江苏省扬州市宝应县2022-2023学年高二下学期期中生物试题（解析版）

高级中学名校试卷PAGEPAGE1江苏省扬州市宝应县2022-2023学年高二下学期期中试题一、单项选择题：本部分包括14题，每题只有一个选项最符合题意。1.如下图是制作李子酒和李子醋的部分流程示意图。下列叙述错误的是（）A.家庭酿酒，可以不用额外添加酵母菌，李子皮表面带有一些野生酵母菌B.图中灭菌的目的是避免杂菌污染，冷却的目的是避免接种时高温杀死酵母菌C.酵母菌和李子在细胞结构上最大的差别是有无液泡D.李子醋发酵过程中要适当提高温度，并需要往发酵液中持续通入无菌空气〖答案〗C〖祥解〗真核细胞和原核细胞最根本的区别是有无以核膜为界限的细胞核；制酒的菌种为酵母菌，酵母菌为兼性厌氧菌，利用酵母菌的无氧呼吸产生酒精；制醋所用的主要菌种为醋酸菌，醋酸菌为好氧菌，有氧呼吸产生醋酸。【详析】A、许多新鲜水果的果皮表面附有大量的不同种类的野生酵母菌，故家庭酿酒，可以不用额外添加酵母菌，A正确；B、操作过程中需要进行灭菌，避免杂菌的污染，高温灭菌后需要冷却再接种酵母菌，冷却的目的是避免接种时高温杀死酵母菌，B正确；C、酵母菌和李子均为真核生物，细胞内均含有液泡，C错误；D、酿酒温度为18~30℃，无氧环境；制醋温度为30~35℃，在氧气充足的环境中进行，故李子醋发酵过程中要适当提高温度，并需要往发酵液中持续通入无菌空气，D正确。故选C。2.谷氨酸的钠盐是味精的主要成分，工业上常用谷氨酸棒状杆菌在30℃下发酵获得谷氨酸，下列叙述正确的是（）A.谷氨酸棒状杆菌染色体上的DNA与RNA不完全相同B.发酵过程中温度会升高，需用冷凝水在发酵罐夹层中流动降温C.搅拌器转速越快，越有利于溶解氧含量的提高，有利于发酵产物的积累D.阻止谷氨酸排出菌体，有利于合成谷氨酸相关酶活性的提高〖答案〗B〖祥解〗谷氨酸生产所用菌种是好氧菌，通风和搅拌不仅会影响对氮源和碳源的利用率，而且会影响发酵周期和谷氨酸的合成量，尤其是发酵后期，加大通气量有利于谷氨酸的合成。当菌体生长到稳定期，适当提高温度有利于生产谷氨酸。【详析】A、谷氨酸棒状杆菌是原核生物，没有染色体，A错误；B、在利用发酵罐进行发酵的过程中，由于微生物的呼吸作用以及搅拌等都能产生大量的热，使发酵液温度升高，为防止温度过高降低酶的活性，而降低谷氨酸产量，采取了水在发酵罐表层中流动而达到冷却降温的措施，B正确；C、搅拌有利于发酵液与谷氨酸棒状杆菌充分接触，还可以增加溶液中的溶解氧，有利于谷氨酸棒状杆菌发酵，但是搅拌器转速太快，则可能影响谷氨酸棒状杆菌的生命活动，甚至使微生物裂解，不利于发酵，C错误；D、促进谷氨酸排出菌体，有利于合成谷氨酸相关酶活性的提高，D错误。故选B。3.地膜的主要成分是聚乙烯，化学式是（C2H4）n常用于覆盖地面，以提高土壤温度，保持土壤水分。但废弃的地膜易造成环境污染，为筛选高效降解地膜的细菌，研究人员进行了如下图所示的操作，下列说法正确的是（）A.覆盖地膜的土壤在富集培养前需进行湿热灭菌处理B.富集培养的过程中，必须加入琼脂作为凝固剂C.X培养基中以聚乙烯为唯一的碳源，可挑选⑤中的单菌落接种到Y培养基上D.配制Y培养基时，其pH一般调至酸性〖答案〗C〖祥解〗在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。【详析】A、所需菌种来自于土壤，不可对覆盖地膜的土壤进行湿热灭菌处理，否则无法获得菌种，A错误；B、结合题图可知，富集培养的目的是获得更多的菌种，采用的是液体培养基进行培养，有利于细菌与营养物质的充分接触，便于增殖，B错误；C、结合题意可知，目标菌种为能分解聚乙烯的菌种，故X培养基中以聚乙烯为唯一的碳源，可挑选⑤中的单菌落（抑菌圈最大，降解地膜的效果最好）接种到Y培养基上，C正确；D、在培养细菌时，一般需要将培养基调至中性或弱碱性，D错误。故选C。4.间充质干细胞是一种多能干细胞，人脐带间充质干细胞具有更好的增殖性和更低的免疫原性，能定向分化成机体的多种功能细胞。与其他体细胞相比，下列关于间充质干细胞的叙述，正确的是（）A.间充质干细胞特有的基因调控其增殖分化B.异体移植间充质干细胞不会发生免疫排斥反应C.如果体细胞也能变为间充质干细胞，则此过程中没有基因的选择性表达D.间充质干细胞可用胰蛋白酶处理进行传代培养〖答案〗D〖祥解〗细胞分化的实质是基因的选择性表达，同一个体各种细胞都是由受精卵有丝分裂而来，基因相同；细胞进行原代的培养过程中出现接触抑制之后，细胞不再分裂，需要将其用胰蛋白酶进行分散处理后再进行传代培养。【详析】A、同一个体各种细胞都是由受精卵有丝分裂而来，基因相同，间充质干细胞并无特有的基因，A错误；B、结合题干“人脐带间充质干细胞具有更好的增殖性和更低的免疫原性”可知，异体移植间充质干细胞免疫排斥反应较弱，但是不会无免疫排斥反应，B错误；C、如果体细胞也能变为间充质干细胞，意味着基因的表达情况发生改变，则此过程中仍有基因的选择性表达，C错误；D、间充质干细胞进行原代培养时，细胞会出现接触抑制，进行传代培养时需要利用胰蛋白酶处理，将细胞分散，继续增殖，D正确。