2023年生物新高考地区高考题分类汇编(发酵工程)

20232023年高考地区高考题分类汇编〔发酵工程〕以下相关表达正确的选项是〔 〕果酒发酵时，用斐林试剂检测葡萄汁中复原糖含量变化，砖红色沉淀逐日增多果醋发酵时，发酵液产生的气泡量明显少于果酒发酵时果醋发酵时，用重铬酸钾测定醋酸含量变化时，溶液灰绿色逐日加深A【分析】参与果酒制作的微生物是酵母菌，其陈代谢类型为异养兼性厌氧型。参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其陈代醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。A每日放气需快速，避开空气回流入发酵容器，影响酒精发酵，A正确；B、果酒发酵时，发酵液中的葡萄糖不断被消耗，因此用斐林试剂检测葡萄汁中复原糖含量变化，砖红色沉淀逐日削减， B错误；C醋酸和水，几乎没有气泡产生，发酵液产生的气泡量明显少于果酒发酵时，假设以葡萄糖为底物进展醋酸发酵，发酵液产生的气泡量与果酒发酵时相当，CDDA。2.〔2023江苏〕〔不定项〕18.为提高一株石油降解菌的净化力气，将菌涂布于石油为唯一碳源的固体培育基上，以致死率为90%的辐照剂量诱变处理，以下表达不合理的是〔 〕率涂布用的菌浓度应把握在30~300个/mL需通过预试验考察辐射时间对存活率的影响，以确定最正确诱变时间分析AB微生物的接种方法有稀释涂布平板法和平板划线法。预试验可以为正式试验进一步的摸索条件，可以检验试验设计的科学性和可行性，避开人力、物力和财力的铺张。A、培育基应先灭菌再分装于培育皿中，AB、涂布用的菌浓度应把握在106倍，以避开菌种重叠而不能BC试验，以确定最正确诱变时间，CD、石油降解菌能分解石油获得碳源，形成菌落，挑取培育基上长出的较大单菌落，给纯化后进展降解效率分析，以获得能高DAB。3．〔2023·1月浙江选考〕用白萝卜制作泡菜的过程中，承受适当方法可缩短腌制时间。以下方法中错误的选项是〔 〕A．将白萝卜切成小块B．向容器中通入无菌空气C．添加已经腌制过的泡菜汁D．用沸水短时处理白萝卜块B【分析】1氧条件下乳酸菌无氧呼吸产生乳酸。2、泡菜的制作流程是：选择和处理原料、洗净泡菜坛、调味装坛、密封发酵。【详解】AAB向容器中通入无菌空气不利于腌制，BC、泡菜汁中含有确定量的发酵菌种，所以在腌制过程中，参与一些已经腌制过泡菜汁可缩短腌制时间，CD、用沸水短时处理，可抑制某些微生物的生殖，提高泡菜品质，也可缩短腌制时间，D4.(2023山东高考12)葡萄酒的制作离不开酵母菌。以下说法错误的选项是〔 〕无氧条件下酵母菌能存活但不能大量生殖自然发酵制作葡萄酒时起主要作用的菌是野生型酵母菌葡萄酒颜色是葡萄皮中的色素进入发酵液形成的制作过程中随着发酵的进展发酵液中糖含量增加D【解析】酵母菌进展有氧呼吸获得能量大量生殖，无氧条件下，发酵产生酒精，故无氧条件下酵母菌能进展无氧呼吸存活但A正确；自然发酵制作葡萄酒时起主要作用的菌是葡萄皮上的野生型酵母菌，B正确；葡萄皮中的色素进入发酵液使葡萄酒呈现颜色，C正确；制作过程中随着发酵的进展发酵D5.〔2023湖北〕3.中国的很多传统美食制作过程蕴含了生物发酵技术。以下表达正确的选项是〔 〕泡菜制作过程中，酵母菌将葡萄糖分解成乳酸馒头制作过程中，酵母菌进展呼吸作用产生 CO2米酒制作过程中，将容器密封可以促进酵母菌生长酸奶制作过程中，后期低温处理可产生大量乳酸杆菌B【分析】1、参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其陈代谢类型是异养需氧型．腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。2〔1〕乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸。〔2〕利用乳酸菌制作泡菜的过程中会引起亚硝酸盐的含量的变化。3、醋酸菌好氧性细菌，当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇〔酒精〕氧化成醋酸；当氧气、糖源都充分时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生长的最正确温度是在 30℃～35℃。