血浆蛋白质与含氮化合物的生物化学检验

第一节血浆蛋白质第二节氨基酸代谢紊乱第三节核苷酸代谢紊乱第2页,共100页，2024年2月25日，星期天第一节血浆蛋白质定义：血浆和组织液中蛋白质，是血浆固体成份中含量最多、组成复杂、功能广泛的一类化合物。第3页,共100页，2024年2月25日，星期天一、血浆蛋白质的功能及分类（一）血浆蛋白质的功能维持血浆胶体渗透压----清蛋白的主要功能作为激素、维生素、脂类、代谢产物、离子、药物等的载体作为pH缓冲系统的一部分营养、修补组织蛋白作用抑制组织蛋白酶在血浆中起催化作用参与凝血与纤维蛋白溶解作为免疫球蛋白与补体等免疫分子，组成体液免疫防御系统。第4页,共100页，2024年2月25日，星期天（二）血浆蛋白质的分类1．电泳分类法

醋酸纤维素薄膜电泳一般可将血清蛋白质分为清蛋白、α1、α2、β、γ球蛋白5条主要区带。2．功能分类法—复杂

运输载体类免疫球蛋白补体蛋白类凝血因子类蛋白酶抑制物血清酶类蛋白类激素第5页,共100页，2024年2月25日，星期天二、血清总蛋白及主要组分正常与异常电泳

人血浆总蛋白(totalprotein，TP)浓度为60～80g/L临床实验室采用的标本多为血清测定血清TP的首选方法：双缩脲法样品采集时，患者应置仰卧位，直立时升高。静脉采血时止血带压迫静脉时间超过3min，TP也可上升10%。剧烈运动后立即采血TP最多可升高12%。第6页,共100页，2024年2月25日，星期天正常血清蛋白电泳图谱增示意图及其扫描曲线

（一）血清蛋白电泳的正常组分第7页,共100页，2024年2月25日，星期天（二）异常电泳图谱的临床意义1.异常血清蛋白电泳图谱分型2.典型异常血清蛋白电泳图谱3．浆细胞病与M蛋白第8页,共100页，2024年2月25日，星期天异常血清蛋白质电泳图谱的分型及其特征图谱类型TPAlbα1α2βγ低蛋白血症型↓↓↓↓N↑N↓N↑肾病型↓↓↓↓N↑↑↑↑↓N↑肝硬化型N↓↑↓↓N↓N↓β-γ↑（融合）弥漫性肝损害型N↓↓↓↑↓↑慢性炎症型↓↑↑↑急性时相反应型N↓N↑↑NM蛋白血症型在α-γ区带中出现M蛋白区带高α2(β)-球蛋白血症型↓↑↑↑妊娠型↓N↓↑↑

N

蛋白质缺陷型个别区带出现特征性缺乏第9页,共100页，2024年2月25日，星期天2．典型异常血清蛋白电泳图谱

A正常人

B肾病综合征C肝硬化(β-γ桥)

D肝硬化(不典型β-γ桥)

E多发性骨髓瘤IgA型F多发性骨髓瘤IgG型第10页,共100页，2024年2月25日，星期天3．浆细胞病与M蛋白正常血清蛋白电泳上显示的宽γ区带主要成分:免疫球蛋白(Ig)。浆细胞病（plasmacelldyscrasia）异常浆细胞增殖，产生大量单克隆Ig或其轻链或重链片段，病人血清或尿液中可出现结构单一的M蛋白（monoclonalprotein）在蛋白电泳时呈现一个色泽深染的窄区带，此区带较多出现在γ或β区，偶见于α区。第11页,共100页，2024年2月25日，星期天血浆蛋白质的性质功能及其与电泳区带的关系电泳区带蛋白质种类成人参考值（g/L）半寿期（d）分子量（kD）等电点含糖量(%)功能前清蛋白前清蛋白0.2~0.41.9554.70.5营养、运载清蛋白清蛋白35~5215~1966.24~5.80维持胶压、运载和营养等α1-球蛋白α1-抗胰蛋白酶0.9~2.04524.812蛋白酶抑制剂α1-酸性糖蛋白0.5~1.25402.7~445免疫应答修饰剂甲胎蛋白3×10－569胎儿期蛋白高密度脂蛋白1.7~3.25200胆固醇逆转运α2-球蛋白结合珠蛋白0.3~2.0285~4004.112结合血红蛋白α2-巨球蛋白1.3~3.057205.48蛋白酶抑制剂铜蓝蛋白0.1~0.44.51324.4铁氧化酶β-球蛋白转铁蛋白2.0~3.6779.65.76运铁到胞内低密度脂蛋白0.6~1.55300运胆固醇到组织C30.9~1.81852补体成分C40.1~0.42067补体成分β2-微球蛋白0.001~0.00211.8纤维蛋白原2.0~4.02.53405.53凝血因子γ-球蛋白IgG7.0~1624144~1506~7.33免疫球蛋白IgA0.7~4.06~1608免疫球蛋白IgM0.4~2.3597012免疫球蛋白C-反应蛋白＜5~1156.20炎症介质第12页,共100页，2024年2月25日，星期天三、血浆蛋白主要组分的生物化学检验

