《微生物学检验》复习思考题参考答案1

《微生物学检验》复习思考题参考答案

绪论

1、微生物的概念、特点，微生物分哪三型八大类？

微生物：是存在于自然界的一大群体形微小、结构简单、肉眼直接看不见，必须藉助光

学显微镜或电子显微镜放大数百倍、数千倍，甚至数万倍才能观察到的微小生物。包括细菌、

病毒、真菌等三类。

特点：

（1）个体微小，结构简单

（2）比表面积大、吸收多、转化快

⑶代谢旺盛，繁殖迅速

（4）种类繁多，分布广泛

⑸适应力强，容易变易

按结构和组成不同，可分为三型八大类

⑴非细胞型微生物：病毒

⑵原核细胞型微生物（广义的细菌）：包括细菌（狭义的细菌）、支原体、立克次体、衣原

体、螺旋体及放线菌。

⑶真核细胞型微牛.物：真菌

2、简述临床微生物学检验的主要任务有哪些？

⑴研究感染性疾病的病原体特征

⑵提供快速、准确的病原学诊断

⑶指导临床合理使用抗生素

⑷监控医院感染

3、简述临床微生物学检验的目的和核心任务是什么？

临床微生物学检验的目的是为感染性疾病提供微生物学诊断，以达到治疗、控制和预防感染

性疾病的扩散。

微生物学检验的核心任务是快速、准确地进行病原学诊断和药敏检测，为临床感染性疾病的

诊断、治疗提供依据。

4、简述临床微生物检验的原则。

⑴确保临床标本可靠；

⑵全面了解机体正常菌群；

⑶保证检验质量、快速准确提供信息；

（4）微生物学定性、定量和定位分析，并结合病情（三定一结合）；

⑸加强与临床联系。

5、填空题

⑴根据微生物能耐受不同的温度，人们常用、、和来

保存菌种。细菌的具有高度抗热性，这常给消毒带来困难。

⑵生物学性状基本相同的细菌群体构成一个菌种，不同来源的同一菌种的细菌称为该菌的

不同;性状相近关系密切的若干菌种构成—;具有某种细菌典型特征的菌株称该

菌的。

⑴普通冰箱（4°C）；低温冰箱（-20。0；干冰（-70。0；液氮（-196℃）；芽胞

⑵菌株、菌属、标准菌株（典型菌株）

细菌的形态与结构

1、名词解释：细菌L型；|中介体|；质粒；gg；荚膜肿胀试验

⑴细菌L型：是指细胞壁缺陷型的细菌。1935年Klieneberger首先在Lister研究所发现而

得名。

⑵中介体：细菌细胞膜向细胞质内陷、折叠、卷曲形成的囊状物，多见于G+菌。中介体参

与细菌的分裂和能量的产生，有类似于真核细菌纺锤丝与线粒体的作用。

⑶质粒：存在于细胞质中的带有遗传信息、控制细菌的某些特定遗传性状、能够自我复制

的染色体以外的闭环双链DNA。或：细菌的胞质DNA。

（4）芽胞：某些细菌在一定的环境条件下，胞质脱水浓缩，在菌体内形成一个圆形或卵圆形

小体，是细菌的休眠形式，即为芽胞。其抵抗力强，衡量灭菌效果时，常以杀死芽胞作

为判断指标。芽胞的大小、形态、位置等随菌种而异，有助于细菌鉴别。

⑸荚膜肿胀试验：某些细菌的荚膜与同型抗血清作用后增厚变宽，此试验为荚膜肿胀试验。

可作为肺炎链球菌等细菌的血清学诊断。

2、细菌的基本结构与特殊结构以及它们的主要功能。|G+菌与G-菌的细胞壁的比较。|G+菌

与G-菌细胞壁差异的临床意义。

基本结构：细胞壁、细胞膜、细胞质、核质

细胞壁的功能：

⑴维持菌体的固有形态，保护细菌抵抗外界低渗环境（主要功能）：

⑵参与菌体内外物质交换；

⑶带有多种抗原，决定细菌的免疫原性。诱发机体产生免疫应答并与血清分型有关。

（4）G-菌外膜是一种屏障结构，阻止某些抗生素的进入，成为细菌耐药的机制之一。

⑸某些G+有表面蛋白、G-菌内毒素等与细菌的致病性有关。

（6）与细菌染色性密切相关。

细胞膜的功能：

⑴物质转运；⑵生物合成；⑶细胞呼吸；⑷形成中介体，参与细菌分裂等。

细胞质的功能：是细菌合成蛋白质和核糖核酸的场所；是细菌进行新陈代谢的场所。

核质的功能：是细菌的遗传物质，控制细菌的各种遗传性状。

细菌的特殊结构：荚膜、鞭毛、菌毛、芽抱。

荚膜的功能：

⑴抗吞噬作用；⑵黏附作用；⑶抗有害物质的损伤；⑷具有抗原性。

荚膜染色特点：不易着色。常用墨汁负染法染色，可见菌体周围一圈未着色的透明圈，也

可用荚膜染色法。

鞭毛的功能：

⑴是细菌的运动器官；⑵有些鞭毛（如霍乱弧菌、空肠弯曲菌）与细菌的致病性密切相关;