【详解】A、泡菜制作过程中，主要是乳酸菌将葡萄糖分解形AB、做馒头或面包时，常常要用到酵母菌，酵母菌可以分解面粉中的葡萄糖，产生二氧化碳和酒精，二氧化碳是气体，遇热膨胀而形成小孔，使得馒头或面包暄软多孔，BCCDDB。6.〔2023海南〕17．关于果酒、果醋和泡菜这三种传统发酵产物的制作，以下表达正确的选项是〔 〕A．发酵所利用的微生物都属于原核生物 氧条件下进展C．发酵过程都在同一温度下进展D．发酵后形成的溶液都呈酸性D【分析】参与果酒制作的微生物是酵母菌，其陈代谢类型为异养兼性厌氧型；参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其陈代谢类型是异养需氧型；泡菜的制作离不开乳酸菌。【详解】AABBC、不同的发酵产物需要的温度不同，CD、果酒、果醋和泡菜发酵后形成的溶液都呈酸性， D正确。D。7.〔2023辽宁〕8.利用菠萝蜜制作果醋的大致流程为：先在灭菌的果肉匀浆中接种酵母菌，发酵6天后，再接入活化的醋酸杆菌，发酵5天。以下有关表达错误的选项是〔 〕乙醇既是醋酸发酵的底物，又可以抑制杂菌生殖酵母菌和醋酸杆菌均以有丝分裂的方式进展增殖酵母菌和醋酸杆菌发酵过程中把握通气的状况不同接入醋酸杆菌后，应适当上升发酵温度B【分析】1、果酒制作的菌种是酵母菌，来源于葡萄皮上野生18～25℃，pH2需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充分时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。最适温度为30～35℃。【详解】A、当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，同时乙醇还可以抑制杂菌生殖，ABBC醇；醋酸杆菌为好氧菌，需持续通入无菌氧气，CD、酵母菌适宜温度是18～25℃，醋酸杆菌最适温度为30～35DB。A用免洗酒精凝胶擦手B.制作泡菜前用开水烫洗容器C.在火焰上灼烧接种环D.防疫期间用石炭酸喷洒教室C【分析】灭菌是指使用猛烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程，常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌。消毒是指用较为温存的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一局部微生物的过程，常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法等。A、用免洗酒精凝胶擦手属于消毒，AB、制作泡菜前用开水烫洗容器属于消毒过程，BC、在火焰上灼烧接种环能到达灭菌目的，CD、防疫期间用石炭酸喷洒教室，属于消毒，DC。9.〔2023·6浙江月选考〕以下关于原生质体和细胞计数的表达，错误的选项是〔 〕测定植物原生质体的密度时，可用血细胞计数板红墨水不能进入活细胞，可用于检测细胞的存活状态并计数涂布分别法和划线分别法均能得到单菌落，都可用于细胞计数酵母菌在液体培育基中培育一段时间后，可用比浊计测定其密度C【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培育基倒入培育皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开头局部，微生物往往连在一起生长，随着线的延将待分别的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培育皿外表，经培养后可形成单个菌落。其中稀释涂布平板法可以用来进展微生物的计数，而平板划线法不能。【详解】A、可用血细胞计数板对原生质体进展计数，一般计数总数不少于300AB能透过细胞膜，当细胞死亡后，细胞膜失去选择透过性，红墨水中的色素分子能进入细胞，所以可用红墨水检测细胞的存活状态BC、划线分别法不能用于细胞计数，CD酵母菌在液体培育基中培育一段时间后，可用比浊计测定其密度，DC。10.(2023山东高考14)解脂菌能利用分泌的脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸取利用。脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色。将不能直接吸取脂肪的甲，乙两种菌分别等量接种在醇溶青琼脂平板上培育。