故选D。5.下列关于细胞工程和胚胎工程的说法正确的是（）A.贴壁生长是动物细胞培养过程中一定会出现的现象B.哺乳动物体内受精时，精子经历了获能的过程C.对青蛙囊胚的内细胞团进行均等分割后应及时进行胚胎移植D.能无限增殖的细胞一定是癌细胞〖答案〗B〖祥解〗体外培养的动物细胞可以分为两大类：一类细胞能悬浮在培养液中生长；另一类则需要贴附于某些基质表面才能够生长增殖，大多数细胞属于这种类型，这类细胞才具有接触抑制现象；接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞通常会停止分裂增殖。【详析】A、体外培养的动物细胞可以分为两大类：一类细胞能悬浮在培养液中生长；另一类则需要贴附于某些基质表面才能够生长增殖，大多数细胞属于这种类型，这类细胞才具有接触抑制现象，A错误；B、精子获能是指精子借以获得受精能力的一系列生理变化过程，哺乳动物体内受精时，精子经历了获能的过程，B正确；C、青蛙为卵生动物，无胚胎发育，C错误；D、能无限增殖的细胞不一定是癌细胞，在适宜的条件下干细胞也能无限增殖，D错误。故选B。6.猴痘是一种病毒性人畜共患病，B6R蛋白是猴痘病毒的抗原。如下图是筛选、制备抗B6R蛋白单克隆抗体的示意图，①-④表示细胞，下列叙述正确的是（）A.图中①为从小鼠的骨髓中获得的能产生特异性抗体的B细胞B.诱导①②细胞融合常用的方法与诱导原生质体融合的方法完全相同C.抗体检测时，多孔培样板的有些孔中可能没有细胞D.细胞④在培养瓶中会长成单层细胞，且细胞中可能会发生染色体变异〖答案〗C〖祥解〗单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。【详析】A、图中①为从小鼠的脾脏中获得的能产生特异性抗体的B细胞，A错误；B、诱导动物细胞融合特有的方法是灭活的病毒，B错误；C、由于只有融合的细胞才能在选择培养基上生长，所以抗体检测时，多孔培样板的有些孔中可能没有细胞，C正确；D、细胞④在培养瓶中会长成单层细胞，说明是正常的细胞，细胞没有发生变异，则不会发生染色体变异，D错误。故选C。7.某实验小组进行“DNA的粗提取与鉴定”实验，其实验流程如下图所示。下列说法正确的是（）A.溶液甲是NaCl，其加入的目的是溶解DNAB.溶液乙在使用时需用50-60°C水浴加热5minC.实验也可用鸡血、猪血等动物组织作为材料D.粗提取的DNA中含有RNA、蛋白质等杂质〖答案〗D〖祥解〗DNA的粗提取与鉴定的原理是：DNA与蛋白质在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精，利用这一原理可将DNA与蛋白质进一步分离；DNA与二苯胺沸水浴加热，呈蓝色。【详析】A、加入溶液甲后获得白色丝状物为DNA，故溶液甲为酒精溶液，DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精，利用这一原理可将DNA与蛋白质进一步分离，A错误；B、溶液乙为二苯胺试剂，使用时需要进行沸水浴加热，B错误；C、猪为哺乳动物，其成熟的红细胞无细胞核，DNA含量少，故猪血不适合用作此实验的材料，C错误；D、粗提取的DNA中含有核蛋白、多糖和RNA等杂质为了纯化提取的DNA需要将滤液作进一步处理，D正确。故选D。8.下列关于DNA片段的电泳鉴定实验说法正确的是（）A.等琼脂糖凝固后插入梳子，形成加样孔B.用微量移液器吸取不同的DNA样品时，需要更换枪头C.电泳结束后，需用显微镜观察形成的电泳条带D.电泳过程中既要使用核酸染色剂和也要使用电泳指示剂，它们的观察方法、作用一致〖答案〗B〖祥解〗影响DNA在琼脂糖凝胶中迁移速率的因素很多，包括DNA分子大小和构型、琼脂糖浓度、所加电压、电泳缓冲液的离子强度等。【详析】A、将温热的琼脂糖溶液倒入模具，并插入合适大小的梳子，以形成加样孔，等凝胶容液完全凝固，拔出梳子，A错误；B、为保证实验结果的准确性，用微量移液器吸取不同的DNA样品时，需要更换枪头，B正确；C、电泳结束后，需将凝胶置于紫外灯下进行观察，C错误；D、电泳过程中既要使用核酸染色剂和也要使用电泳指示剂，它们的观察方法、作用不同，凝胶中的DNA分子通过染色，可以在波长300nm的紫外灯下被检测出来，D错误。故选B。9.下列关于分离高产脲酶菌的实验叙述，正确的是（）A.分离目的菌株时以能产生脲酶的刀豆种子研磨液作为样品B.分离菌种所采用的选择培养基需添加尿素和牛肉膏蛋白胨C.利用稀释涂布平板法纯化菌种时常用菌落数作为统计结果D.实施本实验时所用培养皿较多，应注意在皿盖上做上标记〖答案〗C〖祥解〗微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。