公开课动物细胞培养专家讲座

动物细胞工程公开课动物细胞培养专家讲座第1页动物细胞工程惯用技术伎俩：动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、单克隆抗体思索：植物细胞工程惯用技术伎俩有哪些？植物组织培养、

植物体细胞杂交强调：动物细胞培养技术是其它动物细胞工程技术基础。公开课动物细胞培养专家讲座第2页烧伤病人治疗通常是取烧伤病人健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想怎样来治疗该病人？

取该患者皮肤进行细胞培养,取得足量细胞后再移植公开课动物细胞培养专家讲座第3页学习目标：【知识能力】1、动物细胞培养过程、条件及应用

2、应用细胞基础知识，分析细胞工程理论基础【情感态度与价值观】

1、讨论细胞工程技术社会意义

2、认同细胞学基础理论研究与技术开发之间关系一、动物细胞培养公开课动物细胞培养专家讲座第4页

概念：从动物机体中取出相关组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜培养基中，让这些细胞生长和繁殖。

一、动物细胞培养原理：是细胞增殖（有丝分裂）公开课动物细胞培养专家讲座第5页一、动物细胞培养阅读P53-55“哺乳动物细胞培养技术”并思索：

1、动物细胞生长特点是什么？2、为何选取动物胚胎或幼龄个体器官或组织做动物细胞培养材料？

3、为何要对取出动物组织进行处理，使细胞分散？4、用胰蛋白酶对动物组织进行处理是因为细胞间物质主要是什么？胰蛋白酶真不会把细胞消化掉吗？为何？

5、动物细胞培养条件有哪些？6、简述动物细胞培养操作过程公开课动物细胞培养专家讲座第6页1、动物细胞生长特点：细胞贴壁：

悬液中分散细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。要求：培养瓶或培养皿内表面光滑、无毒、易于贴附。

公开课动物细胞培养专家讲座第7页接触抑制：细胞在贴壁生长过程中，伴随细胞分裂，数量不停增加，最终形成一个单层，此时细胞间相互接触，细胞分裂和生长停顿，数量不再增加。50代以后失去接触抑制接触抑制动物细胞生长特点部分细胞突变，取得不死性，向癌细胞方向发展，糖蛋白降低，失去接触抑制（如肿瘤细胞）。接触抑制公开课动物细胞培养专家讲座第8页动物组织块细胞悬液原代培养传代培养胰蛋白酶处理分散成单个细胞幼龄动物器官组织；动物胚胎加入培养液用胰蛋白酶等处理贴壁细胞适宜条件公开课动物细胞培养专家讲座第9页2、为何选取动物胚胎或幼龄个体器官或组织做动物细胞培养材料？动物胚胎或幼龄动物组织、器官，它们细胞分化程度低，增殖能力强，分裂旺盛，轻易培养。一、动物细胞培养公开课动物细胞培养专家讲座第10页动物组织块细胞悬液原代培养传代培养胰蛋白酶处理分散成单个细胞幼龄动物器官组织；动物胚胎加入培养液用胰蛋白酶等处理贴壁细胞适宜条件公开课动物细胞培养专家讲座第11页3、为何要对取出动物组织进行处理，使细胞分散？

分散单个细胞轻易摄取所需营养，排出代谢废物。一、动物细胞培养公开课动物细胞培养专家讲座第12页4、用胰蛋白酶对动物组织进行处理是因为细胞间物质主要是什么？胰蛋白酶真不会把细胞消化掉吗？为何？

细胞间物质主要是蛋白质（胶原纤维）。一、动物细胞培养胰蛋白酶除了能够消化细胞间蛋白外，长时间作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤作用，所以必须控制好胰蛋白酶消化时间。

公开课动物细胞培养专家讲座第13页动物组织块细胞悬液原代培养传代培养胰蛋白酶处理分散成单个细胞幼龄动物器官组织；动物胚胎加入培养液用胰蛋白酶等处理贴壁细胞适宜条件公开课动物细胞培养专家讲座第14页5、动物细胞培养条件1、无菌、无毒环境（添加一定量抗生素，定时更换培养液）2、营养（葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。）3、温度和PH36.5+（-）0.5度,7.2-7.44、气体环境：

O2和CO2（95%空气和5%CO2

）确保细胞顺利生长增殖一、动物细胞培养公开课动物细胞培养专家讲座第15页一、动物细胞培养6、过程：动物胚胎或幼龄动物组织、器官细胞悬浮液胰蛋白酶10代细胞原代培养50代细胞传代培养细胞株无限传代细胞系单个细胞加培养液遗传物质未改变遗传物质已改变（分解弹性纤维）从机体取出后马上培养细胞为原代细胞。普通培养第1代细胞与传10代以内细胞称为原代细胞培养。将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上培养瓶中继续培养，普通培养第11代细胞与传40代或50代称为传代培养。用胰蛋白酶等处理贴壁细胞公开课动物细胞培养专家讲座第16页植物组织培养和动物细胞培养比较比较项目植物组织培养动物细胞培养原理细胞全能性细胞增殖培养基状态固体培养基液体培养基培养基特有成份蔗糖植物激素葡萄糖动物血清培养结果植物体细胞株、细胞系培养目标快速繁殖、培育无病毒植株取得细胞或细胞分泌蛋白细胞全能性细胞增殖固体培养基液体培养基蔗糖植物激素葡萄糖动物血清植物体细胞株、细胞系快速繁殖、培育无病毒植株取得细胞或细胞分泌蛋白公开课动物细胞培养专家讲座第17页动物细胞培养应用：①.大规模生产生物制品，如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等；②.检测有毒物质，判断某种物质毒性；③.培养基因工程中受体细胞公开课动物细胞培养专家讲座第18页1.用动、植物成体体细胞进行离体培养，以下叙述正确是

A．都需用培养箱

B．都须用液体培养基

C．都要在无菌条件下进行

D．都可表达细胞全能性C巩固练习：公开课动物细胞培养专家讲座第19页2、以下属于动物细胞培养与植物组织培养主要区分是

A.培养基成份不一样

B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行

C.动物细胞能够传代培养，而植物细胞不能

D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株A3、动物细胞工程技术基础是

A.动物细胞融合B.单克隆抗体

C.胚胎移植D.动物细胞培养D公开课动物细胞培养专家讲座第20页4、细胞株特点是

A．遗传物质没有改变，能够无限传代

B．遗传物质发生改变，不可无限传代

C．遗传物质没有改变，不可无限传代

D．遗传物质发生改变，且有癌变特点，能够无限传代

5、在动物细胞培养中有部分细胞可能在培养条件下无限制地传代下去，这种传代细胞称之为:A．原代培养B．传代培养

C．细胞株D．