甲菌菌落四周呈现深蓝色，乙菌菌落四周不变色，以下说法错误的选项是〔 〕甲菌属于解脂菌试验中所用培育基以脂肪为唯一碳源可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进展比照该平板可用来比较解脂菌分泌脂肪酶的力气B【解析】依据题干信息“甲菌菌落四周呈现深蓝色”，说明甲可以分泌脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸，脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色，因此甲菌属于解脂菌，A正确；乙菌落四周没有消灭深蓝色，说明乙菌落不能产生脂肪酶，不能利用脂肪为其供能，但乙菌落也可以在培育基上生存，说明该培育基不是以脂肪为唯一碳源，B错误；可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进展比照，更加直观，C正确；可以利用该平板可用来比较解脂菌分泌脂肪酶的力气，观看指标可以以菌落四周深蓝D11.〔2023北京〕12.人体皮肤外表存在着多种微生物，某同学拟从中分别出葡萄球菌。下述操作不正确的选项是〔 〕对配制的培育基进展高压蒸汽灭菌使用无菌棉拭子从皮肤外表取样用取样后的棉拭子在固体培育基上涂布观看菌落的形态和颜色等进展初步推断C【分析】试验室常用的消毒和灭菌方法的比较：1、消毒：煮沸消毒法〔一般物品〕、巴氏消毒法〔一些不耐高温的液体，如牛奶〕、化学药剂消毒法〔如用酒精擦拭双手，用氯气消毒水源等〕、紫外线消毒法〔接种室、操作台〕；2、灭菌：灼烧灭菌〔接种工具〕、干热灭菌〔玻璃器皿、金属用具〕、高压蒸汽灭菌〔培育基及容器〕。【详解】A、为避开杂菌污染干扰，需对配制的培育基进展高AB故需要使用无菌棉拭子从皮肤外表取样，BCCD小、隆起程度和颜色等特征进展鉴别，DC。12.(2023山东高考20)〔不定项〕含硫蛋白质在某些微生物的作用下产生硫化氢导致生活污水发臭。硫化氢可以与硫酸亚铁铵结合形成黑色沉淀。为探究发臭水体中甲、乙菌是否产生硫化氢及两种菌的运动力气，用穿刺接种的方法，分别将两种菌接种在含有硫酸亚铁铵的培育基上进展培育，如以下图。假设两种菌生殖速度相等，以下说法错误的选项是〔〕乙菌的运动力气比甲菌强为不影响菌的运动需选用液体培育基该试验不能比较出两种菌产生硫化氢的量穿刺接种等接种技术的核心是防止杂菌的污染B【解析】从图中可以看出甲菌在试管中分布范围小于乙菌，说明白乙菌的运动力气比甲菌强，A正确；为不影响菌的运动需选用半固体培育基，B错误；该试验可以依据黑色沉淀的多少初步比较细菌产生硫化氢的力气，但不能测定产生硫化氢的量， 正确；微生物接种技术的核心是防止杂菌的污染，D正确。【2023年浙江7月高考卷，19】以下关于微生物培育及利用的表达，错误的选项是〔 〕利用尿素固体培育基可快速杀死其他微生物，而保存利用尿素的微生物配制培育基时应依据微生物的种类调整培育基的 C.酵母菌不能直接利用糯米淀粉发酵得到糯米酒D.适宜浓度的酒精可使醋化醋杆菌活化A解析：利用尿素固体培育基筛选尿素分解菌时，尿素固体培养基并不直接杀死其他微生物，而是其他微生物不能以尿素为氮源，无法在尿素固体培育基中存活，A错误；不同的微生物生长所需的最适生活在中性偏酸环境，因此配制培育基时应依据微生物的种类调整培育基的pH，B不能直接利用淀粉进展发酵，C正确；醋化醋杆菌的发酵底物为D【2023年山东卷，12】我国的酿酒技术历史悠久，古人在实际生产中积存了很多阅历。《齐民要术》记载：将蒸熟的米和酒曲混合前需“浸曲发，如鱼眼汤，净淘米八斗，炊作饭，舒令极冷”。意思是将酒曲浸到活化，冒出鱼眼大小的气泡，把八斗米淘净，蒸熟，摊开冷透。以下说法错误的选项是( )“浸曲发”过程中酒曲中的微生物代谢加快“鱼眼汤”现象是微生物呼吸作用产生的 CO2

释放形成的“净淘米”是为消退杂菌对酿酒过程的影响而实行的主要措施“舒令极冷”的目的是防止蒸熟的米温度过高导致酒曲中的微生物死亡C解析：由题意可知，“浸曲发”是将酒曲浸泡活化，在活化的过程中微生物代谢加快，A正确；“鱼眼汤”是指冒出鱼眼大小的气泡，气泡是微生物进展呼吸作用产生的 CO2

