糖化血红蛋白分析仪校准规范

JJF1841—20201糖化血红蛋白分析仪校准规范1范围本规范适用于高效液相色谱法和免疫法的糖化血红蛋白分析仪的校准,其他类方法仪器参照本规范执行。2引用文件本规范引用了下列文件:JJF1001—2011通用计量术语及定义JJF1071—2010国家计量校准规范编写规则JJF1265—2010生物计量术语及定义GB/T14666—2003分析化学术语YY/T1246—2014糖化血红蛋白分析仪CLSIEP06-A定量测量程序的线性评估:统计学方法;批准指南(EvaluationoftheLinearityofQuantitativeMeasurementProcedures:AStatisticalApproach;ApprovedGuideline)凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本规范;凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本规范。3术语和计量单位3.1术语JJF1001—2011、JJF1265—2010和GB/T14666—2003中界定的及以下术语和定义适用于本规范。3.1.1糖化血红蛋白HemoglobinA1c;HbA1c人体血液中葡萄糖与血红蛋白β-链-N末端缬氨酸残基以共价键结合的稳定化合物。3.2计量单位3.2.1糖化血红蛋白计量单位糖化血红蛋白(HbA1c)以IFCC单位(mmol/mol)以及衍生的NGSP单位(%)报告。IFCC单位(mmol/mol)与NGSP单位(%)之间换算可使用IFCC-NGSP换算公式:.4概述糖化血红蛋白分析仪(以下简称分析仪)是测定人体中糖化血红蛋白占总血红蛋白比例的仪器。分析仪目前常用的技术原理主要分为高效液相色谱法和免疫法两种,前者JJF1841—20202是利用离子交换HPLC法测定血液中糖化血红蛋白的百分含量,后者是利用抗原抗体直接测定总血红蛋白中糖化血红蛋白的百分含量。分析仪通常主要由进样系统、分离系统、检测系统、显示系统及附带的试剂盒等组成。5计量特性分析仪各项计量性能指标见表1。表1分析仪主要计量性能指标计量性能计量性能指标相对示值误差±8%测量重复性<3%携带污染率*<3%线性相关性r≥0.99注:1表中技术指标不用于合格性判别,仅供参考。2相对示值误差的计量特性也可参照仪器制造厂商给出的技术要求。3*为如适用,可进行该项目的校准。6校准条件6.1环境条件分析仪允许的使用环境条件,校准过程中应记录环境温度、相对湿度数据。6.2标准物质和试剂6.2.1糖化血红蛋白有证标准物质,包括低值、中值、高值3个浓度,其中低值浓度范围应在4.5%~5.5%(25.7mmol/mol~36.6mmol/mol),高值浓度范围应在9.5%~10.5%(80.3mmol/mol~91.2mmol/mol)。相对扩展不确定度一般应不大于4%(k=2),或根据用户及分析仪的技术要求选择。6.2.2校准过程中需要的分析仪配套诊断试剂。试剂应按照说明书要求的条件储存并在有效期内。6.2.3校准设备:校准过程中使用经过计量溯源的可调移液器。7校准项目和校准方法7.1相对示值误差用分析仪分别测定低值和高值的糖化血红蛋白标准物质,每个浓度水平分别重复测量3次,计算3次测量结果的平均值。根据公式(1)计算相对示值误差:×100%(1)式中:JJF1841—20203 x—标准物质3次测量结果的平均值,%或mmol/mol;x———标准物质的标准值,%或mmol/mol。7.2测量重复性用分析仪对低值糖化血红蛋白标准物质重复测量6次,并根据公式(2)计算相对标准偏差RSD作为重复性的表征。RSD=(2)式中:xi—第i次标准偏差的测量值,%或mmol/mol; x———测量平均值,%或mmol/mol;n—测量次数,n=6。7.3携带污染率(如适用)按照从高值到低值的测量顺序,分别连续测量高值和低值糖化血红蛋白标准物质各3次,测量值分别记为i1、i2、i3和j1、j2、j3。以CO来表征分析仪的携带污染率,见公式(3)。×100%(3)式中:i3———高值标准物质第3次测量值,%或mmol/mol;j1———低值标准物质第1次测量值,%或mmol/mol;j3———低值标准物质第3次测量值,%或mmol/mol。7.4线性相关性对至少5个浓度(在低值至高值范围内,涵盖测试范围的上、下限和中间值)的糖化血红蛋白标准物质(或配制的校准溶液)进行测量,重复测量3次,取其平均值。线性相关性校准溶液的配制方法见附录C。将测量结果的平均值与标准物质的标准值(或校准溶液的配制值)进行线性回归,用软件进行线性拟合或按公式(4)计算线性相关系数r作为线性相关性的表征。(4)式中:xi———各个浓度水平标准物质的标准值,%或mmol/mol; x———各个浓度水平标准物质的平均值,%或mmol/mol;JJF1841—20204yi———各个浓度水平标准物质的测量值,%或mmol/mol;y———各个浓度水平标准物质的测量值平均值,%或mmol/mol。