天然药化常见的鉴别反应

自然药化常见的鉴别反应(部分)一、颜色反应的对比(一\三苗类的颜色反应.Liebermann-Burchard反应将样品溶于乙酸酎中，加浓硫酸-乙酸酎(1:20)数滴，可产生黄■＞红一紫一蓝等颜色变化,最终褪色。.Kahldenberg反应将样品的氯仿或醇溶液点于滤纸上，喷20%五氯化铀的氯仿溶液(或三氯化铺饱和的氯仿溶液)，干燥后60℃-70℃

加热，显蓝色、灰蓝色、灰紫色等多种颜色。.Rosen-Heimer反应将样品溶液滴在滤纸上，喷25%三氯乏段乙醇溶液，加热至100℃,呈些，渐渐变为紫色。.Salkowski反应将样品溶于氯仿，加入浓硫酸后,在硫酸层呈现红色或蓝色,氯仿层有绿色荧光消失。5.Tschugaeff反应将样品溶于冰乙酸中，加乙酰氯数滴及氯化锌结晶数粒，稍加热，则呈现淡红色或紫红色。(二卜留体类化合物的颜色反应.Liebermann-Burchard反应将样品溶于氯仿中，加浓硫酸-乙酸酊(1:20)数滴，可产生红→紫—蓝—绿一污绿等颜色变化,最终褪色。也可将样品

溶于冰乙酸，加试剂产生同样的反应。.Kahldenberg反应将样品的氯仿或醇溶液点于滤纸上，喷20%至数维的氯仿溶液，干燥后60°C~70°C力口热，样品斑点显蓝色、灰蓝色、

灰紫色等多种颜色。.Rosen-Heimer反应将样品溶液滴在滤纸上，喷25%三氯乙酸乙醇溶液,加热至60℃,呈红色,渐渐变为紫色。.Salkowski反应将样品溶于氯仿，加入浓硫酸后,在硫酸层呈现红色或蓝色,氯仿层有绿色荧光消失。5.Tschugaeff反应将样品溶于冰乙酸中，加乙酰氯数滴及氯化锌结晶数粒，稍加热，则呈现淡红色或紫红色。二、强心甘的颜色反应1.Cl7位上不饱和内酯环的颜色反应甲型强心昔在碱性醇溶液中，五元不饱和内酯环上的双键移位产生C22活性亚甲基，能与活性亚甲基试剂作用而显色。

乙型强心甘在碱性醇溶液中，不能产生活性亚甲基，无此类反应。所以，采用此类反应可区分甲、乙型强心昔。(1)Legal反应：又称亚硝酰铁禽化钠试剂反应。取样品1~2mg,溶于叱嚏2~3滴中，加3%亚硝酰铁富化钠溶液

和2mol∕L氢氧化钠溶液各1滴，反应液呈深红色并慢慢退去。(2)Raymond反应：阳性反应是反应液呈紫红色。(3)Kedd反应：又称3,5-二硝基苯甲酸试剂反应。阳性反应是反应液呈红色或紫红色。(4)Baljet反应：又称碱性苦味酸试剂反应。阳性反应是反应液呈现橙色或橙红色。2.0■去氧糖颜色反应(1)Keller-Kiliani(K-K)反应：此反应在如乙邀溶液中进行，如有去氧糖，乙酸层显蓝色。界面的颜色随昔元羟基、

双键的位置和数目不同而异，可显红色、绿色、黄色等。留意此反应只对游离的。-去氧糖或。■去氧糖与昔元连接的昔显色,对。■去氧糖和葡萄糖或其他羟基糖连接的二糖、三糖

及乙酰化的。-去氧糖不显色。因它们在此条件下不能水解出。-去氧糖。此反应阳性可确定去氧糖的存在,但对此反应不显色的有时未必具有完全的否定意义。(2)咕吨氢醇反应：反应试剂为咕吨氢醇试剂,此反应极为灵敏，只要分子中有α-去氧糖即呈红色，且分子中的。-去氧糖可定量地发生反应，故还可用于定量分析。(3)对■二甲氨基苯甲醛反应：分子中若有去氧糖可显灰红色斑点。(4)过碘酸-对硝基苯胺反应：此反应可在滤纸或薄层板上进行，反应过程是先喷过碘酸钠水溶液，再喷对硝基苯胺试液，则快速在灰黄色背底上消失深黄色斑点，置紫外灯下观看则为棕色背底上消失黄色荧光斑点。再喷以5%氢氧化钠甲醇