B正确；酿酒过程中酵母菌进展无氧呼吸产生的酒精会抑制其他微生物的生长，而“净淘米”是防止一些杂质影响酒的品质， C错误；由题意可知，“舒令极冷”是将蒸熟的米摊开冷透，其目的是防止蒸熟的米温度过高使酒曲中的微生物死亡，D【202320】〔不定项〕野生型大肠杆菌可以在根本培育基上生长，发生基因突变产生的氨基酸依靠型菌株需要在根本培育基上补充相应氨基酸才能生长。将甲硫氨酸依靠型M和苏氨酸依靠型菌株N会产生菌落。某同学试验过程中觉察，将M、N时间，充分稀释后再涂布到根本培育基上，培育后消灭很多由单个细菌形成的菌落，将这些菌落分别接种到根本培育基上，培育后均有菌落消灭。该同学对这些菌落消灭缘由的分析，不合理的是( )A.操作过程中消灭杂菌污染B.M、NC.混合培育过程中，菌株获得了对方的遗传物质D.混合培育过程中，菌株中已突变的基因再次发生突变B解析：假设操作过程中消灭杂菌污染，则根本培育基上会有杂菌生长，从而消灭菌落，AM、N失的氨基酸，则M、N到根本培育基上，培育后会消灭很多由单个细菌形成的菌落，但MN培育基上时，培育后不会再有菌落消灭，B错误；假设混合培育过程中，菌株获得了对方的遗传物质或菌株中已突变的基因再次发生突变，都会造成遗传物质转变，则混合培育一段时间，充分稀释涂布到根本培育基上培育后会有菌落消灭，将这些菌落再分别接种到根本培育基上培育后，也会有菌落消灭，C、D【20239】阅读以下材料，答复1、2甜瓣子是豆瓣酱的重要成分，风味受蚕豆蛋白分解产生的氨基酸影响，也受发酵过程中不同微生物的多种代谢产物影响。其生产工艺如以以下图所示。时期时段〔天〕盐度〔〕温度〔℃〕前期0~12612中期12~16637后期16~301537某争论团队对加盐水后的发酵阶段的传统工艺〔盐度15%，某争论团队对加盐水后的发酵阶段的传统工艺〔盐度15%，温度37℃，发酵30〕进展了改进，改进后甜瓣子风味得以提升。工艺参数如下表所示。以下关于本争论的试验方法与原理的描述，错误的选项是( )A.发酵开头阶段的微生物主要来源于制曲过程的积存B.蚕豆瓣可供给微生物生长生殖所需的碳源和氮源C.温度与盐度都影响微生物的生长生殖D.定期取样，使用平板划线法统计活细菌总数2.以下对试验结果的分析，错误的选项是()A.工艺中期活霉菌总数下降由温度上升导致工艺后期活细菌总数下降由温度、盐度均上升导致工艺中期氨基酸产生速率较前期末加快，是由于温度上升提高了蛋白酶活性工艺中甜瓣子风味提升，与前、中期活微生物总数高和氨基酸终产量高均有关1.D；2.B解析：1.依据工艺流程可知，蚕豆瓣制曲形成豆瓣曲，说明发酵开头阶段的微生物主要来源于制曲过程的积存， A正确；蚕豆瓣含有丰富的糖类和蛋白质，因此蚕豆瓣可为微生物的生长繁殖供给碳源和氮源，B正确；依据图中发酵前期、中期和后期的活霉菌、活细菌总数变化以及表格数据可知，温度与盐度都影响微生物的生长生殖，C正确；定期取样，使用稀释涂布平板法统计活细菌总数，D错误。与前期相比，中期的盐度不变，温度上升，因此工艺中期活霉菌总数下降与温度上升有关，A正确；与中期相比，工艺后期温度不变，盐度上升，因此工艺后期活细菌总数下降是由盐度上升导致的，B错误；与前期末相比，工艺中期氨基酸1237℃，温度上升提高了C正确；综合分析三图中两条曲线的变化，工艺中甜瓣子风味提升，与前、中期活微生物总数高和氨基酸终产量D【2023年江苏卷，18】某同学在线提交了在家用带盖玻璃瓶制作果酒和果醋的试验报告，他的做法错误的选项是 ( )A.选择颖的葡萄略加冲洗，除去枝梗后榨汁B.将玻璃瓶用酒精消毒后，装满葡萄汁C.酒精发酵期间，依据发酵进程适时拧松瓶盖放气D.酒精发酵后去除瓶盖，盖一层纱布，再进展醋酸发酵B解析：制作葡萄酒时，选择颖的葡萄，榨汁前先将葡萄略加冲洗，并除去枝梗，A正确；发酵瓶要清洗干净，用体积分数为70%的酒精消毒，或用洗洁精洗涤，葡萄汁装入发酵瓶时，要留有大约1/3的空间，不能装满，这样既可以为酵母菌大量生殖供给适量的氧气，又可以防止发酵旺盛时发酵液溢出， B错误；酒精发酵过程中会产生二氧化碳，为了释放出二氧化碳，要依据发酵进程适时拧松瓶盖放气，C正确；由于醋酸发酵使用的菌种为醋酸菌醋酸菌为好氧细菌，为了给醋酸发酵供给充分的氧气，并防止空气中的杂菌污染，酒精发酵后去除瓶盖，盖一层纱布，再进展醋酸发酵，D正确。【2023年江苏卷，19】为纯化菌种，在鉴别培育基上划线接种纤维素降解细菌，培育结果如以以下图所示。以下表达正确的选项是( )倒平板后需间歇晃动，以保证外表平坦图中Ⅰ、Ⅱ区的细菌数量均太多，应从Ⅲ区挑取单菌落C.该试验结果因单菌落太多，不能到达菌种纯化的目的D.