壶瓶碎米荠的组织培养与快速繁殖方法

壶瓶碎米荠的组织培养与快速繁殖方法壶瓶碎米荠的组织培养与快速繁殖方法本发明涉及壶瓶碎米荠培养领域，具体涉及一种壶瓶碎米荠的组织培养与快速繁殖方法，其包括如下步骤：取材及处理、愈伤诱导、不定芽的诱导、生根培养以及移栽。本发明培养方法简便，都使用常用的培养基，成本低，成活率高，是一种值得推广的壶瓶碎米荠的快速培养方法。【专利说明】壶瓶碎米荠的组织培养与快速繁殖方法【技术领域】[0001]本发明涉及壶瓶碎米荠培养领域，尤其涉及一种壶瓶碎米荠的组织培养与快速繁殖方法。【背景技术】[0002]壶瓶碎米荠，是我国特有的十字花科碎米荠属植物新种，当地百姓做野生蔬菜经常采食，单株重达400克，具有超强的富硒能力，但是限于其产量较低，急需一种简易的培养技术。【发明内容】[0003]本发明提供一种壶瓶碎米荠的组织培养与快速繁殖方法，其方法简便、成活率高。[0004]本发明实施例提供一种壶瓶碎米荠的组织培养与快速繁殖方法，其包括如下步骤:取材及处理:取壶瓶碎米荠的茎、幼叶或叶柄，清水冲洗后消毒处理；愈伤诱导:将壶瓶碎米荠接种在诱导分化培养基上，在温度20-25摄氏度、光照强度20-27摩尔/平方米/秒、光照10~17小时/天的环境下培养13~15天，壶瓶碎米荠外植体可见有绿色愈伤组织形成；不定芽的诱导:形成的愈伤组织续生长25~35天，至愈伤组织上形成绿色芽点，继续培养12~17天，大量丛生芽生成；生根培养:丛生芽长至2-3厘米时，将丛生芽进行切割后接种到生根培养基上，25~30天根系形成，成为再生苗；移栽:选根系发达的再生苗，炼苗4~8天后洗净培养基，移栽到蛭石、泥炭土和珍珠岩的混合基质中，覆盖塑料薄膜，弱光环境下生长8~12天后移至自然条件下生长。[0005]对上述技术方案的进一步改进为:所述取材及处理步骤中消毒处理后将壶瓶碎米荠材料剪成0.5厘米Χ0.5厘米小方块。[0006]优选地，所述消毒处理步骤具体为:在2飞摄氏度低温处理6~15小时后，用50%~90%酒精浸泡2~10秒，用无菌水冲洗数次，用0.05%~0.2%的氯化汞溶液浸泡消毒数分钟，再用无菌水冲洗数次。[0007]其中，所述诱导分化培养基为:MS+6_BA2.0毫克/升+NAA0.1，并添加30克/升蔗糖和7克/升琼脂，pH为5.8，在110-130摄氏度下湿热灭菌10-30分钟。[0008]其中，所述生根培养基为:1/2MS+NAA0.3，并添加30克/升蔗糖和7克/升琼脂，pH为5.8，在110~130摄氏度下湿热灭菌10~30分钟。[0009]所述移栽步骤中，蛭石、泥炭土和珍珠岩的比例为1:1:1。[0010]所述取材及处理中，清水冲洗时间为广2小时。[0011]优选地，所述愈伤诱导、不定芽的诱导以及生根培养步骤中，培养环境为温度20~25摄氏度、光照强度20~27摩尔/平方米/秒、光照10~17小时/天。[0012]本实施例壶瓶碎米荠的组织培养与快速繁殖方法，有益效果是:通过在培养基上经过愈伤诱导、不定芽的诱导以及生根培养后移栽培育，培养方法简便，都使用常用的培养基，成本低，成活率高，是一种值得推广的壶瓶碎米荠的快速培养方法。【具体实施方式】[0013]为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明作进一步地详细描述。