【详析】A、寻找目的菌株时，要根据其对生存环境的要求，到相应的环境中寻找，分离高产脲酶菌时应到富含尿素的环境中筛选，不能选用能产生脲酶的刀豆种子研磨液，A错误；B、分离高产脲酶菌的培养基中应以尿素为唯一氮源，不能添加牛肉膏蛋白胨，B错误；C、稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基表面，进行培养，在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落，该培养方法常用菌落数作为统计结果，C正确；D、用记号笔标记培养皿中菌落时，由于培养菌落时需倒置培养，为了方便查看，应标记在皿底上，D错误。故选C。10.在基因工程中，常采用花粉管通道法和土壤农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞。下图为花粉管通道法的一般原理示意图。相关叙述正确的是（）A.外源DNA进入胚囊最终获得的种子均含有目的基因B.植物生长各个时期均可通过花粉管通道导入外源DNAC.花粉管通道法最大的优点是无需植物组培，技术简单D.含外源DNA的种子发育成植株后均具有相应性状〖答案〗C〖祥解〗花粉管通道法有多种操作方式：可以用微量注射器将含目的基因的DNA直接注入子房内；可以在植物受粉后的一定时间内，剪去柱头，将DNA溶液滴加在花柱切面上，使目的基因借助花粉管通道进入胚囊。【详析】A、外源DNA进入胚囊，不一定能整合到染色体上，故最终获得的种子不一定含有目的基因，A错误；B、图示花粉管通道法应在雌蕊成熟时进行操作，B错误；C、花粉管通道法可以直接实现转基因植物的自然生成，无需经过植物组织培养这一过程，C正确；D、含外源DNA的种子发育成植株不一定均具有相应性状，还需进行个体生物学水平等的检测，D错误。故选C。11.下图是三种限制酶的识别序列及其切割位点，下列叙述正确的是（）限制酶BamHIBclISau3AI识别序列及切割位点A.Sau3AI的识别序列在DNA中出现的概率比另外两种酶的识别序列出现的概率大B.限制酶催化的是水解反应，每使用一次，断开1个磷酸二酯键C.将BamHI酶切的末端与BclI酶切的末端连接，连接部位的6个碱基对只有1种类型D.将BamHI酶切的末端与BclI酶切的末端连接，连接部位的6个碱基对依然能被这两种限制酶切割〖答案〗A〖祥解〗限制酶能识别特定的核苷酸序列，从特定的位点切割DNA分子，破坏的是磷酸二酯键，切割之后可形成黏性末端或平末端。【详析】A、BamHI和BclI识别的序列中包含Sau3AI识别的序列，故Sau3AI的识别序列在DNA中出现的概率比另外两种酶的识别序列出现的概率大，A正确；B、限制酶催化的是水解反应，每使用一次，断开2个磷酸二酯键，B错误；C、将BamHI酶和BclI酶切割DNA分子之后会产生相同的黏性末端，故将BamHI酶切的末端与BclI酶切的末端连接，连接部位的6个碱基对有2种类型，C错误；D、将BamHI酶切的末端与BclI酶切的末端连接，产生的DNA片段为，图中BamHⅠ酶和BclⅠ酶都无法识别并切割，所以这两种酶都不能切割，D错误。故选A。12.抗凝血酶是一种药物，目前科学家可以在牛、山羊等动物的乳腺生物反应器中获得。下列说法错误的是（）A.需要将抗凝血酶基因与乳腺中特异性表达的基因的启动子结合B.用显微注射法将凝血酶的基因直接注入哺乳动物的乳腺细胞中C.乳腺生物反应器产品的获得受年龄和性别的限制D.将抗凝血酶基因导入大肠杆菌，大肠杆菌可能不能产生有正常生理功能的酶〖答案〗B〖祥解〗动物乳腺生物反应器是基于转基因技术平台，使外源基因导入动物基因组中并定位表达于动物乳腺，利用动物乳腺天然、高效合成并分泌蛋白的能力，在动物的乳汁中生产一些具有重要价值产品的转基因动物的总称。【详析】A、为了在乳汁中能获得目的蛋白质，需要让目的基因在乳腺细胞中特异性表达，故需要将抗凝血酶基因与乳腺中特异性表达的基因的启动子结合，A正确；B、用显微注射法将凝血酶基因构建的载体注入哺乳动物的受精卵中，B错误；C、乳腺生物反应器产品的获得受年龄和性别的限制，只有雌性动物处于泌乳期时才能获得所需蛋白质，C正确；D、大肠杆菌为原核生物，无内质网和高尔基体，对于转入其体内的真核生物的基因的表达出来的肽链无法进行修饰和加工，故将抗凝血酶基因导入大肠杆菌，大肠杆菌可能不能产生有正常生理功能的酶，D正确。故选B。13.干扰素是动物体内合成的一种蛋白质，可以用于治疗毒感染和癌症，但体外保存相当困难，如果将其分子上的一个半胱氨酸变成丝氨酸，就可以在一70℃条件下保存半年，这属于蛋白质工程的范畴。下列相关说法错误的是（）A.蛋白质工程可以生产自然界不存在的蛋白质B.蛋白质工程生产干扰素的过程不遵循中心法则C.对天然干扰素的改造须通过对基因的操作来实现D.蛋白质空间结构复杂是蛋白质工程实施难度大的重要原因〖答案〗B〖祥解〗1.蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求（基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质）。