菌落四周的纤维素被降解后，可被刚果红染成红色B解析：倒平板后无需间歇晃动，A错误；图中Ⅰ区、Ⅱ区的细菌数量太多，Ⅲ区的细菌数量较少，可从Ⅲ区挑取单菌落， B正确；Ⅲ区中存在单菌落，该试验结果能到达菌种纯化的目的，C错误；刚果红能与纤维素形成红色复合物，但不能和纤维素水解后的纤维二糖和葡萄糖形成红色复合物，因此菌落四周的纤维素被降解后，不能被刚果红染成红色，D19．〔2023·湖南高考真题〕大熊猫是我国特有的珍稀野生动物，每只成年大熊猫每日进食竹子量可达 。大熊猫可利用竹子中8%的纤维素和27%的半纤维素。争论人员从大熊猫粪便和土壤中筛选纤维素分解菌。答复以下问题：纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即 为筛选纤维素分解菌，将大熊猫颖粪便样品稀释液接种至以 为唯一碳源的固体培育基上进展培育，该培育基从功能上分类属于 培育基。配制的培育基必需进展灭菌处理，目的是 。检测固体培育基灭菌效果的常用方法是 。简要写出测定大熊猫颖粪便中纤维素分解菌活菌数的试验思路 。选获得的337℃条件下进展玉米秸秆降解试验，结果如表所示。在该条件下纤维素酶活力最高的是菌株 ，理由是 。菌 秸秆总重

秸秆残重

秸秆失重

株(g)(g)〔%〕〔%〕A2.001.5124.5016.14B2.001.5323.5014.92C2.001.4229.0023.32〔1〕C〔1〕CC纤维素选1 x择〔2〕为了杀死培育基中的全部微生物〔微生物和芽孢、孢子〕不接种培育〔或空白培育〕0.1mL到假设干个平板〔每个稀释度至少涂布三个平板〕30～300素分解菌活菌数〔4〕C C大【分析】1、分解纤维素的微生物分别的试验原理：土壤中存在着大量纤维素分解酶，包括真菌、细菌和放线菌等，它们可以产生纤维素酶。纤维素酶是一种复合酶，可以把纤维素分解为纤维二糖，进一步分解为葡萄糖使微生物加以利用，故在用纤维素作为唯一碳源的培育基中，纤维素分解菌能够很好地生长，其他微生物则不能生长；红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培育基中会消灭以纤维素分解菌为中心的透亮圈，从而可筛选纤维素分解菌。2、消毒和灭菌：消毒 灭菌使用较为温存的物理或化学概方法杀死物体外表或内部的念局部微生物〔不包芽孢和孢子〕

使用猛烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物〔包括芽孢和孢子〕常常用煮沸消毒法、巴氏消毒法、化灼烧灭菌、干热灭菌、方高压蒸汽灭菌法适用接种环、接种针、玻璃操作空间、某些液体、双手等对 器皿、培育基等象【详解】〔1纤维素酶是一种复合酶，CCx1第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。在用纤维素作为唯一碳源的培育基中，纤维素分解菌能够很好地生长，其他微生物则不能生长。为筛选纤维素分解菌，将大熊猫颖粪便样品稀释液接种至以纤维素为唯一碳源的固体培育基上进展培育；培育基从功能上分类可分为选择培育基和鉴别培育基，故该培育基从功能上分类属于选择培育基。〔2〕配制培育基的常用高压蒸汽灭菌，马上培育基置于压力100kPa121℃条件下维持15～30的是为了杀死培育基中的全部微生物〔微生物和芽孢、孢子〕。为检测灭菌效果可对培育基进展空白培育，马上未接种的培育基在适宜条件下培育一段时间，假设在适宜条件下培育无菌落消灭，说明培育基灭菌彻底，否则说明培育基灭菌不彻底。为测定大熊猫颖粪便中纤维素分解菌活菌数，常承受稀释涂布平板法，在适宜的条件下对大熊猫颖粪便中纤维素分解菌进展纯化并计数时，比照组应当涂布等量的无菌水。将大熊倍数后，取0.1mL涂布到假设干个平板〔每个稀释度至少涂布三个平板〕，对菌落数在 30～300的平板进展计数则可依据公式推想大熊猫颖粪便中纤维素分解菌活菌数。测定酶活力时可以用单位时间内、单位体积中反响物的削减量或产物的增加量来表示。由表格可知，在适宜的条件下，C说明该菌株的纤维素分解菌产生的纤维素酶活力最大。20．〔2023·1〕答复以下〔一〕小题：〔一〕某环保公司从淤泥中分别到一种高效降解富养分化污水污染物的细菌菌株，制备了固定化菌株。从淤泥中分别细菌时常用划线分别法或 法两种方法均能在固体培育基上形成 。对分别的菌株进展诱变、 和鉴定，从而获得能高效降解富养分化污水污染物的菌株。