溶液，则斑点转为绿色。三|、醒类化合物的颜色反应 |醒类的颜色反应主要基于其氧化还原性质以及分子中的酚羟基嬴~(1)Feigl反应：全部酶类衍生物在碱性条件下经加热能快速与醛类及邻二硝基苯反应生成紫色化合物。(2)无色亚甲蓝显色试验：无色亚甲蓝溶液为苯醍类及蔡醍类的专用显色剂。蓝色斑点,与葱醍类化合物相区分。(3)Borntrager反应：羟基醍类在碱性溶液中发生颜色转变，会使颜色深入。多呈橙、红、紫红及蓝色。羟基蔻能以

及具有游离酚羟基的葱醍昔均可呈色，但蕙酚、蕙酮、二蕙酮类化合物则需氧化形成羟基蕙醍类化合物后才能呈色也就是不

显色。(4)Kesting—Craven反应(活性亚甲基)：苯酶及禁配类化合物当其醍环上有未被取代的位置时，可在碱性条件下与

一些含有活性次甲基试剂(如乙酰乙酸酯、丙二酸酯、丙二睛等)的醇溶液反应，生成蓝绿色或蓝紫色。蔡配的苯环上如有羟基取代，此反应即减慢反应速度或不反应。慈醍类化合物因醍环两侧有苯环，不能发生该反应，故

可加以区分。(5)与金属离子的反应：在慈酿类化合物中，假如有。-酚羟基或邻二酚羟基结构时，则可与Pb2÷,Mg2+等金属离子形

成络合物。反应灵敏，生成的颜色因分子中羟基的位置不同而不同，有助于识别羟基位置显的颜色不同：环上有1个。■羟基——橙色邻二酚羟基——蓝紫色对二酚羟基——显紫到紫红色各有1个羟基或还有间位羟基一橙红色至红色(6)对亚硝基二甲苯胺反应：9位或10位未取代的羟基慈酮类化合物，尤其是1,8-二羟基衍生物，其翔基对位的亚甲

基上的氢很活泼，可与0.1%对亚硝基-二甲苯胺毗嚏溶液反应缩合而产生各种颜色。本反应可作为蕙酮类化合物的定性鉴别

反应，不受蕙酶类、黄酮类、香豆素类、糖类及酚类化合物的干扰。四、香豆素的颜色反应(1)异羟月亏酸铁反应香豆素类成分具有内酯结构，在碱性条件下开环，与盐酸羟胺缩合生成异羟丽酸，在酸性条件下再与Fe3+络合而显红

色。此反应为香豆素的检识或结构鉴定。(2)酚羟基反应香豆素类成分常具有酚羟基取代，可与三氟化铁溶液反应产生绿色至墨绿色沉淀。常采用与三氯化铁溶液的反应推断酚

羟基的有无。四、黄酮类颜色反应①HCI-Mg:多数黄酮、黄酮醇、二氢黄酮及二氢黄酮醇类化合物显红〜紫红色；②四氢硼钠还原反应：二氢黄酮类化合物专属性较高；③错盐-枸檬酸反应：3-0H,5-0H;④氨性氯化镰反应：邻二酚羟基；⑤五氯化镂：查耳酮。.还原反应(1)盐酸-镁粉反应①鉴定黄酮类化合物最常用的颜色反应；②多数黄酮、黄酮醇、二氢黄酮及二氢黄酮醇类化合物显红〜紫红色，少数显蓝色或绿色，分子中特殊是当B・环上有・0H

或-OCH3取代时，呈现的颜色亦即随之深入。③查耳酮、橙酮、儿茶素类无该显色反应；④异黄酮类除少数例外，也不显色。⑤留意事项：采用此反应进行黄配类化合物的鉴别时，需留意花色素类及部分橙配、查耳酮类等单纯在浓盐酸酸性下也

会发生颜色变化，消失假阳性结果。操作：必要时需预先作空白对比试验，即在供试液中不加镁粉，而仅加入浓盐酸进行观看，若产生红色，则表明供试液

中含有花色素类或某些橙配或查耳配类。(2)钠汞齐还原反应黄酮、二氢黄酮、异黄酮、二氢异黄酮类显红色；黄酮醇类显黄〜淡红色；二氢黄酮醇类显恒同色。(3)四氢硼钠还原反应①四氢硼钠(NaBH4)是对二氢黄酮类化合物专属性较高的一种还原剂,此反应可在试管中或滤纸上进行。②现象：二氢黄酮类或二氢黄酮醇类被还原产生红〜紫红色，其他黄酮类均为负反应。③应用：可用于鉴别二氢黄配类、二氢黄配醇类和其他黄酮类化合物。.与金属盐类试剂的络合反应具有3・羟基、4-翔基或5・羟基、4■叛基或邻二酚羟基等结构，则可以与很多金属盐类试剂如铝盐、错盐、锂盐等反应，