⑶具有抗原性，可籍此鉴定细菌及对细菌分类

鞭毛的检测方法：

⑴电子显微镜观察；

⑵经特殊染色（鞭毛染色）使鞭毛变粗后用光学显微镜观察；

⑶半固体培养基穿刺接种观察生长情况间接判断该菌有无鞭毛（这是鉴定细菌是否有动力

最简单的常用的方法）。

（4）悬滴法或压滴法观察细菌的动力间接判断该菌有无鞭毛；

菌毛的功能：

⑴普通菌毛：细菌的黏附结构，与细菌的致病性有关。

⑵性菌毛：介导接合，细菌的毒力、耐药性等性状可通过此方式传递

⑶为某些噬菌体的受体。

芽抱的功能：

⑴根据芽抱形态、大小以及在菌体中的位置，有利于细菌的鉴别；

⑵杀死芽抱为灭菌的可靠指标（杀灭芽胞最可靠的方法是高压蒸气灭菌法）；

⑶可以成为某些传染病潜在的传染源：芽抱本身不致病，但当它发芽转变为繁殖体后，可

引起疾病。在人类，有四种常见的严重的传染病是由能形成芽泡的细菌引起的——炭疽

杆菌、肉毒梭菌、破伤风梭菌和产气荚膜梭菌。

革兰阳性菌与革兰阴性菌细胞壁结构比较如下：

细胞壁革兰阳性菌革兰阴性菌

组成聚糖骨架、肽侧链和肽交桥聚糖骨架、肽侧链

结构类型三维空间结构二维平面结构

强度较坚韧较蔬松

厚度厚，20—80nm薄,10—15nm

肽聚糖层数多，可达50层少，1-2层

肽聚糖含量多，占细胞干重50—80%少，占细胞干重5—20%

磷壁酸+——

外膜—+

对溶菌酶、青霉素的敏感性敏感不敏感

革兰染色性紫色红色

G+菌与G-菌细胞壁差异的临床意义：体现在细菌染色性、抗原性、致病性、对抗生素敏感

性的不同。

项目革兰阳性菌革兰阴性菌与细胞壁的关系

染色性紫色红色细胞壁对酒精的通透性

抗原性主要为磷壁酸主要为外膜细胞壁的化学组成不同

毒性无内毒素（以外毒素为主）有内毒素内毒素为阴性菌细胞壁成分

对青霉素的作用有效无效作用部位为肽聚糖五肽交联桥

对溶菌酶的作用有效无效作用部位为肽聚糖聚糖骨架

3、简述细菌L型的形成、主要生物学性状及其临床意义。

形成：

细菌细胞壁的肽聚糖结构受到理化或生物因素(溶菌酶、溶葡萄球菌素、青霉素、胆汁、

抗体、补体等)的直接破坏或合成受到抑制后形成。G+菌原生质外仅有细胞膜包住称原生

质体，G-菌尚有外膜保护称原生质球。

主要生物学性状：

(1)高度多形性；

⑵着色不匀，大多染成革兰阴性；

⑶培养条件要求高，必须在高渗低琼脂含血清的培养基中生长；

(4)生长缓慢(2〜7天)，菌落呈荷包蛋样；

⑸去除诱发因素后，有些L型可回复为原菌；

(6)生化反应与原菌有明显差异；

⑺存在于细胞壁的抗原减弱或丢失；

临床意义：可引起慢性和反复发作的感染，如尿路感染、骨髓炎、心内膜炎等，并常在使用

作用于细胞壁的抗菌药物治疗过程中发生。

治疗：对作用于细胞壁的抗生素耐药性，而对作用于核酸或蛋白质合成的抗生素仍敏感。

4、填空题

(1)细菌根据外形，主要有----、一一、一一三大类。

⑵细菌的基本结构为----、------、-----、----。

⑶细菌的特殊结构为----、------、-----、-------------------O

(4)G+菌细胞壁的肽聚糖由--------------------组成。G-菌细胞壁的肽聚糖由-----

——组成；G-菌的内毒素为——o

⑸细菌细胞质中有-------------------等重要结构。

(6)细菌荚膜的功能是-............——,普通菌毛的功能为------，鞭毛的功能为——o

⑺细菌的测量单位为-----。

(8)革兰染色的步骤为......................................色为革兰染色阳性-------

色为革兰染色阴性。

(9)中介体的功能为..................

(10)能在光学显微镜下观察到的细菌特殊结构有、和。

(1D荚膜具有、作用和作用。

⑫荚膜一•般在或形成。

⑬鞭毛与细菌的有关，霍乱弧菌的鞭毛还与有关。

(14)芽胞不是细菌的，而是细菌的。1个繁殖体只形成个芽

胞，1个芽胞发芽也只生成个繁殖体。

⑴球菌杆菌螺形菌

⑵细胞壁细胞膜细胞质核质

⑶荚膜鞭毛菌毛芽抱

(4)聚糖骨架肽侧链肽交桥聚糖骨架肽侧链脂多糖

⑸⑹⑺⑻⑼

⑩荚膜鞭毛芽胞

(11)抗吞噬粘附抗有害物质的损伤

⑫机体内营养丰富的环境中

⑬运动器官致病性

(14)繁殖方式休眠状态1个1个

细菌的生理

1、名词解释：I热原质I;I细菌素耐毒素;外毒贰\

⑴热原质：又称致热原，是细菌合成的一种注入人体或动物体内能引起发热反应的物质。

⑵细菌素：某些细菌菌株产生的一类仅对近缘细菌具有抗菌作用的蛋白质称为细菌素。

⑶内毒素：即革兰阴性菌细胞壁的脂多糖，其毒性成分为脂质A,当菌体死亡裂解后才释

放，是革兰阴性菌的主要致病物质。

（4）外毒素：是多数革兰阳性菌和少数革兰阴性菌在生长繁殖过程中释放到菌体外的蛋白质,

其毒性强，为细菌重要的致病物质。

2、简述细菌生长繁殖的基本条件有哪些？为什么专性厌氧菌在有氧环境中不能生长繁殖？

细菌个体的生长繁殖方式：二分裂繁殖；繁殖速度：细菌分裂数量倍增所需时间，即代时,

多数为20-30分钟。TB（结核杆菌）约18小时，产气荚膜梭菌为8分钟。

细菌生长繁殖的基本条件：

⑴充足的营养物质：包括水、碳源、氮源、无机盐、生长因子等；

⑵合适的pH值：大多病原菌的最适pH值为72-7.6；

⑶适宜的温度：大多数病原菌的最适温度为37℃;

（4）必要的气体环境。

专性厌氧菌不能在有氧环境中生长繁殖的原因：

⑴缺乏Eh高的呼吸能（细胞色素和细胞色素氧化的）；

⑵缺乏分解有毒氧基团的酶（超氧化物歧化酶SOD、触酶、过氧化物酶）

3、细菌的合成代谢产物种类及其在医学上的意义？

⑴与致病性有关的合成代谢产物：热原质/致热原、毒素和侵袭性酶；

⑵供治疗用的合成代谢产物：抗生素、细菌素、维生素；

⑶与鉴别细菌有关的合成代谢产物：色素。

4、细菌的生长曲线可分为几期？各自的主要特点是什么？

细菌生长曲线：是将一定量的细菌接种于适宜培养基中进行培养，连续检测细菌在不同

培养时间的活菌数目（以菌落形成单位cfu表示），以cfu为纵坐标，培养时间为横坐标，

可以作出一条反映细菌生长数变化规律的曲线，即生长曲线。包括迟缓期、对数期、稳定期、

衰退期这四个时期。

（1）迟缓期：代谢活跃，菌体增大，积累酶、辅酶和中间代谢产物，不分裂繁殖，为细菌大

量繁殖作好物质准备。

⑵对数期：细菌繁殖迅速，菌数呈几何级数增长，细菌的生物学性状典型，对外界环境作

用敏感，适用于研究细菌的生物学性状和进行药物敏感实验，一般在培养后8-18小时。

⑶稳定期：细菌数仍在增加，死菌数与活菌数形成一种动态平衡。其特点：形态、染色性

等生物学性状常有改变；芽抱，毒素、抗生素等产生；若向培养系统补充营养物质，取

走代谢产物，改善培养条件则可延长稳定期。

（4）衰亡期：死亡菌数增多，超过活菌数，细菌形态显著改变，生理活动趋于停止。一般不

用该期细菌作鉴定和研究工作。

5、根据细菌代谢时对分子氧的需求与否，可将细菌分为哪几类?