该菌株只能在添加了特定成分X的培育基上生殖。固定化菌株的制备流程如下；①将菌株与该公司研制的特定介质结合；②用蒸馏水去除 ；③检验固定化菌株的 。菌株与特定介质的结合不宜直接承受交联法和共价偶联法，可以承受的2种方法是 。对外只供给固定化菌株有利于保护该公司的学问产权，推想其缘由是 。【答案】〔一〕〔1〕涂布分别 单菌落 筛选〔2〕未固定的细菌 降解富养分化污水污染物的力气 包埋法和吸附法〔3〕特定介质能为菌株生殖供给X【分析】1、分别纯化细菌最常用的方法是划线分别法〔平板划线法〕和涂布分别法〔稀释涂布平板法〕。接种的目的是使聚拢在一起的微生物分散成单个细胞，并在培育基外表形成单个细菌生殖而单菌落更易分开，但操作简洁些。2insolubleenzyme)就是将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质上，使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。固定化的方法有吸附法、共价偶联法、交联法和包埋法等。【详解】〔一〕分析题意可知，本试验目的是从淤泥中分别到一种高效降解富养分化污水污染物的细菌菌株，制备固定化菌株。分别纯化细菌最常用的方法是划线分别法或涂布分别法，两种方法均能在固体培育基上形成单菌落。为了获得能高效降解富养分化污水污染物的菌株，还需对分别的菌株进展诱变处理，再经筛选和鉴定。固定化的方法有吸附法、共价偶联法、交联法和包埋法等。由于菌株与特定介质的结合不宜直接承受交联法和共价偶联法，故可以承受的2由于该菌株只能在添加了特定成分X的培育基上生殖，可推想特定介质能为菌株生殖供给 X，故该公司对外只供给固定化菌株，有利于保护该公司的学问产权。21．〔2023·广东高考真题〕中国科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌H，以糖蜜〔甘蔗榨糖后的废弃液，含较多蔗糖〕为原料，在试验室发酵生产PHA解材料，期望提高甘蔗的整体利用价值。工艺流程如图。答复以下问题：为提高菌株H对蔗糖的耐受力气和利用效率，可在液体培育基中将蔗糖作为 并不断提高其浓度，经屡次传代培育〔指培育一段时间后，将局部培育物转入配的培育基中连续培育〕以获得目标菌株。培育过程中定期取样并用 的方法进展菌落计数，评估菌株增殖状况。此外，选育优良菌株的方法还有 等。〔答出两种方法即可〕基于菌株H嗜盐、酸碱耐受力气强等特性，争论人员设计了一种不需要灭菌的发酵系统，其培育基盐浓度设为 缘由是 。〔答出两点即可〕争论人员在工厂进展扩大培育，在适宜的养分物浓度、温度、pHHPHA产量均未到达预期，并产生了少量乙醇等物质，说明发酵条件中 可能是高密度培育的限制因素。菌株H还能通过分解餐厨垃圾〔主要含蛋白质、淀粉、油脂等〕来生产PHA，说明其能分泌 。【答案】〔1〕唯一碳源 血细胞计数板计数 变育种、基因工程育种盐浓度为60g/L；pH10氧气〔O〕2蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等【分析】微生物的筛选和计数方法：试验室中微生物的筛选原理试验室筛选：人为供给有利于目的菌株生长的条件〔包括养分、温度、pH〕，同时抑制或阻挡其他微生物生长。微生物常见的接种方法：稀释涂布平板法、平板划线法。测定微生物数量的方法：①直接计数法：常用显微镜直接技术法，一般适用于纯培育悬浮液中各种单细胞菌体的计数。②间接计数法：常用稀释平板计数法，平板培育基上长出一个菌落就代表原待测样品中一个微生物个体。【详解】H耐受力气和利用效率，结合微生物的代谢需求，其液体培育基应当以蔗糖作为唯一碳源。并不断提高其浓度，经屡次传代培育〔指培育一段时间后，将局部培育物转入配的培育基中连续培育〕以获得目标菌株。培育过程中定期取样并用血细胞计数板计数的方法进展菌落计数，评估菌株增殖状况。此外，选育优良菌株的方法还有诱变育种、基因工程育种等。H当培育基盐浓度为60g/LpH10时，菌株H60d以上，而盐浓度为60g/L的条件下，其他杂菌因失水过多而pH10抑制，故该系统不需要灭菌。分析题意，扩大培育时，养分物浓度、温度、pH等条HPHA并产生了少量乙醇等物质，说明发酵条件中氧气缺乏，使菌种进行无氧呼吸产生乙醇，即氧气〔O或溶解氧〕是限制高密度培育2的重要因素。