2.基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列（基因）以上是蛋白质工程特有的途径；以下按照基因工程的一般步骤进行（注意：目的基因只能用人工合成的方法）。【详析】A、根据以上分析可知，蛋白质工程可以生产自然界不存在的蛋白质，A正确；B、蛋白质工程生产干扰素的过程仍然遵循中心法则，B错误；C、由于基因指导蛋白质的合成，因此对天然干扰素的改造须通过对基因的操作来实现，C正确；D、根据以上分析可知，蛋白质空间结构复杂是蛋白质工程实施难度大的重要原因，D正确。故选B。14.下列关于PCR叙述正确的是（）A.PCR过程中出现了半不连续复制B.PCR一般根据目的基因中间的碱基序列设计引物C.PCR中使用了解旋酶、DNA聚合酶、DNA连接酶D.引物序列过短会导致PCR扩增的特异性较差〖答案〗D〖祥解〗PCR技术也称聚合酶链式反应，原理为DNA半保留复制，参与的组分有：DNA模板链、4种dNTP、耐高温的DNA聚合酶、引物以及缓冲液。【详析】A、PCR技术的原理为体外DNA双链复制，该过程中DNA的复制是连续的，在生物体内DNA的复制才是半不连续的，A错误；B、PCR一般根据目的基因两端的碱基序列设计引物，B错误；C、PCR中使用了耐高温的DNA聚合酶，C错误；D、太短的引物，由于与目的基因的匹配长度不足，可能会导致PCR扩增产品的误差和不确定性，从而导致PCR扩增的特异性较差，D正确。故选D。二、多项选择题：本部分包括5题，每题有不止一个选项符合题意。15.果酒、果醋、腐乳、泡菜的制作都离不开微生物的发酵作用。下列叙述错误的是（）A.制作果酒时，自始至终都要保持无氧状态，这样才能提高产量B.当糖源充足时，醋酸菌可将葡萄糖直接转化为醋酸C.制作腐乳时当毛霉会将豆腐中的蛋白质摄入细胞并降解为氨基酸D.制作泡菜时，泡菜坛要尽量装满，防止空气混入〖答案〗ACD〖祥解〗参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。腐乳的制作利用的微生物是毛霉。蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸,脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。泡菜制作的微生物是乳酸菌，为厌氧菌，在无氧的条件下产生乳酸。【详析】A、制作果酒时，前期有氧，有利于酵母菌增殖，数量增多，中后期无氧，酵母菌进行无氧呼吸产生酒精，A错误；B、当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，B正确；C、毛霉合成蛋白酶，加盐腌制时会浸提出毛霉菌丝上的蛋白酶，进而将豆腐中的蛋白质分解为小分子的肽和氨基酸，C错误；D、泡菜坛只能装八成满，因为在泡菜发酵初期，由蔬菜表面带入的大肠杆菌、酵母菌等较为活跃，它们可进行发酵,发酵产物中有较多的CO2，如果泡菜坛装得太满，发酵液可能会溢出坛外；另外，泡菜坛装得太满，会使盐水不太容易完全淹没菜料，从而导致坛内菜料变质腐烂。泡菜坛留有一定的空间，也更方便拿取泡菜，D错误。故选ACD。16.下列有关土壤中微生物的分离与计数的说法，错误的是（）A.每个稀释度下做一个菌落数目在30～300的平板，则说明稀释操作比较成功B.牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数目明显小于选择培养基的数目，说明选择培养基起到了选择作用C.每个稀释度下要做一个空白平板，且可以在下次实验时重复使用，以节省成本D.有时不用改变培养基的成分，也能筛选出所需的微生物〖答案〗ABC〖祥解〗在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。【详析】A、每个稀释度下得到两个或两个以上菌落数目在30～300的平板，则说明稀释操作比较成功，A错误；B、牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数目明显大于选择培养基的数目，说明选择培养基起到了选择作用，B错误；C、每个稀释度下要做一个空白平板，作为空白对照，以排除培养基是否被杂菌污染，但是不能重复使用，C错误；D、有时不用改变培养基的成分，也能筛选出所需的微生物，例如在筛选耐高温的菌种时，不需要改变培养基的成分，只需要提高培养环境温度即可，D正确。故选ABC。17.体细胞胚是由愈伤组织表面形成的类似种子胚结构，下列相关叙述正确的是（）A.体细胞胚的染色体组成一定是二倍体B.植物组织培养过程中不一定形成体细胞胚C.体细胞胚可由有性生殖细胞分裂分化而来D.体细胞胚的再分化过程中不需更换培养基〖答案〗BC〖祥解〗1、植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）。