（一）前清蛋白（prealbumin，PA）1.性质分子量55kD由肝脏细胞合成的糖蛋白电泳时迁移在Alb之前半寿期1.9d生理功能：作为组织修补材料和运载蛋白第13页,共100页，2024年2月25日，星期天2.检测

目前多采用免疫透射比浊法

3.临床意义（一）前清蛋白（prealbumin，PA）作为营养不良的指标作为肝功能不全的指标负性急性时相反应蛋白PA:200～400mg/L正常PA:100～150mg/L轻度缺乏PA:50～100mg/L中度缺乏PA＜50mg/L严重缺乏第14页,共100页，2024年2月25日，星期天（二）清蛋白

（albumin，Alb）1．性质585个氨基酸残基组成分子量66.2kD含17个二硫键，是唯一不含糖的血浆蛋白质肝实质细胞合成半寿期19d血浆中含量最多的蛋白质第15页,共100页，2024年2月25日，星期天维持血浆胶体渗透压：血浆渗透压的75%～80%由Alb维持血浆中主要的载体蛋白，具有结合各种配体分子的能力缓冲酸碱维持酸碱平衡作用营养作用2．生理功能3．Alb的检测染料结合法----国内最常用方法是溴甲酚绿法电泳法免疫法(免疫扩散法、免疫比浊法和RIA)电化学测定法第16页,共100页，2024年2月25日，星期天4．临床意义（1）低清蛋白血症1）Alb合成降低：2）Alb的分布异常3）Alb丢失4）Alb分解代谢增加5）无清蛋白血症(analbuminaemia)

（2）血浆Alb增高（3）由Alb含量估计其配体的存在形式和作用（4）作为个体营养状态的评价指标（5）Alb的遗传性变异第17页,共100页，2024年2月25日，星期天4．临床意义血浆Alb作为营养指标的评价标准＞35g/L正常28～34g/L轻度缺乏21～27g/L中度缺乏＜21g/L严重缺乏第18页,共100页，2024年2月25日，星期天（三）α1-抗胰蛋白酶（α1-AT或AAT）基因定位于14q31-32.3394个氨基酸残基组成分子量52kDpI为4.8含糖10%～12%在醋纤膜电泳中位于α1区带主要由肝细胞合成，单核细胞、肺泡巨噬细胞和上皮细胞也能合成人血浆中主要的丝氨酸蛋白酶的抑制剂

1．性质

第19页,共100页，2024年2月25日，星期天

2．ATT基因的遗传表型

常染色体共显性遗传，有多种遗传表型现已发现至少有75种基因变体主要根据电泳迁移率分类移动快的AAT变体用字母表前面的字母表示移动最慢的基因以PiZ表示。F型--fast,M型--middle,S型—slow根据等位基因出现频率的不同，缺陷变体可进一步分为常见和少见两部分最常见的缺陷变体为Z和S型表现为以下基因型：ZZ、SS、SZ、MZ、MS。第20页,共100页，2024年2月25日，星期天3．临床意义PiZZ型、PiSS型甚至PiMS型常伴有早年（20～30岁）出现的肺气肿低血浆AAT可发现于胎儿呼吸窘迫综合征ZZ蛋白聚集在肝细胞，导致肝硬化PiZZ表型的新生儿中10%～20%在出生数周后易患肝炎，最后因活动性肝硬化致死PiZZ表型的某些成人会发生肝损害AAT缺乏：AAT属急性时相蛋白，在炎症、感染、肿瘤、肝病时均显著增加。AAT增加：第21页,共100页，2024年2月25日，星期天4．AAT的检测血清蛋白电泳单向扩散试验免疫散浊比浊免疫透射比浊法。对于AAT降低者可进一步采用等电聚焦电泳或分子生物学方法进行AAT表型分析。第22页,共100页，2024年2月25日，星期天（四）α1-酸性糖蛋白（AAG）181个氨基酸残基组成分子量约40kD属血浆中含糖量最高（达45%）、酸性最强的糖蛋白pI为2.7～4.0典型的急性时相反应蛋白

