一轮复习课件-微生物的培养及应用

考纲原生态1.微生物的别离和培养2.某种微生物数量的测定3.培养基对微生物的选择作用1考点一微生物的实验室培养1．培养基(1)概念：人们按照微生物对_________的不同需求，配制出供其生长繁殖的_________。营养物质营养物质水、碳源、氮源、无机盐pH氧气固体培养基2分类标准培养基种类特点用途根据物理性质液体培养基不加凝固剂工业生产半固体培养基加凝固剂，如琼脂观察微生物的运动、分类、鉴定固体培养基加凝固剂，如琼脂微生物分离、鉴定、活菌计数根据用途选择培养基培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长培养、分离出特定微生物鉴别培养基根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品鉴别不同种类的微生物微生物的实验室培养根底知识1．培养基3【练习稳固】(2010·全国卷Ⅰ改造)某细菌固体培养基的组成成分是KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水，其中凝固剂是__________，碳源是________，氮源是_________。只有能合成脲酶的细菌才能在该培养基上生长，故该培养基属于______培养基。从同化作用类型的角度看，用该培养基培养的细菌属于_________。异养型琼脂葡萄糖尿素选择4煮沸消毒法灼烧灭菌条件结果常用的方法消毒灭菌较为温和的物理或化学方法仅杀死物体外表或内部的对人体有害的局部微生物(不包括芽孢和孢子)煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌2．无菌技术5考点一微生物的实验室培养6考点一微生物的实验室培养3．纯化大肠杆菌的原理与方法(1)原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是纯化的细菌菌落。7比较平板划线法稀释涂布平板法原理优点缺点适用范围考点一微生物的实验室培养通过接种环在琼脂固体培养基外表连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基上。在数次划线后培养，可以别离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，即菌落将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的外表，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基外表形成单个的菌落可以观察菌落特征，对混合菌进行别离可以计数，可以观察菌落特征不能计数吸收量较少，较麻烦，平板不枯燥效果不好，容易蔓延适用于好氧菌适用于厌氧菌和兼性厌氧菌(2)纯化微生物的接种方法：8考点一微生物的实验室培养平板划线法纯化大肠杆菌时不同阶段灼烧接种环的目的不同(1)第一次操作：杀死接种环上原有的微生物。(2)每次划线之前：杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端。(3)划线结束后：杀死接种环上残存的菌种，防止细菌污染环境和感染操作者。9考点一微生物的实验室培养(1)培养基分装到培养皿后进行灭菌。(2013·江苏)()(2)转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线。 (2013·江苏)()(3)接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养。 (2013·江苏)()(4)培养过程中每隔一周观察一次。(2013·江苏)()(5)在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌。 (2011·重庆)()(6)在培养基中参加青霉素可抑制真菌而促进细菌生长，向液体培养基中通入氧气能促进破伤风杆菌的生长。 (2011·重庆)()(7)对新配制的培养基灭菌时所用的设备是高压蒸汽灭菌锅。实验前需对超净工作台进行消毒处理。(2010·山东)()(8)用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板。 (2009·安徽)()×√××××√√10D题组一微生物的培养1．(2015·北京市东城区联考)细菌需要从外界吸收营养物质并通过代谢来维持正常的生长和繁殖。以下与此有关的说法正确的选项是 ()A．乳酸菌与硝化细菌所利用的碳源是相同的B．氮源不可能作为细菌的能源物质C．琼脂是细菌生长和繁殖中不可缺少的一种物质D．以尿素为唯一氮源的培养基上长出的不都是尿素分解菌11题组一微生物的培养2．随着科技的开展，微生物在生产活动中得到了广泛应用。以下关于微生物培养的表达，正确的选项是()A．青霉素就是抗生素，在青霉菌的培养过程中不用严格灭菌B．培养基中参加的琼脂可以作为微生物的碳源C．为了防止污染，在微生物培养过程中，操作人员的手必须经过严格灭菌D．在菌种选育过程中可以利用人工诱变等手段D12成分含量成分含量NaNO33gFeSO40.01gK2HPO41g(CH2O)30g琼脂15gH2O1000mLMgSO4·7H2O0.5g青霉素0.1万单位题组一微生物的培养3．下表所示为某微生物培养基的配方，有关表达错误的选项是ＣA.依物理性质划分，该培养基属于固体培养基；依用途划分，该培养基属于选择培养基B．由培养基的原料可知，所培养微生物的同化作用类型是异养型，培养的微生物可以是酵母菌或毛霉C．本培养基中青霉素的添加满足了微生 物生长对特殊营养物质的要求D．假设用该培养基别离能分解尿素的细菌，应除去青霉素和NaNO3，并应参加尿素13题组一微生物的培养1．筛选微生物的原理人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物的生长。因此，可以通过配制选择培养基、控制培养条件等选择目的微生物。2．选择培养基的设计原理和功能 根据某种微生物的特殊营养要求或其对某些物理、化学因素(如温度、pH等)的抗性而设计的培养基为选择培养基。此类培养基能使混合菌株中的目的菌株变为优势菌，从而提高该菌的筛选效率。14题组一微生物的培养3．选择培养基应用实例序号改变的条件分离的目的菌12345参加青霉素参加高浓度的食盐缺乏氮源石油作为唯一碳源高温环境酵母菌和霉菌金黄色葡萄球菌固氮微生物分解石油的微生物耐高温微生物15题组二微生物纯化的方法分析4．