②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要。2、植物组织培养技术的应用：植物繁殖的新途径、作物新品种的培育、细胞产物的工厂化生产.【详析】A、体细胞胚的染色体组成不一定是二倍体，如多倍体植物组织培养获得的体细胞胚是多倍体，A错误；B、植株组织培养过程中不一定形成体细胞胚，可能形成愈伤组织，B正确；C、若由花粉培养也可形成体细胞胚，即体细胞胚可由有性生殖细胞分裂分化而来，C正确；D、“再分化”的培养过程中，需要更新培养基中的营养物质以及植物激素的比例，从而满足植物组织不同阶段的发育需求，故需要更换培养基，D错误。故选BC。18.组培苗的移栽驯化是植物组织培养成功的关键，其主要过程为：炼苗→基质灭菌→育苗盘准备→试管苗脱瓶→移栽。下列关于该过程中注意事项的叙述，正确的是（）A.炼苗：正午强光和南方光照较强地区需采取阴蓬或温室以避免灼伤小苗B.基质灭菌：将蛭石、珍珠岩、草木灰混匀，经干热灭菌后取出立即移栽组培苗C.试管苗脱瓶：组培苗从液体培养基中取出，使根部带上较多培养液，有利于幼苗生长D.移栽：移栽前需喷雾洒水保持一定的湿度，之后需要逐渐降低湿度和增强光照〖答案〗AD〖祥解〗植物组织培养技术：（1）过程：离体的植物组织，器官或细胞（外植体）→愈伤组织→胚状体→植株（新植体）。（2）原理：植物细胞的全能性。（3）条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。【详析】A、组培苗生存能力较弱，需要进行锻炼，练苗期间在正午强光和南方光照较强地区需要采取阴蓬或温室以避免灼伤小苗，A正确；B、组培苗通常移栽到经过消毒的蛭石、珍珠岩、草木灰材料中，这些材料需要经过高压蒸汽灭菌或干热灭菌，灭菌后应该冷却才能移栽组培苗，B错误；C、试管苗脱瓶过程中，需要将组培苗从液体培养基中取出，沥干后移再栽到土壤等基质中，这样可避免残留营养物质滋生微生物，C错误；D、幼苗移栽至大田前还需“炼苗”，移栽前需喷雾洒水保持一定的湿度，之后需要逐渐降低湿度和增强光照，以逐渐适应大田环境，D正确。故选AD。19.科研小组从埋藏在西伯利亚冻土的猛犸象中成功地提取了DNA片段，将它注入到小鼠的胚胎中，并在这个胚胎形成软骨和其它骨骼的过程中发挥了重要作用。下列对该项技术及应用前景的分析，合理的是（）A.要将猛犸象的基因导入到某动物胚胎内，不能用病毒作为运载体B.利用绝种动物的体细胞的核与小鼠的体细胞的细胞质进行核移植可克隆绝种动物C.用上述提取的猛犸象基因可与现代象的基因进行DNA分子杂交，鉴定二者的亲缘关系D.扩增猛犸象的某个基因时可通过替换碱基使酶切位点丧失，但不改变其蛋白质的功能〖答案〗CD〖祥解〗运载体的种类有质粒、噬菌体、动植物病毒；动物体细胞技术中供体提供细胞核，受体为去核的卵母细胞（体积大，易操作；营养物质丰富；有激发动物细胞核全能性的物质）。【详析】A、运载体的种类有质粒、噬菌体、动植物病毒，故要将猛犸象的基因导入到某动物胚胎内，可以用病毒作为运载体，A错误；B、利用绝种动物的体细胞的核与小鼠的卵母细胞的细胞质进行核移植可克隆绝种动物，B错误；C、用上述提取的猛犸象基因可与现代象的基因进行DNA分子杂交，杂交带越多，DNA分子序列相似度越高，亲缘关系越近，可以用来鉴定二者的亲缘关系，C正确；D、扩增猛犸象的某个基因时可通过替换碱基使酶切位点丧失，碱基发生替换，由于密码子存在简并性，对应的氨基酸种类以及形成的蛋白质均不发生改变，蛋白质功能仍保留，D正确。故选CD。三、非选择题：本部分包括5题。20.阅读下面两则资料，回答相关问题Ⅰ.红薯酒是利用红薯酿制的黄酒，酒精度约为9%。下面有部分操作步骤：（1）原料处理：鲜红薯常需要切成小块，然后再加入10%蔗糖后入锅蒸煮。蒸熟后趁热挤碎，冷却后拌入5%的麦芽，使其温度保持在55℃左右，约4小时搅拌令其出液。过滤后，取滤液入缸待用。蒸煮前拌入适量蔗糖的目的是__________________。加入的麦芽的作用是__________________。（2）发酵：待滤液温度降至25℃左右加入酵母菌，24小时后发酵液温度上升至30℃左右，此后每半天需搅拌一次，搅拌的主要目的是___________。10天左右收获产品，发酵产酒的原理是__________；Ⅱ.ACC氧化酶是合成乙烯的关键酶，由ACC氧化酶基因控制合成。科研人员将人工合成的ACC氧化酶基因反向插入到质粒的启动部位之后，构成反义ACC氧化酶基因，再通过农杆菌转化法转入番茄染色体DNA中。反义ACC氧化酶基因在番茄细胞中的转录产物能与ACC氧化酶基因的转录产物互补配对，抑制乙烯的产生，使番茄减缓成熟。请回答：（3）科研人员能直接用化学合成ACC氧化酶基因的前提条件是__________________。人工合成ACC氧化酶基因后，需用PCR进行扩增：PCR的中文全称是______________。