粪便检验专业知识讲座

粪便检验专业知识讲座粪便检验专业知识讲座第1页粪便检验主要用于帮助诊疗消化道疾病：1、肠道感染性疾病；2、肠道寄生虫感染；3、消化道出血判别与肿瘤筛检；4、了解胃肠道消化、吸收功效；5、黄疸判别诊疗。粪便检验专业知识讲座第2页粪便成份主要有：1、未被消化食物残渣；2、已被消化但未被吸收食糜；3、消化道分泌物；4、分解产物；5、肠壁脱落上皮细胞；6、细菌，如大肠埃希氏菌、肠球菌和一些过路菌；粪便检验专业知识讲座第3页第一节标本采集和处理

粪便检验专业知识讲座第4页一、标本容器盛标本容器应清洁、干燥、有盖、无吸水和渗漏。细菌学检验，粪便标本应采集于灭菌、有盖容器内。粪便检验专业知识讲座第5页二、标本采集标本新鲜，盛器清洁、干燥。选取有病理意义标本，多点取样。及时检测，标本采集后于1小时内检测

完成。粪便检验专业知识讲座第6页寄生虫检测应屡次取样，并注意取样方式。阿米巴滋养体等原虫检测，应及时、保温送

检。粪便隐血检测应于试验前素食三天，并禁服

铁剂、及维生素。粪便检验专业知识讲座第7页

第二节理学检验

粪便检验专业知识讲座第8页1、粪便量2、粪便外观颜色：正常人粪便呈黄褐色，婴儿粪便呈黄绿色或金黄色糊状。常见颜色改变见下表：粪便检验专业知识讲座第9页颜色生理性况病理性况黄褐色金黄色

灰白色绿色红色酱色黑色成人正常颜色哺乳儿正常颜色，食物中有较多奶类，服用山道年、大黄等药品服用钡剂后食用大量含叶绿素蔬菜食用大量红色食物后饮食大量咖啡、可可、巧克力等食物服用活性炭、铁剂、饿剂、中药或猪血等存在未经改变胆红素胆汁降低或缺如，脂肪过量存在乳儿消化不良下消化道出血阿米巴痢疾上消化道出血粪便检验专业知识讲座第10页性状：正常人粪便为成形软便，婴儿为糊状便。病理状态时，粪便性状可发生改变。粪便检验专业知识讲座第11页（1）稀糊状或稀汁样便：常因细菌肠毒素、内源性促分泌物质、致泻物质等物质刺激肠道，造成肠蠕动亢进或肠液分泌增多所致。多见于各种感染和非感染性腹泻，尤其是急性胃肠炎。

（2）脓性及脓血便：常见于下消化道病变、各种肠炎、痢疾、急性血吸虫病，结肠或直肠癌，慢性溃疡性结肠炎、肠结核。（3）米苷样便：呈白色陶米水样，多见于霍乱、副霍乱，为白色淘米水样。粪便检验专业知识讲座第12页

（4）柏油样便：因上消化道出血所致，隐血试验强阳性。（5）白陶土样便：主要见于阻塞性黄疸及钡餐造影术后。（6）鲜血便：见于直肠息肉，结肠癌、肛裂、痔疮。

（7）胨状便：见于慢性菌痢及过敏性肠炎。粪便检验专业知识讲座第13页（8）黏液便：粘液混匀于粪便中，见于小肠病变；粘液非混匀于粪便中且较集中，见于大肠病变；粘液粘附于粪便表面，常见于直肠炎；透明胶冻样粘液附于粪便表面时，见于粘液性肠炎、痉孪性便秘、情绪激动等。粪便检验专业知识讲座第14页

3、寄生虫虫体粪便中如有虫体较大肠道寄生虫蠕虫，如蛔虫、蛲虫、绦虫等或其片段，肉眼可见。钩虫虫体需筛洗粪便后才见。粪便检验专业知识讲座第15页4、气味粪便臭味与进食种类，疾病性质相关。病理情况：粪便恶臭普通见于慢性肠炎、胰腺疾病、消化道大出血、结肠或直肠癌；粪便鱼腥臭味见于阿米巴性肠炎；粪便酸臭味见于消化、吸收不良。