根据细菌代谢时对氧气要求的不同，可将细菌分为专性需氧菌；微需氧菌：兼性厌氧菌；

专性厌氧菌四大类。

专性厌氧菌不能在有氧环境中生长繁殖的原因：缺乏Eh高的呼吸酶（细胞色素和细胞色素

氧化酶）；缺乏分解有毒氧基团的酶（超氧化物歧化酶SOD、触酶、过氧化物酶）。

细菌检验技术

1、名词解释：培养基；分离培养；纯培养；菌落；细菌的生化反应；IMVtC试验;KIA试

验;CAMP试验;荚膜肿胀试验。

（1）培养基：由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养物制品称为培养

基。

⑵分离培养：临床标本中含有多种细菌，可经过划线接种到固体培养基表面分散开，经过

18-24小时培养后可得到单个菌落。这种将混杂的细菌在固体培养基表面分散开的培养

方法称为分离培养。或：将增菌培养物或含菌量多的标本如粪便、脓汁等，直接在平板

上划线分离，将其中的目的菌分离出来的培养方法。

⑶纯培养：挑取一个菌落移种到另一培养基中，长出的细菌为纯种，该方法称为纯培养。

（4）菌落：单个细菌在固体培养基上生长繁殖形成的单一的肉眼可见的细菌集团，称菌落。

许多菌落融合在一起形成菌苔。

⑸细菌的生化反应：用生化试验的方法，检测细菌对各种基质（糖、蛋白质等）的代谢作

用以及形成的代谢产物，从而对细菌鉴别的反应。（原理：细菌内所具有的酶不同，因而

对营养物质的分解能力也不同，产生的代谢产物也不同，据此可鉴别不同细菌。）

（6）IMViC试验：吧咏（I）、甲基红（M）、VP（V）及枸椽酸盐利用（C）四种试验，常用

于肠道杆菌的鉴定，合称IMViC试验。如大肠埃希菌的结果是：++--；产气杆菌的

结果是：----++。

⑺KIA试验：即双糖铁一半固体培养基，它是一种复合性的检查生化反应的培养基，可检

查4种反应，即葡萄糖、乳糖的发酵反应，是否产生H?S,有无动力等。目前多使用国

产双糖铁琼脂粉（KIA）,比较方便，效果也好，但只能配制成斜面培养基，不能配成

半固体培养基，因而无法观察细菌的动力。KIA试验主要用于肠杆菌科细菌的鉴定和鉴

别。

（8）CAMP试验：B群链球菌产生一种细胞外CAMP因子，可增强金黄色葡萄球菌B-溶血

素的活性，因此，血平板上，在两菌（B群链球菌与金黄色葡萄球菌）交界处出现箭头

状溶血区。该试验主要用于B群链球菌的鉴定。

⑼荚膜肿胀试验：某些细菌的荚膜与同型抗血清作用后增厚变宽，此试验为荚膜肿胀试验。

可作为肺炎链球菌等细菌的血清学诊断。

2、简述细菌染色标本检查的基本程序、复染色法基本程序与常用方法。

细菌染色标本检查的基本程序：涂片一一干燥一一固定一f染色。

复染色法基本程序：初染一媒染一脱色一复染

常用方法：革兰染色法利抗酸染色法，尤其是革兰染色法在细菌学检验中有重要意义。

3、革兰染色的原理、染液组成、染色方法、结果判断、影响因素与临床意义。

革兰染色原理：

⑴通透性说：主要是由于两类细菌的细胞壁成分和结构的不同。革兰阴性菌细胞壁中含有

较多类脂质，而肽聚糖含量较少。当用酒精脱色时，溶解了类脂质，增加了细胞的通透

性，使结晶紫和碘的复合物易于渗出，细胞脱色，经复染后，染上复染液（复红）的颜色;