主要在肝脏产生,某些肿瘤组织也可产生1．性质第23页,共100页，2024年2月25日，星期天2．临床意义目前主要作为急性时相反应指标：在风湿病、恶性肿瘤及心肌梗死等炎症或组织坏死时一般增加3～4倍。AAG增高是活动性溃疡性结肠炎最可靠的指标之一。AAG增高：糖皮质激素增加，包括内源性的库欣综合征和外源性强的松、地塞米松等药物治疗时，可引起AAG升高。AAG降低：营养不良、严重肝损害、肾病综合征以及胃肠道疾病致蛋白严重丢失等情况下AAG降低。此外雌激素可使AAG降低。第24页,共100页，2024年2月25日，星期天3．α1-酸性糖蛋白的检测

过氯酸和磷钨酸分级沉淀AAG后，测定蛋白质或含糖量再计算之。免疫扩散免疫比浊法第25页,共100页，2024年2月25日，星期天（五）结合珠蛋白（haptoglobin，Hp）一种急性时相蛋白和转运蛋白在电泳中位于α2区带由α与β链形成α2β2四聚体，α链有α1及α2两种，而α1又有α1F及α1S两种遗传变异体，两种变异体仅为一个氨基酸残基差异1．性质与遗传表型第26页,共100页，2024年2月25日，星期天结合珠蛋白的遗传表型表型亚单位的结构组成组成Hp1-1

(α1F)2β2α1Fα1Sβ2(α1S)2β2分子量约为90kD，α链含83个氨基酸残基，β链含245个氨基酸残基Hp2-1

(α1Sα2β2)n(α1Fα2β2)n分子量为120~200kD的聚合体，由于n不同，可在电泳中出现多条带Hp2-2

(α2β)nn=3~8分子量为160~400kD，由于n不同，可在电泳中出现多条带第27页,共100页，2024年2月25日，星期天2．功能运输血管内游离的血红蛋白(Hb)到网状内皮细胞降解，防止Hb从肾脏丢失而为机体有效地保留铁，并能避免Hb对肾脏的损伤。第28页,共100页，2024年2月25日，星期天3．临床意义

Hp浓度下降见于：①溶血性疾病如溶血性贫血、输血反应、疟疾。Hp参考值范围较宽，须连续观察以监测溶血是否处于进行状态。对于溶血性疾病合适的组合检测项目包括血浆Hp、LD和游离Hb。血管外溶血不会使Hp发生变化。②严重肝病患者，其Hp合成减少。Hp浓度升高见于：

属急性时相反应蛋白，当烧伤和肾病综合征情况下，血Hp常明显升高。第29页,共100页，2024年2月25日，星期天4．Hp的检测

放射免疫扩散法免疫比浊法定量检测Hp亚型聚丙烯酰胺凝胶电泳等电聚焦电泳第30页,共100页，2024年2月25日，星期天（六）α2-巨球蛋白

（α2-macroglobulin，α2-MG或AMG）血浆中分子量最大的糖蛋白，约为720kD，含糖量约8%由肝细胞、单核细胞和星形细胞合成半寿期约5d包括补体C3和C4在内的一组血浆蛋白的主要成员，为硫酯键血浆蛋白家族。主要特性是能与多种离子和分子结合，特别是能与蛋白水解酶结合而抑制酶的活性可选择地保护某些蛋白酶活性1．性质第31页,共100页，2024年2月25日，星期天2．临床意义不属于急性时相反应蛋白。低清蛋白血症，尤其是肾病综合征时，α2-MG含量可显著增高α2-MG水平降低见于：严重的急性胰腺炎和进展型前列腺癌治疗前免疫比浊法3．α2-MG的检测方法第32页,共100页，2024年2月25日，星期天（七）铜蓝蛋白（ceruloplasmin，Cp）含铜的α2球蛋白由1046个氨基酸残基组成含糖约8%~9.5%每分子结合6～8个铜原子，由于含铜而呈蓝色95%的血清铜存在于Cp中，其余5%呈可扩散状态血循环中的Cp可认为是铜的无毒性代谢库1．性质第33页,共100页，2024年2月25日，星期天（七）铜蓝蛋白（ceruloplasmin，Cp）血浆铜的转运具有铁氧化酶作用，将Fe2+氧化为Fe3+，调节铁的运输、利用和氧化还原反应抗氧化作用，抑制膜脂质被金属离子的过氧化作用2．功能第34页,共100页，2024年2月25日，星期天（七）铜蓝蛋白（ceruloplasmin，Cp）Cp浓度减少有关的疾病：包括Wilson病、营养性铜缺乏和Menkes病（遗传性铜吸收不良）。属于急性时相反应蛋白：在妊娠、感染、创伤和肿瘤时血浆浓度增加。但在营养不良、严重肝病及肾病综合征时往往下降。3．临床意义

