实验除草剂与杀菌剂毒力测定

关于实验除草剂与杀菌剂毒力测定利用有害生物（靶标生物，如昆虫、螨类、病菌、线虫、杂草等）对作用物的反应评价化合物生物活性的基本方法---陈年春“农药生测技术”农药生测现在已发展成为是集昆虫学、植物病理学、微生物学、植物学、杂草学、化学、生物技术、统计学等多学科于一体的综合技术，是农药科技创新工程中不可或缺的关键技术。农药生测技术内涵第2页,共17页，2024年2月25日，星期天生理活性物质靶标生物虫、草、菌等反应程度生物测定已成为研究作用物、靶标生物和反应强度三者关系的一项专门技术第3页,共17页，2024年2月25日，星期天杀菌剂的毒力测定第4页,共17页，2024年2月25日，星期天杀菌剂生物测定流程药剂毒力测定；定性定量分析；防治效果测定；第5页,共17页，2024年2月25日，星期天杀菌剂室内生物测定主要方法孢子萌芽测定法：观察供试病菌孢子是否萌发，来判定杀菌剂毒力大小；生长速率法：将不同浓度的药液与溶化的培养基混合，制成带毒培养基平面，在平面上接种病原菌，以其生长速度快慢判定药剂毒力大小。第6页,共17页，2024年2月25日，星期天

将不同浓度的药液和热的培养基混合，用这种含药培养基培养病原菌，以病原菌的生长进度的快慢来判定药剂毒力的大小。

生长速率法原理菌饼（菌碟）含药培养基生长速率法示意图注意事项：应先加药液再加培养基（1:9）；对一些受热易分解的药剂则要待培养基冷却到50度左右时再加入。第7页,共17页，2024年2月25日，星期天优点：①操作比较简单；②适用范围广，适用于乳油、水剂、可湿性粉剂等；③重复性好，只要操作认真，均可得到可靠的结果。生长速率法的优缺点缺点：①对供试菌种要求较严格，病菌要易于培养，生长较快且边缘整齐、产孢子缓慢，而且是农业生产上重要的病原菌；②对供试药剂要求，有一定的耐热性，遇热不易分解。第8页,共17页，2024年2月25日，星期天多菌灵（carbendazim）对小麦赤霉病菌的毒力测定供试菌株：

小麦赤霉病菌（Fusariumgraminerarum）敏感菌株2021和抗性菌株JT04。2021JT04试验目的：掌握生长速率法测定杀菌剂毒力。

第9页,共17页，2024年2月25日，星期天供试药剂：

98%多菌灵原药，由江苏龙灯化学有限公司提供。多菌灵用0.1MHCl分别配成10000μg/mL、100μg/mL母液。剂量设置：1.测定敏感菌株2021，取一定量的100μg/mL母液多菌灵母液，加入到50mLPSA中，每个处理3个重复。

2.测定多菌灵抗性菌株JT04：药剂浓度为：

0（对照）、1.25、2.5、5、10、20、40μg/mL，取400μL10000μg/mL母液，加入到100mLPSA中，即得40μg/mL，然后梯度稀释，每个处理3个重复。

药剂浓度(μg/mL)0(CK)0.20.40.60.81母液体积(μL)0100200300400500第10页,共17页，2024年2月25日，星期天（1）制备含药培养基：准确取一定量的药液加入到热的培养基中，混匀，倒入灭菌的培养皿中，待冷凝后即为含药培养基；（2）制备菌饼：用无菌的打孔器在供试菌种边缘打下菌块即菌饼（在无菌条件下进行）；（3）移植菌饼：用接种针将菌饼（有菌丝的一面向上）移植到含药培养基平板的中央，一个培养皿接一个菌饼；（4）测定菌落直径：25℃培养3天，取出培养皿测量菌落直径。每个菌落十字交叉测两次直径，取平均值。操作步骤第11页,共17页，2024年2月25日，星期天数据处理将抑制率换算成机率值，作为Y；将药剂的剂量数值换算成对数值，作为X，直线回归，求出毒力回归方程Y＝a+bx，计算EC50。抑制率=对照菌落直径–处理菌落直径对照菌落直径–菌饼直径×100%注：菌饼直径为5mm第12页,共17页，2024年2月25日，星期天抑制率机率值80.15.845255.95.148453.75.092938.74.712930.14.478519.44.1367剂量剂量对数

2.62.32501.7251.412.51.1第13页,共17页，2024年2月25日，星期天实验报告要求药剂浓度(μg/ml)菌落直径（mm)IIIIII平均抑制率（%）毒力回归方程相关性EC50(μg/ml)

多菌灵对小麦赤霉病菌2021/JT04菌丝生长的抑制效果第14页,共17页，2024年2月25日，星期天除草剂的毒力测定第15页,共17页，2024年2月25日，星期天几个概念抑制中浓度：指抑制50%测定指标时除草剂的浓度，需采用毒力回归方程的方法计算；最高无影响计量：不影响作物生长发育的最高剂量，是除草剂对作物是否有影响的剂量分界线；相对毒力指数：除