而革兰阳性菌细胞壁中肽聚糖含量多且交联度大，类脂质含量少，经酒精脱色后，肽聚

糖层的孔径变小，通透性降低，酒精不易进入菌体脱色，故细胞仍保留初染液（结晶紫）

的颜色。

⑵化学说：G'菌菌体含有大量的核糖核酸镁盐，可与碘、结晶紫牢固结合，使已着色的菌

体不易脱色。

⑶等电点说：G,菌（PI2-3）低于G菌（PI4-5）,G'菌带负电荷比G菌要多，G+菌易与带正

电荷的碱性染料（结晶紫）结合牢固，因而不易脱色。

革兰染色染液组成：结晶紫染液、卢戈碘液、95%乙醇、稀释石炭酸复红。

染色方法：结晶紫染液（初染）1分钟，水洗一一卢戈碘液（媒染）1分钟，水洗一一95%

乙醇（脱色）30秒至1分钟，水洗一一稀释石炭酸复红（复染）1分钟，水洗后，

待干后用油镜进行观察。

结果判断：革兰阳性菌呈紫色，革兰阴性菌呈红色。

影响革兰染色的因素：

（1）操作因素：涂片的厚、薄；标本是否固定好；染色与脱色时间的长短。

⑵染液因素：卢戈碘液放置时间过长；95%乙醇挥发；结晶紫与草酸镀混合时间太长等。

⑶细菌因素：细菌种类；细菌菌龄。

影响革兰染色的关键步骤是脱色。

革兰染色的临床意义：⑴鉴别细菌；⑵选择药物；⑶与致病性有关。

4、请写出抗酸染色的染液组成、染色方法及染色结果、原理。

染液组成与染色方法：

固定加温3-5min脱色

标本一-►5%石碳酸复红一-►3%盐酸酒精一-►美蓝复染一-►镜检

染色结果：

红色：抗酸性细菌如结核杆菌

兰色：非抗酸性细菌

原理：由于结核杆菌细胞壁中含大量脂质，一般不易着色，若经加温或延长染色时间而着色

后又能抵抗强脱色剂盐酸酒精的脱色，故又称抗酸杆菌。

5、简述细菌细胞壁染色的方法与结果。

方法：

自然干燥固定15min3~5min

制片一f--10%鞍酸-f-f0.5%龙胆紫ffff镜检

水洗水洗

结果：有细胞壁的细菌仅菌体周边染成紫色，菌体内部无色；无细胞壁的细菌（如L型细

菌）可见整个菌体浓染呈紫色。

6、简述细菌不染色标本镜检的常用方法与用途。

常用方法：压滴法、悬滴法、（暗视野聚光法、相差显微镜检查法等）。

应用：主要用于观察活菌的动力和运动方式。

注意事项：检测细菌动力时需注意其真正运动还是分子运动，前者时由于鞭毛引起的有方向

性的位移，而后者只是在原地颤动，是由于水分子撞击细菌而引起的布朗运动，无鞭毛

的细菌也可有此种分子运动。

7、简述培养基制备的一般程序与原则。

不同的培养基制备程序不尽相同，但配制一般培养基的程序基本相似，分为以下几个步骤:

调配一熔化一矫正pH值一过滤澄清一分装一灭菌一检定/质量检验-保存。

培养基的种类很多，但一般制备原则有三条：⑴足够和适当的营养成份。⑵合适的酸碱度。

⑶绝对无菌。

培养基灭菌要求：

（1）基础培养基：121℃高压蒸汽灭菌15〜30min。

⑵含糖/明胶培养基：113℃灭菌15min。

⑶鸡蛋、血清培养基：血清凝固器间歇灭菌3天3次（75℃30min-80℃30min-

85℃30min）o

（4）不耐高温的液体成分如血清、尿素、细胞培养液等：滤过除菌。

8、简述在细菌学检验中常用的接种方法有哪些？

细菌接种时，应根据待检标本的种类、检验目的及所用培养基的类型选择不同的接种方法。

⑴平板划线接种法……分离培养，主要用于固体培养基的接种。

★目的：使混合的细菌呈单个分散生长，形成单个菌落，以便获得纯菌。

★方法：

★分区划线法：适用于含菌量较多的标本如粪便、脓汁

★连续划线法：适用于含菌量较少的标本.