粪便检验专业知识讲座第16页第三节显微镜检验及其临床意义粪便检验专业知识讲座第17页

显微镜检验内容主要包含寄生虫虫卵、原虫、细胞、真菌、结晶、食物残渣等。粪便检验专业知识讲座第18页（二）粪便中各有形成份形态和意义

1、细胞1）红细胞：正常粪便无红细胞。上消化道出血时，红细胞被破坏，粪便中难以见到。下消化道炎症或出血时可出现数量不等红细胞，如痢疾、溃疡性结肠炎、结肠癌、直肠息肉、痔疮、急性血吸虫病等。粪便检验专业知识讲座第19页消化道疾病时因为炎病损伤出血，白细胞、红细胞同时存在。细菌性痢疾时红细胞少于白细胞，多分散存在且形态正常；阿米巴痢疾者红细胞多于白细胞，多粘连成堆存在并有残碎现象。粪便检验专业知识讲座第20页

2）白细胞（脓细胞）粪便中白细胞常见中性粒细胞。病理情况下，中性粒细胞呈灰白色，胞体肿胀、坏死、破碎、结构不完整，胞质内充满细小颗粒，核不清楚中性粒细胞，常成堆出现，此时称为“脓细胞”

粪便检验专业知识讲座第21页正常粪便，无或偶见白细胞。结肠炎，白细胞分散存在，普通少于15个/HFP；细菌性痢疾、溃疡性结肠炎时，可见大量白细胞或成堆出现脓细胞以及吞有异物小吞噬细胞；肠易激综合症、肠道寄生虫病时可见较多嗜酸性粒细胞，可伴有夏科-莱登结晶。

粪便检验专业知识讲座第22页3）巨噬细胞：常随脓细胞出现于急性菌痢粪便中，溃疡性结肠炎时，亦可偶见。

4）肠黏膜上皮细胞：见于结肠炎症、伪膜性肠炎。5）肿瘤细胞：乙状结肠癌、直肠癌病人血性粪便，及时涂片染色（瑞氏或HE染色）可找到成堆体积大，形态异常肿瘤细胞。粪便检验专业知识讲座第23页2、寄生虫卵、原虫、滴虫①寄生虫卵：粪便中检验寄生虫卵是诊疗肠道寄生虫感染最常见指标。粪便中常见寄生虫卵有：蛔虫卵、钩虫卵、鞭虫卵、蛲虫卵、华枝睾吸虫卵、血吸虫卵、姜片虫卵和带绦虫卵等。②原虫和滴虫：肠寄生原虫包含阿米巴原虫、隐孢子虫、鞭毛虫、纤毛虫和人芽囊原虫等。

粪便检验专业知识讲座第24页

3、结晶粪便中检出夏科-雷登结晶，主要见于阿米巴痢疾、钩虫病以及过敏性肠炎，并同时见到嗜酸性粒细胞。4、食物残渣在正常粪便中，食物残渣均系已充分消化后无定形细小颗粒。未经充分消化食物残渣，常见有以下几个：①脂肪小滴②淀粉颗粒③肌肉纤维④结缔组织⑤植物纤维及植物细胞粪便检验专业知识讲座第25页第四节化学检验及其临床意义粪便检验专业知识讲座第26页一、隐血试验

概念：隐血是指上消化道有少许出血时（每日出血量少于5ml），而且红细胞因被消化分解,肉眼不见粪便改变颜色，而且粪便涂片显微检验未能检出红细胞。而需用其它间接方法才能证实出血。隐血试验方法有化学法和免疫法两种。粪便检验专业知识讲座第27页

1、化学法隐血试验（OBT）试验原理：血红蛋白中含铁血红素含有过氧化物酶活性，能分解过氧化物，催化色原物质而呈色，呈色深浅反应了血红蛋白含量，即出血量多少。常见方法：主要有邻联甲苯胺法，联苯胺法，匹拉米洞法，愈创木酯法等。假阳性情况：如外源性干扰；假阴性情况：如外源性与内源性干扰粪便检验专业知识讲座第28页联苯胺法【原理】

于粪便内加入易被氧化物质（联苯胺等）及放氧物质（H2O2）,经粪便内血液作用（血色素中铁卟啉环有过氧化酶作用）分解过氧化氢放出O2-，使联苯胺被氧化而致颜色。【检验方法、结果及优缺点】1.方法