有关平板划线操作正确的选项是()A．使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌B．翻开含菌种的试管后要通过火焰灭菌，取出菌种后要马上塞上棉塞C．将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可D．最后将平板倒置，放入培养箱中培养D16题组二微生物纯化的方法分析5．苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了能降解利用苯酚的细菌菌株筛选的主要步骤如以下图所示，①为土壤样品。以下相关表达错误的选项是 ()ＣA．图中②培养目的菌株的选择培养基中应参加苯酚作为碳源B．如果要测定②中活细菌数量，常采用稀释涂布平板法C．假设图中④为对照实验，那么其中应以苯酚作为唯一的碳源D．使用平板划线法可以在⑥上获得 单菌落17题组二微生物纯化的方法分析微生物纯化的三种途径(1)单菌落挑取法：利用平板划线法或稀释涂布平板法接种到固体平板培养基外表，直接根据微生物菌落的特征利用单菌落挑取的方法获得目的微生物。(2)选择培养法：利用选择培养基对微生物进行选择培养，直接获得目的微生物。(3)鉴定培养法：利用鉴别培养基使目的微生物菌落呈现特有的特征，然后筛选目的微生物。18考点二微生物的别离与数量测定1．土壤中分解尿素的细菌的别离与计数(1)别离原理 土壤中细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成_____，这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起到_____作用。(2)统计菌落数目 统计样品中的活菌一般用_____________法。(3)实验流程 土壤取样→___________→微生物的培养与观察→细菌的_____。脲酶催化稀释涂布平板样品的稀释计数19考点二微生物的别离与数量测定2．分解纤维素的微生物的别离 (1)纤维素酶 ①组成：纤维素酶是一种______，一般认为它至少包括三种组分，即________________________。 ②作用：葡萄糖复合酶C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶20 (2)纤维素分解菌的筛选 ①原理：纤维素分解菌

↓ ②筛选方法：_______染色法，即通过是否产生_______来筛选纤维素分解菌。 ③培养基：以_______为唯一碳源的选择培养基。红色复合物透明圈刚果红透明圈纤维素考点二微生物的别离与数量测定21 ④实验流程： 土壤取样：富含_______的环境 ↓ 选择培养：用__________培养，以增加纤维素分解菌的浓度 ↓ _________：制备系列稀释液 ↓ 涂布平板：将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 ↓ 挑选产生_______的菌落纤维素选择培养基梯度稀释透明圈考点二微生物的别离与数量测定22考点二微生物的别离与数量测定(1)别离微生物所用的选择培养基一定是固体培养基，因为菌落只能在固体培养基上形成。(2)平板划线法只适合用于微生物的提纯，不适合进行计数，并且在最后一次划线的末端处的菌种最纯。23√√×√考点二微生物的别离与数量测定(1)要从土壤中别离获取纤维素分解菌，应选用以纤维素为唯一碳源的选择培养基。(2013·太原五中月考)()(2)在纤维素分解菌培养过程中，对培养基和接种环常采用的灭菌方法分别是高压蒸汽灭菌和灼烧灭菌。 (2013·许昌二次调研)()(3)透明圈是刚果红与纤维素形成的复合物，可根据是否出现透明圈来判断有无纤维素分解菌。(2011·山东改编)()(4)测定培养液中微生物数量，可选用显微镜直接计数法。 (2010·山东)()(5)在“检测土壤中细菌总数”的实验中，确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数。 (2009·安徽)()(6)假设用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、屡次重复外，还应保证待测样品稀释的比例适宜。(2009·高考宁夏卷)()×√24题组三对别离分解尿素细菌及纤维素分解菌的筛选分析1．欲从土壤中别离出能分解尿素的细菌，以下实验操作中，不正确的选项是 ()A．将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释B．同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板C．可将未接种的培养基在相同条件下培养作为对照D．用参加刚果红指示剂的培养基可筛选出分解尿素的细菌D25题组三对别离分解尿素细菌及纤维素分解菌的筛选分析2．(2015·泰州质检)利用农作物秸秆为原料可生产乙醇，生产过程中可采用微生物将秸秆水解或用酶水解，其主要技术流程如以下图所示，以下相关说法错误的选项是 A．可用刚果红染色法筛选过程①所需的纤维素分解菌B．过程①参加的纤维素酶是葡萄糖苷酶C．酒精发酵接种的酵母菌需在无氧条件下发酵D．酒精发酵前需对培养基进行高压蒸汽灭菌Ｂ26项目土壤中分解尿素的细菌的分离分解纤维素的微生物的分离方法使用以尿素为唯一氮源的选择培养基进行培养利用富含纤维素的选择培养基进行培养原理土壤中不能分解尿素的微生物因缺乏脲酶而不能正常生长，能够分解尿素的微生物能利用尿素为氮源正常生长，从而起到选择作用因为培养基中含有丰富的纤维素，因此能够分解纤维素的微生物具有更多的生存机会而大量繁殖特有代谢过程题组三对别离分解尿素细菌及纤维素分解菌的筛选分析筛选微生物的两种方法比较27题组四微生物的计数分析D3．(2015·北京市海淀区高三期中)以下关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的表达中，不正确的选项是()A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高压蒸汽灭菌后倒平板B．取104、105、106倍土壤稀释液和无菌水各0.1ml涂布不同平板C．将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24～48小时D．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的平板进行计数28题组四微生物的计数分析