⑵琼脂斜面接种法：用于纯种增菌、保存菌种或生化反应。

⑶半固体培养基接种法（穿刺接种法）：用于观察细菌动力或生化反应。

⑷液体培养基接种法：用于纯种增菌或生化反应。

⑸倾注平板法：用于水、牛乳、饮料、尿液等液体标本及药物、化妆品等的细菌计数。

方法：是将经灭菌生理盐水适量稀释（通常作10-1〜10-5稀释）的标本1ml,置于灭菌平皿

内。注入10〜15ml已融化并冷至50C左右的适宜培养基，凝固后，将平板倒置于37c培养

18〜24h,计算菌落形成单位（colonyformingunit,CFU）«求出每毫升或每克标本中所含活

菌数。1ml标本中活菌数=全平板CFUX稀释倍数。

我国规定生活饮用水的标准是：1ml水中细菌总数WlOOcfU。

（6）涂布接种法：用于纸片药敏试验和生物制品菌苗的生产。

9、简述细菌的培养方法有哪些？

根据不同标本及培养目的的不同，可采取不同的方法进行培养，常用的有普通（一般）

培养法（又叫需氧培养法）、二氧化碳培养法、微需氧培养法及厌氧培养法。

⑴普通培养（需氧培养）：

★培养温度：35~37℃（采用恒温培养箱）

★培养时间：18〜24h（个别细菌例外）

⑵二氧化碳培养法：5~10%CO2o

★烛缸培养法：能自动调节CO2的含量和温度，使用较为方便。

★二氧化碳培养箱：取有盖磨口标本缸或玻璃干燥器，在盖及磨口处涂以凡士林。

将接种细菌的培养基放入缸中，加盖密封。随燃烧产生的CO2增加，蜡烛自行熄

灭，此时缸内CO2浓度约为5%〜10%。置37℃孵箱孵育。

★化学法（重碳酸钠-盐酸法）：按每升容积重碳酸钠0.4g与lmol/L盐酸0.35ml比

例，分别取两试剂置于容器内，放置于标本缸或干燥器内，密封后倾斜容器，使

盐酸与重碳酸钠接触产生C02。

⑶微需氧培养法：5〜6%02、5~10%CO2和85%N2

有些微需氧菌，如空肠弯曲菌、幽门螺杆菌等，在低氧分压的条件下生长良好。可用抽

气换气法即用真空泵先将容器内的空气排尽，然后注入5〜6%02、5~10%CO2、85%N2

气体，然后放入37℃孵箱孵育。

（4）厌氧培养法：厌氧培养箱、厌氧袋、厌氧罐、疱肉培养法、硫乙醇酸盐法等。

10、按物理性状不同可将培养基分哪几种？各有何主要用途并简述细菌在其中的生长现象。

培养基按其物理性状可分为固体培养基、半固体培养基与液体培养基三种。分别观察下

列生长现象：

（1）固体培养基：细菌得以分离培养生成菌落从而获得纯种，主要用于细菌的分离纯化、鉴

定以及药敏试验。菌落分为三型：①光滑型菌落（S型菌落）；②粗糙型菌落（R型菌

落）；③粘液型菌落（M型菌落）。

⑵半固体培养基：多用来检查细菌的动力和短期保存细菌。有鞭毛的细菌可由穿刺线向四

周运动播散，培养后穿刺线模糊不清，呈羽毛状或云雾状混浊生长；无鞭毛的细菌，不

能运动，仅沿穿刺线生长，穿刺线清晰，穿刺线以外的培养基仍透明澄清。

⑶液体培养基：主要用于大量繁殖细菌（增菌培养）和观察某些细菌的生化反应。细菌在

液体培养基中生长呈三种状态。①混浊生长，见于大多数细菌；②沉淀生长；③菌膜生

长，多为专性需氧菌，在培养液表面生长，形成菌膜。

11、按用途不同可将培养基分为哪几种？请各列出一种常用的培养基。

⑴基础培养基：如营养肉汤、营养琼脂、蛋白陈水等

⑵增菌培养基：

①通用增菌培养基：如血平板、血清肉汤等。

②专用增菌培养基：如碱性蛋白陈水用于霍乱弧菌的增菌。

⑶选择培养基：如SS平板、伊红-美兰琼脂平板、亚麻酸钾血琼脂平板、TCBS等。

⑷鉴别培养基：如糖发酵管、双糖铁培养基等。

⑸厌氧培养基：如庖肉培养基、硫乙醉酸盐肉汤等。

12、简述甲基红试验、V-P试验、七叶背水解试验、靛基质（口引噪）试验、硫化氢试验、尿

素酶试验、枸檬酸盐利用试验的醺、培养基、隆、结果与应用。

甲基红试验：

原理：葡萄糖一丙酮酸一大量混合酸一pH降至4.4以下一加入甲基红试剂，培

养基变红为阳性。

培养基：葡萄糖蛋白陈水

试剂：甲基红试剂

方法：将待检菌接种于葡萄糖蛋白陈水培养基中，培养2-4d,于培养基内加入甲基红指

示剂2d,立即观察结果。

结果：呈现红色为阳性；橘红色为弱阳性；黄色为阴性。

应用：主要用于肠杆菌科细菌的鉴别。如大肠埃希菌为阳性，产气肠杆菌为阴性。

V-P试验：

原理：葡萄糖一丙酮酸一脱酸生成中性的乙酰甲基甲醇-在碱性环境中被空气中

的氧氧化成二乙酰一二乙酰再与培养基内蛋白豚中的精氨酸所含的股基反应，

生成红色化合物为阳性。

培养基：葡萄糖蛋白陈水

方法：将待检菌接种于上述培养基中，于350C培养48h后加入甲液（5%a-茶酚酒精溶

液）和乙液（40%KOH溶液+0.3%肌酊），振摇。

结果：在数分钟内出现红色为阳性：如无红色出现且于35C4h后仍如故者即为阴性。

应用：主要用于肠杆菌科细菌的鉴别。该试验常与甲基红试验一起使用，因为前者阳性

的细菌，后者通常为阴性。

七叶昔水解试验：

原理：某些细菌可将七叶甘分解成葡萄糖和七叶素，七叶素与培养基中枸檬酸铁中的二

价铁离子反应，生成黑色的化合物，使培养基呈黑色。

培养基：七叶甘培养基、胆汁七叶昔培养基。

方法：将待检菌接种于七叶甘培养基中于35℃培养48h后观察结果。

结果：培养基变为黑色为阳性，不变色者为阴性。

应用：主要用于D群链球菌与其它链球菌的鉴别，前者阳性，后者阴性。也可用于革兰

阴性杆菌（克雷伯菌属、肠杆菌属和沙雷菌属）、肠球菌及厌氧菌的鉴别。

靛基质（吧噪）试验：

原理：细菌产生色氨酸酶，可分解蛋白陈中的色氨酸，生成靛基质（吧睬），靛基质与

试剂对二甲基氨基苯甲醛作用，生成玫瑰靛基质。

培养基：蛋白陈水培养基

试剂：靛基质试剂（含对二甲基氨基苯甲醛）

方法：挑取纯培养物接种蛋白陈水培养基，于35c培养24〜48h后，沿管壁徐徐加入靛

基质试剂0.5mL使成两层，观察结果。

结果：加入试剂后，两者液面接触处出现红色为阳性；无色为阴性。

应用：用于肠杆菌科细菌的鉴定。

硫化氢试验：

原理：某些细菌分解蛋白质中的含硫氨基酸（如胱氨酸、甲硫氨酸），生成硫化氯，硫

化氢与培养基中的铁盐（硫酸亚铁）或铅盐（醋酸铅）结合生成黑色硫化物（硫

化亚铁或硫化铅）。

培养基：克氏双糖铁培养基或醋酸铅培养基

结果：培养基变黑为阳性，不变为阴性。

应用：常用于肠道杆菌的鉴别。沙门菌属（甲型副伤寒沙门菌为阴性）、爱德华菌属、

亚利桑那菌属、枸椽酸杆菌属和变形杆菌属等多为阳性，其他菌书呈阴性。

尿素酶试验：

原理：产生版酶的细菌，能水解尿素生成氨和CO2,氨使培养基呈碱性变色。

培养基：尿素培养基（pH6.5-6.8）

试剂：酚红指示剂

方法：将被检菌接种于相应的尿素培养基，于35℃培养18〜24h后观察结果。阴性时应

继续观察4天。

结果：培养基变红者为阳性；培养基不变色者为阴性。

应用：肠杆菌科中的变形杆菌属、摩根菌属和普罗威登菌属的鉴定。奇异变形杆菌和普

通变形杆菌、雷极普罗威登菌和摩根菌为阳性；克雷伯菌为弱阳性；大肠埃希菌、

斯氏和产碱普罗威登菌为阴性。

枸椽酸盐利用试验：