（4）在构建重组质粒时，为确保ACC氧化酶基因反向插入质粒中，需用__________种限制性内切核酸酶切割目的基因和Ti-质粒。为了便于转化后的筛选，表达载体还应具有__________________。（5）将含有重组质粒的农杆菌液涂抹在无菌番茄幼苗的芽尖，适宜时间后，用_______冲洗芽尖除菌，接种于培养基，形成愈伤组织，进而形成转基因植株。实验中选择番茄幼苗的芽尖作为外植体的原因是__________________。（6）反义ACC氧化酶基因抑制转基因番茄乙烯的产生，通过抑制基因表达的________过程从而抑制ACC氧化酶的产生。〖答案〗（1）①.供酵母菌分解，增加酒精量②.麦芽中含有淀粉酶可以将红薯中的淀粉水解（2）①.使酵母菌与营养物质充分混合②.（3）①.已知该基因的碱基序列②.多聚酶链式反应（4）①.2②.标记基因（5）①.无菌水②.芽尖分裂能力强，分化程度低，细胞全能性高（6）翻译〖祥解〗参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制作的原理：（1）在有氧条件下，反应式如下：C6H12O6+6H2O+6O26CO2+12H2O+能量；（2）在无氧条件下，反应式如下：C6H12O62CO2+2C2H5OH+能量。【小问1详析】加入蔗糖的目的是供酵母菌分解，增加酒精量，麦芽中含有淀粉酶可以将红薯中的淀粉水解成葡萄糖，供酵母菌利用。【小问2详析】加入酵母菌后，每半天需搅拌一次，搅拌的主要目的是使酵母菌与营养物质充分混合，以便于彻底发酵。10天左右，发酵液中糖分耗完引起酒精发酵终止，酒精发酵是无氧呼吸，反应式如下：C6H12O62CO2+2C2H5OH+能量。【小问3详析】直接合成目的基因的前提是已知该基因的碱基序列；对目的基因扩增的方法是PCR，中文名称是多聚酶链式反应。【小问4详析】为避免限制酶切割后的目的基因和质粒自身环化，确保ACC氧化酶基因反向插入质粒中，需用2种限制性核酸内切酶切割目的基因和Ti-质粒。为了便于转化后的筛选，表达载体还应具有标记基因，通常是抗生素抗性基因。【小问5详析】将含有重组质粒的农杆菌液涂抹在无菌番茄幼苗的芽尖，适宜时间后，为了除菌要用无菌水冲洗芽尖。植物组织培养需用固体培养基，因此把芽尖接种于固体培养基上。由于芽尖分裂能力强，分化程度低，细胞全能性高，所以选择芽尖作为外植体。【小问6详析】反义ACC氧化酶基因抑制转基因番茄乙烯的产生，反义ACC氧化酶基因在番茄细胞中的转录产物能与ACC氧化酶基因的转录产物互补配对，影响了翻译过程从而抑制ACC氧化酶的产生。21.我国卫生部门规定饮用水标准是1mL自来水中细菌总数不超过100个（37°C培养24h），1000mL自来水中大肠杆菌菌落数不能超过3个（37°C培养48h）。水中大肠杆菌的含量常采用伊红-亚甲基蓝琼脂培养基进行检测，生长在此培养基上的大肠杆菌菌落呈深紫色且带有金属光泽。某校生物兴趣小组开展校园桶装纯净水微生物含量检测活动，请回答问题：（1）检测饮用水中的细菌，需要配制牛肉膏蛋白胨琼脂培养基，从来源角度分析，此培养基属于________培养基。从物理状态角度分析，此培养基属于________培养基。用湿热灭菌法对培养基进行灭菌处理时，发现压力达到了110KPa，但温度没有达到121°C，原因是________________。（2）某同学分别向3个培养基中各加入1mL未经稀释的待测水样，涂布均匀后置于37°C的恒温培养箱中培养24h，结果如图1所示。检测时使用的接种量为1mL而不是0.1mL，其理由是________________。（3）下图2为用滤膜法测定饮用水中大肠杆菌数目的流程示意图，请完成下表。实验步骤的目的简要操作过程①将滤膜放入装有蒸馏水的烧杯中，加热煮沸15min，共煮沸三次过滤细菌装置安装好后，向漏斗内加入1000mL水样，加盖抽滤。冲洗漏斗壁再向漏斗内加等量②继续抽滤。③用无菌镊子取滤膜，将其紧贴在伊红-亚甲基蓝琼脂平板上，然后将平板④，37℃培养48小时统计大肠杆菌菌落数选取⑤的菌落进行计数，统计结果为2个①________；②________；③________；④________；⑤________。（4）综合（2）（3）测定结果，你认为所测桶装纯净水的微生物含量________（填能或不能）达到饮用水卫生标准，理由是________________。〖答案〗（1）①.天然②.固体③.冷空气没有除尽（2）0.1mL水样中细菌数目较少，经培养后平板菌落数可能达不到30个（3）①.滤膜消毒②.无菌水③.培养大肠杆菌④.倒置⑤.呈深紫色且带有金属光泽（4）①.能②.1mL水样中细菌总数约为99个，没有超过100个；1000mL水样中大肠杆菌为2个，没有超过3个〖祥解〗在一般培养温度下呈固体状态的培养基都称固体培养基。在液体培养基中加入1.5%~2.0%左右的琼脂，加热至100℃溶解，40℃下冷却并凝固，使其成为固体状态即为固体培养基。液体培养基，固体培养基的对应词，是微生物或动植物细胞的液状培养基。