第35页,共100页，2024年2月25日，星期天一种常染色体隐性遗传病因血浆Cp减少，血浆游离铜增加，铜沉积在肝可引起肝硬化，沉积在脑基底节的豆状核导致豆状核变性，该病又称为肝豆状核变性该病的原因不全是Cp减少大部分患者可有肝功损害并伴神经系统症状不及时治疗，此病是进行性和致命的，宜及时诊断可用铜螯合剂-青霉胺治疗Wilson病诊断标准：Cp下降，血清总铜浓度降低、游离铜增加和尿铜排泄增加，肝中铜的含量升高Wilson病第36页,共100页，2024年2月25日，星期天放射免疫扩散法散射免疫比浊法透射免疫比浊法4.Cp的检测

第37页,共100页，2024年2月25日，星期天

（八）转铁蛋白（transferrin，TRF）分子量约79.6kD为单链糖蛋白，含糖量约6%电泳位置在β区带等电点5.5～5.9主要由肝细胞合成半寿期为7d能可逆地结合多价阳离子，每分子TRF可结合2个Fe3+血浆中TRF的浓度受食物铁供应的影响1．性质第38页,共100页，2024年2月25日，星期天多采用免疫比浊测定法2．临床意义用于贫血的鉴别诊断负性急时相反应蛋白：在炎症、肿瘤时常随着Alb、前清蛋白同时下降作为营养状态的一项指标3．检测第39页,共100页，2024年2月25日，星期天

由肝细胞合成的典型急性时相反应蛋白由5个相同亚基非共价结合成盘形多聚体分子量为115～140kD电泳分布在慢γ区带在钙离子存在下，结合多种细菌、真菌及原虫等体内的多糖物质以及磷酸胆碱，卵磷脂和核酸在钙离子缺乏情况下，结合多聚阳离子与抗体相似，可引发对入侵微生物对细胞的免疫调理作用和吞噬作用可识别、结合从损伤组织中释放的毒性物质，然后解毒或从血中清除本身在发生调理作用后被分解（九）C-反应蛋白(C-reactiveprotein，CRP)1．性质第40页,共100页，2024年2月25日，星期天第一个被认识的急性时相反应蛋白，是急性时相反应的一个极灵敏指标血浆中CRP浓度在急性心肌梗死、创伤、感染、炎症、外科手术、肿癌浸润时迅速显著地增高CRP是非特异性指标，主要临床用途：①筛选器质性疾病②评估炎症性疾病的活动度和疗效监控③识别系统性红斑狼疮、白血病和外科手术后等并发的感染④监测肾移植后的排斥反应等2．临床意义第41页,共100页，2024年2月25日，星期天散射免疫比浊法透射免疫比浊法酶免疫分析法荧光免疫分析法3．检测第42页,共100页，2024年2月25日，星期天四、急性时相反应蛋白

AATAAGCpCRPHpα1-抗糜蛋白酶血红素结合蛋白C3C4纤维蛋白原显著升高或升高降低

PAAlbTRF急性负相时相反应蛋白第43页,共100页，2024年2月25日，星期天食物蛋白消化吸收体内合成（非必需氨基酸）蛋白质（主）合成酮体氧化供能糖脱羧胺类转变其它含氮化合物经肾排出(1g/d)氨基酸代谢库氨基酸代谢概况分解脱氨

-酮酸（生成尿素）组织蛋白质分解第二节氨基酸代谢紊乱一、体内氨基酸代谢第44页,共100页，2024年2月25日，星期天二、氨基酸代谢紊乱的种类原发性氨基酸代谢紊乱：由于参与氨基酸代谢的酶或其他蛋白因子缺乏而引起的遗传性疾病继发性氨基酸代谢紊乱：与氨基酸代谢有关的器官如肝、肾出现严重病变而导致的。氨基酸血症（aminoacidemia）：当酶缺乏出现在代谢途径的起点时，其作用的氨基酸将在血循环中增加。氨基酸尿症（aminoaciduria）：升高的氨基酸从尿中排出。第45页,共100页，2024年2月25日，星期天氨基酸代谢紊乱可发生于：①膜转移机制障碍，包括氨基酸从小肠吸收和肾小管重吸收；②氨基酸分解代谢途径障碍；