原理：某些细菌能利用培养基中的枸椽酸盐作为唯一的碳源，也能利用其中的钱盐作为

唯•氮源，细菌生长过程中分解枸椽酸盐产生碳酸盐和分解筱盐生成的氨，使培

养基变碱，使指示剂呈碱性反应。

培养基：枸盐酸盐琼脂斜面培养基

试剂：浪麝香草酚蓝（pH6.0以下呈黄色，pH7.6以上呈蓝色）

方法：在枸盐酸盐琼脂斜面上浓密划线，大量接种被检菌，于35℃培养卜4天，逐日

观察结果。

结果：枸盐酸盐琼脂斜面上有细菌生长，培养基变成深蓝色为阳性；无细菌生长，培养

基颜色不变（淡绿色）为阴性。

应用：有助于肠杆菌科属间的鉴别。埃希菌属、志贺菌属、爱德华菌属和耶尔森菌属均

为阴性；产气肠杆菌、沙门菌属、克雷伯菌属、黏质和液化沙雷菌、某些变形杆

菌以及枸椽酸杆菌为阳性。

13、填空题

（1）在形态和染色性上具有特征的致病菌常用方法作初步诊断。如—和_____菌。

⑵鉴定细菌常用凝集试验。此方法是用已知检测未知。

（1）直接涂片镜检结核分枝杆菌白喉棒状杆菌

⑵直接玻片抗体抗原

14、综合分析题

实验室在对细菌培养时，需先制备培养基，根据所培养的细菌不同，选择不同类型

的培养基，如培养营养要求高的细菌时，需制备含血清培养基（即在培养基中加入血清）。

细菌的保存常用细菌保存液，有时也用牛奶保存，如幽门螺杆菌。

思考题：

⑴制备培养基过程中应注意什么？

⑵制备含血清培养基时，基础培养基和血清如何进行消毒灭菌？用于保存菌种的牛奶

又如何进行消毒灭菌？

•提示1：培养基制备过程中应注意无菌操作，以防止微生物的污染。

•提示2：基础培养基通常使用高压蒸汽灭菌法灭菌，以杀灭包括细菌繁殖体和芽胞

在内的所有微生物。含血清培养基和用于保存细菌的牛奶，既要对其进行灭菌处理,

又不能破坏营养成分，故常用间歇蒸汽灭菌法。

提示3：在制备培养基过程中，应注意无菌操作，通常可在经紫外线照射后的无菌

罩或实验室中进行培养基的分装。

•提示4：在准备含血清培养液时，通常使用过滤除菌法除菌，以确保血清中的营养

成分不被破坏。

细菌与环境

1、名词解释：正常菌群；条件致病菌；|菌群失调症；重叠手染；］消毒;灭菌；无菌；无菌

操作；噬菌体;前噬菌体;毒性噬菌体;溶原性细菌;一过除菌法

⑴正常菌群：定居于正常人体体表及其开放性腔道中的微生物群。在正常情况下对机体有

益无害。由于在正常微生物群中以细菌为主，而且对细菌研究得较多而深入，所以将正

常微生物群通称为正常菌群。

⑵条件致病菌：正常情况下不致病，在特定条件下可致病的正常菌群，称条件致病菌（或:

机会致病菌）。

⑶菌群失调症：宿主某部位正常菌群中各菌种间的比例发生较大幅度改变并超出正常范围

的状态称为菌群失调。山此而引起的病症称为菌群失调症。

（4）重叠感染：或称为二重感染，是一种后果较为严重的菌群失调症，即在抗菌药物治疗原

感染性疾病或预防某些微生物感染的过程中，发生的一种新感染。

⑸消毒：杀死物体上或环境中的病原微生物的方法。但不一定能杀死含芽胞的细菌或非病

原微生物。

（6）灭菌：杀灭物体上所有微生物的方法。灭菌比消毒要求高，包括杀灭细菌芽胞在内的全

部病原微生物和非病原微生物。

⑺无菌：不存在活的微生物的意思。

⑻无菌操作：防止微生物进入人体或其他物品的操作技术。

⑼噬菌体：是感染细菌、真菌、放线菌或螺旋体等微生物的病毒。

⑩前噬菌体：整合在细菌染色体上的噬菌体基因。

（11）毒性噬菌体：能在宿主细胞内复制增殖，产生许多子代噬菌体，并最终裂解细菌的噬菌

体，称毒性噬菌体。

⑫溶原性细菌：染色体上带有前噬菌体的细菌。

⑬滤过除菌法：用物理阻留的方法除去液体或空气中的细菌，达到无菌的目的。适用于不

耐高温灭菌的物品如血清、毒素、抗生素及空气等的除菌。生物安全柜也是根据这个原

理，利用高效空气过滤器的过滤作用，除去空气中的微生物，以达到保护操作对象、保

护操作者、保护环境的目的。但滤过除菌法只能除去细菌，一般不能除去病毒、支原体、

衣原体和细菌的L型。

2、正常菌群的生理作用有哪些？正常菌群转化为机会致病菌的条件有哪些？（简要说明微

生态失调的主要原因有哪些？）

正常菌群的生理作用：

（1）生物拮抗；⑵营养作用；（3）免疫作用；（4）抗衰老作用；（5）抑肿瘤作用。

正常菌群转化为机会致病菌的条件有：

（1）抗生素的使用导致菌群失调；⑵正常菌群寄居部位改变；⑶宿主免疫功能低下如

免疫抑制剂使用、激素、射线照射.、细胞毒物的使用导致宿主免疫功能低下。

3、常用湿热灭菌方法的种类及其效果与适用范围。

⑴巴氏消毒法：用较低温度杀灭液体中的病原菌或特定微生物（如结核杆菌）、保持物品中

所需不耐热成分不被破坏的消毒方法。

持续法:61.1-62.8℃30分钟；

瞬间法：71.7℃15-30秒;

常用于消毒牛奶、酒类。

⑵煮沸法：常用于消毒食具、刀剪、注射器等

繁殖体：煮沸100℃,5min；

芽抱：煮沸100℃,1〜3h。

⑶流动蒸气消毒法：阿诺蒸锅或蒸笼。

繁殖体：煮沸100℃,15〜30min

⑷间歇蒸气灭菌法：如血清培养基的灭菌。

⑸高压蒸气灭菌法：一种最有效、最彻底的灭菌方法。在103.4kPa（1.05kg/cm2）蒸气

压下，温度121.3C,维持15-20min,可杀灭包括芽胞在内的所有微生物。是普通培养

基、生理盐水、手术敷料等耐高温、耐湿物品的最佳灭菌法。

4、高压蒸汽灭菌法所要求的条件和用途各是什么？

高压蒸气灭菌法是•种最常用、最有效的灭菌方法，是在密闭的蒸气容器中进行。随着

压力升高，蒸气的温度也相应升高，在103.4kpa蒸气压下，温度达到121.3℃,维持15〜

20min,可杀灭包括细菌芽胞在内的微生物。适用于耐高温、耐潮湿物品的灭菌，如一般培

养基、生理盐水、手术用品等。但该温度还不足以灭活肮粒和热原质。

5、请叙述紫外线的杀菌作用机制、特点和注意事项。

⑴紫外线（UV）的杀菌机制主要是损伤细菌DNA构型，使一条DNA链上相邻的两个胸

腺嚅喔共价结合而形成二聚体，从而干扰DNA的复制与转录，导致细菌死亡。

⑵特点与注意事项：

①UV的杀菌作用与波长有关：240-300nm波长的紫外线有杀菌作用，其中以265-266nm

最强，因其正好与DNA的吸收光谱一致。

②紫外线的穿透力极弱：不能透过玻璃或纸张等，故一般只用于空气消毒及物体表面消毒。

③杀菌波长的UV对人体皮肤、眼睛有损伤作用，使用时应注意防护。

④一般用低压水银蒸气灯做紫外线杀菌处理。

6、简述乙醇、碘酊、过氧化氢、过氧乙酸、戊二醛、环氧乙烷消毒灭菌的主要特点。

乙醇消毒灭菌的机制、特点及主要用途：

⑴机制：去除菌细胞膜中的脂类，并使菌体蛋白质变性与凝固。

⑵特点与主要用途：

①以浓度为70%〜75%时杀菌力最强。

②易挥发，需加盖保存，定期调整浓度。

③主要用于皮肤消毒和浸泡体温计。

2.0〜2.5%碘酊、0.5%碘伏：多用于皮肤黏膜、体温计以及其他物品的表面消毒。

过氧化氢：

机理：导致酶蛋白-SH基转变为-S-S-,导致酶活性丧失。3%〜6%过氧化氢killmost

bacteria;10%过氧化氢killallmicroorganismincludingspore.