8校准结果表达8.1校准结果处理经校准后的分析仪应填发校准证书,校准证书应符合JJF1071—2010中5.12的要求,并给出各校准项目名称和测量结果以及扩展不确定度。校准记录和校准证书的内页格式见附录A。8.2校准结果的测量不确定度分析仪校准结果的不确定度按JJF1059.1—2012的要求评定,相对示值误差校准的不确定度评定示例见附录B。9复校时间间隔由于复校时间间隔的长短是由分析仪的使用情况、使用者、分析仪本身质量等诸因素所决定的,因此,送校单位可根据实际使用情况自主决定复校时间间隔,建议不超过1年。5附录A校准记录和校准证书的内容及格式A.1校准证书的内容校准证书至少应包括下列的信息:a)标题“标准证书”;b)实验室和地址;c)进行校准的地点(如果与实验室的地点不同);d)证书的唯一性标识(如编号),每页及总页数的标识;e)客户的名称和地址;f)被校对象的描述和明确标识;g)进行校准的日期,如果与校准结果的有效性和应用相关时,应说明被校对象的接收日期;h)如果与校准结果的有效性应用相关时,应对被校样品的抽样程序进行说明;i)校准所依据的技术规范的标识,应包括名称和代号;j)本次校准所用测量标准的溯源性及有效性说明;k)校准环境的描述;l)校准结果及测量不确定度的说明;m)对校准规范的偏离的说明;n)校准证书或校准报告签发人的签名、职务或等效标识;o)校准结果只对校准对象的有效声明;p)未经实验室书面批准,不得部分复制证书的声明。A.2校准记录的内页格式JJF1841—20206校准记录共2页,第1页仪器名称型号制造厂商出厂编号委托单位名称联系人地址电话温度湿度大气压试剂和校准品批号记录编号证书编号校准员核验员一、相对示值误差标准物质测量值平均值标准值相对示值误差高值低值二、测量重复性标准物质测量值低值平均值相对标准偏差/%三、携带污染率标准物质测量值携带污染率/%高值低值7四、线性相关性共2页,第2页标准物质测量值平均值标准值线性相关系数1234568A.3校准证书的内页格式共页,第页序号校准项目校准结果不确定度1相对示值误差2测量重复性3携带污染率4线性相关性校准员:核验员:JJF1841—2020附录B相对示值误差校准不确定度评定示例B.1测量方法采用糖化血红蛋白分析仪测定有证标准物质,并与标准物质标准值进行比较。B.2测量模型相对示值误差可由公式(B.1)给出:—((B.1)式中:—x—标准物质3次测量结果的平均值,%或mmol/mol;x———标准物质的标准值,%或mmol/mol。B.3不确定度来源不确定度来源包括:a)糖化血红蛋白分析仪测量重复性引入的标准不确定度u1;b)标准物质引入的标准不确定度u2。B.4合成标准不确定度计算公式—由于糖化血红蛋白分析仪测定结果x与糖化血红蛋白分析仪校准用标准物质的标准值x之间不相关,依据公式(B.1),输出量估计方差的完整表达式应为:u=u+u(B.2)由公式(B.2)得:(B.3)B.5标准不确定度分量评定B.5.1测量重复性引入的标准不确定度分量u1选定一台糖化血红蛋白分析仪,对低值糖化血红蛋白标准物质连续测量10次,得到一组测量值:5.0%,5.1%,5.0%,5.1%,5.0%,5.1%,5.0%,5.1%,5.0%,5.1%。则单次测量结果的标准差s(xi)为:实际校准时在重复性条件下连续测量3次,以3次测量的算术平均值作为结果,则由测量重复性引入的标准不确定度分量u1为:在这种测量条件下,分析仪的最小分辨力为0.1%,区间半宽a=0.05%,按均匀9分布,取包含因子由此引起的标准不确定度u3为:9JJF1841—202010从以上计算可以看出,由于测量重复性引入的标准不确定度分量u1大于分辨力引入的标准不确定度分量u3,由JJF1033—2016《计量标准考核规范》可知,当重复性引入的标准不确定度分量大于分辨力引入的标准不确定度分量时,可不考虑分辨力引入的不确定度分量,故分辨力引入的不确定度分量u3在标准不确定度合成时不列入。B.5.2标准物质引入的标准不确定度分量u2由标准物质引入的不确定度分量u2可以根据标准物质证书提供的扩展不确定度Ux和包含因子kx按公式(B.4)计算:(B.4)式中:u2———标准物质引入的标准不确定度,%;Ux———标准物质证书提供的扩展不确定度,%;kx———标准物质证书提供的包含因子,通常为2。下面以一次糖化血红蛋白分析仪校准为例具体评定其测量不确定度。在校准中糖化血红蛋白标准物质3次测定结果分别为5.0%、5.0%和5.0%;使用的糖化血红蛋白标准物质GBW09181标准值为5.02%,U=0.15%(k=2),则由标准物质引入的标准不确定度分量为:B.6标准不确定度分量一览表标准不确定度分量一览表见表B.1。表B.1糖化血红蛋白分析仪测定标准物质的标准不确定度一览表不确定度来源符号数值灵敏系数输出量不确定度分量测量重复性u10.031%19.90.6169%标准物质u20.075%-19.91.4925%B.7合成标准不确定度由公式(B.3)可得合成标准不确定度uc为:B.8扩展不确定度取包含因子k=2,则扩展不确定度U为:U=k×uc=2×1.62%=3.3%JJF1841—202011附录C线性相关性校准溶液的配制方法依据美国临床实验室标准化协会(ClinicalandLaboratoryStan