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文档简介

1向日葵主要种传病原真菌室内检测技术规程本文件规定了向日葵种子携带真菌的室内检测和鉴本文件适用于室内进行向日葵种子带黄萎病、枯萎病和黑斑病病原菌用于检测的向日葵种子来自市场上销售的不同向日葵品种浸泡24h,用镊子剥下种皮。种皮用70%乙醇浸泡1min,然后用无菌水漂洗两次,每次1min。将种皮A——带菌的种子数;5.2种皮携带真菌的形态学鉴定将菌落转移到新的PDA培养基上后,利用稀释梯度法进行单孢纯化。对纯化后菌株的菌落形态进行5.3种皮携带真菌的分子生物学鉴定2将在PDA平板培养基上扩繁的真菌的菌落用盖玻片刮下,转入2mL的离心管中,然后采用CTAB方法提取菌株的DNA,利用提取的DNA作为模板进行PCR鉴定,引物为ITS序后获得的序列在Genbank进行比对,比对结果中同源性达到99%以上的就可以确定种皮上携带真菌的MNP-10培养基配方见表A.1。4

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