碱性溶剂中生成白色或淡黄色沉淀三硝基苯酚试液结晶性沉淀并有特定熔点硅钨酸试液白色、淡黄色或黄棕色沉淀磷钨酸试液酸性或中性溶液中，淡黄色沉淀第12页,共35页，2024年2月25日，星期天【氢溴酸东莨菪碱鉴别】

取本品约10mg，加水1ml溶解后，置分液漏斗中，加氨试液使成碱性后，加氯仿5ml,振摇，分取氯仿液，置水浴上蒸干，残渣中加二氯化汞的乙醇溶液（取二氯化汞2g，加60％乙醇使成100ml）1.5ml,即生成白色沉淀（与阿托品及后马托品的区别）。

第13页,共35页，2024年2月25日，星期天四、光谱鉴别1.紫外光谱法：一般通过比较药物的或吸收光谱的一致性来进行鉴别以及吸光系数。2.红外光谱法：CHP收载的原料药一般都采用红外光谱法进行鉴别。第14页,共35页，2024年2月25日，星期天五、色谱法

一般用于已知生物碱的鉴别，主要有TLC、HPLC、GC、PC等第15页,共35页，2024年2月25日，星期天六、硫酸盐和溴化物的反应药物大都以硫酸盐或溴化物的形式存在通过加沉淀试剂如硝酸银等生成溴化银沉淀或加入氯试剂生成溴溶于三氯甲烷而显色第16页,共35页，2024年2月25日，星期天一、氢溴酸东莨菪碱中有关物质的检查洋金花粗粉乙醇/渗漉渗漉液减压蒸馏浸膏H2SO4/提取酸性提取液Na2CO3,CHCl3/提取总生物碱Na2CO3,CHCl3/分离东莨菪碱HBr/成盐氢溴酸东莨菪碱（粗品）75%C2H5OH/精制成品根据其制备工艺，本品可通过酸度、其它生物碱、和易氧化物质检查进行控制第三节特殊杂质检查第17页,共35页，2024年2月25日，星期天1.酸度东莨菪碱碱性很弱，对石蕊试纸几乎不显碱性反应。如氢溴酸东莨菪碱为强酸弱碱盐、通过其5%的水溶液pH为4.0~5.5，可控制酸性杂质第18页,共35页，2024年2月25日，星期天2.易氧化物可能杂质为阿扑东莨菪碱、及其它含有不饱和双键的有机物，他们的紫外吸收波长会红移、可使高锰酸钾溶液褪色第19页,共35页，2024年2月25日，星期天示例13-6氢溴酸东莨菪碱易氧化物检查易氧化物可能杂质为阿扑东莨菪碱、及其它含有不饱和双键的有机物，他们的紫外吸收波长会红移、可使高锰酸钾溶液褪色第20页,共35页，2024年2月25日，星期天3.其它生物碱本品水溶液加入氨水试液不得发生混浊。当有其它生物碱存在时，则易产生混浊。第21页,共35页，2024年2月25日，星期天本品水溶液检查方法：第22页,共35页，2024年2月25日，星期天其他生物碱还常用TLC和HPLC法检查ab第23页,共35页，2024年2月25日，星期天二、硫酸阿托品中有关物质的检查硫酸阿托品为消旋体，无旋光性，而莨菪碱为左旋体，可以利用旋光性对莨菪碱杂质进行检查CHP用HPLC法检查其中有关物质，通过峰面积的比值及保留时间来控制杂质限度第24页,共35页，2024年2月25日，星期天第四节含量测定莨菪烷类抗胆碱药物药理活性较强、临床使用剂量较少，因此测定方法要专属、灵敏:

酸性染料比色法非水溶液滴定法高效液相色谱法第25页,共35页，2024年2月25日，星期天UV

一、酸性染料比色法在一定的pH条件下，某些生物碱药物可与某些酸性染料结合而呈色，进而可用分光光度法进行测量（一）原理第26页,共35页，2024年2月25日，星期天酸性染料磺酸酞类指示剂等，如溴甲酚绿、溴麝香草酚蓝、溴甲酚紫、溴酚蓝等其与酸性离子定量结合、生成具有吸收光谱明显红移的有色离子对，且可以被有机溶剂定量萃取，通过测定有机相中有色离子对的特征波长处的吸光度，即可进行含量测定第27页,共35页，2024年2月25日，星期天（二）影响因素1.水相最佳pH值的选择：使得BH+和In-最多第28页,共35页，2024年2月25日，星期天水相最佳pH第29页,共35页，2024年2月25日，星期天

2.酸性染料及其浓度：定量结合，产物溶解性好；可稍过量一般认为对测定结果影响不大，只要量足够大就可以。但浓度过高的话就会形成严重的乳化层，且不易于除去，往往影响测定结果。第30页,共35页，2024年2月25日，星期天磺酸酞类指示剂溴麝香草酚蓝(BTB)bromthymolbluepH6.0~7.6（黄~蓝）溴甲酚绿(BCG)bromcresolgreenpH3.6~5.2（黄~蓝）第31页,共35页，2024年2月25日，星期天3.有机溶剂的选择：提取效率高，氯仿最理想一般应选择对有机碱药物与酸性染料形成离子对萃取效率高、能与离子对形成氢键、不与或极少与水混溶的有机溶剂作为萃取溶剂。第32页,共35页，2024年2月25日，星期天4.水分的影响：第33页,共35页，2024年2月25日，星期天5.酸性染料里面的有色杂质影响结果，先用萃取溶剂萃取除去第34页,共35页，2024年2月25