③尿素合成途径障碍。第46页,共100页，2024年2月25日，星期天①中性氨基酸载体：转运中性氨基酸；

②酸性氨基酸载体：转运酸性氨基酸；

③碱性氨基酸载体：转运碱性氨基酸和

半胱氨酸；

④亚氨基酸和甘氨酸载体：转运脯氨酸

和甘氨酸。肾小管细胞膜上与氨基酸吸收有关的载体：第47页,共100页，2024年2月25日，星期天遗传性氨基酸代谢紊乱及血、尿的检测结果遗传性氨基酸代谢紊乱名称缺乏的酶血中升高的成分尿中升高的成分苯丙酮酸尿症苯丙氨酸羟化酶苯丙氨酸、苯丙酮酸苯丙氨酸、苯丙酮酸Ⅰ型酪氨酸血症延胡索酰乙酰乙酸水解酶？酪氨酸、甲硫氨酸酪氨酸、对-羟苯丙酮酸等尿黑酸尿症尿黑酸氧化酶尿黑酸（轻度）尿黑酸同型胱氨酸尿症胱硫醚-

-合酶同型胱氨酸、甲硫氨酸胱硫醚尿症

-胱硫醚酶胱硫醚胱硫醚及其代谢产物组氨酸血症组氨酸酶组氨酸、丙氨酸咪唑、丙酮酸和组氨酸代谢产物甘氨酸血症甘氨酸裂解酶系统受阻甘氨酸槭糖浆尿症(支链酮酸尿症)支链酮酸脱羧酶亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸和相应的酮酸丙酸尿症丙酰CoA羧化酶甘氨酸甘氨酸、丙酸、羟化丙酸、甲基柠檬酸第48页,共100页，2024年2月25日，星期天遗传性氨基酸代谢紊乱及血、尿的检测结果遗传性氨基酸代谢紊乱名称缺乏的酶血中升高的成分尿中升高的成分甲基丙二酸尿症甲基丙二酸单酰CoA变位酶甘氨酸、甲基丙二酸甘氨酸、甲基丙二酸、酮尿肌肽血症肌肽酶肌肽Ⅰ型高脯氨酸血症脯氨酸氧化酶脯氨酸脯氨酸、羟脯氨酸、甘氨酸瓜氨酸血症精氨酸代琥珀酸合酶瓜氨酸、氨、丙氨酸瓜氨酸、谷氨酰胺精氨酸代琥珀酸尿症精氨酸代琥珀酸裂解酶精氨酸代琥珀酸、瓜氨酸精氨酸代琥珀酸及其酐、瓜氨酸精氨酸血症精氨酸酶精氨酸精氨酸、胱氨酸、鸟氨酸高鸟氨酸血症鸟氨酸脱羧酸鸟氨酸、谷氨酰胺、丙氨酸鸟氨酸、同型瓜氨酸鸟氨酸氨甲酰转移酶缺乏症鸟氨酸氨甲酰转移酶氨、谷氨酰胺乳清酸、尿苷、尿嘧啶二羧基氨基酸尿症（肾小管酸性氨基酸载体）谷氨酸、天冬氨酸第49页,共100页，2024年2月25日，星期天三、主要氨基酸代谢紊乱的生物化学检验（一）苯丙酮酸尿症(phenylketonuria，PKU)苯丙氨酸羟化酶先天性缺乏所致，属常染色体隐性遗传，因患儿尿液中排出大量苯丙酮酸等代谢产物而得名。