它具有进行通气培养、振荡培养的优点。在静止的条件下，在菌体或培养细胞的周围，形成透过养分的壁障，养分的摄入受到阻碍。由于在通气或在振荡的条件下，可消除这种阻碍以及增加供氧量，所以有利于细胞生长，提高生产量。选择性培养基，是指根据某种（类）微生物特殊的营养要求或对某些特殊化学、物理因素的抗性而设计的，能选择性区分这种（类）微生物的培养基。利用选择性培养基，可使混合菌群中的某种（类）微生物变成优势种群，从而提高该种（类）微生物的筛选效率。鉴定培养基，是用于鉴别不同类型微生物的培养基。几种细菌由于对培养基中某一成分的分解能力不同，其菌落通过指示剂显示不同的颜色而被区分开，起鉴别和区分不同细菌作用。【小问1详析】该实验中用到的培养基中加入了牛肉膏、蛋白胨，其中蛋白胨来源于动物原料，含有糖、维生素和有机氮等营养物质，故从来源角度分析，此培养基属天然培养基；该培养基含有琼脂，从物理状态角度分析，此培养基属于固体培养基；利用湿热灭菌法进行较为彻底的灭菌时，发现压力达到了110KPa，但温度没有达到121°C，原因是冷空气没有除尽，因为冷空气在锅内时不能在规定灭菌时间内被加热泄压阀就放气了，所以等灭菌时间到了锅内温度不一定能达到灭菌的标准温度从而导致灭菌效果没达到。【小问2详析】经稀释涂布平板法获得的平板上菌落数要求是30～300，图1中3个平板上所长菌落数均位于30～300之间，适合计数，检测时使用的接种量为1mL而不是0.1mL，其理由是0.1mL水样中细菌数目较少，经培养后平板菌落数可能达不到30个，故在接种时吸取1mL样液。【小问3详析】“将滤膜放入装有蒸馏水的烧杯中，加热煮沸15min，共煮沸三次”煮沸能起到消毒的作用，故步骤①的目的是对滤膜进行消毒；实验需要避免杂菌的污染，故冲洗漏斗壁时需要再向漏斗内加等量的无菌水，继续抽滤；将平板倒置，放入培养箱中培养，将平板倒置，既有利于培养基表面水分更好地挥发，又能防止冷凝水滴到培养基上造成杂菌污染；若存在大肠杆菌，伊红—亚甲基蓝用于检测大肠杆菌，选取呈深紫色且带有金属光泽的菌落进行计数。【小问4详析】分析题意可知，我国卫生部门规定饮用水标准是1mL自来水中细菌总数不超过100个（37℃培养24h），1000mL自来水中大肠杆菌菌落数不能超过3个（37℃培养48h），故该同学认为所测桶装纯净水的微生物含量已达到了饮用水卫生标准，是因为：1mL水样中细菌总数为（96+106+92）÷3≈98个，没有超过100个；1000mL水样中大肠杆菌为2个，没有超过3个。22.白叶枯病是水稻最严重的病害之一，疣粒野生稻（2n＝24）则对它具有高度抗病性。疣粒野生稻与普通栽培稻（2n＝24）虽然染色体数相同，但两者存在生殖隔离。为了将疣粒野生稻的抗白叶枯病特性向栽培稻中转移，育种工作者在这2个种之间进行了不对称体细胞杂交实验。请分析并回答以下问题。（1）将两种水稻的种子________（灭菌/消毒）后接种于含一定比例________等植物激素的MS培养基上诱导________过程，产生愈伤组织，并用________酶处理，获得游离的原生质体。（2）不对称体细胞杂交法可以将一个亲本的部分染色体或染色体上的某些片段转移到另一个亲本内，获得不对称杂种植株。大剂量X射线能随机破坏染色体结构，使其发生断裂、易位、染色体消除等，从而使该细胞一些酶失活，无法持续分裂。碘乙酰胺（IOA）也可以使细胞中一些酶失活（染色体数目、形态正常）抑制细胞分裂，为了达到实验目的，融合前，要用X射线照射________的原生质体，用IOA处理另一亲本的原生质体，融合后只有杂种融合细胞能产生正常的酶，从而能持续分裂。直接原因是________________。最终发育为多株再生植株。（3）挑选再生植株的新鲜根尖，经解离和漂洗后，进行________和________，然后置于光学显微镜下镜检，对体细胞杂种系的根尖细胞染色体记数，当发现染色体数目比双亲染色体数目之和________时，说明成功获得了不对称杂种。（4）有些杂种植株染色体数目与栽培稻相同，性状明显偏向栽培稻，但也表现出野生稻的一些特性，推测这些杂种植株形成的原因是________。（5）普通栽培稻缺失一条染色体称为单体，则共有________种单体，利用单体水稻可对基因所在的染色体进行定位，科学家发现某隐性突变体，用各种该性状表现为显性的单体水稻和该隐性突变体杂交，若子代单体水稻中________（出现或不出现）隐性突变性状，则基因位于相应的染色体上。〖答案〗（1）①.消毒②.细胞分裂素和生长素③.脱分化④.纤维素酶和果胶酶（2）①.疣粒野生稻②.两亲本融合后弥补了对方细胞质中失活的酶（生理互补）（3）①.染色②.制片③.少（4）来自疣粒野生稻的某些基因通过染色体易位整合到栽培稻的细胞中（5）①.12②.出现〖祥解〗消毒是指使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物。