H含蛋白质、淀粉、油脂等的餐厨垃圾来生产PHA，说明其能分泌蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等。22.〔20231〕29.答复以下〔一〕、〔二〕小题：〔一〕红曲霉合成的红曲色素是可食用的自然色素，具有防腐、降脂等功能。争论者进展了红曲色素的提取及红色素的含量测定试验，流程如下：取红曲霉菌种斜面，加适量 洗下菌苔，制成菌悬液并培育，解除休眠获得 菌种经液体发酵，收集红曲霉菌丝体，红曲霉菌丝体与70%乙醇溶液混合，经浸提、 ，获得的上清液即为红曲色素提取液。为进一步提高红曲色素得率，可将红曲霉细胞进展 处理。红曲色素包括红色素、黄色素和橙黄色素等，红色素在390nm、420nm和505nm液特长均有较大吸取峰。用光电比色法测定红曲色素取液甲的红色素含量时，通常选用 505nm波长测定的缘由是 。测定时需用 作空白比照。生产上提取红曲色素后的残渣，经 处理后作为饲料添加剂或有机肥，这属于废弃物的无害化和 处理。【答案】〔1〕①.无菌水②.活化③.离心④.裂开①.其它色素对该波长光的吸取相对较少，干扰相对较小②.70%①.灭菌②.资源化【分析】1、无菌操作包括灭菌和消毒两种方式。消毒的方法有巴氏消毒法、酒精消毒、煮沸消毒法；灭菌的方法有干热灭菌、灼烧灭菌和高压蒸汽灭菌。2、微生物接种：微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，常用来统计样品活菌数目的方法是稀释涂布平板法。3、平板划线法：通过接种环在琼脂固体培育基外表连续划线的操作，将聚拢的菌种逐步稀释分散到培育基外表。1防止污染，洗菌苔可加适量的无菌水，制成菌悬液并培育，解除休眠获得活化菌种。红曲霉菌丝体与 70%乙醇溶液混合，经浸提、离心，获得的上清液即为红曲色素提取液。为进一步提高红曲色素得率，可将红曲霉细胞进展裂开处理，使细胞内的红曲色素释放出来。2用光电比色法测定红曲色素取液甲的红色素含量时，通常选用505nm波长测定的缘由是其它色素对该波长光的吸取相对较少，干扰相对较小。由于提取红曲色素是用的 70%乙醇溶液，故测定时需用70%乙醇溶液作空白比照。3生产上提取红曲色素后的残渣，经灭菌处理残渣后，作为饲料添加剂或有机肥，这属于废弃物的无害化和资源化处理。23．〔2023·河北高考真题〕葡萄酒生产过程中会产生大量的酿酒残渣〔皮渣〕。目前这些皮渣主要用作饲料或肥料，同时争论者也实行多种措施拓展其利用价值。答复以下问题：皮渣中含有较多的自然食用色素花色苷，可用萃取法提取。萃取前将原料枯燥、粉碎的目的分别是 ，萃取效率主要取决于萃取剂的 。萃取过程需要在适宜温度下进展，温度过高会导致花色苷 。争论觉察，萃取时辅以纤维素酶、果胶酶处理可提高花色苷的提取率，缘由是 。为了解皮渣中微生物的数量，取10g皮渣参与90mL无菌水，混匀、静置后取上清液，用稀释涂布平板法将0．1mL稀释液接种于培育基上。104倍稀释对应的三个平板中菌落数量分别为78、91和95，则每克皮渣中微生物数量为 个。皮渣积存会积存醋酸菌，可从中筛选优良菌株。制备醋酸菌初筛平板时，需要将培育基的pH调至 性灭菌后须在未凝固的培育基中参与无菌碳酸钙粉末、充分混匀后倒平板，参与碳酸钙的目的是

。培育筛选得到的醋酸菌时，在缺少糖源的液体培育基中可参与乙醇作为 。皮渣积存过程中也会积存某些兼性厌氧型乳酸菌。初筛醋酸菌时，乳酸菌有可能混入其中，且两者菌落形态相像。请设计一个简洁试验，区分筛选平板上的醋酸菌和乳酸菌 。〔简要写出试验步骤和预期结果〕【答案】〔1〕利于萃取剂溶解花色苷、使原料与萃取剂充分接触 性质和使用量 分解 纤维素酶、果胶酶可破坏细胞壁，有利于提高花色苷的提取率〔2〕8.8×106中性或偏碱使培育基不透亮，从而使醋酸菌菌落四周消灭透亮圈碳源〔4〕试验步骤：将平板置于无氧环境下连续培育，观看菌落形态和透亮圈大小预期结果：假设菌落连续生长，且透亮圈增大，则为兼性厌氧型的乳酸菌菌落，假设菌落不能连续生长，透亮圈不再扩大，则为醋酸菌菌落【分析】萃取的效率主要取决于萃取剂的性质和使用量，同时还受到原料颗粒的大小、严密程度、含水量、草取的温度和时间等条件的影响。一般来说，原料颗粒小，萃取温度高，时间长，需要提取的物质就能够充分溶解，萃取效果就好。区分筛选平板上的醋酸菌和乳酸菌，可依据二者代谢类型的不同，在无氧条件下进展培育，观看菌落生长状况。