第50页,共100页，2024年2月25日，星期天苯丙氨酸羟化酶（PAH）+H2O酪氨酸+O2四氢生物蝶呤二氢生物蝶呤NADPH+H+NADP+苯丙氨酸1．苯丙氨酸的代谢紊乱正常代谢第51页,共100页，2024年2月25日，星期天苯丙氨酸先天性缺少PAH(多数)苯丙氨酸的代谢紊乱四氢生物蝶呤生成不足(少数)苯乙酸转氨酶苯乙酰谷氨酰胺GlnH2O苯丙酮酸(血中积累，尿中排出)酪氨酸苯丙酮酸尿症NAD+NADH+H+CO2苯乳酸NADH+H+NAD+第52页,共100页，2024年2月25日，星期天有智力缺陷，其严重程度与血苯丙氨酸升高的水平和持续时间有关。毛发和皮肤色素较正常人略浅。身体有霉臭味，尿有鼠尿样气味，易流口水及出汗。有反复发作的惊厥、肌张力高，躯体前后摇摆，行动困难。2．苯丙酮酸尿症临床表现及治疗临床表现第53页,共100页，2024年2月25日，星期天患儿在出生后3月内就需用低苯丙氨酸膳食（如低苯丙氨酸的奶粉）治疗，可改善症状，防止痴呆发生。治疗最少要坚持到10岁，甚至终生。在停止饮食治疗前需作负荷试验。若是，则可停止饮食治疗。饮食治疗中，给予低苯丙氨酸及高酪氨酸膳食最为合理。女性在幼时若治疗恰当，可正常生长发育。妊娠时，则应使用治疗本病的膳食，以免因再发高苯丙氨酸血症而影响胎儿正常发育。2．苯丙酮酸尿症临床表现及治疗治疗第54页,共100页，2024年2月25日，星期天3．新生儿中苯丙酮酸尿症的诊断PKU的早期诊断十分必要。目前国际上新生儿PKU筛查的常用方法：Guthrie试验、荧光光度法、苯丙氨酸脱氢酶法。新生儿的筛查在欧美国家广泛地进行。评估应包括尿中生物蝶呤和新蝶呤的测定和有时可能还要测定其血清含量。新生儿PKU的诊断试验：色谱法、荧光分光光度法、FeCl3法检测尿中苯丙酮酸。用PCR-ASO探针法和PCR-RFLP连锁分析法可鉴定出导致PKU的点突变。第55页,共100页，2024年2月25日，星期天3．新生儿中苯丙酮酸尿症的诊断Guthrie建立的一种细菌抑制法。在PKU的筛查试验中用来测定人血清、尿液中苯丙氨酸。原理Guthrie试验琼脂糖培养基中的噻吩丙氨酸可抑制枯草杆菌的生长，而苯丙氨酸及其代谢产物苯丙酮酸等可抑制噻吩丙氨酸的此种作用。将浸有血液或尿液的滤纸片置于培养基表面上培养，通过抑菌圈的大小来半定量样本中的苯丙氨酸浓度。第56页,共100页，2024年2月25日，星期天（二）酪氨酸的代谢紊乱

1．酪氨酸的正常分解代谢和转变（1）酪氨酸的正常分解代谢第57页,共100页，2024年2月25日，星期天酪氨酸羟化酶CO2（2）转变成儿茶酚胺与黑色素酪氨酸多巴多巴胺第58页,共100页，2024年2月25日，星期天多巴胺去甲肾上腺素SAM腺苷同型半胱氨酸儿茶酚胺CH3肾上腺素第59页,共100页，2024年2月25日，星期天

原因：酪氨酸分解途径中的延胡索酰乙酰乙酸水解酶活性降低。该症可出现：血和尿中酪氨酸水平增加；血中甲硫氨酸浓度升高；尿中排出大量多巴和其他酪氨酸代谢物。2．酪氨酸血症

（1）Ⅰ型酪氨酸血症（tyrosinemiaⅠ）

第60页,共100页，2024年2月25日，星期天Ⅰ型酪氨酸血症（肝肾型酪氨酸血症）病人有严重的肝功能损害和肾小管功能不全。急性酪氨酸血症患者肝延胡索酰乙酰乙酸水解酶只有正常活性的6%，临床表现有腹泻、呕吐。如未治疗，常在1岁前死于肝功能衰竭。慢性酪氨酸血症病人的延胡索酰乙酰乙酸水解酶活性只有正常活性的20%，症状较轻，常在10岁前死亡。Ⅰ型酪氨酸血症发病率约为1/10万。用低酪氨酸、苯丙氨酸和甲硫氨酸膳食可减轻症状。第61页,共100页，2024年2月25日，星期天

（2）Ⅱ型酪氨酸血症（tyrosinemiaⅡ）原因：肝细胞液酪氨酸转氨酶缺乏血中和尿中酪氨酸水平升高，尿中酚酸和酪胺浓度增加。

Ⅱ型病罕见。

与Ⅰ型不同的是：血中甲硫氨酸不升高。第62页,共100页，2024年2月25日，星期天

（3）酪氨酸血症的生物化学检验参考方法：离子交换层析其他方法：色谱法分光光度法酶学方法第63页,共100页，2024年2月25日，星期天3.白化病（albinism）在皮肤黑色素细胞中酪氨酸酶催化下，酪氨酸羟化生成多巴，后者经氧化、脱羧等反应转变为吲哚-5，6-醌，黑色素就是吲哚-醌的聚合物。如酪氨酸酶缺乏，酪氨酸不能转变为黑色素，将导致白化病。白化病发病率约为1/13000，表现为白色头发、浅色皮肤和灰蓝色眼睛等。多数白化病同时累及皮肤和眼部、少数单独累及眼部，但无单独累及皮肤者。患者要尽可能避免日光照射。