用途：可用于物品表面和皮肤黏膜消毒（如口腔、创口的消毒、厌氧菌感染的消毒）。

但对金属制品有腐蚀作用。

0.2%~0.3%过氧乙酸：类似于过氧化氢。

2%戊二醛：

机理：细菌蛋白和核酸的烷化作用。

特点：广谱，高效，快速。

用途：戊二醛以0.3%NaHCO3调整pH至7.5〜8.5,配成2%水溶液，浸泡5min,适用于

精密仪器、内窥镜（不能用热力灭菌法进行灭菌）等的灭菌。

环氧乙烷：

种类：杂环类化合物，沸点10.8C,气体消毒剂。

机理：细菌蛋白和核酸的烷化作用。

特点：能穿透包裹物，广谱高效，杀灭芽胞，易燃，对人有毒性。

用途：已广泛用于医疗器械、一次性用具的灭菌。

常用的灭菌要求是浓度800〜1200mg/L；相对湿度55%~60%；50℃；6h。

7、影响消毒灭菌效果的因素有哪些？

（1）消毒剂的性质、浓度和作用时间

消毒剂种类不同，其杀菌效果亦有很大差别，大多数浓度越高，杀菌效果越好，但醇类

例外，作用时间越长，杀菌效果越好。

⑵微生物的种类与数量：菌龄、有无特殊构造等。

同种消毒剂对不同的微生物杀菌效果也不一致，且微生物数量越多，所需消毒的时间

就越长。

⑶温度、湿度：温度升高可提高消毒效果。

⑷酸碱度：酸碱度可影响消毒剂的杀菌效果。

⑸有机物：环境中有机物的存在，可影响消毒剂的效果。生理盐水清洗污染创口表面。

8、化学消毒剂的杀菌机制有哪些？各自种类的代表是什么？

⑴使菌体蛋白变性或凝固，导致细菌死亡：酚类（高浓度）、醇类、重金属盐类、酸碱类、

醛类

⑵干扰细菌的酶系统和代谢：某些氧化剂、重金属盐类（低浓度）与细菌酶蛋白的-SH基结

合而使有关酶失去活性，导致细菌代谢发生障碍而死亡；

⑶损伤细胞膜，能降低菌细胞的表面张力并增加其通透性，胞外液体内渗，导致细菌破裂:

酚类（低浓度）、表面活性剂、脂溶剂

9、毒性噬菌体增殖以何种方式增殖？它的增殖过程包括哪几个阶段？

毒性噬菌体以复制方式增殖。它的增殖过程包括吸附，穿入，生物合成和装配、成熟与

释放等步骤。

10、填空题

⑴正常菌群的组成和数量发生明显改变时，可出现,由此产生的一系列临床症状

称为。

⑵当正常菌群发生_________或时，可成为_________菌。

⑶正常菌群对机体的有益作用是、、、

和O

⑷引起微生态失调动主要原因是、和..

（5）毒性噬菌体以—方式进行增殖，增殖过程包括—、—、—、一几个阶段。

（6）噬菌体参与的基因转移与重组的方式有和o

⑺噬菌体的化学组成主要为、.