联苯胺法

无色孔雀绿法

单克隆抗体OB试验取联苯胺粉少许置于玻片上，滴加冰醋酸

2-3滴，再加3%H2O22滴，取粪便少许与以上试剂混匀，观察结果。

粪便检验专业知识讲座第29页

2.结果

2分钟兰色（+）

1分钟兰色（++）

1/2分钟兰色（+++）

马上兰色（++++）

2分钟以上兰色（-）粪便检验专业知识讲座第30页

2、免疫法隐血试验原理：该试验全部抗体可分为两类，一个为抗人血红蛋白抗体，另一个为抗人红细胞基质抗体。常见方法有免疫单扩法、对流免疫电泳、免疫扩散法、酶联免疫吸附试验、反向间接血凝法等。粪便检验专业知识讲座第31页免疫法无须控制饮食，且敏感性和特异

性都高于化学法。假阳性情况：高灵敏度可造成假阳性，

故不宜用于日常筛检。假阴性情况：主要检测下消化道出血，

以及带现象。粪便检验专业知识讲座第32页临床意义：粪便隐血试验主要用于消化道出血、消化道肿瘤筛检和判别。隐血阳性：

1、见于消化道出血、药品致胃粘膜损伤（如服用阿司匹林、糖皮质激素）、肠结核、克罗思病、胃病（胃溃疡、胃炎）、溃疡性结肠炎、结肠息肉、钩虫病及肾病综合症出血热、消化道恶性肿瘤等。

粪便检验专业知识讲座第33页

2、消化性溃疡与肿瘤出血判别：隐血试验对消化道溃疡阳性诊疗率为40-70％，呈间断性阳性；而消化道恶性肿瘤诊疗阳性率可达95％，且呈连续性阳性。粪便检验专业知识讲座第34页第五节粪便细菌学检验粪便检验专业知识讲座第35页正常人肠道中栖居大量不一样种类微生物，组成人类健康极为主要体内微生态环境——参加营养、消化、吸收及清洁肠道，维护健康作用。腹泻因病原菌或病毒在在肠道繁殖引发，引发腹泻细菌种类多。本试验主要介绍疑为沙门菌或志贺菌属感染者或带菌者粪便标本（或直肠拭子）中致病菌分离和判定。

粪便检验专业知识讲座第36页因为肠道中存在大肠埃希菌等很多条件致病菌，其与肠道致病菌主要区分之一是：大多数条件致病菌可分解乳糖，而绝大多数肠道致病菌则不分解乳糖。分离肠道致病菌多用含乳糖弱选择性判别培养液（如麦康凯琼脂等）以及对大肠埃希菌等条件致病菌有较强抑制作用、而又有利于肠道一些致病菌（如沙门菌及志贺菌属）生长繁殖强选择性判别培养液。粪便检验专业知识讲座第37页粪便标本常见病原菌：■G＋菌：葡萄球菌属、白色假丝酵母菌、艰难梭菌、结核分枝杆菌、蜡样芽孢杆菌■G－菌：志贺菌、沙门菌、致病性大肠埃希菌、霍乱弧菌、亲水气单胞菌、类志贺邻单胞菌、弯曲菌、小肠结肠炎耶尔森菌