灭菌是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。【小问1详析】灭菌是使用强烈的理化方法处理，消毒是用较为温和的物理或化学或生物等方法处理，为了保证水稻种子的正常活性，需要将两种水稻的种子消毒后接种于含一定比例细胞分裂素和生长素等植物激素的MS培养基上诱导脱分化过程（植物细胞失去原有结构和功能，变成未分化的细胞），产生愈伤组织（分化程度低，分裂能力强，全能性高），并用纤维素酶和果胶酶处理，获得游离的原生质体。【小问2详析】“不对称体细胞杂交”法可以将一个亲本的部分染色体或染色体上。由题意知：大剂量的X射线能随机破坏染色体结构，使其发生断裂、易位、染色体消除等，细胞不再持续分裂；碘乙酰胺（IOA）使细胞质中某些酶失活，抑制细胞分裂。为了达到转移抗白叶枯病特性的目的，可先用X射线照射疣粒野生稻的原生质体，使其部分的染色体发生变异，然后用IOA处理另一亲本的原生质体，经诱导融合后，从而获得杂种细胞，由于杂种细胞融合后补充了细胞质中失活的酶（生理互补），细胞能正常分裂，故异源融合后的原生质体可持续分裂形成再生细胞团。【小问3详析】挑选再生植株的新鲜根尖，经解离和漂洗后，进行染色（染色体可被碱性染料染成深色）和制片（便于细胞中染色体的观察），然后置于光学显微镜下镜检，对体细胞杂种系的根尖细胞染色体记数；不对称杂种植株细胞中只获得一个亲本的部分染色体或染色体上某些片段，故观察再生植株细胞中的染色体，发现数目均少于两亲本染色体数目之和，说明成功获得了不对称杂种。【小问4详析】基因位于染色体上，基因控制生物的性状，有些杂种植株染色体数目与栽培稻相同，性状明显偏向栽培稻，但也表现出野生稻的一些特性，可能的原因是杂种植株中来自野生稻的某些基因通过染色体易位整合到栽培稻细胞中。【小问5详析】当体细胞缺失一对同源染色体中的一条染色体（染色体数目减少），该变异为染色体数目变异。当体细胞缺失一对同源染色体中的一条染色体时，称为单体，由2n=24可知，该水稻有12对同源染色体，因此有12种单体；利用单体水稻可对基因所在的染色体进行定位，科学家发现某隐性突变体，用各种该性状表现为显性的单体水稻和该隐性突变体杂交，若子代单体水稻中出现隐性突变性状（且显性性状：隐性性状为1:1），则基因位于相应的染色体上；若均为显性性状，则说明基因不位于相应的染色体（缺失的染色体）上。23.科研人员在杂交瘤细胞的基础上，获得了双杂交瘤细胞，每种杂交瘤细胞产生的抗体结构、与抗原结合的情况如下图1所示。请回答下列问题。（1）科研人员将抗原ɑ、β分别注射到不同的小鼠体内，引起机体发生________免疫，其中的________分泌相应抗体。（2）制备杂交瘤细胞时，需将上述小鼠的脾脏组织处理获得单细胞后，再与小鼠的骨髓瘤细胞融合，经过两次筛选得到两种杂交瘤细胞，其中第二次筛选一般先用________方法获得单个杂交瘤细胞，并通过________获得大量的这种杂交瘤细胞。培养时，需在培养液中加入________（天然成分），且置于CO2培养箱中，其中CO2的主要作用是________。如果两种杂交瘤细胞成功融合，则会同时表达出抗体的重链A、B和轻链a、b，这种细胞称作双杂交瘤细胞。（3）抗体由两条重链和两条轻链组成，重链和轻链均分为恒定区和可变区，两条重链依赖于A1或B1进行组装（A1与B1相同），重链与轻链的组装依赖于恒定区A2、a或B2、b（a与b相同）。因此，双杂交瘤细胞产生的抗体种类较多，其中有一种抗体能同时与抗原ɑ、β结合称为双特异性抗体，如下图2，请将合适的字母填入下面的表格中。123456A2①②③ɑ④①________；②________；③________；④________。（4）结合所学，将双特异性抗体应用于肿瘤治疗的优点是________。〖答案〗（1）①.体液②.浆细胞（2）①.有限稀释法②.克隆化培养③.动物血清④.维持培养液的pH（3）①.B2②.a③.b④.β（4）同时结合肿瘤细胞表面两种特异性目标蛋白或分子，提高了抗肿瘤药物的靶向性或特异性〖祥解〗1、题图分析：图1中是抗原α、β分别注射到小鼠体内，小鼠分别产生的α、β的两种单克隆抗体；图2中是双杂交瘤细胞产生的双特异性抗体。2、图中抗体由两条重链和两条轻链组成，重链和轻链均分为恒定区和可变区，两条重链依赖于A1或B1进行组装（A1与B1相同），重链与轻链的组装依赖于恒定区A2、a或B2、b（a与b相同）。【小问1详析】科研人员将抗原α、β分别注射到小鼠体内，可引起机体的体液免疫，由B淋巴细胞增殖分化而来的浆细胞分泌相应抗体，该抗体能与相应的抗原特异性结合。【小问2详析】制备杂交瘤细胞时，需将上述小鼠的脾脏组织，用胰蛋白酶处理获得单细胞后，再与小鼠的骨髓瘤细胞融合，筛选得到两种杂交瘤细胞。其中第二次筛选一般用96孔板（多孔板）采用有限稀释的方法获得单个杂交瘤细胞，并通过克隆化培养（体外细胞培养或注入到小鼠腹腔）获得大量的这种杂交瘤细胞。培养时，需在培养液中加入动物血清（天然成分），且置于CO2培养箱中，