（8）温和噬菌体有三种存在形式、、o

⑴菌群失调菌群失调症

⑵寄居部位改变菌群失调条件致病菌

⑶生物屏障作用营养作用免疫作用抗衰老作用抗肿瘤作用

（4）正常菌群寄居部位改变滥用抗生素导致菌群失调机体免疫功能降低

⑸复制吸附穿入生物合成成熟与释放

（6）转导溶原性转换

⑺核酸蛋白质

⑻游离的具有感染性的噬菌体颗粒宿主胞质内类似质粒形式的噬菌体核酸前噬菌体

细菌的遗传与变异

1、名词解释：陡化；接合：转导；溶原性转换；|耐药性变异;卡介苗（BCG）

⑴转化：是供体菌裂解游离的DNA片段被受体菌直接摄取，使受体菌获得供体菌的遗传性

状。（转化是指受体菌直接摄取供体菌游离的DNA片段，从而使受体菌获得供体菌的遗传

性状的过程。）

⑵接合：是细菌通过性菌毛相互沟通，将遗传物质（主要是质粒DNA）从供体菌转移给受

体菌，使受体菌获得新的性状。

⑶转导：是以温和噬菌体为载体，将供体菌的一段DNA转移到受体菌内，使受体菌获得新

的性状。

（4）溶原性转换：噬菌体感染细菌时，噬菌体作为供体，宿主菌染色体中整合了噬菌体的DNA

片段，而获得新的遗传性状。

⑸耐药性变异：细菌对某种抗菌药物由敏感变成耐药的变异称耐药性变异

（6）卡介苗：卡-介二氏将有毒力的牛型结核分枝杆菌接种在含有胆汁、甘油、马铃薯培养基

上，经过13年传230代，终于获得一株毒力减弱但仍保持免疫原性的变异株，即卡介苗。

2、常见的细菌变异现象有哪些？

⑴形态、结构变异：如L型细菌的产生；荚膜、芽抱、鞭毛的形成与缺失。

⑵菌落变异：细菌S-R变异

⑶毒力变异：毒力增强的变异与毒力减弱的变异

（4）抗原性变异：O抗原与H抗原变异；H抗原的I相与n相的互变。

⑸耐药性变异：细菌对某种抗菌药物由敏感变成耐药的变异称耐药性变异。

（6）酶活性变异

3、简述细菌耐药性获得的主要机制有哪些？

⑴钝化酶的产生

⑵药物作用靶位发生改变

⑶细胞壁的通透性的改变，抗菌药物的渗透障碍

（4）主动外排机制：细菌主动外排系统的过度表达

k、医学上重要的质粒的种类有哪些？简述质粒的主要特征。

医学上重要质粒的种类：①致育质粒（F质粒），②耐药质粒（R质粒），③毒力质粒（Vi

质粒），④细菌素质粒：如Col质粒，⑤代谢质粒。

质粒的主要特点：

（1）具有自我复制的能力；

⑵编码产物赋予细菌某些性状特征：如sexpilus、细菌素、毒素和耐药性等；

⑶可自行丢失与消除，非生命活动所必需；

（4）质粒的转移性：可通过接合、转化或转导等方式在细菌间转移；

⑸质粒的不相容性与相容性。

5、细菌基因的转移与重组方式有几种？

细菌基因转移与重组的方式有：转化、接合、转导、溶原性转换和原生质体融合等。

6、简述F+菌、F.菌、Hfr的区别以及F+菌和Hfr的共同特点。

F+菌：带有F质粒具有性菌毛的细菌，这种细菌可通过性菌毛将遗传物质传递给F菌。

F.菌：不带有F质粒无性菌毛的细菌。

Hfr：当F质粒进入受体细菌并将质粒DNA整合到染色体上，这种细菌称为Hfr（染色体

上整合有F质粒的细菌）。

F+菌和Hfr菌的共同特点是：两者都有性菌毛，均可通过接合方式进行基因转移。

7^填空题

⑴F-菌亦称,可经方式变为F+菌。

⑵R质粒可通过、和等基因转移和重组的方式在细菌间传递耐

药性，其中最主要的方式为。

⑶通常把细菌的鞭毛从有到无的变异，称为变异，把细菌因受青霉素、免疫血清

等作用而致细胞壁缺陷称为变异。

⑴雌菌，接合

⑵转化，接合，转导，接合

⑶H-0,细菌L型

细菌的感染与免疫

1、名词解释：展袭力；|毒血症;脓毒血症:败血症;菌血症;收卜源性感染；内源性感染

（1）侵袭力：致病菌能突破宿主皮肤、粘膜生理屏障等免疫防御机制，进入机体定居、繁殖

和扩散的能力。

⑵毒血症是指致病菌侵入宿主机体后，只在机体局部生长繁殖，病菌不进入血循环，但其

产生的外毒素入血。外毒素经血到达特定的靶器官和组织，引起特征性的毒性症状。例

如白喉、破伤风等。

⑶脓毒血症是指化脓性细菌侵入血流后，在其中大量繁殖，并通过血流扩散到机体其他组

织器官，产生新的化脓性病灶。例如金黄色葡萄球菌（S.aureus）引起肝脓肿、肾脓肿、

肺脓肿。

⑷败血症是指病原菌侵入血流并在其中大量繁殖，产生毒性代谢产物（包括内毒素和外毒

素等）所引起严重的全身性中毒症状。例如高热、皮肤和粘膜瘀斑、肝脾肿大等。

⑸菌血症是指病原菌由局部入血，一过性从血流到达易感部位后再行繁殖而致病，例如伤

寒早期有菌血症。

（6）外源性感染：病原菌来源于宿主体外的感染。

（7）内源性感染：病原菌来自病人自身的体内或体表。多数由正常菌群引起；少数是以潜伏

状态存在于体内的致病菌引起，如结核分枝杆菌、HSV、CMVo

2、细菌性感染的发生与哪些因素有关？（细菌的致病机制如何？）

①侵入体内的微生物（细菌）的数量

「侵袭力：菌体表面结构与侵袭性醐等

②侵入体内的微生物（细菌）的毒力-

'毒素：内、外毒素

③侵入途径：呼吸道、消化道、皮肤（创伤）、血液、人畜共患病的传播（节支动物媒介传

播）、性接触等

④机体免疫力

3、内毒素与外毒素的比较。______________________________________________

区别点外毒素内毒素

⑴来源G*菌和部分G菌G菌

⑵存在从活菌分泌出，少数菌崩解后释出Cellwall成分，菌裂解后释出

部位

⑶化学蛋白质，分子结构为A-B模式脂多糖

成分

⑷稳定60-80℃,30min被破坏160℃,2-4h才被破坏

性

⑸毒性强，对组织器官有选择性毒害效应,较弱，各菌的毒性效应大致相同，引起发

作用可分为神经毒素、细胞毒素和肠毒热、白细胞增多、微循环障碍、休克、DIC

素三大类，引起特殊临床表现等。

（6）抗原强，刺激机体产生抗毒素；甲醛液弱，刺激机体产生的中和抗体作用弱；甲

性处理脱毒形成类毒素醛液处理不形成类毒素

4、简述细菌性感染的类型有哪些？全身细菌性感染类型有哪些？

细菌性感染的类型有：

⑴根据临床症状可分为：隐性感染、显性感染、。其中显性感染又可根据病情缓急分急性感

染、慢性感染；

⑵根据感染部位分：局部感染和全身感染，其中全身感染又可分为毒血症、内毒素血症、

菌血症、败血症和脓毒血症。

5、病原菌标本的采集与送检要注意什么？

采集细菌标本的一般原则是：

⑴无菌操作。避免杂菌污染标本；

⑵因时取材。根据疾病特点采集不同标本（不同病期取不同标本）；在采取局部病变标本

处，不可用消毒剂；

⑶尽早取材。在使用抗生素之前采集，对已用抗菌药患者的标本，应注明药物名称；

（4）因地取材。尽可能采集病变明显部位的材料；

⑸标本必须新鲜。采集后尽快送检（多数细菌标本可冷藏保存或运送）。

【附】病毒性疾病标本的采集与送检方法原则基本，

病毒感染性疾病实验室诊断标本采取基本原则与细菌相似，即：早期采样，冷藏速送。

但还要特别注意下列原则：

⑴被杂菌或易受污染的标本，在进行分离培养时应该使用抗生素（加入高浓度青霉素、链

霉素或庆大霉素处理）；

⑵标本的运输和保存：若标本采集地点离病毒实验室较远，可将标本置甘油缓冲盐水中低

温保存送检；

⑶进行病毒血清学诊断时，应采取双份血清即在发病初期和病后2-3w内各取份血清，

以对比抗体效价变化。

6、填空题

⑴感染的后果与病原菌本身的、侵入的和密切相关。

⑵细菌的毒力由和构成。

⑶内毒素主要是菌细胞壁中的成分。其他微生物如、

和中亦存在类似物质。

（4）内毒素引起发热的机制是作用于机体的细胞，使之产生具有的细胞因子。

⑸因为外毒素的化学成分是，所以可用处理制备成用于预防疾病。

（6）根据外毒素的作用机制不同，可将其分为、和三类。

⑺多数外毒素的分子结构由和亚单位组成，其功能前者是,后者

是