[0014]实施例1:本实施例提供一种壶瓶碎米荠的组织培养与快速繁殖方法，其包括如下步骤:制作培养基:诱导分化培养基:用MS+6-BA2.0毫克/升+NAA0.1，并添加30克/升蔗糖和7克/升琼脂，调节PH至5.8，在121摄氏度下湿热灭菌20分钟。[0015]生根培养基:用1/2MS+NAA0.3，并添加30克/升蔗糖和7克/升琼脂，调节pH至5.8，在121摄氏度下湿热灭菌20分钟。[0016]取材及处理:取壶瓶碎米荠的茎、幼叶或叶柄，清水冲洗2小时，在4摄氏度低温处理12小时后,用75%酒精浸泡7秒,用无菌水冲洗3次,用0.1%的氯化萊溶液浸泡消毒10分钟，再用无菌水冲洗3次，将壶瓶碎米荠材料剪成0.5厘米X0.5厘米的小方块。[0017]愈伤诱导:将壶瓶碎米荠接种在诱导分化培养基上，在温度23摄氏度、光照强度24摩尔/平方米/秒、光照14小时/天的环境下培养，4天后培养基出现愈伤组织，呈现淡绿色，14天后，80%以上叶柄外植体可见有绿色愈伤组织形成。[0018]不定芽的诱导:形成的愈伤组织在相同的培养基及培养环境下继续生长30天，至愈伤组织上形成绿色芽点，继续培养15天，大量丛生芽生成。[0019]生根培养:丛生芽长至2-3厘米时，将丛生芽进行切割后接种到生根培养基上，相同的培养环境下培养30天后根系形成，生根率为100%，成为再生苗。[0020]移栽:选根系发达的再生苗，炼苗7天后洗净培养基，移栽到蛭石、泥炭土和珍珠岩比例1:1:1的混合基质中，覆盖塑料薄膜，弱光环境下生长10天后移至自然条件下生长即可。[0021]经检测，上述移栽的壶瓶碎米荠再生苗成活率达90%以上。[0022]实施例2:本实施例提供一种壶瓶碎米荠的组织培养与快速繁殖方法，其包括如下步骤:制作培养基:诱导分化培养基:用MS+6-BA2.0毫克/升+NAA0.1，并添加30克/升蔗糖和7克/升琼脂，调节PH至5.8，在110摄氏度下湿热灭菌10分钟。[0023]生根培养基:用1/2MS+NAA0.3，并添加30克/升蔗糖和7克/升琼脂，调节pH至5.8，在110摄氏度下湿热灭菌10分钟。[0024]取材及处理:取壶瓶碎米荠的茎、幼叶或叶柄，清水冲洗I小时，在2摄氏度低温处理6小时后,用50%酒精浸泡2秒,用无菌水冲洗3次,用0.05%的氯化萊溶液浸泡消毒10分钟，再用无菌水冲洗3次，将壶瓶碎米荠材料剪成0.5厘米X0.5厘米的小方块。[0025]愈伤诱导:将壶瓶碎米荠接种在诱导分化培养基上，在温度20摄氏度、光照强度20摩尔/平方米/秒、光照10小时/天的环境下培养，3天后培养基出现愈伤组织，呈现淡绿色，13天后，80%以上叶柄外植体可见有绿色愈伤组织形成。[0026]不定芽的诱导:形成的愈伤组织在相同的培养基及培养环境下继续生长25天，至愈伤组织上形成绿色芽点，继续培养12天，大量丛生芽生成。[0027]生根培养:丛生芽长至2-3厘米时，将丛生芽进行切割后接种到生根培养基上，相同的培养环境下培养25天后根系形成，生根率为100%，成为再生苗。[0028]移栽:选根系发达的再生苗，炼苗4天后洗净培养基，移栽到蛭石、泥炭土和珍珠岩比例1:1:1的混合基质中，覆盖塑料薄膜，弱光环境下生长8天后移至自然条件下生长即可。[0029]实施例3:本实施例提供一种壶瓶碎米荠的组织培养与快速繁殖方法，其包括如下步骤:制作培养基:诱导分化培养基:用MS+6-BA2.0毫克/升+NAA0.1，并添加30克/升蔗糖和7克/升琼脂，调节pH至5.8，在130摄氏度下湿热灭菌30分钟。