【详解】自然食用色素花色苷可用萃取法提取，萃取剂与水应不混溶，萃取前将原料枯燥，有利于萃取剂溶解花色苷，提高溶解率；粉碎的目的是使原料与萃取剂充分接触；萃取效率主要取决于萃取剂的性质和使用量。萃取过程需要在适宜温度下进展，温度过高会导致花色苷分解。萃取时辅以纤维素酶、果胶酶处理，可破坏细胞壁，有利于提高花色苷的提取率。为了解皮渣中微生物的数量，取10g皮渣参与90mL无菌水，混匀、静置后取上清液，用稀释涂布平板法将 0.1mL稀释液接种于培育基上。104倍稀释对应的三个平板中菌落数量分别为78、91和95，则三个平板中平均菌落数为〔78+91+95〕÷3=88，每克皮渣中微生物数量为88÷0.1×104=8.8×106个。醋酸菌属于细菌，制备醋酸菌初筛平板时，需要将培育pH醋酸菌产生的醋酸可分解碳酸钙，产生透亮圈，依据这一特点可先把乙醇氧化为乙醛，再把乙醛氧化为乙酸。醋酸菌为好氧菌，与兼性厌氧型的乳酸菌菌落形态相像，且二者产生的代谢产物均可使碳酸钙分解，区分筛选平板上的醋酸菌和乳酸菌，可将平板置于无氧环境下连续培育，观看菌落形态和透亮圈大小。假设菌落连续生长，且透亮圈增大，则为兼性厌氧型的乳酸菌菌落，假设菌落不能连续生长，透亮圈不再扩大，则为醋酸菌菌落。【点睛】此题考察植物成分的提取和微生物的分别，考察考生对植物成分提取方法和原理、微生物培育、分别、计数方法的理解和识记。解答此题，需充分利用题干信息，如醋酸菌、乳酸菌代谢类型的区分等，才能准确作答。24.〔2023·6浙江月选考〕〔15分〕答复以下〔一〕、〔二〕小题：〔一〕答复与甘蔗醋制作有关的问题：为了获得酿造甘蔗醋的高产菌株，以自然发酵的甘蔗、2

4

溶解并定容，调整pH，再高压蒸汽灭菌，经 后参与3%体积的无水乙醇。然后将10g自然发酵的甘蔗渣参与选择培育基，震荡培育24h。用 将少量上述培育液涂布到含CaCO3

的分别培育基上，在30℃培育48h。再挑取分别培育基上具有 的单菌落假设干，分别接种到与分别培育基成分一样的 培育基上培育24h后，置于4℃冰箱中保存。优良产酸菌种筛选。将冰箱保存的菌种分别接入选择培育基，培育一段时间后，取适宜接种量的菌液在 30℃、150r/min条件下震荡培育。持续培育至培育液中醋酸浓度不再上升，或者培育液中 含量到达最低时，发酵完毕。筛选得到的优良菌种 除 了 产 酸 量 高 外 ， 还 应 有 〔答出2〕等特点。〔3〕制醋过程中，可将甘蔗渣制作成固定化介质，经 后用于发酵。其固定化分法为 。【答案】①.冷却②.玻璃刮刀③.较大透亮圈④.斜面⑤.乙醇⑥.耐酒精度高、耐酸高⑦.灭菌⑧.吸附法【解析】【分析】1、涂布法：将待分别的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在固体培育皿外表，经培育后可形成单个菌落，是筛选高表达量菌株的常用方法；【详解】〔一〕高压蒸汽灭菌刚完毕时，培育基温度较高，要等培育基冷却后再参与3使用玻璃刮刀将待分别的菌液涂布到分别培育基的整个平面上。醋酸菌发酵产生的醋酸会使培育基中的CaCO3菌落小，透亮圈大，代表着高产醋酸菌。菌种的贮存方法：在无菌操作下将单菌落用接种环取出，再用划线法接种在斜面培育基24h4℃冰箱中保存。醋酸发酵完毕的标志性：产物不再增加〔醋酸浓度不再上升〕或原料消耗到最低值〔乙醇含量到达最低〕。优质菌种不光要产酸高，还要耐高酸，同时还要耐酒精〔原料〕等特点。其他微生物污染。因此，在培育微生物时必需进展无菌操作，所以作为固定化介质的甘蔗渣需要经过灭菌处理。甘蔗渣类似果醋发酵装置中的锯末，可使醋杆菌吸附在甘蔗渣上进展发酵。【2023129】答复以下〔一〕、〔二〕小题：〔一〕答复与泡菜制作有关的问题：用萝卜等根菜类蔬菜制作泡菜，用热水短时处理，可抑制某些微生物产生 从而使成品泡菜口感较脆。同时，该处理也会使泡菜发酵时间缩短，其缘由是 。泡菜发酵初期由于泡菜罐加盖并水封，会使 菌被渐渐抑制。发酵中期，乳酸菌大量生殖，会使 菌受到抑制。发酵后期，乳酸生产过多，会使乳酸菌受到抑制。从泡菜汁中可分别制作酸奶的乳酸菌，首先对经屡次发酵的泡菜汁进展过滤，然后取滤液进展 ，再用 的方法在某种含牛乳的专用的培育基中进展初步筛选。该培育基必需含有 ，以便于观看是否产酸。自然界中醋杆菌常与乳酸菌共同生长。假设要筛选出醋杆菌，则其专用的培育基中应添加 。答案：〔一〕〔1〕果胶酶；细胞裂开，细胞内养分物质外流使乳酸菌快速地获得养分物质喜好氧的；不耐酸的稀释；涂布分别；酸碱指示剂乙醇【2023729