生成有色的络合物或有色沉淀，有的还产生荧光。(1)三氯化铝反应生成的络合物多呈黄色，置紫外灯下显鲜黄色荧光，但“■羟基黄酮醇或7,4・二羟基黄酮醇显天蓝色荧光。(2)错盐-枸檬酸反应①应用：采用此反应鉴别黄酮类化合物分子中3-或5・0H的存在与否。②若消失黄色，说明3-0H或5-0H与皓盐生成了络合物。继之再加入枸檬酸，如黄色不减褪，示有3・0H或3,5■二

0H;假如黄色显著减褪，示无3-0H,但有5-0H。③原理：由于5-羟基、4-粉基与铅盐生成的络合物没有3-羟基、4-黑基错络合物稳定。简单被弱酸分解。此反应也可在滤纸上进行，得到的精盐络合物斑点多呈黄绿色并有荧光。(3)氨性氯化锂反应如产生绿色至棕色乃至黑色沉淀，则表示有邻二酚羟基。(4)三氯化铁反应多含有酚羟基,能与三氯化铁水溶液或醇溶液发生显色反应，可呈现紫、绿、蓝等不同颜色。.碱性试剂反应生成黄色、橙色或红色等。.硼酸显色反应.羟基黄酮、6'■羟基查耳酣,可与硼酸反应，产生亮黄色。①一般在草酸存在下显黄色并具有绿色荧光。②在枸椽酸丙酮存在的条件下，则只显黄色而无荧光。.五氯化铺反应①查耳酮类则生成红色或紫红色沉淀，而黄配、二氢黄酮及黄酮醇类显黄色至橙色。②应用：区分查耳酮类与其他黄酮类化合物。.其他显色反应①应用：Gibb's反应也可用于鉴别酚羟基对位是否被取代。②方法：酚羟基对位未被取代者在加入Gibb's试剂后即显蓝色或蓝绿色。.还原反应(1)盐酸-镁粉反应①鉴定黄酮类化合物最常用的颜色反应；②多数黄酮、黄酮醇、二氢黄酮及二氢黄酮醇类化合物显红〜紫红色，少数显蓝色或绿色，分子中特殊是当B・环上有-0H

或∙0CH3取代时，呈现的颜色亦即随之深入。③查耳酮、橙酮、儿茶素类无该显色反应；④异黄酮类除少数例外，也不显色。⑤留意事项：采用此反应进行黄配类化合物的鉴别时，需留意花色素类及部分橙配、查耳酮类等单纯在浓盐酸酸性下也

会发生颜色变化，消失假阳性结果。操作：必要时需预先作空白对比试验，即在供试液中不加镁粉，而仅加入浓盐酸进行观看，若产生红色，则表明供试液

中含有花色素类或某些橙配或查耳配类。(2)钠汞齐还原反应①方法：样品的乙醇溶液中加入钠汞齐，放置数分钟至数小时或加热，过滤，滤液用盐酸酸化。②现象：黄酮、二氢黄酮、异黄酮、二氢异黄酮类显红色；黄酮醇类显黄〜淡红色；二氢黄酮醇类显棕黄色。(3)四氢硼钠还原反应①四氢硼钠(NaBH4)是对二氢黄酮类化合物专属性较高的一种还原剂，此反应可在试管中或滤纸上进行。②现象：二氢黄酮类或二氢黄配醇类被还原产生红~紫红色，其他黄酮类均为负反应。③应用：可用于鉴别二氢黄酮类、二氢黄酮醇类和其他黄酮类化合物。2.与金属盐类试剂的络合反应黄酮类化合物分子中若具有3・羟基、4・涉基或5・羟基、4-粉基或邻二酚羟基等结构，则可以与很多金属盐类试剂如铝盐、

皓盐、镰盐等反应，生成有色的络合物或有色沉淀，有的还产生荧光。(1)三氯化铝反应①方法：此反应可在滤纸、薄层上或试管中进行。②现象：生成的络合物多呈黄色，置紫外灯下显鲜黄色荧光，但“■羟基黄酮醇或7,4,■二羟基黄酮醇显天蓝色荧光。(2)错盐-枸檬酸反应①应用：采用此反应鉴别黄酮类化合物分子中3-或5-0H的存在与否。②方法：是取样品0.5~1mg,用甲醇10ml溶解，加2%二氯氧错甲醇溶液1ml,若消失黄色，说明3-0H或5-0H与