粪便检验专业知识讲座第38页试剂与器材菌株：伤寒沙门菌培养基：麦康凯和SS琼脂平板各种生化反应培养液及革兰氏染液等试剂（可参见微生物自动分析及附录）

沙门菌多价“O”（A-F组）及单价“O”诊疗血清、“H”因子诊疗血清粪便检验专业知识讲座第39页标本采集

因为粪便中细菌种类很多，故应依据检验目标不一样选择适宜培养液或用适当方法处理，尽可能地抑制杂菌，以利于病原菌检出。不能认为粪便中细菌含量多，粪便标本采集就无须无菌操作。粪便标本采集也应遵照无菌操作标准。若便器或标本容器不洁而污染了变形杆菌，就可能影响病原菌分离检出，甚至把污染菌误报，造成误诊。粪便检验专业知识讲座第40页标本采集采样时期应适当。疑似痢疾患者应在发病早期、用药前采取标本。粪便标本采集时应挑取无尿液污染有脓血、黏液个别粪便2—3g（液状粪便可挑取絮状物），盛于无菌容器内送检。在无法取得粪便时，可采取直肠拭子，即用灭菌棉拭子经0.9%氯化钠溶液或增菌培养液湿润后，插入肛门内)4—5cm处，轻轻转动一圈后取出，插入无菌试管（CaryBlair系统运输管）或保留液中送检；疑似伤寒患者应在发病2—3周内采集粪便标本。粪便检验专业知识讲座第41页标本采集在无法取得粪便时，可采取直肠拭子，即用灭菌棉拭子经0.9%氯化钠溶液或增菌培养液湿润后，插入肛门内)4—5cm处，轻轻转动一圈后取出，插入无菌试管（CaryBlair，卡—布系统运输管）或保留液中送检；应采集可疑粪便，如马上患者粘液脓血便、霍乱患者米泔水样便等。认为换乱患者，硬质碱性蛋白胨水中。除婴幼儿外，不推荐用棉拭子做常规病原菌培养。粪便标本如不能马上送检，可将标本放入甘油盐水保留液中，或保留于冰箱内（勿超出2小时）。粪便检验专业知识讲座第42页粪便标本细菌学检验程序粪便标本或肛拭子道标本涂片增菌培养直接分离汇报革兰染色；动力学观察与制动试验（KIA、MIU）初步汇报需氧培养GN增菌液或亚硒酸增菌液碱性蛋白胨TCBS平板或其它碱性平板分离SS平板MAC平板EMB平板副溶血性弧菌选择平板菌落形态生化反应菌落形态、生化反应、抗血清凝集药敏菌落形态、生化反应、抗血清凝集药敏粪便检验专业知识讲座第43页步骤与方法革兰氏染色志贺菌与沙门菌：急性腹泻患者粪便标本划线接种于SS平板和MAC平板。慢性腹泻患者志贺菌或携带者应接种GN增菌液，沙门菌接种亚硒酸盐增菌液，再转种SS平板与MAC平板，观察小、透明或半透明、无色或浅黄色能够菌落生长，有时SS平板可见中心黑色菌落（H2S）。挑选三个可疑菌落分别接种三支KIA、MIU培养基，观察结果。挑取菌落进行革兰氏染色，观察细菌形态、排列。采取伤寒沙门菌诊疗血清进行血清学判定。粪便检验专业知识讲座第44页步骤与方法生化反应判定第2日观察平板上有没有可疑菌落，用接种针于上述平板中挑取单个可疑菌落（无色、半透明、光滑、较小）2—3个，分别接种至2—3管双糖培养液内，置37℃培养18—24h。第3日观察细菌生长情况，依据表10—2初步判定细菌种类，然后取双糖培养液上菌落进行系列生化判定。表不一样肠道细菌在双糖培养液培养结果（教学试验模拟标本结果）序号上层（乳糖）下层（葡萄糖）动力可能结果

1++有大肠埃希菌

2—+有伤寒沙门菌

3—+无痢疾志贺菌粪便检验专业知识讲座第45页步骤与方法血清学最终判定依据双糖培养液及系列生化反应结果判断，最终利用血清学试验对细菌进行最终确实定。假如初步判定结果为沙门菌属，则取双糖培养液斜面上菌苔与沙门菌多价“O”（A-F组）诊疗血清作玻片凝集试验，如凝集即为沙门菌属，然后分别与A-F组单价“O”诊疗血清作玻片凝集试验定组，最终以H因子诊疗血清作玻片凝集试验以定型（种），必要时可用因子诊疗血清定型。假如依据双糖培养液及系列生化反应结果判断，初步判定结果为志贺菌属，则取菌苔与志贺菌属多价诊疗血清作玻片凝集试验以定组，必要时可用因子诊疗血清定种或型。粪便检验专业知识讲座第46页步骤与方法若为较经典沙门菌生化反应，但与A-F组多价“O”诊疗血清又不发生凝集反应，应考虑可能为有VI抗原沙门菌，可将菌制成悬液以100℃加热30分钟以除去VI抗原后，再做血清学判定。如为较经典志贺菌生化反应又不与其多价诊疗血清发生凝集，则可用一样方法加热100℃1小时以破坏其K抗原，再做玻片凝集反应判定之。在细菌血清判定中，最常使用方法是