第64页,共100页，2024年2月25日，星期天4．尿黑酸尿症（alkaptonuria）一种罕见的因尿黑酸氧化酶缺陷引起的遗传病性代谢性疾病。细胞和体液尿黑酸的积聚。特点是尿放置变黑色，一般不引起注意。常在中年被疑为褐黄病和关节炎时才被诊断。如新生儿未洗尿布变黑引起了注意或被观察到，在新生儿时期即可诊断。目前对本症没有满意的治疗方法。如早期发现，限制酪氨酸或其前体苯丙氨酸饮食可能有所收效。服用维生素C可能会减少尿黑酸在体液中含量和在组织中沉积。诊断本病的方法:尿黑酸的还原试验。第65页,共100页，2024年2月25日，星期天（三）含硫氨基酸代谢紊乱甲硫氨酸(Met)半胱氨酸(Cys)同型半胱氨酸(HCY)第66页,共100页，2024年2月25日，星期天半胱氨酸与胱氨酸的互变+2H2半胱氨酸–2H—S——S—胱氨酸第67页,共100页，2024年2月25日，星期天蛋氨酸循环N5-CH3-FH4FH4N5-CH3-FH4转甲基酶蛋氨酸ATPPPi+PiH2O腺苷同型半胱氨酸RHS-腺苷同型半胱氨酸R-CH31．含硫氨基酸的正常代谢SAM第68页,共100页，2024年2月25日，星期天S-腺苷甲硫氨酸（SAM）中的甲基为活性甲基，可转移至另一种物质，生成50多种含甲基的重要生理活性物质。HCY+丝氨酸胱硫醚-β-合酶胱硫醚裂解半胱氨酸+α-酮丁酸第69页,共100页，2024年2月25日，星期天2．同型胱氨酸尿症（homocystinuria）含硫氨基酸代谢紊乱最常见的是同型胱氨酸尿症，它是一组体内以HCY增高为特征的代谢紊乱。（1）胱硫醚-β-合成酶缺失-----最常见的原因体液HCY及其前体积聚，Cys和胱氨酸下降。生化异常：血浆同型胱氨酸(HCY的氧化形式)达到可检测水平，血浆Met升高。尿中含有同型胱氨酸和其他含硫氨基酸如Met、甲硫氨酸硫氧化物和Cys的二硫化物和HCY。血浆Met不升高.

（2）N5甲基四氢叶酸转甲基酶缺失----较罕见原因第70页,共100页，2024年2月25日，星期天（3）同型胱氨酸尿症的诊断

新生儿筛选的Guthrie试验只适用于胱硫醚-β-合酶缺失所致的同型胱氨酸尿症。阳性结果解释应慎重，因很有可能是暂时的，或由于肝损害，酪氨酸代谢病或肝S-腺苷甲硫氨酸合成酶的缺失所致。暂时性同型胱氨酸尿症目前发生率已下降。如未进行新生儿筛选，同型胱氨酸尿症需等到症状出现或尿液检测才被发现。硝基氢氰酸试验检测同型胱氨酸和胱氨酸。银硝普盐改良试验可区分同型胱氨酸和胱氨酸之间的差别。第71页,共100页，2024年2月25日，星期天目前血浆HCY检测可作为心脑血管病临床常规检查指标。血脂正常，胆固醇不高的人群有严重AS性疾病和家族史人群有早期(＜50岁)冠心病、脑血管或外周血管病症状的人群服用氨甲喋呤、氨茶碱、苯妥英等人群中，HCY升高的比例较高，有进一步引发血管疾病的可能，需要联合考虑。HCY检测适应症第72页,共100页，2024年2月25日，星期天（3）同型胱氨酸尿症的诊断

轻度：16～30μmol/L中度：31～100μmol/L重度：＞100

mol/LHPLC放射酶免疫分析法荧光偏振免疫分析(FPIA)HCY测定方法参考值：空腹血浆HCY5～15

mol/L≥15

mol/L为高HCY血症。高HCY血症分型第73页,共100页，2024年2月25日，星期天四、继发性氨基酸代谢紊乱的生物化学检验

主要发生在肝脏和肾脏疾患、蛋白质-能量营养紊乱以及烧伤等

。（一）肝功能衰竭和氨基酸代谢失衡

（二）肾脏疾病

第74页,共100页，2024年2月25日，星期天五、氨基酸的生物化学检验筛选试验：薄层层析，尿呈色试验（三氯化铁、硝基氢氰酸、2，4-二硝基苯肼、硝基萘酚试验），Guthrie试验半定量测定。定量试验：毛细管电泳，气相色谱，HPLC，离子交换液体层析，串联质谱，分子遗传学试验等用于监测治疗或证实最初的诊断。特异性试验：判明未知氨基酸或代谢产物。第75页,共100页，2024年2月25日，星期天（一）自动分析法