[0030]生根培养基:用1/2MS+NAA0.3，并添加30克/升蔗糖和7克/升琼脂，调节pH至5.8，在130摄氏度下湿热灭菌30分钟。[0031]取材及处理:取壶瓶碎米荠的茎、幼叶或叶柄，清水冲洗2小时，在6摄氏度低温处理15小时后,用90%酒精浸泡10秒,用无菌水冲洗3次,用0.2%的氯化萊溶液浸泡消毒10分钟，再用无菌水冲洗3次，将壶瓶碎米荠材料剪成0.5厘米X0.5厘米的小方块。[0032]愈伤诱导:将壶瓶碎米荠接种在诱导分化培养基上，在温度25摄氏度、光照强度27摩尔/平方米/秒、光照17小时/天的环境下培养，4天后培养基出现愈伤组织，呈现淡绿色，15天后，80%以上叶柄外植体可见有绿色愈伤组织形成。[0033]不定芽的诱导:形成的愈伤组织在相同的培养基及培养环境下继续生长35天，至愈伤组织上形成绿色芽点，继续培养17天，大量丛生芽生成。[0034]生根培养:丛生芽长至2-3厘米时，将丛生芽进行切割后接种到生根培养基上，相同的培养环境下培养30天后根系形成，生根率为100%，成为再生苗。[0035]移栽:选根系发达的再生苗，炼苗8天后洗净培养基，移栽到蛭石、泥炭土和珍珠岩比例1:1:1的混合基质中，覆盖塑料薄膜，弱光环境下生长12天后移至自然条件下生长即可。[0036]经检测，上述移栽的壶瓶碎米荠再生苗成活率达90%以上。[0037]以上是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本【技术领域】的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也视为本发明的保护范围。”替代亦可。【权利要求】1.一种壶瓶碎米荠的组织培养与快速繁殖方法，其特征在于，包括依次进行的如下步骤:取材及处理:取壶瓶碎米荠的茎、幼叶或叶柄，清水冲洗后消毒处理；愈伤诱导:将壶瓶碎米荠接种在诱导分化培养基上培养13~15天，壶瓶碎米荠外植体可见有绿色愈伤组织形成；不定芽的诱导:形成的愈伤组织续生长25~35天，至愈伤组织上形成绿色芽点，继续培养12~17天，大量丛生芽生成；生根培养:丛生芽长至2-3厘米时，将丛生芽进行切割后接种到生根培养基上，25~30天根系形成，成为再生苗；移栽:选根系发达的再生苗，炼苗41天后洗净培养基，移栽到蛭石、泥炭土和珍珠岩的混合基质中，覆盖塑料薄膜，弱光环境下生长8~12天后移至自然条件下生长。2.如权利要求1所述壶瓶碎米荠的组织培养与快速繁殖方法，其特征在于，所述取材及处理步骤中消毒处理后将壶瓶碎米荠材料剪成0.5厘米X0.5厘米小方块。3.如权利要求1所述壶瓶碎米荠的组织培养与快速繁殖方法，其特征在于:所述消毒处理步骤具体为:在2飞摄氏度低温处理6~15小时后，用50%~90%酒精浸泡2^10秒，用无菌水冲洗数次，用0.05%~0.2%的氯化汞溶液浸泡消毒数分钟，再用无菌水冲洗数次。4.如权利要求1所述壶瓶碎米荠的组织培养与快速繁殖方法，其特征在于:所述诱导分化培养基为:MS+6-BA2.0毫克/升+NAA0.1，并添加30克/升蔗糖和7克/升琼脂，pH为5.8，在110-130摄氏度下湿热灭菌10-30分钟。5.如权利要求1所述壶瓶碎米荠的组织培养与快速繁殖方法，其特征在于:所述生根培养基为:1/2MS+NAA0.3，并添加30克/升蔗糖和7克/升琼脂，pH为5.8，在110~130摄氏度下湿热灭菌10~30分钟