错盐生成了络合物。继之再加入2%枸檬酸甲醇溶液，如黄色不减褪，示有3・0H或3,5■二0H;假如黄色显著减褪，示无

3-0H,但有5-OHo③原理：由于5-羟基、4-默基与错盐生成的络合物没有3-羟基、4-涉基错络合物稳定。简单被弱酸分解。此反应也可在滤纸上进行，得到的错盐络合物斑点多呈黄绿色并有荧光。(3)氨性氯化锂反应黄酮类化合物的分子中假如有邻二酚羟基，则可与氨性氯化锂试剂反应，如产生绿色至棕色乃至黑色沉淀，则表示有邻

二酚羟基。(4)三氧化铁反应多数黄酮类化合物分子中含有酚羟基，能与三氯化铁水溶液或醇溶液发生显色反应，可呈现紫、绿、蓝等不同颜色。.碱性试剂反应①现象：黄酮类化合物与碱性溶液可生成黄色、橙色或红色等。②应用：对于鉴别黄酮类化合物的结构类型有肯定意义。还可关心鉴别分子中某些结构特征。.硼酸显色反应5-羟基黄酮、6'-羟基查耳配类化合物在无机酸或有机酸存在条件下，可与硼酸反应，产生亮黄色。①一般在草酸存在下显黄色并具有绿色荧光。②在枸椽酸丙酮存在的条件下，则只显黄色而无荧光。.五氯化铺反应①方法：样品的无水四氯化碳溶液，加2%五氯化睇的四氯化碳溶液，若为查耳酮类则生成红色或紫红色沉淀，而黄配、

二氢黄酮及黄酮醇类显黄色至橙色，②应用：查耳酮类与其他黄配类化合物。.其他显色反应①应用：Gibb's反应也可用于鉴别黄酮类化合物酚羟基对位是否被取代。②方法：将样品溶于毗嚏中，酚羟基对位未被取代者在加入Gibb's试剂后即显蓝色或蓝绿色。显色总结：①HCI-Mg:多数黄酮、黄配醇、二氢黄酣及二氢黄鲍醇类化合物显红~紫红色；②四氢硼钠还原反应：二氢黄酮类化合物专属性较高；③皓盐■枸椽酸反应：3-OH,5-0H;④氨性氯化锂反应：邻二酚羟基；⑤五氯化睇:查耳酮。胆汁酸类除具有留体母核的颜色反应外，尚具有以下颜色反应：（1）Pettenkofer反应：取胆汁加蒸馅水及10%蔗糖溶液摇匀，沿试管管壁加入浓硫酸，则在两液分界处消失紫色环。

其原理是蔗糖经浓硫酸作用生成羟甲基糠醛，后者可与胆汁酸结合成紫色物质。（2）GregoryPascoe反应：取胆汁加45%硫酸及0.3%糠醛，水浴加热，胆酸存在的溶液显蓝色。本反应可用于胆酸

的定量分析。（3）Hammarsten反应：取少量样品，用20%珞酸溶液（20gCQ3在少量水中，用乙酸加至100m1）溶解，温热，胆

酸为紫色，鹅去氧胆酸不显色。Molish反应--是糖和苗类的检识反应。样品+浓硫酸+a蔡酚:界面处紫色环。碳昔和糖醛酸与Molish阴性。Smith降解一检测糖的种类，连接方式，氧环大小•特点：反应条件温柔、易得到原昔元适用：昔元不稳定的昔和碳昔，不适合昔元上有邻二醇羟基或易被氧化的基团的昔。样品（含稀醇）+NalO4=糖开裂成醛+NaBH4=伯醇，再调pH=2,放置。Smith裂解获得连一个醛基的昔元异羟月亏酸铁反应一鉴定内酯环的存在：碱性条件下，香豆素内酯开环，并与盐酸羟胺缩合成异羟月亏酸，再在酸性条件下与三

价铁离子络合成盐而显红色。酚羟基反应：具酚羟基取代的香豆素类在水溶液中可与三氯化铁试剂络合而产生不同的颜色。酚羟基的对位未被取代，6・位上没有取代，内酯环碱化开环后，可与Gibb's试剂、Emerson试剂反应。Gibb,s反应：2,6-二氯（溪）苯醍氯亚胺试剂蓝色。Emerson反应：2%的4-氨基安替匹林和8%的铁富化钾试剂红色。.