氨基酸自动分析仪：色谱系统检测系统加样系统控制系统数据处理系统

第76页,共100页，2024年2月25日，星期天（二）氨基酸的纸层析和薄层层析（TLC）不需特殊设备、经济和操作简单采集在滤纸上的标本可邮寄。1.纸层析的优点灵敏度低分辨力差费时2.纸层析缺点速度快分辨力灵敏度高3.TLC优点第77页,共100页，2024年2月25日，星期天（二）氨基酸的纸层析和薄层层析（TLC）纸层析和TLC又分为单向和双向两种。单向层析一般适用于某个或某组氨基酸增高时的筛选检测，如获异常结果需进一步用双向层析分离，或其他定量方法证实。双向层析法能分离全部氨基酸，可作为确诊的参考。第78页,共100页，2024年2月25日，星期天（三）氨基酸的化学法测定

1．尿液总氨基酸量测定----磷酸铜试剂法2．色氨酸测定3．尿羟脯氨酸测定第79页,共100页，2024年2月25日，星期天（四）氨基酸的酶法分析1．苯丙氨酸测定2．酪氨酸测定3．支链氨基酸测定4．谷氨酰胺测定

第80页,共100页，2024年2月25日，星期天（四）氨基酸的酶法分析1．苯丙氨酸测定----有两种酶学方法苯丙氨酸苯丙氨酸氧化酶H2O2+4-氨基安替比林+N，N’-二甲苯胺生成醌亚胺测定A550NADH+H+苯丙氨酸NAD+苯丙氨酸脱氢酶苯丙酮酸检测A340的增加速率，反映苯丙氨酸含量检测A340的下降速率，反映苯丙酮酸含量第81页,共100页，2024年2月25日，星期天2．酪氨酸测定三氯醋酸滤液在硝酸存在条件下与硝基萘酚和亚硝酸盐的混合物反应。通过测定其荧光对酪氨酸进行定量。该法不适应于尿液酪氨酸测定。常规方法氧电极测定氧的消耗来对酪氨酸进行定量。酪氨酸酶法酪氨酸+O2酪氨酸酶多巴醌第82页,共100页，2024年2月25日，星期天3．支链氨基酸测定

LeuIleValNADH+H+NAD+亮氨酸脱氢酶相应酮酸检测A340的增加速率，反映各氨基酸含量4.谷氨酰胺测定GlnNH3谷氨酰胺酶Glu检测A340的增加速率，反映Gln含量NAD+谷氨酸脱氢酶NADH+H+α酮戊二酸第83页,共100页，2024年2月25日，星期天第三节核苷酸代谢紊乱一、嘌呤核苷酸代谢紊乱的生物化学检验（一）嘌呤核苷酸的代谢（二）高尿酸血症（三）痛风的发生机制（四）尿酸的生物化学检验二、嘧啶核苷酸代谢紊乱的生物化学检验第84页,共100页，2024年2月25日，星期天（一）嘌呤核苷酸的代谢1.嘌呤核苷酸的从头合成途径（主要）用磷酸核糖、氨基酸、一碳单位及CO2等简单物质为原料，经过一系列酶促反应合成嘌呤核苷酸的途径。第85页,共100页，2024年2月25日，星期天N1C2N3C4C5C6N97NC8

甲酰基(一碳单位)甘氨酸CO2Asp甲酰基(一碳单位)Gln(酰胺基)甘氨当中站,谷氮坐两边,左上天冬氨,头顶CO2第86页,共100页，2024年2月25日，星期天1.嘌呤核苷酸从头合成途径合成的原料:CO2,甲酰基,氨基酸等合成的场所:肝脏的胞液合成的过程:两个阶段①次黄嘌呤核苷酸(IMP)的合成②腺苷酸(AMP)和鸟苷酸(GMP)的合成第87页,共100页，2024年2月25日，星期天1.从头合成途径第88页,共100页，2024年2月25日，星期天1.嘌呤核苷酸从头合成途径ATPGTPR-5-PATPPRPP合成酶PRPP酰胺转移酶PRAIMPAMPSAMPADPXMPGMPGDP嘌呤核苷酸是在磷酸核糖基础上逐步合成嘌呤环的，而不是首先单独合成嘌呤碱然后再与磷酸核糖结合的，这是与嘧啶核苷酸合成过程不同之处。重要特点第89页,共100页